血清MIF、G-CSF水平對早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良的診斷價值

王晶磊，姬建剛，張勇華，靳麗娜，畢艷旭

臨汾市中心醫(yī)院新生兒科，山西臨汾 041000

隨著新生兒重癥監(jiān)護技術(shù)和圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)迅速發(fā)展，早產(chǎn)兒的存活率越來越高。但由于早產(chǎn)兒各器官或系統(tǒng)在宮內(nèi)發(fā)育不成熟，出生后易發(fā)生各種并發(fā)癥。支氣管肺發(fā)育不良（BPD）是早產(chǎn)兒常見的并發(fā)癥之一，可引起早產(chǎn)兒肺功能發(fā)育不全、反應(yīng)性氣道疾病、運動發(fā)育遲緩和喂養(yǎng)困難，隨著時間推移可發(fā)展為哮喘、慢性阻塞性肺疾病甚至肺動脈高壓［1］。BPD 的發(fā)病機制尚不完全清楚。目前普遍認(rèn)為，宮內(nèi)感染、機械通氣等引起的炎癥反應(yīng)在BPD 發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用［2］。因此，炎癥細(xì)胞因子有望成為預(yù)測早產(chǎn)兒BPD 的潛在生物標(biāo)志物。巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）是一種多效性炎癥細(xì)胞因子，在先天性免疫和適應(yīng)性免疫中具有上游調(diào)節(jié)作用。有研究報道，MIF 能夠引起肺血管炎癥反應(yīng)和肺動脈重塑［3］。粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）是一種促炎癥細(xì)胞因子，可通過促進骨髓造血系統(tǒng)中性粒細(xì)胞發(fā)育導(dǎo)致氣道中性粒細(xì)胞增多，誘發(fā)呼吸系統(tǒng)炎癥反應(yīng)［4］。鑒于MIF、G-CSF 與呼吸系統(tǒng)疾病密切相關(guān)，我們推測二者可能亦與早產(chǎn)兒BPD 存在一定關(guān)系。本研究探討了血清MIF、G-CSF 水平對早產(chǎn)兒BPD的診斷價值?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2019年1月—2021年10月臨汾市中心醫(yī)院收治的早產(chǎn)兒126 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①胎齡＜32 周和/或出生體質(zhì)量≤1 500 g；②出生后轉(zhuǎn)入新生兒重癥監(jiān)護室；③住院時間＞28 d。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并21-三體綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征等染色體疾病患兒；②合并免疫系統(tǒng)疾病患兒；③合并甲狀腺功能減退、1 型糖尿病等內(nèi)分泌疾病患兒；④合并其他肺部疾病患兒；⑤中途轉(zhuǎn)院或自動出院患兒。BPD 診斷標(biāo)準(zhǔn)：氧依賴（吸入氧濃度＞21%）超過28 d 的新生兒［5］。根據(jù)是否發(fā)生BPD，將早產(chǎn)兒分為BPD 組35 例和非BPD 組91 例。本研究經(jīng)臨汾市中心醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)（審批文號：2021-15-1 號），所有早產(chǎn)兒監(jiān)護人知情同意并簽署書面知情同意書。

1.2 血清MIF、G-CSF 檢測 所有早產(chǎn)兒入組次日采集清晨空腹外周靜脈血3 mL，注入干燥試管，待血液自然凝固后，取上層液，771×g離心15 min，留取上層血清，-80 ℃冰箱保存。采用ELISA 法檢測血清MIF、G-CSF。所有操作嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程和試劑盒說明進行。

1.3 資料收集分析 收集早產(chǎn)兒胎齡、性別、出生體質(zhì)量、分娩方式、胎兒宮內(nèi)生長受限、新生兒窒息、呼吸窘迫、機械通氣、氧療時間、使用肺表面活性劑以及其母親年齡、孕期吸煙、胎膜早破、宮內(nèi)感染、妊娠合并癥（高血壓、糖尿病）等臨床資料。比較BPD組與非BPD 組上述臨床資料，將有統(tǒng)計學(xué)差異的指標(biāo)納入多因素Logistic回歸模型，分析早產(chǎn)兒BPD的危險因素。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS25.0 統(tǒng)計軟件。符合正態(tài)分布的計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗；兩組間比較采用獨立樣本t檢驗。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。危險因素分析采用多因素Logistic 回歸模型。診斷價值分析采用受試者工作特征（ROC）曲線。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清MIF、G-CSF 水平比較 BPD 組與非BPD組血清MIF水平分別為（10.35 ± 2.64）、（4.65 ±1.27）ng/mL，血清G-CSF 水平分別為（80.15 ±20.16）、（46.05 ± 9.12）pg/mL。BPD 組血清MIF、G-CSF 水平均顯著高于非BPD 組（t分別為16.325、13.080，P均＜0.01）。

2.2 早產(chǎn)兒BPD 的危險因素分析 兩組臨床資料比較見表1。BPD 組與非BPD 組母親年齡分別為（29.45 ± 3.26）、（30.11 ± 3.51）歲，孕期吸煙分別為10（28.57%）、9 例（9.89%），妊娠期合并高血壓分別為7（20.00%）、16 例（17.58%），妊娠期合并糖尿病分別為11（31.43%）、25例（27.47%），胎膜早破分別為10（28.57%）、18 例（19.78%），宮內(nèi)感染分別為6（17.14%）、12例（13.19%）。兩組母親孕期吸煙比例比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=6.889，P＜0.05），而母親年齡和妊娠期合并高血壓、糖尿病以及胎膜早破、宮內(nèi)感染比例比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t/χ2分別為0.964、0.099、0.194、1.130、0.323，P均＞0.05）。

表1 兩組臨床資料比較

以早產(chǎn)兒是否發(fā)生BPD（否=0，是=1）為因變量，以胎齡、出生體質(zhì)量、母親孕期吸煙（否=0，是=1）、胎兒宮內(nèi)生長受限（否=0，是=1）、新生兒窒息（否=0，是=1）、呼吸窘迫（否=0，是=1）、機械通氣（否=0，是=1）、使用肺表面活性劑（否=0，是=1）、氧療時間、MIF、G-CSF 為自變量，納入多因素Logistic 回歸模型。采用向后逐步法排除無關(guān)變量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，氧療時間長及血清MIF、G-CSF 水平升高是早產(chǎn)兒BPD 的獨立危險因素，而胎齡大則為其獨立保護因素（P均＜0.05），見表2。

表2 早產(chǎn)兒BPD的多因素Logistic回歸分析結(jié)果

2.3 血清MIF、G-CSF 水平對早產(chǎn)兒BPD 的診斷價值分析 ROC 曲線分析顯示，血清MIF 水平診斷早產(chǎn)兒BPD 的曲線下面積（AUC）為0.743（95%CI：0.657～0.816），其最佳截斷值為6.15 ng/mL，此時其診斷早產(chǎn)兒BPD 的靈敏度為71.43%、特異度為71.43%；血清G-CSF水平診斷早產(chǎn)兒BPD的AUC為0.684（95%CI：0.596～0.764），其最佳截斷值為72.09 pg/mL，此時其診斷早產(chǎn)兒BPD 的靈敏度為74.29%、特異度為69.23%；血清MIF、G-CSF 水平聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒BPD的AUC為0.930（95%CI：0.870～0.968），其診斷早產(chǎn)兒BPD 的靈敏度為91.43%、特異度為90.11%。血清MIF、G-CSF 水平聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒BPD 的AUC顯著高于血清MIF、G-CSF 水平單獨（Z分別為5.335、4.174，P均＜0.05）。

3 討論

BPD 是早產(chǎn)兒中常見的一種慢性肺部疾病，是由多種因素導(dǎo)致下呼吸道發(fā)育障礙所引起的疾病，其影像學(xué)表現(xiàn)為肺泡化減少、囊性肺氣腫、纖維化和氣道損傷等。目前對BPD 尚缺乏早期診斷和有效治療的手段，如果診治不及時可導(dǎo)致嚴(yán)重的終身疾?。?］。早產(chǎn)和低出生體質(zhì)量是導(dǎo)致新生兒BPD 的常見危險因素。據(jù)統(tǒng)計，妊娠22～24 周出生的早產(chǎn)兒BPD 患病率高達80%，而妊娠28 周以后出生的早產(chǎn)兒BPD 患病率降至20%，患BPD 的新生兒約95%為極低出生體質(zhì)量［7］。此外，胎兒宮內(nèi)生長受限、宮內(nèi)感染、肺泡表面活性劑缺乏、機械通氣、營養(yǎng)不足等也與新生兒BPD患病風(fēng)險增加有關(guān)［7］。

目前普遍認(rèn)為，宮內(nèi)感染、機械通氣等引起的炎癥反應(yīng)在BPD 的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用［2］。炎癥細(xì)胞可募集T細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等向肺損傷區(qū)域遷移并牢固粘附至活化的內(nèi)皮細(xì)胞表面，進一步釋放促炎癥細(xì)胞因子啟動炎癥級聯(lián)反應(yīng)，引起肺或支氣管損傷［8］。MIF 是一種上游促炎癥因子，基因定位于人染色體22q11.2，其組成型表達并儲存于T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等細(xì)胞內(nèi)池，在感染、促炎癥細(xì)胞因子或抗原刺激下從細(xì)胞內(nèi)池中釋放出來，直接或間接促進TNF-α、INF-γ、IL-1β等促炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生。MIF 還可通過自分泌作用促使T 細(xì)胞活化和增殖以及相關(guān)細(xì)胞因子釋放，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)。有研究報道，過敏性哮喘患者血清MIF 水平顯著升高，且其水平與肺功能指數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系［9］。HUSEBO 等［10］研究指出，慢性阻塞性肺疾病患者血清MIF 水平顯著升高，且在急性加重期血清MIF 水平進一步升高。另外，在呼吸窘迫綜合征早產(chǎn)兒臍血中也發(fā)現(xiàn)血清MIF水平明顯升高［11］。結(jié)果提示，MIF 可能與呼吸系統(tǒng)疾病密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，BPD 組血清MIF 水平顯著高于非BPD 組；多因素Logistic 回歸分析顯示，血清MIF水平升高是早產(chǎn)兒BPD 的獨立危險因素。提示MIF可能與早產(chǎn)兒BPD 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。究其原因，在肺發(fā)育過程中MIF 不僅能通過誘導(dǎo)肺部炎癥反應(yīng)引起肺損傷，還能通過影響肺血管生成和肺泡形成阻礙肺發(fā)育，最終導(dǎo)致早產(chǎn)兒BPD［12］。

G-CSF 是一種單體型糖蛋白，主要由巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞、肥大細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞合成，可動員造血干細(xì)胞促使中性粒細(xì)胞系造血細(xì)胞發(fā)育和分化。目前，臨床多采用重組人G-CSF刺激粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞成熟并向外周血釋放，主要用于治療腫瘤放療或化療后引起的白細(xì)胞減少癥。正常肺上皮細(xì)胞可分泌少量G-CSF，在微生物感染、炎癥和創(chuàng)傷刺激下G-CSF 合成增加，G-CSF 增多能夠促使中性粒細(xì)胞產(chǎn)生、存活和趨化，導(dǎo)致破壞性炎癥反應(yīng)，從而引起上呼吸道疾病或肺部疾?。?3］。有研究報道，急性肺損傷患者血清G-CSF水平顯著升高，并且血清G-CSF水平升高是急性肺損傷患者死亡的獨立危險因素之一［14］。有研究還發(fā)現(xiàn)，呼吸道合胞病毒感染哮喘患者痰液G-CSF 水平顯著升高，且其與嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系［13］，表明G-CSF 可能促使嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)在氣道中遷移和浸潤，與氣道炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，BPD 組血清G-CSF 水平顯著高于非BPD 組；多因素Logistic回歸分析顯示，血清G-CSF 水平升高是早產(chǎn)兒BPD的獨立危險因素。提示G-CSF亦能參與早產(chǎn)兒BPD的發(fā)生、發(fā)展。究其原因，G-CSF 增多可導(dǎo)致未發(fā)育成熟的巨噬細(xì)胞在肺間質(zhì)中積累，影響肺泡發(fā)育，從而導(dǎo)致早產(chǎn)兒BPD［15］。

本研究ROC 曲線分析顯示，血清MIF、G-CSF 水平單獨和聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒BPD 的AUC分別為0.743、0.684、0.930，血清MIF、G-CSF 水平聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒BPD 的AUC顯著高于血清MIF、G-CSF 水平單獨。結(jié)果提示，血清MIF、G-CSF 水平對早產(chǎn)兒BPD均有一定診斷價值，二者聯(lián)合診斷價值更高。綜上所述，血清MIF、G-CSF 水平與早產(chǎn)兒BPD密切相關(guān)；血清MIF、G-CSF 水平對早產(chǎn)兒BPD 均有一定診斷價值，二者聯(lián)合診斷價值更高。