尿液胱抑素C檢測在腎損傷中的診斷價(jià)值

李軼春，黃日昇，劉建航，彭云娟，岑文新，梁國玲

（北海市中醫(yī)醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西 北海 536000）

隨著人民生活方式、飲食結(jié)構(gòu)等變化，使高血壓、糖尿病、冠心病等發(fā)病率呈增高趨勢(shì)，容易導(dǎo)致腎損傷，因此能早期發(fā)現(xiàn)其損傷的標(biāo)志物對(duì)腎病的診治尤為重要[1]。胱抑素C（cystatin，CYS-C）為半胱氨酸蛋白酶抑制劑C，由120個(gè)氨基酸組成，低相對(duì)分子質(zhì)量、堿性非糖化蛋白質(zhì)，位于人類第20號(hào)染色體,能通過腎小球?yàn)V過被腎小管上皮細(xì)胞重吸收并在細(xì)胞內(nèi)降解，而腎小管上皮細(xì)胞本身則不分泌CYS-C[2-3]。因此腎臟出現(xiàn)輕微損害時(shí)即可在外周血檢測到CYS-C水平顯著增高，是腎損傷早期診斷理想的內(nèi)源性標(biāo)志物[4]。研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性腎小球疾病或腎血管疾病以及其他疾病病累及引發(fā)的腎損傷多伴有不同程度的腎小管間質(zhì)損害，引起CYS-C在腎小管重吸收障礙，致使尿液中CYS-C濃度升高，尿液CYS-C可作為評(píng)估腎小管功能的重要指標(biāo)[5]。但目前，腎功能檢測指標(biāo)多以血清胱抑素C檢測為主，尿胱抑素C的檢測診斷濃度區(qū)間等還存在爭議。本研究旨在通過評(píng)價(jià)尿液CYS-C對(duì)腎損傷的診斷價(jià)值，協(xié)助建立腎損傷患者的尿液CYS-C診斷濃度區(qū)間，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2021年2月-10月北海市中醫(yī)醫(yī)院腎病科門診及住院收治的腎損傷患者45例作為腎損傷組（慢性腎臟病1-5期20例，腎功能不全7例，其他腎病3例，腎病綜合征15例），其中男29例，女16例，年齡22～84歲，平均年齡（44.4±16.7）歲；另選擇同期55例健康體檢者為健康對(duì)照組，其中男39例，女16例，年齡18-58歲，平均年齡（23.8±8.9）歲。準(zhǔn)入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《腎臟診斷學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)，腎損傷參照實(shí)驗(yàn)室診斷[6]；②臨床資料完善；③獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：使用糖皮質(zhì)激素或甲狀腺異?；颊摺?/p>

1.2 方法分別采集兩組受試者空腹肘靜脈血5 mL和清晨中段尿5 mL。血液標(biāo)本室溫靜置30 min后，3 000 r/min 離心10min ,取上層血清待測；尿液標(biāo)本1 000 r/min離心15 min，取上層尿液待測。血尿素和血肌酐分別使用尿素酶-谷氨酸脫氫酶法和肌氨酸氧化酶法檢測，試劑由北京安圖生物工程有限公司提供；尿液CYS-C使用膠乳免疫比濁法檢測，試劑由北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司提供。以上項(xiàng)目均由同一實(shí)驗(yàn)組人員，同一批號(hào)質(zhì)控品，按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第四版的要求及標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指導(dǎo)書在佳能TBA-FX8全自動(dòng)生化儀檢測完成。實(shí)驗(yàn)期間所有室內(nèi)質(zhì)控均在控，室間質(zhì)評(píng)均合格。血尿素參考范圍為1.17-8.3 mmol/L；血肌酐參考范圍為：男性71.0～115.0 μmol/L，女性53.0～88.0 μmol/L；尿液CYS-C參考范圍為：0.03～0.3 mg/L，以上項(xiàng)目超出參考范圍判斷為 異常。

1.3 觀察指標(biāo)血尿素、血肌酐、尿液CYS-C其在兩組試驗(yàn)者中的濃度變化；ROC曲線評(píng)價(jià)尿液CYS-C、血尿素、血肌酐單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測對(duì)腎損傷的診斷效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布，以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用ROC曲線評(píng)價(jià)尿液CYS-C、血尿素、血肌酐單獨(dú)及聯(lián)合檢測對(duì)腎損傷的診斷效能。

2 結(jié)果

2.1 兩組檢測項(xiàng)目結(jié)果比較腎損傷組與健康對(duì)照組血尿素、血肌酐、尿液CYS-C檢測結(jié)果顯示，腎損傷組明顯高于健康對(duì)照組，并且尿液CYS-C增高幅度最大，可達(dá)到健康對(duì)照組的51倍，兩組結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組檢測項(xiàng)目結(jié)果比較( ±s)

表1 兩組檢測項(xiàng)目結(jié)果比較( ±s)

組別 例數(shù) 血尿素（mmol/L）血肌酐（μmol/L）尿液CYS-C（mg/L）腎損傷組 45 7.506±5.238 138.227±117.046 0.329±0.642健康對(duì)照組55 4.729±1.104 78.780±13.936 0.047±0.026 t值 -3.833 -3.833 -3.26 P值 0.001 0.001 0.002

2.2 ROC曲線評(píng)價(jià)尿液CYS-C、血尿素、血肌酐單獨(dú)及聯(lián)合檢測對(duì)腎損傷的診斷效能尿液CYS-C最佳截?cái)嘀禐?.095 mg/L，相比血尿素、血肌酐檢測有更高的敏感度、特異性和AUC，且聯(lián)合檢測能提高腎損傷診斷的敏感度和特異性，見表2及圖1。

圖1 尿液CYS-C、血尿素、血肌酐單獨(dú)及聯(lián)合檢測ROC曲線

表2 各指標(biāo)單獨(dú)檢測及聯(lián)合檢測ROC曲線分析

3 討論

隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展、生活方式、年齡及飲食結(jié)構(gòu)等的變化，使高血壓、冠心病、糖尿病等呈上升趨勢(shì)，這給老人的生活質(zhì)量及生命健康帶來了巨大的威脅[7-8]。CYS-C屬半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族，廣泛存在于植物、細(xì)菌、病毒、原生動(dòng)物和哺乳動(dòng)物組織中，其在預(yù)測心血管疾病、糖尿病腎病及先兆子癇等方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，是評(píng)定腎小球?yàn)V過率（GFR）變化和腎小管損傷的優(yōu)良內(nèi)源性標(biāo)志物，對(duì)腎損傷起到早期診斷作用[9-10]。而使用尿液CYS-C評(píng)估腎小管間質(zhì)損害的研究報(bào)道不多，其在腎損傷診斷濃度區(qū)間等還存在爭議。

本研究結(jié)果顯示，血尿素、血肌酐、尿液CYS-C檢測結(jié)果，腎損傷組均明顯高于健康對(duì)照組。腎損傷組尿液CYS-C（0.329±0.642）mg/L相比健康對(duì)照組（0.047±0.026）mg/L 增高幅度更大，可達(dá)健康對(duì)照組的51倍，尿液CYS-C相比血尿素、血肌酐檢測有更高的敏感度、特異性和AUC，且聯(lián)合檢測能提高對(duì)腎損傷診斷的敏感度和特異性。有報(bào)道指出，尿液中CYS-C的濃度與血清CYS-C和血肌酐具有良好的相關(guān)性[11]，但傳統(tǒng)的腎小球?yàn)V過率（GFR）標(biāo)志物血尿素和血肌酐容易受到蛋白攝入量、某些藥物、體內(nèi)代謝水平及個(gè)體肌肉量影響，在腎功能輕度減退時(shí)，其敏感性低于胱抑素C[12-13]，聯(lián)合檢測更適用于早期腎損傷的診斷。謝東德等[14]則指出當(dāng)腎小球輕微病變時(shí)，血清CYS-C水平就會(huì)升高，能代替血尿素和血肌酐，成為GFR理想標(biāo)志物，當(dāng)腎小管損傷時(shí)，腎小管功能發(fā)生紊亂，尿液 CYS-C含量能上升200倍[15]，尿液CYS-C明顯高于血清CYS-C水平。故尿液CYS-C可作為腎損傷診斷標(biāo)志物，同時(shí)檢測尿液與血清中的CYS-C濃度變化可以推測腎損傷的部位及評(píng)估腎損傷嚴(yán)重程度，聯(lián)合血尿素和血肌酐檢測能提高腎損傷診斷的敏感度和特異性。

通過本次研究還發(fā)現(xiàn)，尿液CYS-C檢測ROC曲線AUC為0.835，敏感度為65%，特異性為80%，最佳截?cái)嘀禐?.095 mg/L與王慧等[16]研究的AUC為0.828，敏感度為76%，特異性為84%，最佳截?cái)嘀禐?.075 mg/L相近，均小于試劑盒提供的臨界值0.3 mg/L。由此推測臨床有較大部分早期腎損傷患者，尿液CYS-C檢測結(jié)果不超過0.3 mg/L， 此時(shí)的診斷可能要參考實(shí)驗(yàn)室修訂的參考范圍并結(jié)合臨床癥狀等綜合判斷，檢測結(jié)果在0.095～0.3 mg/L范圍以內(nèi)，仍然存在腎損傷風(fēng)險(xiǎn)。由于本次研究組例數(shù)較少，未能依據(jù)美國腎病NKF-K/DOQI工作組制定的指南[17]，將入選的腎病患者按照eGFR水平分期統(tǒng)計(jì)分析，尿液CYS-C對(duì)腎損傷的診斷價(jià)值及診斷濃度區(qū)間，仍有待多中心檢測研究分析。由此更多的研究報(bào)道[11,14-15,18]，建議尿液CYS-C聯(lián)合24 h尿微量蛋白（24 h UMA）、N-乙酰-β-D - 葡萄糖苷酶 （NAG）、α1 -微球蛋白（α1-MG）、嗜中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NGAL）等項(xiàng)目檢測以提高腎損傷診斷的準(zhǔn)確性。

綜上所述，尿液CYS-C可作為腎損傷診斷標(biāo)志物，當(dāng)濃度超過0.095mg/L時(shí)對(duì)腎損傷早期診斷有一定的診斷價(jià)值，聯(lián)合血尿素和血肌酐檢測能提高腎損傷診斷的敏感度和特異性。