藥品微生物檢驗(yàn)與化妝品微生物檢驗(yàn)的異同

陳彩霞，李建麗*，阮班展

（1.海南省食品藥品檢驗(yàn)所?？诜炙?，海南?？?570311；2.海南醫(yī)學(xué)院，海南?？?571199）

藥品微生物限度檢查是保障藥品質(zhì)量安全的重要控制措施之一，是《中華人民共和國藥典》指定用于判斷非無菌制劑及其原、輔料受到微生物污染程度的標(biāo)準(zhǔn)方法，包括微生物技術(shù)法和控制菌檢查法[1]。化妝品是指以涂抹、噴灑或者其他類似方法，散布于人體表面的任何部位，如皮膚、毛發(fā)、指趾甲、唇齒等，以達(dá)到清潔、保養(yǎng)、美容、修飾和改變外觀，或者修正人體氣味，保持良好狀態(tài)為目的的化學(xué)工業(yè)品或精細(xì)化工產(chǎn)品[2]。近年來，因化妝品感染微生物引發(fā)的質(zhì)量安全問題越發(fā)突出[3-5]?！痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》中規(guī)定化妝品微生物指標(biāo)主要包括菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、耐熱大腸菌群、金黃色葡萄球菌以及銅綠假單胞菌等[6]，用于評價(jià)化妝品在生產(chǎn)、包裝、運(yùn)輸各個(gè)環(huán)節(jié)的衛(wèi)生質(zhì)量狀況。筆者所在的實(shí)驗(yàn)室同時(shí)兼具了藥品及化妝品檢測職能，結(jié)合日常工作經(jīng)驗(yàn)，筆者對藥品及化妝品微生物檢驗(yàn)的異同進(jìn)行深入分析，旨在為從事相關(guān)工作的機(jī)構(gòu)與同行提供參考。

1 人員方面的異同

人員是實(shí)驗(yàn)室的第一資源，人員的專業(yè)背景、培訓(xùn)經(jīng)歷及技術(shù)能力是藥品及化妝品微生物檢測結(jié)果準(zhǔn)確的重要保障?！吨腥A人民共和國藥典（2020年版）》第四部通則9203《藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則》要求，從事藥品微生物檢驗(yàn)人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)的教育背景，檢驗(yàn)人員必須熟悉檢驗(yàn)檢測方法、程序、檢查的目的和結(jié)果評價(jià)，檢驗(yàn)人員上崗前必須接受崗前培訓(xùn)并考核合格后持證上崗，且保證持續(xù)教育，保證知識和技能不斷更新以滿足要求[7]?；瘖y品微生物檢驗(yàn)對人員相關(guān)資質(zhì)要求沒有相應(yīng)的文件說明，筆者建議，實(shí)驗(yàn)室可以借鑒藥品微生物檢驗(yàn)人員具體要求，結(jié)合化妝品微生物檢驗(yàn)的特點(diǎn)，制定相應(yīng)的化妝品微生物檢驗(yàn)人員的資格條件。

2 儀器設(shè)備方面的異同

開展微生物檢測離不開儀器設(shè)備，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備與微生物檢驗(yàn)類型、技術(shù)能力及工作量相適宜的儀器設(shè)備，包括電子天平、高壓蒸汽滅菌鍋、接種環(huán)、生物安全柜、超凈工作臺(tái)、培養(yǎng)箱、水浴鍋以及微生物鑒定儀等，且實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定儀器設(shè)備管理制度,對儀器設(shè)備的采購、安裝、驗(yàn)收、維護(hù)維修、使用登記以及日常監(jiān)測等各方面進(jìn)行規(guī)范化管理[8]。藥品微生物檢驗(yàn)與化妝品微生物檢驗(yàn)使用的儀器類型及管理上沒有差別，對于高壓蒸汽滅菌鍋、培養(yǎng)箱等影響檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的儀器，應(yīng)在其運(yùn)行過程中對關(guān)鍵參數(shù)（如溫度、壓力）進(jìn)行連續(xù)觀察及記錄，對于容易發(fā)生交叉污染微生物儀器設(shè)備，如生物安全柜、冰箱等應(yīng)以工作類型及工作量為依據(jù)制定相應(yīng)的清潔和消毒制度，防止交叉污染。

3 物料方面的異同

培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)必不可少的物質(zhì)基礎(chǔ)，培養(yǎng)基的質(zhì)量直接影響微生物檢測的結(jié)果，符合檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制是微生物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。《中華人民共和國藥典》對藥品微生物檢驗(yàn)用培養(yǎng)基的購買、驗(yàn)收、配制、滅菌、分裝、貯藏、使用記錄及質(zhì)量控制等全生命周期均有規(guī)定，常規(guī)的監(jiān)控項(xiàng)目包括pH值、適用性檢查或靈敏度檢查試驗(yàn)等，常用的培養(yǎng)基有胰酪大豆胨瓊脂、沙氏葡萄糖瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基以及紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等，不同類型的培養(yǎng)基根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行促生長能力、抑制能力及指示能力的測試，培養(yǎng)基使用性檢查所用的試驗(yàn)菌株也有嚴(yán)格的要求[1]?；瘖y品微生物檢驗(yàn)與藥品微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基質(zhì)量控制的原理相同，培養(yǎng)基的配制、滅菌等環(huán)節(jié)基本一樣，但化妝品微生物檢驗(yàn)沒有要求進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查，且化妝品培養(yǎng)基一般含有可以中和防腐劑的吐溫80成分，如菌落總數(shù)用到的卵磷脂吐溫80瓊脂，且菌落總數(shù)項(xiàng)目檢驗(yàn)要求在培養(yǎng)基中加入0.5%的TTC溶液，用于區(qū)別化妝品中的顆粒與菌落[9]。此外需要注意的是，化妝品微生物檢驗(yàn)用培養(yǎng)基配制要使用蒸餾水，應(yīng)注意規(guī)范使用TTC[9]，避免微生物培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象、抑菌現(xiàn)象和次生菌現(xiàn)象等。藥品微生物檢驗(yàn)時(shí)，對于一些中成藥，如樣品本底有雜質(zhì)，可以借鑒化妝品使用TTC，從而提高檢驗(yàn)結(jié)果可靠性。

4 檢驗(yàn)方法方面的異同

從檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)來看，兩種檢驗(yàn)方法都以我國頒布的相關(guān)法規(guī)和法典為依據(jù)，藥品微生物檢驗(yàn)方法與化妝品微生物檢驗(yàn)方法各具特色又相互補(bǔ)充，在實(shí)際檢驗(yàn)應(yīng)用過程中可以取長補(bǔ)短，互相借鑒。藥品微生物限度檢查主要依據(jù)國家藥典委員會(huì)編制的《中華人民共和國藥典》檢查藥品的非無菌制劑及原、輔料等的微生物污染程度，并判定其是否超過規(guī)定限度。《中華人民共和國藥典》每5年更新一個(gè)版本，沒有對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)制定相關(guān)規(guī)定，目前執(zhí)行的是2020年版[10]?；瘖y品微生物檢驗(yàn)以《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2020年版）》為依據(jù)，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的更新時(shí)限沒有規(guī)律。此外，《中華人民共和國藥典》對藥品微生物檢驗(yàn)方法投入使用前有嚴(yán)格要求，必須進(jìn)行方法適用性檢查，證明該方法適用于該樣品微生物檢測后方可采用，而現(xiàn)行的化妝品微生物檢驗(yàn)方法沒有相關(guān)規(guī)定，這與化妝品生產(chǎn)中大量使用的防腐劑有矛盾之處?！痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》中可供選擇的化妝品防腐劑達(dá)51種，化妝品中的防腐劑對微生物有一定的抑制作用[11]，雖然化妝品使用的培養(yǎng)基中增加了中和劑，如卵磷脂和吐溫80成分，以去除化妝品中殘留的防腐劑，提高檢出率，但實(shí)際檢驗(yàn)過程中還是會(huì)出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象。筆者結(jié)合多年化妝品檢測經(jīng)驗(yàn)，在樣品溶解時(shí)適當(dāng)升溫至40～44 ℃使樣品充分溶解，或增加助溶劑如石蠟等，大大提升了化妝品微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度。由于化妝品中防腐劑的抑菌能力很強(qiáng)，可以借鑒藥品進(jìn)行方法學(xué)適用性檢查，確定方法的適用性后再運(yùn)用于日常檢驗(yàn)工作。

5 環(huán)境方面的異同

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對微生物檢驗(yàn)有著很大影響，先進(jìn)的硬件設(shè)施及符合標(biāo)準(zhǔn)要求的實(shí)驗(yàn)環(huán)境是保證微生物檢測結(jié)果真實(shí)性與準(zhǔn)確性的重要因素。藥品微生物檢驗(yàn)對環(huán)境的要求非常嚴(yán)格。藥品微生物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)要求必須在專屬區(qū)內(nèi)進(jìn)行，藥品微生物限度檢查應(yīng)在不低于D級區(qū)下的生物安全柜或B級潔凈區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，A級區(qū)和B級區(qū)的空氣供給應(yīng)配備終端高效空氣過濾器，此外，《中華人民共和國藥典》通則“9205藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則”（以下簡稱“通則9205”）中還對實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)測項(xiàng)目與監(jiān)測頻率、人員的進(jìn)出監(jiān)測、更衣流程等進(jìn)行了全面詳細(xì)的規(guī)定[1]。相對于藥品，化妝品微生物檢驗(yàn)環(huán)境相對寬松，沒有明確的文件要求。目前大部分化妝品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在潔凈區(qū)域內(nèi)采用單方向工作流程進(jìn)行檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室可以參考“通則9205”制定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程對化妝品的監(jiān)測環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測，如實(shí)驗(yàn)室條件允許，筆者認(rèn)為實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的藥品微生物檢測區(qū)與化妝品微生物檢測區(qū)，如受客觀條件限制，也應(yīng)做好相應(yīng)控制措施，降低交叉污染以及假陽性、假陰性結(jié)果出現(xiàn)的風(fēng)險(xiǎn)。

6 結(jié)語

從人、機(jī)、料、法、環(huán)5大方面對比分析藥品微生物檢驗(yàn)與化妝品微生物檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，二者既有相同點(diǎn)又各自特點(diǎn)，但總體來講藥品微生物檢查法比化妝品微生物檢查法更具嚴(yán)謹(jǐn)性與先進(jìn)性。例如，藥品的方法在使用時(shí)必須進(jìn)行方法學(xué)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)，這是化妝品沒有的，化妝品對菌落計(jì)數(shù)的各種情況作出的詳細(xì)規(guī)定是藥品所不具備的。作為同時(shí)具備藥品與化妝品微生物檢驗(yàn)職能的機(jī)構(gòu)，要深入學(xué)習(xí)兩者之間的關(guān)聯(lián)性，在實(shí)際檢驗(yàn)過程中靈活運(yùn)用，互相借鑒、取長補(bǔ)短，推動(dòng)實(shí)驗(yàn)室管理水平與技術(shù)能力上新臺(tái)階，為食品化妝品監(jiān)管提供技術(shù)支撐。