• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    經(jīng)典名方當歸四逆湯物質(zhì)基準指紋圖譜及關(guān)鍵質(zhì)量屬性量值傳遞規(guī)律研究

    2023-02-08 03:20:36儲煙闐匡艷輝嚴曾豪王德勤郭海彪張偲偲劉曉秋
    中草藥 2023年3期

    儲煙闐 ,匡艷輝,嚴曾豪,王德勤,郭海彪,張偲偲*,劉曉秋*

    1.廣州白云山和記黃埔中藥有限公司現(xiàn)代中藥研究院,廣東 廣州 510000

    2.沈陽藥科大學中藥學院,遼寧 沈陽 110016

    當歸四逆湯(Danggui Sini Decoction,DSD),來源于張仲景的《傷寒論》,由當歸、桂枝、白芍、細辛、甘草、木通、大棗7 味藥組成,具有溫經(jīng)散寒、養(yǎng)血通脈的作用,主治血虛寒厥證[1-2]。現(xiàn)代藥理研究表明,DSD 可用于痛經(jīng)[3]、風濕性關(guān)節(jié)炎[4]、冠心病[5]、周圍神經(jīng)病變[6]、雷諾病[7]等諸多疾病的治療,臨床使用廣泛。DSD 在2018 年國家中醫(yī)藥管理局發(fā)布的《古代經(jīng)典名方目錄(第一批)》中為第13 方[8]。根據(jù)《傷寒論》原文記載,其煎煮方法為“當歸三兩,桂枝三兩(去皮),芍藥三兩,細辛三兩,甘草二兩(炙),通草二兩,大棗二十五枚(擘),上七味,以水八升,煮取三升,去滓,溫服一升,日三服?!备鶕?jù)國家藥品監(jiān)督管理局2018 年5 月發(fā)布《古代經(jīng)典名方中藥復(fù)方制劑簡化注冊審批管理規(guī)定》[9],經(jīng)典名方復(fù)方制劑開發(fā)必須首先進行物質(zhì)基準研究,為其后續(xù)的制劑開發(fā)提供依據(jù)。此外,國家藥品監(jiān)督管理局2019 年3 月發(fā)布《古代經(jīng)典名方中藥復(fù)方制劑及其物質(zhì)基準申報資料要求(征求意見稿)》[10],經(jīng)典名方的開發(fā)研究要首先明確其煎煮方法及投料規(guī)格等,且“原則上應(yīng)與經(jīng)典名方古代醫(yī)籍記載一致”。

    目前,關(guān)于經(jīng)典名方DSD 的研究多見文獻考證及臨床應(yīng)用,少見其多個成分含量測定方法及物質(zhì)基準制備工藝的研究報道[11-12],本研究擬建立DSD指紋圖譜并結(jié)合3 種化學模式識別進行多維度質(zhì)量評價,同時建立含量測定的方法。測定15 批DSD物質(zhì)基準指紋圖譜、指標成分的含量及出膏率,探究關(guān)鍵質(zhì)量屬性在飲片-水煎液-物質(zhì)基準的傳遞規(guī)律,初步建立DSD 的全過程質(zhì)量控制體系,為DSD后續(xù)復(fù)方制劑研究提供前期基礎(chǔ),并為其他經(jīng)典名方的物質(zhì)基準研究提供借鑒。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器

    Waters 2695 型高效液相色譜儀,沃特世科技中國有限公司;KQ-600VDB 型雙頻數(shù)控超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司;C21-SDHCB9E32S型電磁爐,浙江蘇泊爾股份有限公司;CP225D 型十萬分之一電子分析天平,賽多利斯科學儀器有限公司;Genie U12 型超純水儀,上海樂楓生物科技有限公司;LDZ4-0.8 型離心機,北京醫(yī)用離心機廠;FD-2D 型冷凍干燥機,上海比朗儀器制造有限公司。

    1.2 材料

    飲片信息如表1 所示,委托廣州采芝林藥房進行采購,經(jīng)廣州白云山和記黃埔中藥有限公司匡艷輝制藥高級工程師鑒定均屬正品。DSD 流浸膏,批號為200601S,由廣州白云山和記黃埔中藥有限公司提供。對照品阿魏酸(批號110773-201915,質(zhì)量分數(shù)99.4%)、甘草苷(批號11610-201908,質(zhì)量分數(shù)95.0%)、苯甲酸(批號100419-201703,質(zhì)量分數(shù)99.9%)、綠原酸(批號110753-202018,質(zhì)量分數(shù)96.1%)、芍藥苷(批號110736-202044,質(zhì)量分數(shù)96.8%)購自中國食品藥品檢定研究院;對照品芍藥內(nèi)酯苷(批號39011-90-0,質(zhì)量分數(shù)90.5%)、甘草酸(批號1405-86-3,質(zhì)量分數(shù)96.3%)購自上海詩丹德標準技術(shù)服務(wù)有限公司。乙腈、乙酸為色譜純,德國默克公司;其余試劑為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 DSD 物質(zhì)基準的制備

    采用隨機數(shù)表法對表1(表1 中各味飲片委托廣州采芝林大藥房進行采購,均來自道地產(chǎn)區(qū),每味飲片3 個產(chǎn)地,每個產(chǎn)地5 個批次)中15 批次各飲片進行隨機組合并排序,組合信息見表2。通過本課題組前期考證及度量衡換算,宋代1 兩折算為今3 g,大棗折算為24 g,1 升換算為200 mL,煎煮時間由原文記載的“煮取3 升”即可明確,煎煮時間確定為1.5 h,煎煮次數(shù)按原文記載為1 次,稱取處方劑量當歸9 g、桂枝9 g、白芍9 g、細辛9 g、木通6 g、甘草6 g、大棗24 g,置3 L 陶瓷罐中,加1600 mL[13]去離子水,武火1400 W 煮沸后轉(zhuǎn)文火600 W 煎煮1.5 h,煎煮至600 mL,雙層300 目篩網(wǎng)濾過,即得標準煎液,均勻取適量藥液,4000 r/min 下離心(離心半徑5 cm)10 min,過0.45 μm微孔濾膜,取續(xù)濾液,即得供試品溶液;取標準煎液50 mL,冷凍干燥,即得DSD 物質(zhì)基準。

    表1 DSD 飲片信息Table 1 DSD pieces information

    表2 15 批DSD 物質(zhì)基準樣品組合信息Table 2 Information table of random combination of 15 batches of DSD substances

    2.2 DSD 指紋圖譜研究

    2.2.1 色譜條件 色譜柱為ACE Excel 3 C18-AR(150 mm×4.6 mm,3 μm);流動相為乙腈-0.2%乙酸水溶液,梯度洗脫:0~18 min,8%~10%乙腈;18~48 min,10%~14%乙腈;48~70 min,14%~17%乙腈;70~85 min,17%~21%乙腈;85~95 min,21%~21.5%乙腈;95~135 min,21.5%~45%乙腈;檢測波長237 nm;體積流量0.6 mL/min;進樣體積5 μL;柱溫25 ℃。理論塔板數(shù)以芍藥苷峰計算大于5000。

    2.2.2 混合對照品溶液的制備 分別取綠原酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、阿魏酸、苯甲酸、甘草苷、甘草酸適量,精密稱定,加甲醇配制成質(zhì)量濃度分別為30.10、167.70、277.50、35.50、42.45、170.40、144.30 μg/mL 的混合對照品溶液。

    2.2.3 供試品溶液的制備 取DSD 流浸膏2 g(物質(zhì)基準1.25 g),精密稱定,置50 mL 量瓶中,加水定容,超聲處理20 min,放冷,過0.45 μm 微孔濾膜,取續(xù)濾液為供試品溶液。

    2.2.4 指紋圖譜方法學考察

    (1)參照峰的選擇:指紋圖譜中,芍藥苷的含量較高,且色譜峰穩(wěn)定故選擇芍藥苷(峰6)作為指紋圖譜的參照峰,計算指紋圖譜中各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。

    (2)精密度試驗:取DSD 流浸膏,按“2.2.3”項下制備供試品溶液,連續(xù)進樣6 次,按“2.2.1”項下色譜條件進行測定,記錄色譜圖。以芍藥苷(峰6)為參照峰,計算各共有峰的相對保留時間及相對峰面積,并計算其RSD 值。結(jié)果表明各共有峰的相對保留時間RSD 均≤0.32%,相對峰面積RSD 均≤3.84%,表明儀器精密度良好。

    (3)重復(fù)性試驗:按“2.2.3”項下方法平行制備6 份供試品溶液,連續(xù)進樣6 次,按“2.2.1”項下色譜條件進行測定。各共有峰的相對保留時間RSD 均≤0.53%,相對峰面積RSD 均≤3.81%,表明該方法重復(fù)性良好。

    (4)穩(wěn)定性試驗:取DSD 流浸膏,按“2.2.3”項下制備供試品溶液,分別在0、2、4、6、12、24 h 進樣,按“2.2.1”項下色譜條件進行測定。各共有峰的相對保留時間RSD 值均≤0.28%,相對峰面積RSD 值均≤4.10%,表明供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.2.5 指紋圖譜的建立及共有峰歸屬 按“2.1”項下制備物質(zhì)基準取15 批DSD 物質(zhì)基準、各單味藥及陰性對照樣品,按“2.2.3”項下方法制備供試品溶液,按“2.2.1”項下色譜條件進行測定。采用國家藥典委員會“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”(2012 版)軟件對樣品指紋圖譜進行分析。以樣品S1 的指紋圖譜作為參照譜進行指紋匹配(中位數(shù)法,時間窗0.1 min),確定了16 個共有峰,并生成對照指紋圖譜(R),15 批DSD 物質(zhì)基準的HPLC指紋圖譜疊加圖見圖1。15 批DSD 物質(zhì)基準指紋圖譜與對照圖譜的相似度大于0.90。指認了其中16個共有峰,通過與對照品比較,分別為綠原酸(2 號峰)、芍藥內(nèi)酯苷(5 號峰)、芍藥苷(6 號峰)、阿魏酸(7 號峰)、苯甲酸(8 號峰)、甘草苷(9 號峰)、甘草酸(15 號峰)。如圖2 所示,其中1、4、9、10、13~16 號峰來自于甘草;2、3、11 號峰來自于木通;5、6、8、12 來自于白芍。15 批DSD 物質(zhì)基準(S1~S15)相似度結(jié)果分別為0.996、0.987、0.990、0.994、0.993、0.991、0.993、0.991、0.989、0.985、0.993、0.901、0.974、0.991、0.972,相似度均大于0.90。其中S12、S13、S15 低于其他樣品,說明不同批次藥材制備的物質(zhì)基準樣品存在一定的質(zhì)量差異。

    圖1 15 批DSD 物質(zhì)基準HPLC 指紋圖譜 (S1~S15) 和對照指紋圖譜 (R)Fig.1 HPLC fringerprints (S1—S15) and control fringerprint (R) of 15 batches of DSD substances

    圖2 DSD 物質(zhì)基準指紋圖譜中16 個特征峰及其歸屬Fig.2 Specific peaks and their attribution in benchmark fringerprints of DSD substances

    2.2.6 層次聚類分析(hierarchical cluster analysis,HCA)[14]采用SPSS 25.0 數(shù)據(jù)分析軟件,對15 批樣品的共有峰的峰面積進行系統(tǒng)聚類,采用組間連接法,測量區(qū)間為平方歐氏距離,聚類結(jié)果見圖3,結(jié)果發(fā)現(xiàn)當歐氏距離約為8 時,15 批DSD 物質(zhì)基準可分為3 類,即樣品S1~S11、S14 為第1 類,樣品S13、S15 為第2 類,S12 為第3 類,此結(jié)果可與相似度評價結(jié)果相互印證。

    圖3 15 批DSD 物質(zhì)基準HCA 譜系圖Fig.3 Reference HCA pedigree of 15 batches

    2.2.7 主成分分析(principal component analysis,PCA)選擇15 批DSD 物質(zhì)基準的16 個共有峰的峰面積為變量,導(dǎo)入SIMCA-P+14.1(Demo)軟件進行PCA 處理,得分矩陣圖見圖4。15 批DSD物質(zhì)基準可分為3 類,即樣品S1~S11、S14 為第1類,樣品S13、S15 為第2 類,S12 為第3 類,此結(jié)果可與HCA 結(jié)果相互印證。

    圖4 15 批DSD 物質(zhì)基準PCA 得分矩陣Fig.4 PCA scoring plots of 15 batches of substance of DSD substances benchmarks of DSD

    2.2.8 OPLS-DA 將15 批GSD 物質(zhì)基準的16 個共有峰的峰面積導(dǎo)入SIMCA-P+14.1(Demo)軟件進行OPLS-DA 處理,得分矩陣圖見圖5。結(jié)果發(fā)現(xiàn)15 批樣品聚為3 類,結(jié)合以變量重要性投影(VIP)值>1 為判定標準,篩選差異組分,見圖6。結(jié)果共找到了4 個成分,按VIP 值大小排序分別為9(甘草苷)、10、15(甘草酸)、6(芍藥苷)號峰。上述4 個差異成分中3 個來自甘草,1 個來自白芍,進一步說明嚴格控制甘草飲片質(zhì)量是確保DSD 物質(zhì)基準質(zhì)量穩(wěn)定的關(guān)鍵。

    圖5 15 批DSD 物質(zhì)基準OPLS-DA 得分Fig.5 OPLS-DA scoring plots of 15 batches of substance benchmarks of DSD

    圖6 DSD 物質(zhì)基準OPLS-DA 的VIP 值Fig.6 VIP values of OPLS-DA of DSD substance benchmarks

    2.3 DSD 物質(zhì)基準指標成分芍藥苷、甘草苷、甘草酸定量測定

    2.3.1 色譜條件 同“2.2.1”項下,3 個成分的理論板數(shù)均大于5000,分離度大于1.5。色譜圖見圖7。

    圖7 DSD 樣品 (A) 和混合對照品 (B) 的HPLC 圖Fig.7 HPLC of DSD sample (A) and mixed reference substances (B)

    2.3.2 混合對照品溶液的制備 同“2.2.2”項下方法制備芍藥苷、甘草苷、甘草酸混合對照品溶液。

    2.3.3 供試品溶液的制備 同“2.2.3”項下。

    2.3.4 方法學考察

    (1)線性關(guān)系考察:分別精密吸取適量“2.3.2”項下的混合對照品溶液,加甲醇稀釋,得芍藥苷質(zhì)量濃度為13.88、27.75、55.50、111.00、222.00、277.50 μg/mL,甘草苷質(zhì)量濃度為8.52、17.04、34.08、68.16、136.32、170.40 μg/mL,甘草酸質(zhì)量濃度為7.22、14.43、28.86、57.72、115.44、144.30 μg/mL 的系列混合對照品溶液。取各個質(zhì)量濃度的混合對照品溶液各5 μL 注入液相色譜儀,按“2.2.1”項下色譜條件測定各成分的峰面積,以質(zhì)量濃度為橫坐標(X),峰面積積分值為縱坐標(Y)進行線性回歸,得回歸方程:芍藥苷Y=9 025.82X-1 653.98,r=1.000 0,線性范圍13.88~277.50 μg/mL;甘草苷Y=17 790.30X-17 745.64,r=1.000 0,線性范圍8.52~170.40 μg/mL;甘草酸Y=4 436.94X-2 084.58,r=1.000 0,線性范圍7.22~144.30 μg/mL。結(jié)果表明,各成分在各自質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    (2)精密度試驗:精密吸取中等質(zhì)量濃度的混合對照品溶液,按“2.2.1”項下色譜條件連續(xù)進樣分析6 次,分別計算峰面積。結(jié)果芍藥苷、甘草苷和甘草酸峰面積的RSD 分別為0.81%、1.00%、1.03%,表明儀器精密度良好。

    (3)穩(wěn)定性試驗:精密吸取“2.3.3”項下方法制備所得的供試品溶液,分別于0、2、4、6、8、12、24 h,精密吸取5 μL 供試品溶液并按“2.2.1”項下色譜條件進行測定,結(jié)果芍藥苷、甘草苷和甘草酸峰面積的RSD 分別為2.55%、2.56%、2.09%,表明供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    (4)重復(fù)性試驗:根據(jù)“2.3.3”項下方法平行制備6 份供試品溶液,分別精密吸取5 μL 供試品溶液并按“2.2.1”項下色譜條件進行測定,結(jié)果流浸膏中芍藥苷、甘草苷和甘草酸質(zhì)量濃度平均值分別為4.427 9、1.075 6、2.192 8 mg/g,RSD 分別為2.80%、2.81%、2.87%,表明該方法重復(fù)性良好。

    (5)加樣回收率試驗:取6 份已測定各成分量的流浸膏1 g,精密稱定,分別加入芍藥苷4.23 mg、甘草苷1.11 mg、甘草酸2.19 mg,按“2.3.3”項下方法制備供試品溶液,分別精密吸取5 μL 供試品溶液并按“2.2.1”項下色譜條件進行測定,計算各成分的平均回收率和RSD 值,結(jié)果芍藥苷、甘草苷和甘草酸的平均加樣回收率分別為98.81%、96.68%、100.75%,RSD 分別為2.17%、2.33%、1.78%,表明該方法準確度良好。

    2.4 DSD 物質(zhì)基準指標成分在飲片-水煎液-物質(zhì)基準之間的量值傳遞分析

    飲片的含量測定方法參考《中國藥典》2020 年版,選取“2.3”項建立含量測定方法中具有特征性的白芍、甘草中的芍藥苷、甘草苷及甘草酸探究其飲片-水煎液-物質(zhì)基準的量值傳遞規(guī)律,DSD 物質(zhì)基準水煎液中指標成分的測定按“2.1”項下制備供試品溶液及物質(zhì)基準。

    ω表示物質(zhì)基準中指標成分的質(zhì)量分數(shù),m表示物質(zhì)基準樣品質(zhì)量,W表示飲片中有效成分的質(zhì)量分數(shù),M表示處方中的飲片質(zhì)量

    各藥味指標成分的含量及從飲片-物質(zhì)基準轉(zhuǎn)移率結(jié)果如表3 所示,芍藥苷、甘草苷、甘草酸從飲片-物質(zhì)基準平均轉(zhuǎn)移率分別為52.94%、48.79%、47.39%。結(jié)果見圖8。

    圖8 DSD 物質(zhì)基準指標成分轉(zhuǎn)移率Fig.8 Component transfer rate of DSD material benchmark index

    表3 白芍及甘草藥味指標成分含量及飲片-物質(zhì)基準轉(zhuǎn)移率Table 3 Content of medicinal flavor index components and reference transfer rate of decoction pieces and substances of paeoniflorin and glycyrrhizae

    2.5 DSD 物質(zhì)基準制備過程中各藥味干膏率傳遞規(guī)律研究

    按上述確定的工藝制備15 批次的DSD 物質(zhì)基準樣品,測定其干膏率。干膏率的測定方式為取100 mL(n=2)提取液或單味藥材105 ℃烘干至恒定質(zhì)量,計算公式為干膏率=6m/M,公式中6m表示干膏的質(zhì)量,M表示各組稱取的飲片量。比較全方的理論干膏率與實際干膏率的轉(zhuǎn)移規(guī)律。

    結(jié)果如圖9 和表4 所示,15 批DSD 物質(zhì)基準全方理論干膏率為24.26%~26.88%,實際全方干膏率為19.13%~24.58%,干膏率的平均轉(zhuǎn)移率為86.40%。

    表4 15 批DSD 單味藥及物質(zhì)基準干膏率及傳遞率結(jié)果Table 4 Results of 15 batches of DSD single drug and substance reference dry paste rate and transmissibility

    圖9 DSD 物質(zhì)基準干膏率及傳遞率分析Fig.9 Analysis of DSD material standard dry paste rate and transmissibility

    理論干膏率=∑(單味藥干膏率×單味藥生藥量)/全方生藥量

    3 討論

    DSD 方中具有當歸、桂枝、芍藥、細辛、甘草(炙)、通草、大棗(擘)7 味藥,方中桂枝辛溫,溫經(jīng)散寒以通脈,與當歸共為君藥;白芍、細辛共為臣藥,助桂枝溫通血脈[15]。

    原文記載的芍藥、通草、細辛和甘草均為多基原藥材,經(jīng)過前期文獻研究中進行的本草考證,并結(jié)合《傷寒論》所處歷史時期,基本確定DSD 中所用的芍藥藥材基原為毛茛科芍藥屬植物芍藥P.lactifloraPall.的干燥根;通草藥材基原為木通科木通屬植物木通A.quinata(Thunb.) Decne、三葉木通A.trifoliata(Thunb.) Koidz.的干燥藤莖;細辛藥材基原為馬兜鈴科細辛屬植物北細辛A.heterotropoidesFr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.) Kitag.的干燥根;甘草藥材基原為豆科甘草屬植物甘草G.uralensisFisch.的干燥根及根莖。其他3 味藥所用基原均為《中國藥典》2020 年版中各自藥材基原,當歸為傘形科當歸屬植物當歸A.sinensis(Oliv.) Diels.干燥根,桂枝為樟科樟屬植物肉桂C.cassiaPresl.干燥嫩枝,大棗為鼠李科棗屬植物棗Z.jujubaMill.干燥成熟果實。方中甘草原文記載為“炙甘草”,經(jīng)考證該炮制品為炒甘草,炮制方法取甘草片,照清炒法(炮制通則)炒至深黃色[16]。

    課題組在建立指紋圖譜和含量測定方法時,對比了4.6 μm 及3 μm 不同粒徑色譜柱,3 μm 粒徑的色譜柱分離度更好,因此,最終選擇采用粒徑為3 μm 的色譜柱,建立復(fù)雜中藥復(fù)方制劑的含量測定方法,在流動相體積流量篩選過程中,由于色譜柱的內(nèi)填物粒徑較小,為3 μm,且色譜柱為150 mm的短柱,因此選用0.6 mL/min 的體積流量,從而避免高體積流量導(dǎo)致的高壓對高效液相色譜儀器及色譜柱的損耗。

    采用了Agilent 1260 和Waters 2695 高效液相色譜儀測定供試品溶液中各成分的含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各成分含量差異不大;采用ACE Excel 3 C18-AR(150 mm×4.6 mm,3 μm)、Titank C18(150 mm×4.6 mm,3 μm)、SuperLu C18(150 mm×4.6 mm,3 μm)3 種品牌的色譜柱測定各成分含量、分離度、理論塔板數(shù)及拖尾因子,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各成分含量差異不大,分離度良好,理論塔板數(shù)較高,拖尾因子符合要求,說明該含量測定方法的耐用性良好。

    在供試品溶液的制備過程中,考察了水和不同體積分數(shù)的甲醇超聲提取對各成分含量的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各成分含量差異不大,其中水提取的供試品溶液較為澄清且重復(fù)性較好,因此,選擇水作為其提取溶劑以最大程度保留DSD 的物質(zhì)概貌。課題組在前期建立色譜條件時,將桂皮醛納入含量測定的范圍中,但由于其性質(zhì)不穩(wěn)定且極性小在水中的提取率較低,最終在物質(zhì)基準中的含量僅為0.01 mg/g,不建議對其進行含量檢測,后續(xù)研究可考慮進行薄層色譜的鑒別。

    在結(jié)合3 種化學模式進行15 批次DSD 物質(zhì)基準多維度質(zhì)量差異分析時,結(jié)果表明造成差異的主要原因來源于甘草中的甘草苷(峰9),其次是結(jié)合課題組后期質(zhì)譜分析確定的芹糖甘草苷(峰10)及甘草酸(峰15),其原因可能是由于甘草不同部位對應(yīng)含量不均勻而導(dǎo)致的差異[17],此外,甘草不同產(chǎn)地的含量也存在一定差異,甘草中總皂苷、總黃酮和甘草酸含量較高的經(jīng)度區(qū)間均在95°0'~99°59'和104°0'~118°59',地理位置上這2 個點分別處于新疆與甘肅的交界、內(nèi)蒙古與吉林的交界[18],經(jīng)典名方開發(fā)過程中建議采用道地產(chǎn)區(qū)的優(yōu)質(zhì)藥材并嚴格按照飲片部位、大小等進行分類以確保物質(zhì)基準的質(zhì)量穩(wěn)定性。

    通過開展指紋圖譜研究,共指認了16 個共有峰,15 批物質(zhì)基準的相似度大于0.90。同時指認了綠原酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、阿魏酸、苯甲酸、甘草苷、甘草酸7 個成分,15 批物質(zhì)基準中芍藥苷、甘草苷、甘草酸的平均質(zhì)量分數(shù)分別為8.267 8、2.533 3、5.160 5 mg/g,其中15 批物質(zhì)基準芍藥苷、甘草酸的質(zhì)量分數(shù)均在均值的70%~130%,甘草苷含量范圍為2.56~3.35 mg/g。芍藥苷、甘草苷和甘草酸質(zhì)量分數(shù)均大于1 mg/g,可作為含量測定指標,探究量值傳遞規(guī)律。

    經(jīng)典名方物質(zhì)基準的制備工藝主要包括煎煮、濾過、干燥等工藝,本課題組前期通過考察煎煮工藝過程中所用的加熱源、煎煮容器、加熱火力、是否浸泡、過濾和干燥方法,確定了物質(zhì)基準制備工藝的各項參數(shù)。以確定的工藝制備15 批次的物質(zhì)基準,從指標成分的含量、特征圖譜、干膏率3 個方面開展質(zhì)量相關(guān)研究,擬從多個角度分析并闡述制備過程中的質(zhì)量變化規(guī)律探究飲片-中間體-物質(zhì)基準的量值傳遞規(guī)律,其中芍藥苷、甘草苷、甘草酸從飲片-中間體的傳遞率接近50%,證明水溶性成分在制備過程中轉(zhuǎn)移率高。在分析15 批次DSD 物質(zhì)基準干膏率時,干膏率均在均值的±10%以內(nèi),但實際干膏率要低于理論干膏率的數(shù)值,其原因可能是由于單味藥進行煎煮時其吸水量要大于全方進行煎煮時的吸水量,因此理論干膏率的數(shù)值要大于實際值[19]。

    本實驗建立DSD 指紋圖譜及含量測定方法,從飲片入手探究飲片-中間體-物質(zhì)基準的量值傳遞規(guī)律,證明DSD 物質(zhì)基準在制備過程中其指標成分的含量、指紋圖譜相似性及干膏率均穩(wěn)定。

    利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突

    欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 十八禁人妻一区二区| 日本五十路高清| 国产一区二区三区视频了| 国产伦一二天堂av在线观看| 757午夜福利合集在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久精品亚洲熟妇少妇任你| www.精华液| 国产av又大| 麻豆国产av国片精品| 无人区码免费观看不卡| 高清av免费在线| 精品国产乱子伦一区二区三区| 校园春色视频在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲精品粉嫩美女一区| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 免费看十八禁软件| 国产国语露脸激情在线看| 后天国语完整版免费观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 午夜两性在线视频| 老司机靠b影院| 日韩精品中文字幕看吧| 日本黄色视频三级网站网址| 黄色女人牲交| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 成人三级黄色视频| 国产乱人伦免费视频| 精品国产国语对白av| 日日爽夜夜爽网站| 日韩国内少妇激情av| 不卡av一区二区三区| 亚洲在线自拍视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 十八禁人妻一区二区| 超色免费av| 日本vs欧美在线观看视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精华一区二区三区| 午夜福利免费观看在线| 日本精品一区二区三区蜜桃| 丰满的人妻完整版| 另类亚洲欧美激情| av在线天堂中文字幕 | 午夜激情av网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 日本三级黄在线观看| 精品久久久久久成人av| 两个人看的免费小视频| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲精品国产一区二区精华液| 免费不卡黄色视频| 两性夫妻黄色片| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲精华国产精华精| 国产精品秋霞免费鲁丝片| av网站在线播放免费| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 十八禁网站免费在线| 午夜a级毛片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 啦啦啦免费观看视频1| a级片在线免费高清观看视频| 欧美日本中文国产一区发布| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 新久久久久国产一级毛片| 激情在线观看视频在线高清| 欧美日韩av久久| 国产免费男女视频| 久久国产精品影院| 激情视频va一区二区三区| 天堂俺去俺来也www色官网| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲国产精品合色在线| 神马国产精品三级电影在线观看 | 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲精华国产精华精| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美成狂野欧美在线观看| 成人国语在线视频| 91九色精品人成在线观看| 波多野结衣高清无吗| 另类亚洲欧美激情| 久久人妻熟女aⅴ| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲第一av免费看| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产又爽黄色视频| av在线播放免费不卡| 999久久久精品免费观看国产| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产av一区二区精品久久| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产麻豆69| 91老司机精品| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 午夜精品在线福利| 极品教师在线免费播放| 免费观看人在逋| 老鸭窝网址在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 丁香六月欧美| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 一级作爱视频免费观看| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲专区字幕在线| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲第一av免费看| 免费少妇av软件| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲精品在线观看二区| av视频免费观看在线观看| 99re在线观看精品视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久久国产成人精品二区 | 精品国产美女av久久久久小说| 久久天堂一区二区三区四区| 三上悠亚av全集在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 女同久久另类99精品国产91| 日韩成人在线观看一区二区三区| 男女床上黄色一级片免费看| 嫩草影院精品99| 久久精品人人爽人人爽视色| 一区福利在线观看| 国产av在哪里看| 亚洲精品在线观看二区| 1024香蕉在线观看| 免费在线观看亚洲国产| 国产精品野战在线观看 | 亚洲成人国产一区在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 妹子高潮喷水视频| 午夜影院日韩av| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 成年人免费黄色播放视频| 99久久国产精品久久久| 精品国产乱子伦一区二区三区| av免费在线观看网站| netflix在线观看网站| 亚洲欧美精品综合久久99| 99在线视频只有这里精品首页| 色婷婷av一区二区三区视频| 性欧美人与动物交配| 最近最新中文字幕大全电影3 | 午夜免费观看网址| 欧美黑人欧美精品刺激| www.999成人在线观看| 长腿黑丝高跟| 日韩三级视频一区二区三区| 天天添夜夜摸| 免费高清在线观看日韩| 久久久久久人人人人人| 欧美激情 高清一区二区三区| 黄色片一级片一级黄色片| 热99国产精品久久久久久7| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲精华国产精华精| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美一级毛片孕妇| 在线观看免费高清a一片| 久久久久久久久中文| 757午夜福利合集在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 精品国产美女av久久久久小说| 黄频高清免费视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 一级a爱视频在线免费观看| 在线观看一区二区三区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 51午夜福利影视在线观看| 国产成人精品无人区| 又大又爽又粗| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲一区二区三区不卡视频| av中文乱码字幕在线| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲专区中文字幕在线| 一进一出好大好爽视频| 电影成人av| 欧美黄色淫秽网站| 91大片在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 99精品欧美一区二区三区四区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 成人手机av| 欧美日韩一级在线毛片| 91老司机精品| 激情视频va一区二区三区| 天天影视国产精品| 俄罗斯特黄特色一大片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 99久久人妻综合| a级毛片在线看网站| 看免费av毛片| 亚洲全国av大片| 国产一区二区三区综合在线观看| 精品国产乱码久久久久久男人| 免费观看人在逋| 99精品久久久久人妻精品| 免费av中文字幕在线| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产精品综合久久久久久久免费 | 日本免费一区二区三区高清不卡 | 成人特级黄色片久久久久久久| 乱人伦中国视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 一夜夜www| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 真人做人爱边吃奶动态| 麻豆久久精品国产亚洲av | 亚洲中文av在线| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产熟女xx| 自线自在国产av| 男女下面进入的视频免费午夜 | 国产三级黄色录像| 一夜夜www| 欧美乱妇无乱码| 亚洲avbb在线观看| 色老头精品视频在线观看| 久久人人精品亚洲av| 深夜精品福利| 88av欧美| 露出奶头的视频| 青草久久国产| 欧美日韩一级在线毛片| 久久热在线av| 亚洲专区国产一区二区| 手机成人av网站| 成年版毛片免费区| 黄色成人免费大全| 国产精品综合久久久久久久免费 | 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 99国产极品粉嫩在线观看| 1024香蕉在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 久久久久国内视频| 视频区图区小说| 搡老乐熟女国产| 亚洲一区中文字幕在线| 在线观看一区二区三区激情| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久久久久久久中文| 欧美激情久久久久久爽电影 | 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲国产精品sss在线观看 | 婷婷丁香在线五月| 丁香六月欧美| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 妹子高潮喷水视频| 一进一出好大好爽视频| 香蕉丝袜av| 日本vs欧美在线观看视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 黄色 视频免费看| 国产精品二区激情视频| 午夜精品在线福利| 真人做人爱边吃奶动态| 国产又爽黄色视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 免费在线观看影片大全网站| 香蕉国产在线看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 淫秽高清视频在线观看| 美女福利国产在线| 美女大奶头视频| 国产精品久久视频播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| 老司机亚洲免费影院| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 久久狼人影院| 大陆偷拍与自拍| 欧美丝袜亚洲另类 | 深夜精品福利| 国产黄色免费在线视频| 青草久久国产| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲成人久久性| 五月开心婷婷网| 操美女的视频在线观看| 黄色成人免费大全| 黄色视频不卡| 两人在一起打扑克的视频| 美女福利国产在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产有黄有色有爽视频| 99久久国产精品久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 成人国产一区最新在线观看| av网站免费在线观看视频| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲三区欧美一区| 在线观看一区二区三区激情| 宅男免费午夜| 国产精品av久久久久免费| 亚洲人成伊人成综合网2020| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲专区中文字幕在线| 亚洲五月天丁香| 可以在线观看毛片的网站| 18禁观看日本| 亚洲久久久国产精品| 丝袜美腿诱惑在线| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲色图综合在线观看| 激情视频va一区二区三区| 一进一出好大好爽视频| 日本vs欧美在线观看视频| 999久久久精品免费观看国产| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲精品在线美女| 悠悠久久av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 精品久久久久久成人av| 麻豆成人av在线观看| 国产一区二区激情短视频| 我的亚洲天堂| 精品人妻在线不人妻| 无人区码免费观看不卡| 无限看片的www在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 18美女黄网站色大片免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 不卡一级毛片| 天堂中文最新版在线下载| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲精品在线观看二区| 中文字幕人妻丝袜制服| 日本三级黄在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久久水蜜桃国产精品网| 无人区码免费观看不卡| 国产精品野战在线观看 | 成人18禁在线播放| 国产一区在线观看成人免费| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 在线国产一区二区在线| 涩涩av久久男人的天堂| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 久久精品成人免费网站| 亚洲国产中文字幕在线视频| 黄色 视频免费看| 国产精品日韩av在线免费观看 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 身体一侧抽搐| 免费观看人在逋| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 美女国产高潮福利片在线看| 搡老岳熟女国产| 中文字幕人妻丝袜制服| 99久久综合精品五月天人人| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 国产xxxxx性猛交| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 色婷婷久久久亚洲欧美| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产麻豆69| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 在线国产一区二区在线| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 91av网站免费观看| 天堂影院成人在线观看| 亚洲三区欧美一区| 极品教师在线免费播放| 最近最新中文字幕大全电影3 | 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 精品久久久久久电影网| 精品久久久久久久久久免费视频 | 色老头精品视频在线观看| 亚洲美女黄片视频| 精品福利永久在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 黄色女人牲交| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲专区国产一区二区| 深夜精品福利| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 纯流量卡能插随身wifi吗| 十八禁人妻一区二区| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲伊人色综图| 电影成人av| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲五月天丁香| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 成年人免费黄色播放视频| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲性夜色夜夜综合| 在线国产一区二区在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 成人三级做爰电影| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产精品成人在线| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲国产看品久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 91九色精品人成在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 女警被强在线播放| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日日干狠狠操夜夜爽| 成人18禁在线播放| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久中文字幕一级| 久久伊人香网站| 超碰97精品在线观看| 91成人精品电影| 久久久久久久久久久久大奶| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产成人av教育| 9热在线视频观看99| 国产精品日韩av在线免费观看 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲九九香蕉| 曰老女人黄片| 制服诱惑二区| 国产野战对白在线观看| 久久伊人香网站| 欧美午夜高清在线| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 天堂俺去俺来也www色官网| 长腿黑丝高跟| 久久久国产成人精品二区 | 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 夫妻午夜视频| 亚洲伊人色综图| 在线看a的网站| 精品国产国语对白av| 嫩草影视91久久| 大香蕉久久成人网| 黄色成人免费大全| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久人妻av系列| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲国产欧美一区二区综合| 我的亚洲天堂| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 深夜精品福利| 国产成人欧美在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 久热这里只有精品99| 视频在线观看一区二区三区| 精品国产国语对白av| 黄色女人牲交| 精品久久蜜臀av无| 国产精品1区2区在线观看.| 欧美激情高清一区二区三区| 午夜免费鲁丝| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 久久影院123| 在线观看免费视频网站a站| 很黄的视频免费| 国产精品一区二区精品视频观看| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 18禁美女被吸乳视频| 成人影院久久| av欧美777| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产av精品麻豆| 国产精品一区二区免费欧美| av在线播放免费不卡| 免费在线观看亚洲国产| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 1024视频免费在线观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲av成人av| 精品久久久久久久久久免费视频 | 99国产综合亚洲精品| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲国产精品sss在线观看 | 欧美日韩亚洲高清精品| 久久九九热精品免费| 亚洲熟女毛片儿| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲国产看品久久| 首页视频小说图片口味搜索| 麻豆久久精品国产亚洲av | 一本大道久久a久久精品| videosex国产| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产一卡二卡三卡精品| 夫妻午夜视频| 美女大奶头视频| 99久久国产精品久久久| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 亚洲成人国产一区在线观看| 9色porny在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 69精品国产乱码久久久| 欧美日韩黄片免| 99在线视频只有这里精品首页| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美成人性av电影在线观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 色婷婷av一区二区三区视频| 1024香蕉在线观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产av在哪里看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 妹子高潮喷水视频| 一级,二级,三级黄色视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 精品人妻在线不人妻| 欧美另类亚洲清纯唯美| 丁香欧美五月| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 日韩成人在线观看一区二区三区| 免费在线观看亚洲国产| 精品人妻1区二区| 国产亚洲欧美98| 亚洲 国产 在线| 成年人黄色毛片网站| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产黄a三级三级三级人| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲久久久国产精品| 亚洲情色 制服丝袜| 天堂√8在线中文| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产一区二区在线av高清观看| 黄色毛片三级朝国网站| av有码第一页| 黄色毛片三级朝国网站| 日韩欧美三级三区| 久久伊人香网站| av在线播放免费不卡| aaaaa片日本免费| 久久久久亚洲av毛片大全| 性少妇av在线| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久香蕉激情| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲免费av在线视频| 自线自在国产av| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久久精品91蜜桃| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 天堂中文最新版在线下载| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产有黄有色有爽视频| 岛国在线观看网站| 日韩大码丰满熟妇| 少妇 在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 纯流量卡能插随身wifi吗| 在线观看免费午夜福利视频| 国产精品综合久久久久久久免费 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久蜜臀av无| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 午夜成年电影在线免费观看| 黄片小视频在线播放| 看免费av毛片| 精品久久久久久久毛片微露脸| www日本在线高清视频| 99riav亚洲国产免费| 纯流量卡能插随身wifi吗|