2021年國(guó)內(nèi)外蜂王漿研究概況

陶凌晨 王康莉 于心雨 李珊珊 鄭火青 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州 310058）

蜂王漿是最重要的蜂產(chǎn)品之一，化學(xué)成分復(fù)雜，生物學(xué)活性豐富，應(yīng)用領(lǐng)域廣泛。關(guān)注國(guó)內(nèi)外蜂王漿研究動(dòng)態(tài)，了解蜂王漿研究熱點(diǎn)，有助于國(guó)內(nèi)蜂王漿科學(xué)研究更好地向縱深發(fā)展，有助于蜂王漿產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。本文介紹了2021 年度國(guó)內(nèi)外蜂王漿論文、專利情況，從地域和研究領(lǐng)域兩方面入手，對(duì)蜂王漿的研究進(jìn)行了分析比較，并對(duì)蜂王漿研究的趨勢(shì)作出展望。

1 蜂王漿相關(guān)研究性論文

1.1 論文數(shù)量及地域分布

根 據(jù)Google Scholar、Elsevier、Springerlink、NCBI、Web of Science、中國(guó)知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫(kù)的搜索結(jié)果，2021年度發(fā)表與蜂王漿相關(guān)的中、英文研究論文共90 篇，包括62 篇SCI 收錄論文，10 篇普通英文論文，以及18 篇中文論文，其中5 篇是中文核心期刊論文。2021年發(fā)表的蜂王漿研究論文數(shù)量是近5 年來(lái)最多的（表1）。

表1 2017～2021年蜂王漿研究論文數(shù)

在62 篇SCI 論文中，第一作者單位是中國(guó)的有12 篇，是2021 年發(fā)表蜂王漿相關(guān)論文最多的國(guó)家。其他國(guó)家包括：伊朗和土耳其各8 篇，日本和沙特阿拉伯各5 篇，美國(guó)和西班牙各4 篇，埃及和波蘭各3 篇，巴西、意大利和印度尼西亞各2 篇，德國(guó)、馬來(lái)西亞、立陶宛和葡萄牙各1 篇。2021 年發(fā)表的SCI 論文數(shù)量相比2020 年有所提升。2021 發(fā)表的蜂王漿相關(guān)的中文核心論文有5 篇，相比2020 年有所減少。

1.2 研究領(lǐng)域分布

2021年蜂王漿研究仍然主要集中于生物學(xué)活性、化學(xué)成分分析和質(zhì)量控制。在62 篇SCI 論文中，有45 篇是有關(guān)蜂王漿及其活性成分的生物學(xué)活性研究，有10 篇是有關(guān)蜂王漿成分、理化特性和質(zhì)量控制的研究。此外，有7 篇是有關(guān)蜂王漿的研究綜述。

2 蜂王漿研究新進(jìn)展

2.1 蜂王漿質(zhì)量控制研究

蜂王漿的化學(xué)成分十分復(fù)雜，會(huì)受到蜜蜂的食物來(lái)源及環(huán)境變化的影響。de Almeida 等[1]研究發(fā)現(xiàn)，在蜂糧中添加鋅能抑制參與哺乳蜂幼蟲和腺體發(fā)育的王漿主蛋白（MRJP1、MRJP2、MRJP3、MRJP5和MRJP7）的表達(dá)及促進(jìn)參與防御系統(tǒng)的王漿主蛋白（MRJP8 和MRJP9）的表達(dá)，從而影響蜂群的營(yíng)養(yǎng)和維持。

汞是一種有毒的重金屬，可以在生物體內(nèi)積累，引發(fā)多種疾病。Astolfi 等[2]建立了一種用冷蒸汽原子熒光光譜法測(cè)定小批量蜜蜂和蜂產(chǎn)品中的汞的分析方法，并且將這種方法應(yīng)用于意大利的六個(gè)地區(qū)收集的真實(shí)樣本（蜂蜜、蜂蠟、花粉和蜂膠）上，結(jié)果顯示蜜蜂體內(nèi)的汞濃度高于其他基質(zhì)，并且由于工業(yè)污染和廢氣排放，汞污染與人類活動(dòng)有密切聯(lián)系。Milone等[3]發(fā)現(xiàn)殺蟲劑會(huì)影響哺育蜂合成蜂王漿的質(zhì)量，如24-亞甲基膽固醇酯、王漿主蛋白和王漿酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量顯著降低；此外，在有殺蟲劑殘留的蜂群中，蜂王的蜂王漿供應(yīng)量會(huì)降低。這說(shuō)明殺蟲劑會(huì)同時(shí)降低蜂王漿的質(zhì)量及產(chǎn)量，并且可能會(huì)對(duì)蜂王的發(fā)育有不利影響，甚至?xí)斐刹赣湎袤w退化等問(wèn)題。Regina 等[4]通過(guò)蛋白組學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)殺蟲劑草甘膦會(huì)降低蜂王漿中MRJP3 的含量。

貯藏條件也是影響蜂王漿成分的重要因素。Ma等[5]比較了普通意大利蜜蜂和王漿高產(chǎn)蜜蜂在24h、48h 和72h 生產(chǎn)的蜂王漿的代謝特征。一方面，兩個(gè)蜂種生產(chǎn)的蜂王漿的代謝物豐度、水分含量和抗菌活性基本沒(méi)有變化，表明這兩種蜂王漿質(zhì)量相似。另一方面，相較于48h 和72h 生產(chǎn)的蜂王漿，24h 生產(chǎn)的蜂王漿生物活性物質(zhì)豐度更高，水分含量更低，但是產(chǎn)量較低，說(shuō)明提前至24h 采收可獲得較高的品質(zhì)，但不適宜商業(yè)生產(chǎn)。Hu 等[6]對(duì)不同貯藏溫度和時(shí)間的蜂王漿的抗菌活性和蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行綜合分析，證實(shí)了抗菌性能與貯藏溫度和時(shí)間之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。值得注意的是，因MRJP4 對(duì)溫度更為敏感，且變化趨勢(shì)與蜂王漿一致，所以可以作為一種可靠的蜂王漿降解標(biāo)志物?；谶@些結(jié)果，它們建立了一種檢測(cè)MRJP4 的膠體金免疫分析試紙條，為檢測(cè)蜂王漿新鮮度提供一種快捷的方法。

雄蜂蛹通常被認(rèn)為是雄性“蜂王漿”等價(jià)物，由于兩者相似性很高，如何尋找特征物質(zhì)鑒別摻假蜂王漿是一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。Sidor 等[7]比較了來(lái)自同一蜂群的蜂王漿及雄蜂蛹的化學(xué)成分和生理活性，發(fā)現(xiàn)雄蜂蛹和蜂王漿在化學(xué)成分方面有很多相似之處，前者含有更豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、類固醇和多酚，且表現(xiàn)出更高的生物活性。其中，阿魏酸和鞣花酸是雄蜂蛹中特有的物質(zhì)，淀粉酶和α-葡萄糖苷酶是雄蜂蛹特有的酶，可以用于鑒別雄蜂蛹和蜂王漿。

2.2 蜂王漿化學(xué)成分研究

已有大量研究表明蜂王漿中的水溶性蛋白有多種功能活性，但對(duì)醇溶性蛋白的活性研究甚少。Yuan 等[8]對(duì)新疆黑蜂蜂王漿醇溶蛋白的兩種主要蛋白質(zhì)進(jìn)行了純化和鑒定，經(jīng)LC-MS/MS 鑒定，一種為葡萄糖神經(jīng)酰胺酶，另一種為王漿主蛋白1（MRJP1），其中葡萄糖神經(jīng)酰胺酶可降解細(xì)胞膜上的葡萄糖神經(jīng)酰胺，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致細(xì)胞壞死。

Sari 等[9]首次使用高效液相色譜（UPLC）結(jié)合四極飛行時(shí)間質(zhì)譜（QTOF/MS）對(duì)印度尼西亞不同產(chǎn)地的4 種蜂王漿進(jìn)行了化學(xué)圖譜分析，鑒定出了30種以上的化合物，并且比較了這4 種類型蜂王漿在化學(xué)成分上的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)班加內(nèi)加拉和基迪里樣品中蔗糖和植物糖含量最高，而二甲基羅丹酸是班加內(nèi)加拉蜂王漿特有的物質(zhì)，在其他樣品中均未檢測(cè)到；德馬克和圖班的蜂王漿含有更多的脂肪酸和低聚糖。通過(guò)分析，可以對(duì)不同來(lái)源和地區(qū)的蜂王漿進(jìn)行鑒別，并針對(duì)性地利用其中的特征性成分。

2.3 蜂王漿的生物學(xué)活性及其作用機(jī)制研究

蜂王漿的多種生物學(xué)活性越來(lái)越受到研究者的關(guān)注。2021 年發(fā)表的7 篇英文綜述中有6 篇是對(duì)蜂王漿生物學(xué)活性的綜述。Collazo 等[10]回顧了近年來(lái)有關(guān)蜂王漿成分及其生物活性和在健康應(yīng)用上的研究，并對(duì)蜂王漿或其特定成分具有的抗高血脂、抗氧化、抗增殖、抗微生物、神經(jīng)保護(hù)、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老和雌激素作用等活性進(jìn)行了綜述。

Uversky 等[11]報(bào)道了蜂王漿蛋白包含不同的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，具有多個(gè)翻譯后修飾的位點(diǎn)，其中許多是無(wú)序的結(jié)合位點(diǎn)，與特定分子結(jié)合蜂王漿蛋白的構(gòu)象可能會(huì)發(fā)生變化。這些結(jié)果表明，蜂王漿蛋白質(zhì)和肽的多功能性是由于它們的結(jié)構(gòu)異質(zhì)性和多態(tài)性引起的。Nainu 等[12]綜述了包括蜂王漿在內(nèi)的蜂產(chǎn)品的醫(yī)藥前景，主要關(guān)注抗癌、抗菌、抗病毒和抗寄生蟲方面的特性。Suleiman 等[13]綜述了在男性生殖障礙上有潛在預(yù)防和治療價(jià)值的蜂產(chǎn)品，包括蜂蜜、蜂王漿、蜂花粉、蜂幼蟲、蜂糧、蜂蠟和蜂毒。這些蜂產(chǎn)品對(duì)類固醇生成、精子生成、氧化應(yīng)激、炎癥方面顯示出積極的作用，從而使它們有希望成為預(yù)防和治療男性不育癥的可能療法。Li 等[14]對(duì)蜂王漿蛋白及其衍生肽的制備、性質(zhì)和生物活性進(jìn)行了綜述，同時(shí)指出蜂王漿作為功能性食品，蜂王漿蛋白不僅是必需氨基酸的豐富來(lái)源，也是制備生物活性肽的優(yōu)良底物，需要進(jìn)一步研究來(lái)表征王漿主蛋白和肽的功能特性，探索生物活性肽的制備和潛在的新活性，提高其生物利用度。

2.3.1 抗氧化活性

蜂王漿是一種有效的天然抗氧化劑，其主要的抗氧化成分是多酚類和黃酮類化合物、蛋白質(zhì)、多肽、小肽和脂肪酸等[15]。熱應(yīng)激易導(dǎo)致睪丸產(chǎn)生氧化應(yīng)激和精子凋亡，Mahdivand 等[16]給熱應(yīng)激小鼠口服100mg/kg/day 劑量的蜂王漿，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，口服蜂王漿可顯著降低丙二醛（MDA）水平，提高總抗氧化能力（TAC）和過(guò)氧化氫酶（CAT）水平，提高小鼠的抗氧化能力，緩解熱應(yīng)激誘導(dǎo)的損傷；在抗精子凋亡方面，蜂王漿促進(jìn)小鼠抗凋亡因子Bcl-2 表達(dá)，抑制P53 和caspase-3 表達(dá)。蜂王漿可通過(guò)提高小鼠抗氧化能力，抑制生殖細(xì)胞凋亡，顯著改善熱應(yīng)激導(dǎo)致的睪丸組織損傷。蜂王漿可提高保存狀態(tài)下公羊精子谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx）、TAC、SOD 活性，降低MDA 水平，提高精子抗氧化水平[17]。

Khazaei 等[18]用蜂王漿治療患有多囊卵巢綜合征（PCOS）的小鼠，血清檢測(cè)雌性激素和抗氧化能力，結(jié)果顯示，蜂王漿增加了鐵還原抗氧化能力（FRAP）和孕酮水平，降低雌二醇和NO 水平，維護(hù)生殖系統(tǒng)抗氧化功能。Aksakal 等[19]在斑馬魚飼料中添加蜂王漿，檢測(cè)肌肉，肝臟、腎臟中SOD、CAT、GPx、谷胱甘肽還原酶（GR）和谷胱甘肽s -轉(zhuǎn)移酶（GST）活性和基因表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蜂王漿組抗氧化酶基因表達(dá)均顯著上調(diào)，抗氧化酶活性總體上提高，且這種抗氧化功能的提高依賴蜂王漿劑量。蜂王漿對(duì)多囊卵巢綜合征這種代謝紊亂疾病有良好的緩解效果。Chi 等[20]給小鼠飼喂不同劑量的蜂王漿，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蜂王漿可以豐富血清白介素-10 的含量，提高肝腎抗氧化水平（TAC、SOD、GPx），調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)，適量服用蜂王漿可以保護(hù)機(jī)體健康。進(jìn)一步研究富硒蜂王漿的抗氧化功能以及腸道菌群的影響發(fā)現(xiàn)，富硒蜂王漿能有效提高肝腎GPx 水平和TAC 活性，以及腎臟SOD 水平，并且可優(yōu)化腸道菌群結(jié)構(gòu)，增加Lachnospiraceae NK4A136 group、Prevotellaceae UCG 001、Rikenellaceae RC9 gut group 和Oscillibacter 豐度，降低Alistipes 豐度，根據(jù)抗氧化指標(biāo)和菌群的相關(guān)性分析，抗氧化功能與豐度上調(diào)的菌群成正相關(guān)，與下調(diào)的菌群呈負(fù)相關(guān)[21]。

Aslan 等[22]用氟化物誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生心臟損傷，再給大鼠灌胃蜂王漿，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，心臟組織中的MDA水平降低，谷胱甘肽（GSH）水平升高；蜂王漿抑制Bcl-2、Gsk-3 和NF-κB 蛋白表達(dá)，促進(jìn)caspase-3、caspase-9、caspase-6、Bax、BDNF 和Nrf-2 蛋 白 表達(dá)，通過(guò)緩解損傷和提高抗氧化能力保護(hù)心臟。蜂王漿蛋白經(jīng)過(guò)不同商業(yè)酶酶解后的水解液和蜂王漿蛋白對(duì)Fenton 反應(yīng)誘導(dǎo)的不同生物分子DNA 氧化損傷均有顯著的抑制作用，并能抑制低密度脂蛋白的氧化。蜂王漿在保護(hù)植物免受氧化損傷方面效果顯著[23]。Acar[24]用蜂王漿處理苯甲酸鈉誘導(dǎo)的蔥屬植物鱗莖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蜂王漿可以抑制苯甲酸鈉誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA 和過(guò)度氧化導(dǎo)致的抗氧化酶SOD、CAT、GR 水平升高，緩解苯甲酸鈉誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷。

2.3.2 抗菌活性

蜂王漿在抗菌方面的研究也越來(lái)越廣泛和深入。為了對(duì)抗多藥耐藥細(xì)菌對(duì)人類健康的威脅，Zhou 等[25]首次從蜂王漿中分離得到一種兩親性抗菌肽Jelleine-1，這種抗菌肽具有廣泛的抗菌譜和較小的毒性，為了提高其抗菌活性，它們研發(fā)出多種新型Jelleine-1 類似物，對(duì)多種革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌，包括耐多藥銅綠假單胞菌均表現(xiàn)出很強(qiáng)的抗菌活性。此外，以蜂王漿為原料合成的綠色合成納米銀顆粒對(duì)革蘭氏陰性菌鼠傷寒鏈球菌具有較高的抗菌活性[26]。Feng 等[27]研究了不同齡期幼蟲蜂王漿和從蜂王漿中純化出的N-糖基化蜂王漿主蛋白2（N-MRJP2）的抗菌作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同齡期幼蟲蜂王漿對(duì)未成熟的幼蟲具有免疫抗菌作用，N-MRJP2通過(guò)干擾細(xì)胞壁生物合成、增加細(xì)胞膜通透性、阻礙有氧呼吸、抑制細(xì)胞分裂和誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，從而殺死革蘭氏陽(yáng)性菌幼蟲芽孢桿菌。

2.3.3 抗腫瘤活性

蜂王漿具有的抗腫瘤活性與其獨(dú)特的脂肪酸成分密切相關(guān)。10-HDA 是蜂王漿最重要的脂肪酸，具有多種生理藥理活性。Aishah 等[28]研究了10-HDA 單獨(dú)或與廣泛用于腫瘤治療的烷基化劑環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide,CP）聯(lián)用對(duì)小鼠Ehrlich 實(shí)體瘤（EST）的抗腫瘤作用，發(fā)現(xiàn)2.5 mg/kg 和5 mg/kg 10-HDA 顯著降低了腫瘤體積、抑制率、腫瘤標(biāo)志物（AFP、CEA）、血清肝腎酶[ALT、AST、肌酸酐（Cr）、尿素氮（BUN）]、脂質(zhì)過(guò)氧化物（LPO）、NO、TNF-α 水平、Bcl-2 表達(dá)水平，且提高了GPx、CAT、SOD 等抗氧化酶水平和凋亡相關(guān)基因（caspase-3、Bax）表達(dá)水平，與CP 聯(lián)用時(shí)，抗腫瘤效果更佳。

Chi 等[29]以含有一定濃度亞硒酸鈉的蔗糖溶液飼喂蜜蜂，生產(chǎn)富硒蜂王漿，研究富硒蜂王漿對(duì)肝癌的抑制作用及其機(jī)制，結(jié)果顯示，以H22 荷瘤小鼠為肝癌模型，灌胃蜂王漿和富硒蜂王漿后，荷瘤小鼠的血清炎癥因子（IL-2、TNF-α）水平升高，LDH 和AST 水平降低，肝功能損傷緩解，抗氧化和免疫功能提高，從而抑制了腫瘤生長(zhǎng)。另外，通過(guò)16S rRNA測(cè)序和血清非靶向代謝組學(xué)檢測(cè)，結(jié)果表明，蜂王漿和富硒蜂王漿調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群，增加腸道益生菌豐度（Muribaculaceae）。代謝組學(xué)結(jié)果顯示，非瑟酮和氧化型L-谷胱甘肽是代謝中的主要抗腫瘤物質(zhì)。根據(jù)基因和蛋白的檢測(cè)結(jié)果，蜂王漿和富硒蜂王漿通過(guò)抑制PI3K 的表達(dá)和AKT 的磷酸化，調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax的表達(dá)，激活caspase-9 和caspase-3 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，下調(diào)COX-2 和VEGF 的表達(dá)，抑制血管生成。富硒蜂王漿可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制血管生成等途徑抑制腫瘤生長(zhǎng)，并通過(guò)提高免疫功能和抗氧化活性等途徑發(fā)揮抗腫瘤作用。

蜂王漿與其他植物的活性成分聯(lián)合抗腫瘤作用也受到研究者的關(guān)注。Moubarak 等[30]通過(guò)百里醌和蜂王漿單獨(dú)或聯(lián)合作用于三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞，研究這兩種物質(zhì)對(duì)乳腺癌的抑制作用和機(jī)制，結(jié)果顯示，百里醌濃度為15μmol/L 時(shí)對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用最顯著，蜂王漿濃度為5μg/mL，兩者聯(lián)合作用效果更佳，0.1μg/mL 和5μg/mL 蜂王漿均使腫瘤細(xì)胞凋亡水平升高，5μg/mL 蜂王漿組cleavedcaspase 3 表達(dá)水平高于0.1μg/mL 蜂王漿組，與百里醌聯(lián)用后，cleaved-caspase 3 表達(dá)水平顯著提高，而調(diào)控細(xì)胞周期的相關(guān)蛋白Ki67 并無(wú)明顯變化，說(shuō)明百里醌與蜂王漿聯(lián)用主要通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡途徑抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。

2.3.4 神經(jīng)保護(hù)作用

Nguyen 等[31]研究了蜂王漿的抗抑郁作用，應(yīng)用嚴(yán)重抑郁癥（MDD）小鼠模型來(lái)研究蜂王漿對(duì)抑郁樣行為的影響。結(jié)果表明，無(wú)論是口服蜂王漿12d 還是單次側(cè)腦室注射，均可減少尾部懸吊試驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間，這表明蜂王漿具有抗抑郁樣作用。此外發(fā)現(xiàn)，蜂王漿治療后，小鼠杏仁核區(qū)域sirtuin1 蛋白和氧化磷酸化（OXPHOS）相關(guān)蛋白的表達(dá)增加。Ghorbanpour等[32]的研究也發(fā)現(xiàn)蜂王漿和豐富的環(huán)境能改變壓力應(yīng)激大鼠的行為，有利于緩解壓力。

血管性癡呆（VaD）是繼阿爾茨海默?。ˋD）之后第二常見(jiàn)的癡呆類型，但仍無(wú)有效的治療方法，人們迫切希望尋找到新的神經(jīng)保護(hù)劑。Sirinupong 等[33]通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)酶解后的蜂王漿能減弱過(guò)氧化氫和谷氨酸誘導(dǎo)的SH-SY5Y 細(xì)胞損傷，提升血管性癡呆大鼠的認(rèn)知水平。大量研究表明，快速眼動(dòng)睡眠剝奪（REM-SD）對(duì)神經(jīng)發(fā)生產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響行為、學(xué)習(xí)和記憶。Khodaverdiloo 等[34]的研究發(fā)現(xiàn)給予REM-SD 懷孕母鼠蜂王漿治療，新生大鼠海馬體中神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子高表達(dá)，表明蜂王漿作為一種神經(jīng)保護(hù)劑，可以通過(guò)恢復(fù)神經(jīng)發(fā)生補(bǔ)償REMSD 的影響。

自噬是一種保守的細(xì)胞內(nèi)分解代謝途徑，可以促進(jìn)神經(jīng)元穩(wěn)態(tài)。Martinez-Chacon 等[35]研究發(fā)現(xiàn)王漿酸QBA 是一種自噬誘導(dǎo)劑，可在各種神經(jīng)元細(xì)胞系、小鼠和果蠅模型中觸發(fā)自噬，QBA 通過(guò)促進(jìn)自噬延長(zhǎng)果蠅的壽命，發(fā)揮對(duì)帕金森體內(nèi)和體外模型的神經(jīng)保護(hù)作用。

2.3.5 免疫調(diào)節(jié)、抗衰老作用

機(jī)體衰老會(huì)導(dǎo)致免疫力下降，蜂王漿抗衰老和免疫調(diào)節(jié)活性一直是國(guó)內(nèi)外研究熱點(diǎn)。Bouamama等[36]通過(guò)體外培養(yǎng)來(lái)自老年人和年輕人的外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs），發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中添加蜂王漿能顯著改善老年P(guān)BMCs 的增殖。伴隨著NO 和IL2、IL-4、IL-6 的釋放，蜂王漿增加了PBMCs 細(xì)胞內(nèi)GSH 和MDA 水平，使之趨于年輕化。Natarajan 等[37]探究了蜂王漿作為補(bǔ)充劑對(duì)先天性免疫調(diào)節(jié)的潛在益處。在秀麗隱桿線蟲模型上，發(fā)現(xiàn)從卵孵化到長(zhǎng)大階段補(bǔ)充蜂王漿可以保護(hù)線蟲免受金黃色葡萄球菌感染。進(jìn)一步的機(jī)理研究證明,蜂王漿通過(guò)調(diào)控IIS/DAF-16、p38 MAPK 和Wnt 的信號(hào)通路來(lái)調(diào)節(jié)先天免疫。此外，與非治療組相比，補(bǔ)充飼喂蜂王漿的老年秀麗隱桿線蟲在各種細(xì)菌感染下存活更久，這個(gè)結(jié)果表明蜂王漿可能有助于延遲先天免疫。Eslami-Kaliji等[38]研究發(fā)現(xiàn)，10-HDA 作為TLR4 的拮抗劑，有可能用于預(yù)防自身免疫疾病和生物材料植入或異體移植時(shí)的排斥反應(yīng)。

2.3.6 對(duì)肌肉、骨骼、皮膚的保護(hù)作用

氟化物作為一種常見(jiàn)的化學(xué)污染物，對(duì)動(dòng)物機(jī)體的牙齒、骨骼和肌肉等各種組織都造成了極大的損害。Aslan 等[39]通過(guò)氟化物誘導(dǎo)大鼠肌肉損傷，研究蜂王漿對(duì)大鼠肌肉損傷的保護(hù)作用。研究表明，蜂王漿通過(guò)促進(jìn)Caspase-3、Caspase-6 和Bax 蛋白表達(dá)水平，抑制Bcl-2、TNF-α 和IL1-α 蛋白表達(dá)減少肌肉組織中的細(xì)胞凋亡以及炎癥的產(chǎn)生，另外，肌肉組織的MDA、GSH 和CAT 的檢測(cè)結(jié)果和組織病理學(xué)分析結(jié)果也證實(shí)了蜂王漿對(duì)大鼠肌肉損傷具有保護(hù)作用。

Fujisue 等[40]進(jìn)行了一項(xiàng)雙盲的臨床試驗(yàn)來(lái)研究蜂王漿對(duì)絕經(jīng)后婦女骨代謝的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相較于安慰劑，持續(xù)6 個(gè)月服用蜂王漿可以改善絕經(jīng)后女性股骨骨礦物質(zhì)密度（BMD）和力量的下降。目前已有的研究表明蜂王漿具有抗骨質(zhì)疏松的功效，但蜂王漿中真正發(fā)揮作用的成分還是未知。Hattori 等[41]探究了蜂王漿蛋白對(duì)去卵巢雌性大鼠骨礦物質(zhì)密度和強(qiáng)度的影響，同樣發(fā)現(xiàn)蜂王漿蛋白有助于預(yù)防性激素相關(guān)的骨骼異常和骨質(zhì)流失，推進(jìn)了蜂王漿保護(hù)更年期骨健康方面的研究。

口腔粘膜炎（OM）是一種常見(jiàn)且嚴(yán)重的癌癥治療藥物引起的并發(fā)癥，不僅影響患者的生活質(zhì)量，還會(huì)增加繼發(fā)感染的風(fēng)險(xiǎn)，可能導(dǎo)致延誤腫瘤治療。Severo 等[42]評(píng)估了蜂王漿、蜂膠和激光療對(duì)5-氟尿嘧啶造成的OM 的療效。結(jié)果表明，蜂王漿、蜂膠以及自身骨髓移植（PBMT）都可有效治療 OM，考慮到一些發(fā)展為OM 的患者無(wú)法使用 PBMT，該研究表明局部應(yīng)用蜂王漿和蜂膠可能是治療OM 的重要替代品。Lin 等[43]研究發(fā)現(xiàn)，在體內(nèi)和體外模型中，板栗花期蜂王漿比油菜花期蜂王漿具有更好的促進(jìn)傷口愈合作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，板栗花期蜂王漿可通過(guò)促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移，調(diào)節(jié)水通道蛋白3（AQP3）的表達(dá)，調(diào)節(jié)鈣離子和MAPK 通路并介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)皮膚傷口愈合。此外，通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)比較分析，鑒定出了15 個(gè)差異蛋白質(zhì)和631 個(gè)差異化合物，推測(cè)不同來(lái)源蜂王漿的傷口愈合特性是由一些不同的成分引起的。

2.3.7 血管、肝腎保護(hù)和抗糖尿病作用

蜂王漿對(duì)肝臟保護(hù)方面的研究也越來(lái)越多。非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）作為一種由脂質(zhì)過(guò)度積累和氧化應(yīng)激導(dǎo)致的代謝類疾病，已經(jīng)成為慢性肝損傷的主要原因之一。Zhang 等[44]研究了蜂王漿主蛋白（MRJPs）對(duì)非酒精性脂肪性肝病的預(yù)防和治療作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)肝細(xì)胞進(jìn)行蜂王漿主蛋白預(yù)處理，能夠顯著減少油酸誘導(dǎo)的NAFLD 細(xì)胞模型中的脂質(zhì)和甘油三酯含量，同時(shí)，抑制細(xì)胞產(chǎn)生ALT 和AST。與模型組相比，蜂王漿組均可恢復(fù)SOD 水平和線粒體膜電位，其中，在油酸誘導(dǎo)的HepG2 細(xì)胞上，蜂王漿主蛋白還顯著上調(diào)了沉默信息調(diào)控因子2 相關(guān)蛋白3、線粒體SOD2 和細(xì)胞色素c 氧化酶亞基IV 的表達(dá)。肝臟缺血再灌注（IR）是肝臟手術(shù)、肝臟移植手術(shù)中無(wú)法避免的過(guò)程，在此過(guò)程中，會(huì)引起氧化應(yīng)激損傷、炎癥和線粒體功能障礙等問(wèn)題。Ali 等[45]對(duì)蜂王漿抗肝臟缺血再灌注損傷的作用及分子機(jī)制進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，200 mg/kg 蜂王漿預(yù)處理后胰島素抵抗（IR）大鼠的肝功能異常，以及IR 肝臟組織病理表現(xiàn)出的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，血竇充血擴(kuò)張，竇腔浸潤(rùn)等得到顯著改善。其可能的作用機(jī)制是通過(guò)調(diào)控細(xì)胞紅蛋白、Nrf-2/HO-1/COX-4 和P38-MAPK/NFκb-p65/TNF-α 信號(hào)通路，提高肝臟Nrf-2、HO-1、COX-4 和細(xì)胞紅蛋白的表達(dá)，減少P38-MAPK、NFκB-p65 和TNF-α 的表達(dá)，顯著減輕炎癥反應(yīng)，保護(hù)肝臟免受IR 損傷。

Pourmobini 等[46]研究了蜂王漿聯(lián)合納米銀治療肝臟和腎臟的炎癥，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，蜂王漿處理降低了腎臟IL-6 水平，蜂王漿和納米銀降低了腎臟和肝臟的白介素-1β 水平，表明蜂王漿聯(lián)合納米銀具有良好的抗炎作用。Nohair[47]研究了蜂蜜蜂王漿混合物對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的1 型糖尿?。═1DM）大鼠生化指標(biāo)的影響，結(jié)果表明，與對(duì)照組和二甲雙胍治療組相比，蜂蜜蜂王漿治療組顯著降低了血漿低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C）含量和甘油三酯。動(dòng)脈粥樣硬化與炎癥和巨噬細(xì)胞增殖有關(guān)，因此抑制巨噬細(xì)胞增殖和減少炎癥可能對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療起到有益作用。Sato 等[48]的研究發(fā)現(xiàn)，蜂王漿蛋白包括Royalisin、MRJP1 和MRJP3 的降解產(chǎn)物可以特異性結(jié)合氧化的低密度脂蛋白（Ox-LDL），抑制巨噬細(xì)胞增殖。這些結(jié)果表明蜂王漿蛋白可能對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化具有治療作用。

2.3.8 生殖保護(hù)作用

蜂王漿對(duì)畜禽生殖系統(tǒng)的保護(hù)有積極作用。蜂王漿通過(guò)卵巢和卵泡的抗衰老，可延長(zhǎng)蛋雞的產(chǎn)蛋期及提高蛋的品質(zhì)。Mahmoud 等[49]研究了蜂王漿對(duì)蛋雞生殖道形態(tài)（包括卵泡生長(zhǎng)和輸卵管形態(tài)）、產(chǎn)蛋率和內(nèi)部蛋品質(zhì)性狀的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蜂王漿提高了58 周齡蛋雞的產(chǎn)蛋率和蛋品質(zhì)。此外，低劑量（100mg/kg）和高劑量（200mg/kg）的蜂王漿均增加了蛋雞卵泡的直徑和重量，改善卵泡的品質(zhì)，但對(duì)輸卵管比例和卵巢間質(zhì)重量沒(méi)有影響，且高劑量的蜂王漿對(duì)增加卵巢和子宮重量效果顯著。蜂王漿對(duì)多囊卵巢綜合征（PCOS）有良好的緩解效果，可以促進(jìn)多囊卵巢綜合征小鼠成熟卵泡數(shù)量和黃體數(shù)量增加，卵巢和子宮重量顯著降低，改善卵巢結(jié)構(gòu)，維護(hù)生殖系統(tǒng)的健康[18]。

精子質(zhì)量對(duì)家禽養(yǎng)殖業(yè)至關(guān)重要，蜂王漿可提高公雞的精子質(zhì)量。Mirzaei 等[50]將不同濃度的蜂王漿稀釋劑添加到液體和冷凍貯藏的公雞精液中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相較于高濃度（10～40mg/mL）蜂王漿和零添加組，低濃度（5mg/mL）蜂王漿稀釋液顯著提高兩種保存狀態(tài)下精子的運(yùn)動(dòng)率、活力和精子膜的完整性，且可防止精子異?；?；而相較于對(duì)照組，高濃度蜂王漿條件下保存的精子特性嚴(yán)重降低。另外，低濃度的蜂王漿還可以提高液體保存過(guò)程中抗氧化酶的表達(dá)量。因此，低濃度蜂王漿對(duì)改善公雞精子特性和提高精子抗氧化性能有顯著的效果。蜂王漿還可減少熱應(yīng)激對(duì)小鼠睪丸的損傷，抑制精子凋亡[16]。Saberivand 等[17]的關(guān)于蜂王漿保護(hù)冷凍公羊精子的研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)。因冷凍后的公羊精子各項(xiàng)活性顯著下降，降低了綿羊人工授精的效率，在精子冷凍劑中分別添加1%、2%和3%蜂王漿，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相較于1%和3%蜂王漿，2%蜂王漿在提高精子的運(yùn)動(dòng)活性和精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)，保護(hù)精膜完整性，提高精子GPx、TAC、SOD，降低MDA 水平，減少精子異?；?，抑制DNA 損傷和細(xì)胞凋亡方面效果更佳。

2.3.9 其他生物活性

組織纖溶酶原激活劑（tPA）作為溶栓治療，可以幫助限制中風(fēng)損害和殘疾，然而，tPA 會(huì)對(duì)大腦產(chǎn)生炎癥及神經(jīng)毒性作用。Shabanizadeh 等[51]研究了用蜂王漿聯(lián)合間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）治療對(duì)卒中5 h 后的保護(hù)作用，結(jié)果顯示，以大腦中動(dòng)脈閉塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）小鼠為模型，小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞組（mMSC）和小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合蜂王漿組（mMSC/RJ）顯著改善了小鼠的行為功能，顯著減少腦梗死的體積，并且，蜂王漿和mMSC/RJ 處理顯著降低了腦水腫，mMSC 和蜂王漿降低了血清促炎細(xì)胞因子水平，表明蜂王漿可以協(xié)同MSC 療法有效治療腦卒中。

被稱為“癌癥第一殺手”的肺癌，已經(jīng)成為中國(guó)乃至全球發(fā)病率和死亡率最高的腫瘤之一。雖然它的發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜，但是醫(yī)學(xué)界公認(rèn)吸煙是肺癌發(fā)生的最重要因素之一。Pancar[52]研究了蜂王漿配合呼吸訓(xùn)練對(duì)吸煙成癮者鐵代謝的影響，通過(guò)分析血液樣本結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，蜂王漿組、吸氣肌訓(xùn)練（IMT）組和聯(lián)合治療組的鐵、鐵結(jié)合和總鐵結(jié)合能力都有顯著提升，從而得出結(jié)論，IMT 和蜂王漿補(bǔ)充劑通過(guò)改變香煙成癮者的鐵代謝來(lái)調(diào)節(jié)呼吸，對(duì)肺有積極的作用。

干眼癥是一種多因素疾病，其特征是眼部不適和視力受損。如今人們經(jīng)常使用空調(diào)和數(shù)字設(shè)備導(dǎo)致干眼癥發(fā)病率上升。目前的治療方法通常是滴人工淚液提供暫時(shí)的緩解，但效果不持久。Yamaga 等[53]用應(yīng)激誘導(dǎo)的干眼模型小鼠，證實(shí)蜂王漿中的乙酰膽堿和三種脂肪酸（10-羥基癸酸、8-羥基辛酸和3,10-二羥基癸酸）有助于淚液分泌，表明特定的蜂王漿脂肪酸有助于穩(wěn)定乙酰膽堿。Perminaite 等[54]制作了一款蜂王漿眼部凝膠，用于角膜局部使用，以增加制劑在眼表的保留時(shí)間和生物利用度。通過(guò)評(píng)估該凝膠理化特性（pH、流變特性、折光率）和體外藥物釋放量，證明凝膠均在可接受的pH 值范圍內(nèi)和折光率接近角膜特性，且無(wú)刺激性，釋放藥物更持久。蜂王漿凝膠具有成為眼部藥物制劑的潛力。

3 蜂王漿相關(guān)專利

3.1 專利數(shù)量情況

作為最大的蜂王漿生產(chǎn)和出口國(guó)，2021 年我國(guó)依然和往年一樣，有大量相關(guān)專利被授權(quán)或公示，這表明我國(guó)在蜂王漿相關(guān)領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)熱情和對(duì)知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)的重視。2021 年在中國(guó)大陸地區(qū)公布的與蜂王漿有關(guān)的專利共有111 項(xiàng)，其中有44 項(xiàng)是被授權(quán)實(shí)用新型專利，67 項(xiàng)是公開(kāi)未授權(quán)的發(fā)明專利（表2）。

表2 2021年中國(guó)（大陸）蜂王漿專利概況

3.2 專利領(lǐng)域分布

在中國(guó)（大陸）專利中，發(fā)明專利主要集中在蜂王漿制品、深加工工藝和質(zhì)量控制等領(lǐng)域，如：“一種蜂王漿蠶絲修護(hù)面膜（CN202110435728.7）”“一種蜂王漿雙歧桿菌粉的制備方法（CN202011294102.0）”“無(wú)蔗糖鮮蜂王漿丸的制備方法（CN202011375359.9）”“一種蜂王漿多肽及其制備方法和應(yīng)用（CN202110416277.2）”“ 蜂王漿新鮮度的生物標(biāo)記物及其篩選方法（CN202110248185.8）”等；實(shí)用新型專利主要集中在蜂王漿生產(chǎn)機(jī)具的設(shè)計(jì)、生產(chǎn)方法以及相關(guān)制品領(lǐng)域，如：“一種蜂王漿生產(chǎn)用的定量取樣裝置（CN2020 21710135.4）”“蜂王漿稀釋裝置（CN202120079975.3）”“ 一種蜂王漿蛋白提純裝置（CN202022175642.9）”“ 一種蜂王漿桶里殘留蜂王漿回收裝置（CN20202189 5088.5）”“一種用于蜂王漿加工的防漏式成品儲(chǔ)存罐（CN202023025086.3）”等。

4 蜂王漿研究展望

與2020 年相比，2021 年國(guó)內(nèi)外蜂王漿研究的論文數(shù)量有所上升，生物學(xué)活性相關(guān)的論文數(shù)量的增加尤為顯著。與往年相比，2021 年國(guó)內(nèi)專利數(shù)量顯著上升，涉及蜂王漿的生產(chǎn)與加工、蜂王漿酶解制備多肽、蜂王漿在保健品化妝品上的應(yīng)用等領(lǐng)域，說(shuō)明蜂王漿的應(yīng)用正在朝著深加工化、多元化的方向發(fā)展。

蜂王漿作為一種重要的蜂產(chǎn)品，其質(zhì)量控制及成分分析一直是研究的重點(diǎn)。2021 年的研究除了在蜂王漿成分的檢測(cè)方法的優(yōu)化之外，還有學(xué)者探究了不同時(shí)間點(diǎn)采收對(duì)蜂王漿成分的影響，為相關(guān)研究提供了一個(gè)新的思路。

作為一種具有多種生物學(xué)活性的保健食品和醫(yī)療補(bǔ)充療法，蜂王漿的生物學(xué)活性一直是研究的熱點(diǎn)。2021 年的研究主要集中在蜂王漿的神經(jīng)保護(hù)活性和抗氧化活性方面。本年度有多篇文獻(xiàn)研究蜂王漿蛋白及脂肪酸的生物學(xué)活性，表明蜂王漿功能研究的對(duì)象已經(jīng)逐步從蜂王漿整體邁入到蜂王漿功能活性組分，代表著蜂王漿研究領(lǐng)域的進(jìn)一步深化。研究者的關(guān)注點(diǎn)也進(jìn)一步從蛋白到肽，探究蜂王漿活性肽的制備和潛在的新活性，提高其生物利用度，獲得更大的商業(yè)價(jià)值，為蜂王漿作為功能性食品和潛在治療劑開(kāi)發(fā)新的應(yīng)用。此外，蜂王漿在更年期綜合癥和生殖保護(hù)方面的研究也有較大的進(jìn)展。

和近幾年一樣，中國(guó)仍然是蜂王漿研究的主力。此外，中東地區(qū)的蜂王漿研究數(shù)量和質(zhì)量有了顯著的提升，研究蜂王漿的地區(qū)正在進(jìn)一步擴(kuò)大，研究熱度逐漸升高。越來(lái)越多的科研團(tuán)隊(duì)投入到蜂王漿的基礎(chǔ)與應(yīng)用研究中，推動(dòng)蜂王漿科研與產(chǎn)業(yè)的健康蓬勃發(fā)展。