蛇菰多糖對(duì)大鼠乙酸型胃潰瘍的治療作用及機(jī)制

夏德堯，黃晟哲，趙依如，王江華，牟俊彥，趙方毓，王鳳杰，陳顯兵

(湖北民族大學(xué)1.附屬民大醫(yī)院病理科、2.醫(yī)學(xué)部,湖北 恩施 445000)

胃潰瘍(gastric ulcer，GU)是消化系統(tǒng)的常見(jiàn)疾病之一，是一種深達(dá)胃黏膜層甚至黏膜肌層的壞死性缺損，臨床上以周期性、節(jié)律性的上腹部疼痛為主要表現(xiàn)，易反復(fù)發(fā)作，遷延不愈而成慢性病，嚴(yán)重者可出現(xiàn)便血、胃出血甚至胃穿孔等癥狀，可能導(dǎo)致死亡[1]。由于人們飲食和生活習(xí)慣的改變，GU的發(fā)病率逐年上升，且有年輕化趨勢(shì)。GU發(fā)病受到多種因素影響，一般認(rèn)為，攻擊因子與防御因子的失衡是潰瘍發(fā)生的主要原因，GU的損傷修復(fù)同樣也是一個(gè)涉及多種細(xì)胞及細(xì)胞因子的復(fù)雜過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)及表皮的分化和再生對(duì)GU的發(fā)生和發(fā)展都起重要作用[2]。因此，通過(guò)抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，促進(jìn)潰瘍區(qū)域表皮的增生分化，從而減輕胃黏膜損傷，加快GU愈合具有重要意義。

筒鞘蛇菰(BalanophorainvolucrataHook.f.)是土家名貴藥材，又名文王一支筆、借母還胎或雞心七等，具有清熱解毒、涼血止血、固腎澀精等功效，湖北恩施民間用以治療消化性潰瘍、肝炎、外傷出血和醉酒等病癥。研究發(fā)現(xiàn)，筒鞘蛇菰含多糖、黃酮和三萜類(lèi)等活性成分，具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗氧化和抗癌等多種藥理學(xué)作用[3-4]。蛇菰多糖(balanophorapolysaccharide，BPS)是筒鞘蛇菰的有效成分之一，前期研究證實(shí)，BPS可通過(guò)抗氧化等機(jī)制降低糖尿病大鼠血糖，改善脂肪代謝異常[5]，但對(duì)于GU的療效觀(guān)察和作用機(jī)制研究未見(jiàn)報(bào)道。本研究采用乙酸燒灼法制備GU模型，探究BPS對(duì)GU的療效及可能的作用機(jī)制，為GU的臨床治療提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 藥物、試劑和主要儀器BPS由湖北民族大學(xué)中藥學(xué)實(shí)驗(yàn)中心自制。藥材全草采自湖北恩施，經(jīng)湖北民族大學(xué)中藥學(xué)實(shí)驗(yàn)中心李厚聰博士鑒定為蛇菰科蛇菰屬植物筒鞘蛇菰。新鮮藥材洗凈后60 ℃烘干，搗成粗粉后稱(chēng)取500 g，以8倍體積的雙蒸水浸泡4 h后，加熱煮沸2 h，以紗布過(guò)濾保存濾液，藥渣再加6倍體積水煮沸1 h后留存濾液，合并2次濾液，再加熱減壓濃縮至1 L，冷卻后加入無(wú)水乙醇使乙醇體積分?jǐn)?shù)達(dá)75%，4 ℃靜置過(guò)夜；用紗布過(guò)濾收集沉淀，并用無(wú)水乙醇沖洗3次，于50 ℃烘箱干燥沉淀物，得蛇菰粗多糖。采用苯酚-硫酸法測(cè)定其中多糖含量為61.3%。

冰乙酸分析純(天津市福晨化學(xué)試劑廠(chǎng)，批號(hào)：20150202)，奧美拉唑腸溶片(Omeprazole Enteric-coated Tablets, OME，批號(hào)：2004022，青島雙鯨藥業(yè)股份有限公司)，超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD，貨號(hào)：A001-3-2)、丙二醛(malondialdehyde, MDA，貨號(hào)：A003-1-2)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX,貨號(hào)：A005-1-2)檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程研究所)，即用型免疫組織化試劑盒(福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，貨號(hào)：KIT-9710)，腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α, TNF-α，貨號(hào)：PT516)和白細(xì)胞介素6(interleukin-6, IL-6，貨號(hào)：PI328)ELISA試劑盒(上海碧云天生物技術(shù)有限公司)，表皮生生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor, EGF，貨號(hào)：A00378-1)單克隆抗體(武漢博士德生物工程有限公司)，表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor, EGFR，貨號(hào)：AF1330)單克隆抗體和β-actin單克隆抗體(貨號(hào)：AF5003)(上海碧云天生物技術(shù)有限公司)，生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG抗體(武漢科瑞生物技術(shù)有限公司，貨號(hào)：137093)，其他蛋白免疫印跡相關(guān)試劑(上海碧云天生物技術(shù)有限公司)。

冰凍切片機(jī)(德國(guó)Leica Biosystems Nussloch GmbH公司)，熒光顯微鏡(日本Nikon公司)，全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司)，Western blot電泳及轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)(美國(guó)Bio-Rad公司)，Tanon-5200全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)(上海天能科技公司)。

1.2 動(dòng)物、分組和造模60只雄性SD大鼠，8周齡，體質(zhì)量(200±20) g，購(gòu)自湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,許可證號(hào)SCXK(鄂)2015-0018，分籠飼養(yǎng)，自然光照周期，維持室溫24 ℃。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作均符合動(dòng)物倫理委員會(huì)制定的操作標(biāo)準(zhǔn)，接受湖北民族大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)的監(jiān)督與檢查。

大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、GU模型組(GU)、OME陽(yáng)性組(OME)、BPS低、中、高劑量治療組(BPS-L，BPS-M，BPS-H)，每組10只。除Sham組外，各組均采用Okabe[6]的乙酸燒灼法進(jìn)行胃潰瘍模型制備。具體操作：使用10%水合氯醛3.5 mL·kg-1將大鼠麻醉后，在左上腹區(qū)域備皮，消毒后縱向做一1.5 cm左右切口，使用無(wú)齒鑷游離胃體并從切口拉出，使用32 G一次性注射針頭將50%乙酸溶液注射至胃漿膜層下，每只0.05 mL，選取相同部位注射，Sham組使用等體積生理鹽水注射，確認(rèn)胃體無(wú)出血后，用生理鹽水沖洗胃體，用大網(wǎng)膜覆蓋注射區(qū)，還納胃體入腹，分層縫合，外涂馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏，操作全程注意無(wú)菌。

1.3 樣本采集造模后1 d開(kāi)始進(jìn)行灌胃，OME組每日使用OME溶液3.6 mg·kg-1灌胃，BPS-L、BPS-M和BPS-H組每天使用BPS溶液100、200和400 mg·kg-1灌胃，Sham組和GU組使用等體積雙蒸水灌胃，連續(xù)10 d。末次給藥后禁食不禁水24 h，使用10%水合氯醛麻醉大鼠，打開(kāi)腹腔，將胃體從賁門(mén)和幽門(mén)離斷取出。將胃體延胃大彎剪開(kāi)，使用生理鹽水沖洗內(nèi)容物，暴露潰瘍病灶，帶刻度拍照后，以潰瘍?cè)顬橹行娜“ㄖ車(chē)?.5 cm的胃組織，將組織分為兩部分，一部分使用中性甲醛固定，一部分于-80 ℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 指標(biāo)檢測(cè)

1.4.1各組大鼠潰瘍面積和潰瘍抑制率計(jì)算 根據(jù)帶刻度拍攝的圖片，測(cè)量潰瘍的最大直徑(d1)和最大寬徑(d2)，按公式進(jìn)行計(jì)算：

潰瘍面積/cm2=π× d1/2×d2/2；

潰瘍抑制率/%= (1-給藥組潰瘍面積/模型組潰瘍面積)×100% .

1.4.2HE染色觀(guān)察各組大鼠胃潰瘍組織病理形態(tài)變化 取中性甲醛固定24 h后的組織樣本，進(jìn)行修塊、脫水、透明，石蠟包埋，4 μm切片，60 ℃烤片2 h，全自動(dòng)染色機(jī)進(jìn)行HE染色，中性樹(shù)脂封片，掃描圖片觀(guān)察。

1.4.3酶法檢測(cè)各組大鼠胃組織中SOD活力、MDA含量和GSH-PX活力 取適量?jī)龃娴慕M織樣本，加入含苯甲基磺酰氟的細(xì)胞裂解液制備組織勻漿，提取總蛋白并測(cè)定蛋白濃度。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，測(cè)定組織勻漿中各指標(biāo)情況。

1.4.4ELISA檢測(cè)各組大鼠胃組織中TNF-α和IL-6蛋白含量 取適量?jī)龃娼M織樣本，同前法提取總蛋白并測(cè)定濃度。按照試劑盒說(shuō)明操作，使用預(yù)包被板操作，加樣后封板室溫孵育2 h，洗板5次，每次30 s；加入生物素化抗體，封板室溫孵育1 h，洗板5次，每次30 s；加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin，封板室溫避光孵育20 min，洗板5次，每次30 s；加入顯色劑TMB溶液，封板室溫避光孵育20 min；加入終止液，混勻后立即使用酶標(biāo)儀測(cè)量450 nm處吸光度。根據(jù)試劑盒所提供的標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算樣本蛋白含量。

1.4.5免疫組化法測(cè)定EGF和EGFR蛋白在各組大鼠胃組織中的表達(dá)定位 胃組織厚4 μm石蠟切片后，在60 ℃攤片機(jī)烤片2 h，二甲苯脫蠟3次，每次3 min；無(wú)水乙醇浸泡3次，每次5 min，純水沖洗1 min，置于EDTA修復(fù)液于高壓鍋高壓修復(fù)2 min，流水冷卻后用PBS溶液沖洗3次，除去PBS，按照免疫組化試劑盒說(shuō)明，滴加內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑，反應(yīng)10 min；PBS溶液沖洗3次，滴加非特異染色阻斷劑，反應(yīng)10 min；除去殘余試劑，滴加稀釋好的EGF(1 ∶200)和EGFR(1 ∶100)抗體，孵育1 h；PBS溶液沖洗3次，除去PBS，滴加生物素標(biāo)記的山羊抗兔/小鼠IgG聚合物，反應(yīng)10 min；PBS溶液沖洗3次，除去PBS，滴加辣根過(guò)氧化物酶，反應(yīng)10 min；PBS溶液沖洗3次，除去PBS，滴加DAB顯色液避光顯色10 min；流水沖洗1 min，置于蘇木精染色液1 min，流水沖洗，鹽酸酒精分化15 s，流水沖洗，返藍(lán)30 s，流水沖洗，無(wú)水乙醇浸3 s，冷風(fēng)風(fēng)干水痕，中性樹(shù)脂封片，掃描圖片觀(guān)察。

1.4.6Western blot檢測(cè)各組大鼠胃組織中EGF和EGFR蛋白的相對(duì)表達(dá)量 取凍存組織適量，提取總蛋白，測(cè)定蛋白濃度，根據(jù)樣本中最低濃度標(biāo)準(zhǔn)，使用凝膠電泳上樣緩沖液將蛋白樣品稀釋至同一濃度。經(jīng)SDS-PAGE電泳后轉(zhuǎn)膜，5%脫脂奶粉室溫封閉2 h，EGF(1 ∶2 000)和EGFR(1 ∶2 000)一抗4 ℃孵育過(guò)夜，TBST洗滌3次，每次10 min;生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG二抗(1 ∶5 000)室溫孵育2 h，TBST洗滌3次，每次10 min，ECL發(fā)光檢測(cè)，凝膠成像系統(tǒng)顯影并分析，β-actin作為內(nèi)參蛋白。

2 結(jié)果

2.1 BPS減輕了GU大鼠胃黏膜組織病理?yè)p傷Fig 1結(jié)果顯示，Sham組大鼠胃黏膜無(wú)明顯缺損，皺襞清晰，GU組、OME組和BPS各治療組大鼠胃黏膜均出現(xiàn)不同程度缺損，形成橢圓或近似圓形潰瘍病灶，潰瘍區(qū)及周?chē)欞畔?。?jīng)過(guò)測(cè)量計(jì)算發(fā)現(xiàn)，與GU組比較，BPS-L、BPS-M、BPS-H和OME組潰瘍面積均明顯減小(P<0.01)，潰瘍抑制率分別達(dá)45.45%、65.15%、57.58%、56.06%(Tab 1)，BPS-M和BPS-H組潰瘍抑制率比OME組高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。為進(jìn)一步觀(guān)察胃黏膜損傷情況，我們對(duì)胃黏膜組織進(jìn)行了HE染色，結(jié)果如Fig 1B所示，Sham組大鼠胃黏膜無(wú)明顯缺損，細(xì)胞排列整齊，無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；GU組大鼠胃黏膜缺失明顯，結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重，潰瘍損傷深達(dá)肌層，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)明顯；BPS-L組大鼠胃黏膜缺失，結(jié)構(gòu)破壞明顯，可見(jiàn)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，BPS-M和BPS-H組大鼠潰瘍周?chē)葛つば螒B(tài)結(jié)構(gòu)趨于正常，潰瘍面黏膜缺損，損傷部位見(jiàn)新生肉芽組織，仍可見(jiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，OME組大鼠潰瘍周?chē)つば螒B(tài)趨于正常，見(jiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。以上結(jié)果表明，BPS可以減輕大鼠胃黏膜損傷，對(duì)乙酸所致大鼠GU具有較好的治療作用。

Fig 1 Effect of Balanophora polysaccharide(BPS) on gastric tissue pathological morphology in rats with gastric ulcer (GU)(HE×400)

Tab 1 Effect of BPS on ulcer area and ulcer inhibition rate in rats with

2.2 BPS增加了GU大鼠胃組織中SOD和GSH-PX活力，降低了MDA含量氧化應(yīng)激損傷是胃黏膜損傷的重要因素，SOD、MDA和GSH-PX能較全面的反映氧化應(yīng)激水平。結(jié)果如Tab 2所示，與Sham組比較，GU組大鼠胃組織中SOD和GSH-PX活力明顯降低(P<0.01或P<0.05)，MDA含量增加(P<0.01)；經(jīng)藥物干預(yù)后，各指標(biāo)均有不同程度逆轉(zhuǎn)，與GU組比較，BPS-L、BPS-M和BPS-H組SOD活力分別增加50.51%、71.19%、79.49%(均P<0.01)，MDA含量分別減少8.33%、15.28%、11.11%，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，BPS-H組GSH-PX活力增加27.66%(P<0.05)，OME組SOD活力增加113.29%(P<0.01)，MDA含量減少38.89%(P<0.01)，GSH-PX活力增加25.36%(P<0.05)，BPS-H組GSH-PX活力增加率高于OME組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以上結(jié)果表明，BPS治療大鼠乙酸型胃潰瘍的作用機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激相關(guān)。

Tab 2 Effect of BPS on SOD activity, MDA content and GSH-PX activity in gastric tissues of rats with GU

2.3 BPS降低了GU大鼠胃組織中TNF-α和IL-6蛋白含量氧自由基不僅能引起氧化應(yīng)激損傷，而且與炎性損傷也密切相關(guān)，炎癥反應(yīng)是GU病理過(guò)程中的重要環(huán)節(jié)。Fig 2結(jié)果顯示，與Sham組比較，GU組大鼠胃組織內(nèi)TNF-α和IL-6蛋白含量明顯增加(均P<0.01)；藥物干預(yù)后的各組大鼠胃組織中TNF-α和IL-6蛋白含量明顯降低，與GU組比較，BPS-L、BPS-M和OME組TNF-α蛋白含量分別降低41.23%、59.92%、71.27%(P<0.05或P<0.01)，BPS-L、BPS-M、BPS-H和OME組IL-6含量分別降低47.69%、63.72%、63.53%、77.01%(均P<0.01)。以上結(jié)果表明，BPS治療大鼠乙酸型胃潰瘍的作用機(jī)制可能與降低TNF-α和IL-6蛋白含量，減輕炎癥損傷有關(guān)。

Fig 2 Effect of BPS on content of TNF-α and IL-6 protein in gastric tissues of rats with

2.4 BPS上調(diào)了GU大鼠胃組織中EGF和EGFR蛋白表達(dá)水平EGF和EGFR是重要的胃黏膜防御因子，在胃黏膜的修復(fù)過(guò)程中起著重要的作用。為了解EGF和EGFR在胃黏膜中的表達(dá)部位，我們進(jìn)行了免疫組化染色，結(jié)果如Fig 3A所示，EGF主要在細(xì)胞質(zhì)表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)為棕色，在胃黏膜和潰瘍基底部均呈弱陽(yáng)性表達(dá)；EGFR在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)呈棕色，在胃黏膜、潰瘍基底部以及潰瘍滲出物中均呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。為進(jìn)一步評(píng)估EGF和EGFR的表達(dá)水平，我們進(jìn)行了蛋白免疫印跡檢測(cè)，結(jié)果如Fig 3B、C、D所示，與Sham組比較，GU組大鼠胃組織中EGF和EGFR蛋白表達(dá)水平有所升高，分別增加7.36%、66.98%，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；經(jīng)BPS治療后，各組EGF和EGFR蛋白表達(dá)水平進(jìn)一步升高，與GU組比較，BPS-L、BPS-M、BPS-H和OME組EGF表達(dá)分別升高124.47%、99.50%、103.32%、105.75%(P<0.05或P<0.01)，BPS-H組EGFR表達(dá)升高91.37%(P<0.05)，BPS-L、BPS-M和OME組EGFR表達(dá)分別升高35.73%、61.20%、53.74%，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；BPS-L組EGF表達(dá)高于OME組，BPS-M和BPS-H組EGFR表達(dá)高于OME組，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果表明，BPS治療大鼠乙酸型胃潰瘍的作用機(jī)制可能與增加胃黏膜中EGF和EGFR蛋白表達(dá)，促進(jìn)黏膜修復(fù)有關(guān)。

3 討論

GU是消化系統(tǒng)常見(jiàn)疾病之一，以胃黏膜壞死性缺損為主要病理表現(xiàn)，而胃黏膜的損傷修復(fù)是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，受到多種細(xì)胞因子的影響。研究發(fā)現(xiàn)，胃黏膜氧化應(yīng)激、炎癥刺激、表皮細(xì)胞再生和血管再生等，都會(huì)影響GU的發(fā)生、發(fā)展和愈合[7]。本研究通過(guò)對(duì)GU大鼠胃組織的病理觀(guān)察、氧化和炎癥損傷相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)以及EGF及其受體EGFR的檢測(cè)，對(duì)BPS治療大鼠GU的作用機(jī)制進(jìn)行了分析探討。

在GU的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)都是重要的攻擊因素。在乙酸刺激下，胃黏膜氧化和抗氧化水平失衡，產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，氧化應(yīng)激產(chǎn)生的活性氧(ROS)可以直接或間接地?fù)p傷細(xì)胞功能，導(dǎo)致胃黏膜屏障被破壞，胃黏膜修復(fù)障礙，導(dǎo)致GU的發(fā)生[8]。MDA是一種脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物，具有細(xì)胞毒性，其含量反映了胃黏膜氧化損傷程度，而SOD和GSH-PX屬于抗氧化酶系統(tǒng)，可以反映ROS的清除力，保護(hù)細(xì)胞不受過(guò)氧化物損害，體現(xiàn)胃黏膜的抗氧化水平。炎癥反應(yīng)是GU的特征之一，TNF-α是炎癥過(guò)程中巨噬細(xì)胞分泌的主要促炎因子，可以促進(jìn)其他促炎因子如IL-1β、IL-6等的釋放，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞聚集，造成局部炎癥反應(yīng)，破壞胃內(nèi)保護(hù)屏障而導(dǎo)致潰瘍形成或加劇[9]。TNF-α和ROS也有著復(fù)雜的聯(lián)系，TNF-α可以誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生，加劇氧化應(yīng)激反應(yīng)，而ROS又可以進(jìn)一步增強(qiáng)TNF-α的水平，加重炎癥反應(yīng)，加劇胃黏膜損傷程度[10]。本研究結(jié)果顯示，GU大鼠胃組織潰瘍損傷明顯，抗氧化因子SOD和GSH-PX的活力降低，而攻擊因子MDA、TNF-α和IL-6的含量升高，提示GU大鼠胃組織出現(xiàn)氧化損傷和炎癥反應(yīng)；經(jīng)BPS治療干預(yù)后，SOD和GSH-PX的活力明顯升高，MDA、TNF-α和IL-6含量降低，提示BPS可以提高胃黏膜抗氧化水平，減少促炎因子的異常釋放，減輕氧化損傷和炎癥刺激，從而減輕胃黏膜損傷。

Fig 3 Effect of BPS on expression of EGF and EGFR proteins in gastric tissues of GU rats

EGF是一種重要的生物活性肽，是胃防御因子的重要成員之一，該因子能夠抑制胃酸和胃蛋白分泌，改善胃黏膜血流，保護(hù)胃黏膜免受損傷，加速潰瘍的愈合[11]。研究表明，EGF在正常胃黏膜中少量表達(dá)，而當(dāng)GU發(fā)生時(shí)，EGF表達(dá)降低，但隨著潰瘍的愈合呈不斷升高趨勢(shì)。EGF的生物活性需與其受體EGFR結(jié)合后發(fā)揮作用，EGFR是一種跨膜糖蛋白，EGF與之結(jié)合后可以形成二聚體，促進(jìn)黏膜的修復(fù)，并減少胃酸分泌，對(duì)胃潰瘍的愈合有著非常重要的意義。本研究結(jié)果顯示，EGF和EGFR生理情況下主要在胃黏膜中表達(dá)，當(dāng)GU發(fā)生時(shí)，EGF和EGFR在受損的胃黏膜和潰瘍基底部有明顯表達(dá)；相對(duì)定量結(jié)果顯示，GU大鼠胃組織中EGF和EGFR表達(dá)增加，而B(niǎo)PS治療后，EGF和EGFR表達(dá)進(jìn)一步增加，表明在GU發(fā)生發(fā)展的過(guò)程中，胃防御因子啟動(dòng)自我修復(fù)機(jī)制，EGF和EGFR分泌增加，促進(jìn)潰瘍修復(fù)，而經(jīng)BPS治療后，EGF和EGFR蛋白分泌水平進(jìn)一步增加，增強(qiáng)了胃黏膜的修復(fù)水平，加速潰瘍的愈合。

本研究選用OME作為陽(yáng)性對(duì)照藥物，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，BPS-M和BPS-H組對(duì)GU大鼠的潰瘍抑制率比OME組高，但在作用機(jī)制上，BPS在抑制氧化應(yīng)激和炎癥損傷方面作用不及OME，在調(diào)控生長(zhǎng)因子促進(jìn)胃黏膜修復(fù)方面也與OME沒(méi)有明顯差異，BPS與OME在潰瘍抑制率方面的比較并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此推測(cè)是樣本量較小，統(tǒng)計(jì)誤差造成上述矛盾現(xiàn)象。BPS與OME的療效及作用機(jī)制比較，還需要進(jìn)一步的大樣本研究才能得以確定。另外，從結(jié)果中可以看出，BPS的調(diào)節(jié)作用無(wú)明顯劑量依賴(lài)性，尤其在對(duì)炎癥因子TNF-α的調(diào)節(jié)方面，BPS-H組的作用不及BPS-L和BPS-M組，對(duì)IL-6的影響也不及BPS-M組，推測(cè)高劑量的BPS并不能更加有效的抑制炎癥損傷，甚至?xí)p弱抑炎作用，不同濃度的BPS在GU的治療過(guò)程中所帶來(lái)的不同影響，還需要進(jìn)行更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃幚韺W(xué)實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。

綜上述，BPS對(duì)大鼠GU具有較好的治療作用，可以促進(jìn)潰瘍的愈合，其作用機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激，抑制炎癥刺激，促進(jìn)胃黏膜再生修復(fù)有關(guān)，為BPS治療GU的臨床應(yīng)用提供了一定的理論依據(jù)。