探究副豬嗜血桿菌病的診斷與防治

何建秋

（南充市嘉陵區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 南充 637100）

副豬嗜血桿菌病中的病菌屬于革蘭氏陰性短桿菌，其血清形態(tài)呈現(xiàn)多樣化狀態(tài)，各個(gè)血清型菌株具有地方性特征，且缺乏一定交叉保護(hù)。這種病癥多感染斷奶仔豬和保育豬，如未及時(shí)診治患病豬群，病菌將會(huì)快速感染其他健康豬群，造成養(yǎng)豬場(chǎng)產(chǎn)量下降、成本上升。為避免此類事件發(fā)生，養(yǎng)殖農(nóng)戶需在發(fā)現(xiàn)豬只異常時(shí)，第一時(shí)間進(jìn)行隔離治療控制病菌擴(kuò)散。

1 副豬嗜血桿菌病診斷方法

1.1 發(fā)病原因

該疾病一年四季均有發(fā)生可能性，豬群患病主要原因如下：①日常飼喂管理差，如部分養(yǎng)殖戶飼料儲(chǔ)存不當(dāng)造成飼料變質(zhì)，豬群食用后營(yíng)養(yǎng)不良或者發(fā)生腸胃炎等疾病，更容易受到病菌侵害；②養(yǎng)殖環(huán)境發(fā)生變化，造成豬群產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)；③氣候發(fā)生變化，如秋季轉(zhuǎn)冬季時(shí)氣溫驟降，豬群抵抗力變差；④患病豬群未及時(shí)得到治療，病菌在養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)擴(kuò)散[1]。

1.2 臨床癥狀

該疾病主要分為兩種類型：一種為急性型，另外一種為慢性型[2]。患急性型疾病時(shí)，豬只通常無(wú)臨床癥狀，且直接死亡。患慢性型疾病時(shí)，臨床癥狀一般表現(xiàn)為生長(zhǎng)緩慢、背毛粗糙雜亂；食欲降低造成營(yíng)養(yǎng)不良；體溫持續(xù)升高，維持在40～42℃之間；精神萎靡，且不斷咳嗽；耳朵明顯發(fā)紺，皮膚明顯發(fā)白；關(guān)節(jié)發(fā)生腫脹，觸摸時(shí)豬只因疼痛而尖叫，行走緩慢，且伴隨顫抖癥狀。

1.3 剖檢癥狀

剖檢癥狀如下：病死豬只具有較為明顯的胸膜炎以及關(guān)節(jié)炎。將關(guān)節(jié)切開后，

可發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)腔內(nèi)積留大量液體，伴有膠凍性物體以及纖維素樣物；部分病死豬只具有較為明顯的心包炎、肺炎等癥狀。可發(fā)現(xiàn)心包積液嚴(yán)重，心包膜明顯增厚，心肌表面滲出大量纖維素。肺臟腫大，顏色為暗紅色，伴有不同程度的出血或者淤血現(xiàn)象，同時(shí)粘連胸膜。肺部表面有纖維素性膜，呈現(xiàn)漿液性狀態(tài)，顏色為淡黃色。喉氣管內(nèi)可發(fā)現(xiàn)黏液，胸腔積有淡紅色纖維性滲出物，并粘連腹腔。淋巴結(jié)腫脹，顏色為暗紅色，切開后可發(fā)現(xiàn)其切面呈現(xiàn)大理石樣。其中，腹股溝淋巴結(jié)腫脹最明顯。肝脾處同樣發(fā)生腫脹，肝臟邊緣嚴(yán)重出血，其表面有明顯的纖維蛋白膜。

1.4 檢測(cè)

臨床癥狀和剖檢癥狀可作為初步診斷依據(jù)，確診則需進(jìn)一步檢測(cè)。

檢測(cè)方法如下：

1.4.1 分子生物學(xué)檢測(cè)法

PCR檢測(cè)方法在診斷中較為常用，其可以對(duì)脫氧核糖核酸模板拷貝起始數(shù)進(jìn)行定量，操作簡(jiǎn)單方便，反應(yīng)時(shí)間較短[3]。在無(wú)菌條件下，對(duì)病死豬進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。主要采集病死豬內(nèi)臟器官作為測(cè)試樣本，如脾臟、肺臟等，以明確這些豬只體內(nèi)是否存有以下幾種病毒和細(xì)菌：①豬瘟病毒；②繁殖與呼吸綜合征病毒；③圓環(huán)病毒；④副豬嗜血桿菌。采樣結(jié)束后，參照不同病毒脫氧核糖核酸提取與純化試劑盒說(shuō)明書，將此次實(shí)驗(yàn)所需核酸提取出來(lái)。接著，利用不同病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)提取核酸物質(zhì)。最后，經(jīng)過(guò)PCR檢測(cè)確定后，檢測(cè)樣品中并未發(fā)現(xiàn)上述3種病毒。結(jié)果顯示，樣品呈現(xiàn)陽(yáng)性，比對(duì)后可發(fā)現(xiàn)基因序列核苷酸同源性在98.2%～99%之間，可確定其中有副豬嗜血桿菌。

1.4.2 病原體檢測(cè)法

這種檢測(cè)方法主要在臨床癥狀和尸檢病變基礎(chǔ)上開展，可以采用兩個(gè)階段進(jìn)行精準(zhǔn)檢測(cè)：其一為細(xì)菌分離；其二為培養(yǎng)基培養(yǎng)與觀察。經(jīng)過(guò)顯微鏡觀察，確定細(xì)菌或者培養(yǎng)基為革蘭氏陰性短桿菌即可確診。細(xì)菌分離培養(yǎng)方法如下：首先，將病菌接種以下物質(zhì)中：①巧克力瓊脂培養(yǎng)基；②含5%無(wú)菌胎牛血清；③1%煙酰胺腺嘌呤二核苷酸TSA固體培養(yǎng)基，前提條件為經(jīng)過(guò)過(guò)濾以及除菌。其次，在恒溫狀態(tài)下進(jìn)行培養(yǎng)。溫度維持在37℃為宜，觀察時(shí)間為1d。觀察期間可發(fā)現(xiàn)巧克力瓊脂培養(yǎng)基會(huì)生長(zhǎng)出小菌落：菌落較為細(xì)??；顏色為灰色；形狀如同針尖；并無(wú)任何溶血現(xiàn)象發(fā)生。1%煙酰胺腺嘌呤二核苷酸TSA固體培養(yǎng)基中菌落情況如下：菌落形狀為圓形，且與針尖較為相似；表面光滑；無(wú)顏色。選擇較為典型的單個(gè)菌落，進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，可發(fā)現(xiàn)菌體大小不一、形態(tài)不一，同時(shí)分布不規(guī)則，無(wú)鞭毛和芽孢，主要為短桿菌，伴有少許革蘭氏陰性菌，呈現(xiàn)球體狀。

1.4.3 藥敏試驗(yàn)

確定豬群患得該疾病后，需要結(jié)合藥敏試驗(yàn)，明確高敏藥物。

首先，選擇經(jīng)過(guò)純化的分離菌；其次，使用涂布棒，將分離菌均勻接種在含有NAD的TSA培養(yǎng)基上；接著，采取“藥敏片擴(kuò)散法”進(jìn)行試驗(yàn)；最后，在37℃恒溫下仔細(xì)觀察，觀察時(shí)間為1d。根據(jù)結(jié)果（見表1）可知，這種分離菌對(duì)部分藥物高敏。

表1 藥敏試驗(yàn)具體結(jié)果

2 副豬嗜血桿菌病防治措施

防治過(guò)程中，養(yǎng)殖農(nóng)戶需要以預(yù)防為主，做好日常飼喂管理，減少養(yǎng)豬場(chǎng)細(xì)菌和病毒滋生量，有效降低豬群發(fā)病率。如豬群患病，則應(yīng)第一時(shí)間診斷，確診后進(jìn)行科學(xué)藥物治療，幫助患病豬群恢復(fù)健康機(jī)體。

2.1 治療措施

2.1.1 隔離治療

發(fā)現(xiàn)患病豬只時(shí)，養(yǎng)殖農(nóng)戶應(yīng)當(dāng)立即采取隔離治療方式，避免造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。選擇通風(fēng)良好的豬舍作為治療區(qū)域，嚴(yán)禁其他人員隨意進(jìn)出。其次，做好消毒處理。由于該疾病病菌傳染性極高，因此，在發(fā)現(xiàn)病例隔離后，應(yīng)第一時(shí)間對(duì)養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行全面消毒，以防止病菌擴(kuò)散侵染其他健康豬群。可以選用高效的消毒劑進(jìn)行消毒，對(duì)各個(gè)豬舍進(jìn)行噴灑即可。注意豬舍角落也需要進(jìn)行消毒，以免消毒工作不到位，病菌在豬舍內(nèi)持續(xù)擴(kuò)散。隔離期間，如患病豬只直接死亡，則應(yīng)及時(shí)進(jìn)行淘汰處理。根據(jù)牲畜無(wú)害化處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行有效處理，避免病菌殘留，危害其余豬群。對(duì)于未患病豬群，需要通過(guò)有效的藥物保健加強(qiáng)健康豬群抵抗力，降低病菌感染率。

2.1.2 藥物治療

由于這種疾病多發(fā)于高熱綜合癥或者呼吸道病綜合癥，病毒混合后激發(fā)疾病發(fā)生，因此必須采取聯(lián)合治療方法，如抗病毒藥物+抗應(yīng)激反應(yīng)藥物+抗細(xì)菌藥物+提高免疫力藥物，才可提高藥物治療效果，幫助患病豬群恢復(fù)健康機(jī)體。在治療病豬時(shí)，對(duì)于一些無(wú)癥狀病豬，可以使用氟苯尼考粉、復(fù)方阿莫西林粉等抗菌藥物進(jìn)行拌料飼喂治療，一般治療5～7d即可好轉(zhuǎn)。如病豬在發(fā)病期間伴有呼吸困難或者哮喘等癥狀，則可使用卡那霉素注射液等進(jìn)行治療。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，一般可以按照病豬體重進(jìn)行藥物肌內(nèi)注射治療。如注射10～20mg/kg氟苯尼考。每隔1d，注射1次，持續(xù)治療7d。這種藥物可以有效預(yù)防繼發(fā)性病癥，但是在使用時(shí)應(yīng)注意適量，以免過(guò)量注射造成豬只肝臟受損。全群治療時(shí)，可在病豬飼料中添加包被恩諾沙星粉，用量用法按說(shuō)明，每日拌料1次；連續(xù)治療7d后，可改用復(fù)方阿莫西林等藥物進(jìn)行持續(xù)治療。每日拌料1次，飼喂7d即可。如養(yǎng)豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)條件允許，可制作自家疫苗進(jìn)行治療，也可以有效控制疾病。

2.2 預(yù)防措施

2.2.1 注重飼料營(yíng)養(yǎng)物添加

預(yù)防過(guò)程中，飼料喂養(yǎng)是關(guān)鍵管理內(nèi)容之一。飼料是豬群主要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，如豬群日常飼料存在問(wèn)題，則會(huì)造成其營(yíng)養(yǎng)不良，出現(xiàn)繼發(fā)性疾病。由此可見，飼料管理不容小覷。在管理飼料時(shí)，養(yǎng)殖農(nóng)戶必須選擇背陰干燥、通風(fēng)透光的區(qū)域儲(chǔ)存飼料，保證飼料不變質(zhì)或發(fā)霉。其次，在飼喂飼料時(shí)，應(yīng)根據(jù)不同生長(zhǎng)階段的豬群采取不同飼喂手段。例如，斷奶仔豬飼料應(yīng)遵循循序漸進(jìn)的原則，在斷奶初期適量添加一些飼料飼喂，使其可以逐漸適應(yīng)食用飼料，避免發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)。同時(shí)關(guān)注豬群日常食用情況和生長(zhǎng)情況，如缺乏維生素（維生素E、維生素A等）或微量元素（鐵、銅、錳等），則應(yīng)在飼料中添加含有維生素或者微量元素的精飼料，保證豬群生長(zhǎng)期可以吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。日常飼喂?fàn)I養(yǎng)充足可有效提升豬群抗病能力，從而減少患病豬數(shù)量。由于該疾病常常伴有混合感染特點(diǎn)，如支原體與其他病毒感染，因此養(yǎng)殖農(nóng)戶可以在日常飼料中添加藥物進(jìn)行預(yù)防，加強(qiáng)豬群免疫能力。例如，為了預(yù)防疾病發(fā)生，可以在產(chǎn)前或者產(chǎn)后母豬飼料中添加預(yù)防性藥物，可起到良好預(yù)防效果；仔豬斷奶前3天至斷奶后10天內(nèi)，可以在飼料中添加泰妙和氟苯尼考，或者多西環(huán)素和氟苯尼考，按照說(shuō)明書添加適量藥物，通過(guò)提高仔豬抵抗力和免疫力，減少仔豬患病數(shù)量。

2.2.2 做好內(nèi)部管理

首先，養(yǎng)殖農(nóng)戶應(yīng)重視豬舍衛(wèi)生清潔。病菌容易滋生在骯臟的環(huán)境中，如日常清潔不到位，長(zhǎng)期堆積豬群排泄糞便等，必然會(huì)增加患病率，導(dǎo)致豬群產(chǎn)量明顯下降。因此養(yǎng)殖農(nóng)戶需要做好每日清潔。其次，每周進(jìn)行1次全面消毒（也可根據(jù)養(yǎng)豬場(chǎng)情況決定消毒頻次），防止病菌滋生后侵入豬群呼吸道，造成豬群生長(zhǎng)緩慢。消毒時(shí)，相關(guān)人員應(yīng)穿戴好消毒護(hù)具，既可起到防護(hù)作用，也可提高消毒有效性。除了內(nèi)部消毒之外，養(yǎng)殖農(nóng)戶也應(yīng)重視日常消毒與防護(hù)。例如，外來(lái)車輛進(jìn)出時(shí)，必須做好人員消毒才可進(jìn)入養(yǎng)豬場(chǎng)。最后，盡量堅(jiān)持“自繁自養(yǎng)”，確保無(wú)外來(lái)病毒侵染。如必須引入外來(lái)豬群提高產(chǎn)量和質(zhì)量，則應(yīng)做好檢疫工作。在外來(lái)豬群入場(chǎng)前，檢查豬群機(jī)體健康情況，如發(fā)現(xiàn)某豬只呈陽(yáng)性，則應(yīng)立即隔離檢疫?；疾∝i只隔離期間，其他外來(lái)豬群也應(yīng)進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，以免病菌侵染無(wú)明顯臨床癥狀，造成內(nèi)部豬群被病菌感染。通過(guò)科學(xué)藥物治療后，需要對(duì)患病豬只再次進(jìn)行嚴(yán)格檢測(cè)，呈陰性后觀察數(shù)日，才可將外來(lái)豬群與內(nèi)部豬群混養(yǎng)。嚴(yán)格檢疫外來(lái)豬群才可避免交叉感染，從而有效提高豬群生長(zhǎng)健康性，促進(jìn)養(yǎng)豬場(chǎng)實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)。

2.2.3 避免應(yīng)激反應(yīng)

應(yīng)激反應(yīng)是引發(fā)豬群患病的主要原因之一，采取合適的養(yǎng)殖方法降低應(yīng)激反應(yīng)，是重要預(yù)防措施之一。首先，在轉(zhuǎn)換仔豬養(yǎng)殖環(huán)境時(shí)，養(yǎng)殖農(nóng)戶需要做好相關(guān)措施，避免仔豬出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)患上此病。例如，仔豬到一定日齡時(shí)，需要轉(zhuǎn)入保育豬舍，與保育豬共同飼喂。此時(shí)養(yǎng)殖農(nóng)戶應(yīng)采取循序漸進(jìn)的方式，幫助仔豬適應(yīng)環(huán)境轉(zhuǎn)變。從飼喂方式方面，逐步增加飼料進(jìn)行飼喂，使其可以食用普通飼料。同時(shí)可在飲水中添加抗應(yīng)激藥物（多種維生素或黃芪多糖等），或者在飼料中添加一些藥物，以降低仔豬應(yīng)激反應(yīng)發(fā)生率。轉(zhuǎn)變環(huán)境后，養(yǎng)殖農(nóng)戶需要實(shí)時(shí)關(guān)注仔豬生長(zhǎng)情況，如發(fā)生異常現(xiàn)象，則應(yīng)立即根據(jù)實(shí)際情況解決問(wèn)題，避免仔豬因外界因素產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，增加患病可能性。其次，日常飼喂中，豬舍養(yǎng)殖量不應(yīng)過(guò)于密集。如豬舍飼喂量過(guò)多，夏季天氣炎熱時(shí)，豬群容易出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)。具體數(shù)量可根據(jù)豬舍面積進(jìn)行合理劃分，避免養(yǎng)殖數(shù)量過(guò)多或過(guò)少。最后，做好豬舍整修工作。前面提到，疾病發(fā)生原因之一為天氣變化，冬季時(shí)期天氣驟變，且氣溫較低，如豬舍保暖設(shè)施不全，豬群也容易發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)。養(yǎng)殖農(nóng)戶需要實(shí)時(shí)關(guān)注豬舍情況，及時(shí)修繕屋頂、門窗等，確保豬舍保暖效果良好；夏季時(shí)，根據(jù)養(yǎng)豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)條件配備經(jīng)濟(jì)實(shí)用的基礎(chǔ)降溫設(shè)施，如發(fā)現(xiàn)設(shè)備老化或者損壞，則應(yīng)及時(shí)更換或者修理，保證豬舍溫度適宜。

2.2.4 定期接種疫苗

定期接種疫苗，可以有效預(yù)防疾病發(fā)生。目前國(guó)內(nèi)使用的疫苗為——副豬嗜血桿菌多價(jià)滅活菌苗，一共分為4種類型：①血清4；②血清5；③血清12；④血清13。該疫苗免疫效果極佳，使用安全性高，且具有較強(qiáng)的機(jī)體保護(hù)力，豬群接種疫苗后可以對(duì)疾病產(chǎn)生抗體。在給母豬接種疫苗時(shí)，如若母豬第一次生產(chǎn)，則需要在其生產(chǎn)前40d進(jìn)行1次免疫，產(chǎn)前20d再進(jìn)行1次免疫，共免疫2次。之后，母豬二次生產(chǎn)可以在產(chǎn)前30d進(jìn)行1次免疫即可。注射方式為肌肉注射，3ml滅活苗即可。在給仔豬接種疫苗時(shí)，一般需要進(jìn)行2次免疫。肌肉注射1.5毫升滅活苗即可。其中，第2次免疫時(shí)間應(yīng)在第1次免疫后15d，才可起到良好防疫效果。在給公豬接種疫苗時(shí)，時(shí)間為1年2次，采取肌肉注射方式，注射3ml滅活苗即可。接種疫苗期間，可以將免疫增強(qiáng)劑和疫苗結(jié)合使用，這種方式可促進(jìn)免疫效果提升，注射之后，豬群體內(nèi)抗體形成速度較快：抗體在豬只體內(nèi)分布均勻，存活時(shí)間較長(zhǎng)，可有效弱化機(jī)體免疫與應(yīng)激抵抗作用。在注射專用轉(zhuǎn)移因子時(shí)，不同體型的豬群注射量也均有不同。仔豬：每次注射0.25ml；中型體格豬群：每次注射0.5ml；大型體格豬群：每次注射1ml。注意事項(xiàng)：應(yīng)與副豬嗜血桿菌多價(jià)滅活菌苗分開注射，嚴(yán)禁混合使用。

3 結(jié)論

副豬嗜血桿菌病一旦發(fā)生，將阻礙養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。養(yǎng)殖農(nóng)戶在日常飼喂中應(yīng)重視疾病預(yù)防，采取飼喂“精飼料+粗飼料”的形式提升豬群抵抗力和免疫力，同時(shí)加強(qiáng)豬場(chǎng)清潔消毒與防疫工作，從根本上降低病菌感染率，確保養(yǎng)豬場(chǎng)運(yùn)營(yíng)正常。