乳酸刺痛試驗在敏感皮膚評價中的應(yīng)用

韓雨晴 于佳 王瑞 趙金楓 顏士玉 盤瑤

關(guān)鍵詞：乳酸刺痛試驗；敏感皮膚；表皮屏障功能；化妝品功效評價

01引言

隨著適用于敏感皮膚的化妝品的不斷發(fā)展，評價敏感性皮膚（Sensitiveskin，SS）的相關(guān)方法在化妝品功效研究中顯得至關(guān)重要。流行病學(xué)調(diào)查顯示，SS在亞洲地區(qū)的女性中發(fā)生率為40%～55.98%，在中國女性中發(fā)生率約為36.1%[1]。在我國皮膚病專家共同發(fā)布的《中國敏感性皮膚診治專家共識》（以下簡稱《共識》）中，將SS定義為：皮膚在生理或病理條件下發(fā)生的一種高反應(yīng)狀態(tài)，主要發(fā)生于面部，表現(xiàn)為受到物理、化學(xué)、精神等因素刺激時皮膚易出現(xiàn)灼熱、刺痛、瘙癢及緊繃感等主觀癥狀，伴或不伴紅斑、鱗屑、毛細血管擴張等客體特征[2]。國外對于SS的定義是皮膚對于外界因素呈現(xiàn)的一種高反應(yīng)狀態(tài)[3]。SS的發(fā)生機制尚未完全闡明，目前公認其是涉及皮膚屏障—神經(jīng)血管—免疫炎癥的一個復(fù)雜過程[4]。

《共識》中將SS的評定方法劃分為主觀評估、半主觀評估和客觀評估。半主觀評估是基于化學(xué)探頭引起皮膚的刺激反應(yīng)這一原理，根據(jù)受試者感受到的刺激大小對他們的皮膚的敏感程度進行評分。而乳酸刺痛試驗（LacticAcidStingTest，LAST）是《共識》中提到的半主觀評價SS的方法之一[2]，同時也是目前評價SS的方法中認可度最高、應(yīng)用最廣泛的方法。

02研究方法

2.1文獻檢索策略

計算機檢索中國知網(wǎng)、萬方、WebofScience數(shù)據(jù)庫，搜索有關(guān)使用、研究LAST的文章，檢索時限為建庫到2022年11月前。搜索的關(guān)鍵詞為“乳酸刺痛試驗”“敏感皮膚”“皮膚屏障”“l(fā)acticacidstingtest”“sensitiveskin”“self-perceivedsensitiveskin”和“epidermalskinbarrierfunction”等。檢索文獻類型：綜述性論文和研究性論文。

2.2文獻篩選

納入標準：根據(jù)文章題目和摘要，選擇涉及LAST的相關(guān)研究以及其參考文獻。

排除標準：研究目的與該文內(nèi)容無關(guān)的文獻；觀點陳舊或重復(fù)性研究的文獻。

2.3資料提取

初檢后獲得關(guān)鍵詞為“乳酸刺痛試驗”“l(fā)acticacidstingtest”的文獻116篇，按照發(fā)表時間倒序選取關(guān)鍵詞為“敏感皮膚”“皮膚屏障”“sensitiveskin”“selfperceivedsensitiveskin”和“epidermalskinbarrierfunction”的文獻107篇，通過其他資源途徑獲得的文獻53篇，共收集相關(guān)文獻276篇。在去重、閱讀題目及摘要后排除明顯不相關(guān)文獻，共收集185篇。對初篩后可能符合標準的185篇文獻進一步閱讀全文，最終納入43篇文獻。文獻篩選流程及結(jié)果見圖1。

03結(jié)果

3.1乳酸刺痛試驗的發(fā)展歷程

1977年，F(xiàn)rosch[5]等人最先設(shè)計出LAST，用于篩選出易感受到皮膚刺激的人群。最經(jīng)典的LAST方案是首先在室溫下涂抹50μL5%或10%的乳酸于鼻唇溝及任意一側(cè)面頰，從計時開始分別在2.5分鐘、5分鐘和8分鐘的時間點詢問受試者的感受，然后按4分法進行評分（0分為沒有刺痛感，1分為輕度刺痛，2分為中度刺痛，3分為重度刺痛），最后將分數(shù)相加?？偡帧?分，則為LAST陽性。

由于LAST的結(jié)果是根據(jù)受試者的主觀評分得出的，具有較強的主觀性，為了使試驗結(jié)果更加客觀、標準，一些試驗經(jīng)常會結(jié)合其他測試共同作為評價SS的依據(jù)。最先與其他測試結(jié)合是在1998年，Seidenari[6]等人將10%LAST的評分、受試者的問卷調(diào)研以及無創(chuàng)儀器測試相結(jié)合，發(fā)現(xiàn)SS的經(jīng)表皮失水率、pH值相對高，而水分、皮脂的含量相對較少。在2002年，基于亞洲人使用化妝品后上報的不良反應(yīng)更多這一情況，Aramaki[7]等人使用濃度為10%的LA結(jié)合不同濃度的十二烷基硫酸鈉的結(jié)果共同作為評判的依據(jù)，發(fā)現(xiàn)亞洲人的皮膚對刺激物的滲透速度更快，刺激感受更強烈。因此，為提高LAST對于亞洲人的安全性，在2003年，Wu[8]等人首先提出將LA濃度調(diào)整為3%和5%。皮膚病患者的表皮屏障功能表現(xiàn)出不同程度的損傷，出于對皮膚病患者安全性的考慮，Tsuyoshi[9]等人在2018年將在皮膚病患者中進行LAST的LA濃度降為1%。

因此，從安全性的角度出發(fā)，研究人員對LAST的方法做了調(diào)整，在不同地區(qū)會選擇不同濃度的LA，詢問受試者的時間節(jié)點也做出了相應(yīng)的改變。表1是對32篇文獻中選擇的LA濃度、地區(qū)、部位、作用時間、試驗?zāi)康牡膮R總。研究者可以參考文獻中的方法，根據(jù)受試者的實際情況來調(diào)整LAST的實際操作方式。

3.2乳酸刺痛試驗在皮膚疾病臨床治療中的應(yīng)用

表皮屏障功能是皮膚重要的防御屏障之一。越來越多的研究證實，表皮屏障功能混亂是引起多種皮膚病的主要因素[34]。LAST可以辨別由于表皮屏障受損導(dǎo)致的SS，并且通過受試者的評分評價皮膚敏感程度。

玫瑰痤瘡是常見的慢性充血性炎癥性皮膚病，吳琰瑜[14]等人為了研究玫瑰痤瘡不同時期敏感程度的差異，使用濃度為5%的LA進行LAST，發(fā)現(xiàn)紅斑期患者的皮膚敏感程度高于丘疹期，推測這一現(xiàn)象可能是由于局部血管明顯擴張導(dǎo)致。手部暴露于親脂性刺激物很有可能引起手部皮膚過敏，Schliemann[18]等人使用濃度為5%的LA進行LAST，篩選出現(xiàn)刺痛的患者，發(fā)現(xiàn)他們對于兩種脂質(zhì)刺激物的反應(yīng)更敏感，且LAST可以預(yù)測出對脂質(zhì)刺激物敏感的人群。LAST也可用于探究皮膚敏感性與特異性皮炎嚴重程度的關(guān)系，Tsuyoshi[9]等人使用1%的LAST，結(jié)合客觀儀器測量和量表評分，發(fā)現(xiàn)特異性皮炎患者的LAST評分更高，且特異性皮炎越嚴重皮膚越敏感。軟體動物傳染在非洲是一種常見的兒童皮膚感染病，Melike[39]等人發(fā)現(xiàn)LA和水楊酸的混合溶液能有效判斷兒童的軟體動物傳染。

LAST也常被用于評價皮膚病治療方法的療效，李艷飛[34]等人通過對比面部激素依賴性皮炎患者使用噻嗎洛爾和卡替洛爾聯(lián)合他克莫司前后的LAST評分和毛細血管再充盈時間，發(fā)現(xiàn)二者均能明顯改善面部激素依賴性皮炎導(dǎo)致的皮膚毛細血管擴張，緩解皮膚敏感狀態(tài)。黃迎玉[40]等人通過對比SS受試者治療前后的LAST評分和經(jīng)表皮失水率，發(fā)現(xiàn)透明質(zhì)酸經(jīng)微針注射以及外用對于修復(fù)SS的皮膚屏障是有效的。Zhang[33]等人對比了SS受試者使用新開發(fā)的乳膏前后的LAST評分和紅斑指數(shù)等指標，發(fā)現(xiàn)其能夠改善皮膚的敏感狀態(tài)。Sabine[17]等人測試了一款保濕乳液對于玫瑰痤瘡的療效，使用15%的LA進行LAST，同時檢測皮膚的水分含量、經(jīng)表皮失水率等數(shù)據(jù)，結(jié)果表明此款乳液能夠降低玫瑰痤瘡患者皮膚的敏感程度。

3.3乳酸刺痛試驗在化妝品功效評價中的應(yīng)用

消費者的需求愈發(fā)多樣化，化妝品研發(fā)人員針對SS人群推出適用于敏感皮膚的化妝品，其主要是通過修復(fù)皮膚屏障發(fā)揮功效，以此提高皮膚對于化妝品的耐受性。因此，可以在受試者單次及多次使用化妝品后，通過LAST結(jié)合其他測試對產(chǎn)品的功效或護膚習(xí)慣進行評價。

清潔、保濕、防曬是保持皮膚健康的基本三步，Stacy[13]等人讓SS受試者持續(xù)三周不斷重復(fù)這三個步驟，再比較三周前后的LAST得分，發(fā)現(xiàn)堅持這三個步驟可以降低皮膚的敏感性。袁超[19]等人為探究保濕劑短期內(nèi)對LAST陽性者的皮膚屏障修復(fù)作用，發(fā)現(xiàn)短期內(nèi)，保濕劑對LAST陽性患者皮膚屏障的影響為增加皮膚水分含量、降低皮膚的經(jīng)皮水分散失量，對LAST刺痛的改善不大。為探究透明質(zhì)酸修護膜與保濕修復(fù)霜輔助治療SS效果，李娜[20]等人對比了受試者在涂抹樣品前后的LAST得分和經(jīng)表皮失水率等數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)透明質(zhì)酸修護生物膜能促進皮膚屏障的恢復(fù)。Hiroshi[41]等人對比SS受試者使用神經(jīng)酰胺前后的LAST評分，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)酰胺可以減少由LA引起的刺痛感。張圓瑾[42]等人對比SS受試者使用含有當歸、紫球藻的新型功效性護膚品前后的LAST評分和紅斑指數(shù)等數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)其可以改善SS受試者的面部紅斑和毛細血管擴張，有效修復(fù)皮膚屏障。宮建輝[43]等人使用LAST篩選出LAST陽性受試者，發(fā)現(xiàn)受試者食用透明質(zhì)酸鈉膠原蛋白果味飲品后表現(xiàn)出皮膚發(fā)紅程度降低、皮膚水分含量提升、皮膚彈性提升、經(jīng)皮水分散失量降低，且能夠有效修護皮膚屏障。

04總結(jié)與展望

皮膚屏障受損是SS的一大特征，而LA可以靈敏的辨別由于皮膚屏障受損所導(dǎo)致的SS。LA具有分子量小這一優(yōu)點，極容易在皮膚屏障受損后經(jīng)皮滲透，刺激真皮層中的無髓C類神經(jīng)，進而產(chǎn)生刺痛的感覺。LAST作為評價SS的一種半主觀評價方法，操作簡便，應(yīng)用廣泛。最經(jīng)典的LAST是使用10%的LA，但不同地區(qū)的人群對LA的耐受程度不同，在歐美地區(qū)進行LAST時通常情況下仍然使用10%～15%的LA濃度，而在亞洲地區(qū)進行的LAST會按照研究需求和受試人群選擇1%～10%的LA濃度。在今后的實驗當中，應(yīng)當考慮到不同受試者人群的皮膚特點，并有針對性地修改LAST中LA的濃度和作用時間。

導(dǎo)致皮膚敏感的因素有很多，包括屏障受損、神經(jīng)血管反應(yīng)、免疫炎癥等，而LAST只適用于判斷是否為SS，無法準確區(qū)其SS類型。其一，LAST無法檢測出皮膚屏障完好的SS。皮膚屏障受損只是SS的眾多表現(xiàn)之一，但也存在一部分SS的皮膚屏障完好的情況。考慮到LA的作用原理，皮膚屏障完好的SS無法感受到刺痛感，可能會被誤判為健康肌膚。其二，LAST無法區(qū)分血管性反應(yīng)型SS和皮膚屏障受損型SS，由于二者都會對LA產(chǎn)生刺痛感，所以單獨使用LAST無法對其進行區(qū)分。綜上所述，LAST不適合單獨作為SS的判斷依據(jù)。在今后的研究中，應(yīng)當綜合考慮不同的研究目的和不同的SS類型，選擇多種判斷方法并結(jié)合LAST一起使用。