李金萍
(內(nèi)蒙古呼倫貝爾市阿榮旗興安鎮(zhèn)綜合保障和技術(shù)推廣中心,內(nèi)蒙古 呼倫貝爾 162750)
1907年Tyzzer首次在家鼠身上發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲(chóng),隨后在多種動(dòng)物中也發(fā)現(xiàn)了該蟲(chóng),1976 年在美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)人類(lèi)感染隱孢子蟲(chóng)的病例,表明隱孢子蟲(chóng)病是一種重要的人畜共患寄生蟲(chóng)病。隱孢子蟲(chóng)主要寄生于動(dòng)物的腸道,并主要引起幼齡動(dòng)物腹瀉病。牛隱孢子蟲(chóng)病主要見(jiàn)于犢牛,導(dǎo)致?tīng)倥3霈F(xiàn)嚴(yán)重腹瀉甚至脫水癥狀,病情嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致?tīng)倥K劳?。在我?guó)內(nèi)蒙古、北京、廣東等省均有牛隱孢子蟲(chóng)病的報(bào)道,并且在規(guī)?;B(yǎng)殖場(chǎng)中犢牛感染隱孢子蟲(chóng)的情況較為嚴(yán)重,給我國(guó)肉牛和奶牛養(yǎng)殖均造成了嚴(yán)重的影響。本文對(duì)牛隱孢子蟲(chóng)病的病原特征、流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化、診斷方法和防控措施進(jìn)行綜述,希望為犢牛隱孢子蟲(chóng)病的防控工作提供參考。
牛隱孢子蟲(chóng)病的病原為隱孢子蟲(chóng)科隱孢子蟲(chóng)屬的多種寄生蟲(chóng),如安氏隱孢子蟲(chóng)、鼠隱孢子蟲(chóng)、小隱孢子蟲(chóng)、牛隱孢子蟲(chóng)和瑞氏隱孢子蟲(chóng),其中安氏隱孢子蟲(chóng)和鼠隱孢子蟲(chóng)是人畜共患的隱孢子蟲(chóng)。隱孢子蟲(chóng)蟲(chóng)體較小,從形態(tài)上很難將不同的隱孢子蟲(chóng)進(jìn)行區(qū)分,需要進(jìn)行分子生物學(xué)試驗(yàn)鑒定。不同類(lèi)型的隱孢子蟲(chóng)卵囊大小不同,形態(tài)相近,卵囊呈圓形或卵圓形,卵囊壁光滑,無(wú)微孔、極粒和孢子囊,每個(gè)卵囊內(nèi)含有4個(gè)裸露的子孢子和1個(gè)殘?bào)w。隱孢子蟲(chóng)主要寄生于宿主的上皮細(xì)胞內(nèi),尤其是腸道上皮細(xì)胞。隱孢子蟲(chóng)有三種生殖方式,分別為裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖。宿主經(jīng)口感染隱孢子蟲(chóng)成熟的卵囊后,子孢子從宿主小腸脫囊逸出,附著于腸上皮細(xì)胞,在胞膜和胞質(zhì)之間形成帶蟲(chóng)空泡,隨后隱孢子蟲(chóng)在空泡內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖。首先發(fā)育成滋養(yǎng)體,隨后發(fā)育為第一代裂殖體(6~8個(gè)裂殖體)、第二代裂殖體(4 個(gè)裂殖體)。第二代裂殖體分別發(fā)育為大配子體和小配子體,小配子體又分裂為16個(gè)無(wú)鞭毛小配子,隨后和大配子體形成合子。合子又可發(fā)育為薄壁型和后壁型兩種卵囊,但該階段卵囊無(wú)極帽和微孔。卵囊在宿主體內(nèi)完成孢子發(fā)育,內(nèi)含有4個(gè)子孢子和1 個(gè)殘?bào)w,但沒(méi)有孢子囊。薄壁型卵囊宿主可以自身感染,而厚壁型卵囊則通過(guò)糞便排出體外后才具有感染性。隱孢子蟲(chóng)完成生活史一般為5~11 d。
隱孢子蟲(chóng)可感染多種動(dòng)物,目前已知至少有240種動(dòng)物可感染隱孢子蟲(chóng)。在牛場(chǎng)中,帶蟲(chóng)牛和患病牛是主要的傳染源,其糞便中含有大量的隱孢子蟲(chóng)卵囊,通過(guò)污染水源和飼料傳播卵囊,此外,蒼蠅等節(jié)肢動(dòng)物、飼養(yǎng)人員也可機(jī)械性地?cái)y帶隱孢子蟲(chóng)卵囊。各日齡的牛均可感染隱孢子蟲(chóng),但年齡較大的牛感染后一般不會(huì)表現(xiàn)臨床癥狀,感染的牛排出的卵囊數(shù)量較少,但是犢牛尤其是剛出生1~2周的犢牛感染后臨床癥狀較為嚴(yán)重,且糞便卵囊數(shù)量也較多。易感牛通過(guò)攝入被隱孢子蟲(chóng)卵囊污染的飼料和飲水后感染,犢??赏ㄟ^(guò)被隱孢子蟲(chóng)卵囊污染的乳頭感染。
目前,隱孢子蟲(chóng)的致病機(jī)制尚未完全闡明。隱孢子蟲(chóng)主要寄生于腸上皮細(xì)胞刷狀緣空泡內(nèi),蟲(chóng)體寄生后腸黏膜表面呈凹陷或火山口狀,當(dāng)蟲(chóng)體數(shù)量增多后可導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞絨毛萎縮、變短、變粗或融合、移位和脫落,上皮細(xì)胞老化和脫落的速度加快。宿主小腸黏膜廣泛受損,腸黏膜表面積減少,導(dǎo)致宿主腸道吸收功能降低,脂肪和糖類(lèi)吸收功能受損,從而導(dǎo)致宿主出現(xiàn)腹瀉癥狀。隱孢子蟲(chóng)寄生可導(dǎo)致宿主腸黏膜表面積縮小,多種黏膜酶數(shù)量降低,這可能是引起腹瀉的主要原因之一。
感染犢牛的潛伏期為7 d,排卵囊高峰期為7 d,高峰期可持續(xù)5 d,排卵囊持續(xù)時(shí)間為10 d。新生犢牛對(duì)隱孢子蟲(chóng)的敏感度最高,1~8 月齡的犢牛發(fā)病率較高,尤其是3~4 周齡的犢牛癥狀更為嚴(yán)重?;疾倥>癯劣?,厭食,腹瀉,糞便中可混有大量的纖維素性滲出物,有時(shí)可見(jiàn)血液。患病犢牛生長(zhǎng)發(fā)育停滯,極度消瘦,有時(shí)體溫升高。犢牛死亡率可達(dá)16%~40%,其中4~30日齡的犢牛死亡率最高,耐過(guò)的犢牛生長(zhǎng)發(fā)育受阻,生長(zhǎng)性能?chē)?yán)重下降?;疾∨5闹饕∽兲卣鳛榭漳c絨毛層萎縮和損傷,腸黏膜固有層中的淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞增多,呈現(xiàn)出典型的腸炎病變,在腸道病變部位可見(jiàn)大量的隱孢子蟲(chóng)各階段蟲(chóng)體。
通常出現(xiàn)腹瀉并且使用抗生素治療無(wú)效的犢牛可能患有隱孢子蟲(chóng)病,確診該病需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)??刹杉疾∨5募S便進(jìn)行飽和蔗糖溶液漂浮試驗(yàn),若在溶液內(nèi)發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲(chóng)卵囊即可確診。不同隱孢子蟲(chóng)株的卵囊可存在一定的差異。鼠隱孢子蟲(chóng)卵囊呈卵圓形,無(wú)卵膜孔和極體,平均大小為7.38 μm×5.6 μm,長(zhǎng)寬比為1.32∶1,孢子化的卵囊內(nèi)有4 個(gè)子孢子和顆粒狀殘?bào)w,細(xì)胞核靠近后端。小隱孢子蟲(chóng)卵囊呈球形或卵圓形,平均大小為5.3 μm×4.8 μm,長(zhǎng)寬比為1.1∶1,孢子化卵囊有4 個(gè)子孢子和顆粒狀殘?bào)w,子孢子大小為4.9 μm×2.0 μm,細(xì)胞核靠近鈍端。安氏隱孢子蟲(chóng)卵囊呈卵圓形,平均大小為7.25 μm×6.33 μm,長(zhǎng)寬比為1.22∶1,囊壁透明,厚度為1μm,無(wú)微孔和極粒,孢子化卵囊內(nèi)有4 個(gè)子孢子和1 個(gè)殘?bào)w。牛隱孢子蟲(chóng)的卵囊呈近圓形,大小為4.76~5.35 μm×4.17~4.76 μm,長(zhǎng)寬比1.06∶1,孢子化卵囊內(nèi)有4個(gè)子孢子,無(wú)孢子卵囊。瑞氏隱孢子蟲(chóng)卵囊近圓形,體積較小,大小為3.38~3.50 μm×3.49~3.61 μm,長(zhǎng)寬比為1.03∶1。
對(duì)于病死的犢牛也可采集犢牛的腸道組織制備成切片或涂片,采取姬姆薩染色或者萋-尼氏染色,在顯微鏡下觀察蟲(chóng)體。此外,也可使用提取患病牛直腸糞便、病變腸道等樣品的核酸進(jìn)行PCR 檢測(cè)隱孢子蟲(chóng)特異性的核酸序列。還可使用ELISA、膠體金快速診斷試紙條等診斷該病。
目前,犢牛隱孢子蟲(chóng)病無(wú)特效的治療藥物,對(duì)于患病牛進(jìn)行對(duì)癥治療和支持療法,如腹瀉嚴(yán)重的牛應(yīng)及時(shí)止瀉、補(bǔ)液、糾正酸中毒。有研究使用抗球蟲(chóng)藥物、抗生素和磺胺類(lèi)藥物治療患病動(dòng)物,但治療效果較差,然而,部分中藥和組方在治療隱孢子蟲(chóng)病時(shí)表現(xiàn)出一定的效果,是目前隱孢子蟲(chóng)病治療藥物研究的重要方向。
除了無(wú)特效治療藥物,目前也無(wú)疫苗可用于牛隱孢子蟲(chóng)病的防控,因此該病的防控主要采取加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和防止病原傳入。首先,應(yīng)防止隱孢子蟲(chóng)進(jìn)入牛場(chǎng)。隱孢子蟲(chóng)主要通過(guò)帶蟲(chóng)牛或患病牛進(jìn)入牛場(chǎng),因此需要引進(jìn)新牛的牛場(chǎng)應(yīng)做好相關(guān)的檢測(cè),不從流行該病的牛場(chǎng)引入新牛。其次,由于隱孢子蟲(chóng)感染后僅有犢牛可出現(xiàn)較為明顯的臨床癥狀,而成年牛感染后通常成為隱性帶蟲(chóng)牛,因此對(duì)于流行過(guò)隱孢子蟲(chóng)病的牛場(chǎng)應(yīng)定期進(jìn)行隱孢子蟲(chóng)檢測(cè),區(qū)分帶蟲(chóng)牛和健康牛,并采取分別管理。對(duì)于長(zhǎng)期帶蟲(chóng)的母牛應(yīng)進(jìn)行淘汰處理,以防犢牛感染。在牛隱孢子蟲(chóng)防控工作中,消毒是重要的一環(huán)。隱孢子蟲(chóng)的卵囊對(duì)不同的消毒劑敏感程度不同,因此,選擇適合的消毒方法尤為重要。目前已知碘酊、氫氧化鈉、煤皂酚和次氯酸等對(duì)隱孢子蟲(chóng)的卵囊無(wú)效,常用的消毒劑中10%甲醛、5%氨水和漂白粉對(duì)隱孢子蟲(chóng)卵囊具有較好的抑殺作用??墒褂?0%的甲醛消毒液加熱至65~75 ℃處理30 min,可有效殺死隱孢子蟲(chóng)卵囊,該方法常用于毛巾、毛刷等養(yǎng)殖工具的消毒?;钚月葹?%的漂白粉則常用于牛床、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)、水槽、飼料槽、土壤和糞便的消毒。5%氨水可噴灑飼料槽、牛床、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)進(jìn)行消毒,但應(yīng)注意氨水對(duì)牛可產(chǎn)生刺激,因此應(yīng)避免牛接觸氨水。犢牛是牛隱孢子蟲(chóng)病的多發(fā)群體,因此應(yīng)對(duì)犢牛進(jìn)行單獨(dú)飼養(yǎng),定期清洗母牛乳頭,防止其被隱孢子蟲(chóng)卵囊污染。同時(shí)還應(yīng)注意,在斷奶前后應(yīng)加強(qiáng)對(duì)犢牛的飼養(yǎng)工作,飼料更換應(yīng)采取逐步更換的方式,也可為犢牛喂食增強(qiáng)免疫水平的中草藥、維生素和微生態(tài)制劑,以增強(qiáng)犢牛的抗病能力。對(duì)于表現(xiàn)出嚴(yán)重腹瀉的犢牛,應(yīng)及時(shí)隔離飼喂,診斷發(fā)病原因,若為隱孢子蟲(chóng)感染引起的腹瀉,應(yīng)采取支持療法和對(duì)癥治療,對(duì)于經(jīng)濟(jì)價(jià)值較低或患病嚴(yán)重的犢牛可淘汰處理,患病牛的糞便應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理。此外,還應(yīng)對(duì)同群牛感染隱孢子蟲(chóng)的情況進(jìn)行檢測(cè),將感染牛和健康牛分欄飼喂,降低隱孢子蟲(chóng)傳播造成的經(jīng)濟(jì)損失。
近年來(lái),牛規(guī)?;B(yǎng)殖程度逐步提高,同時(shí)也導(dǎo)致牛疫病和寄生蟲(chóng)病的頻發(fā),其中隱孢子蟲(chóng)的感染率也有上升的趨勢(shì)。因此,牛場(chǎng)養(yǎng)殖工作人員應(yīng)加強(qiáng)對(duì)犢牛隱孢子蟲(chóng)病的防控意識(shí),了解隱孢子蟲(chóng)對(duì)牛的危害,采取科學(xué)的方式防控該病。與此同時(shí),由于對(duì)隱孢子蟲(chóng)的致病機(jī)制和傳染機(jī)制方面仍存在知識(shí)空白,因此尚未研發(fā)出抗牛隱孢子蟲(chóng)病的特效藥和疫苗,這要求從事獸醫(yī)科研工作的人員加強(qiáng)對(duì)隱孢子蟲(chóng)相關(guān)的致病機(jī)制的基礎(chǔ)研究,根據(jù)其生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn)研發(fā)出特效的抗隱孢子蟲(chóng)的藥物和疫苗,為牛隱孢子蟲(chóng)病的防治提供有效的手段,從而降低牛隱孢子蟲(chóng)病的發(fā)病率,降低由該病造成的經(jīng)濟(jì)損失?!?/p>