低敏寵物核心料對(duì)食源性過敏小鼠的作用效果評(píng)價(jià)

劉佳儀，王福正，王承志，杜 鵬，張明月，陳思琪，朱嘉欣，孫 旭，吳高峰*，楊建成*

(1.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與醫(yī)學(xué)學(xué)院，沈陽 110866；2.遼寧海辰寵物有機(jī)食品有限公司，朝陽 122312)

隨著寵物飼養(yǎng)量的逐年增加以及其生活環(huán)境變化和食物種類不斷豐富，寵物過敏的發(fā)生率也不斷增加。據(jù)獸醫(yī)臨床統(tǒng)計(jì)，約70%的寵物犬是過敏性體質(zhì)。寵物食源性過敏(food allergy, FA)與其他過敏類型不同，是由于食用了某些食物或者食物添加劑引起的一種特殊的免疫反應(yīng)，除了伴有皮膚反應(yīng)引起的瘙癢外，還會(huì)在腸道或其他組織產(chǎn)生局部炎癥，造成消化功能紊亂[1]，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致呼吸窘迫危及生命。因而，通過合理的配方飲食及功能性物質(zhì)的添加提高動(dòng)物的免疫機(jī)能，起到抗過敏的作用，是寵物飼養(yǎng)中亟待解決的問題。

本試驗(yàn)采用的低敏寵物核心料在滿足寵物日常營養(yǎng)需求基礎(chǔ)上，添加了酵母水解物、?；撬帷⒍剂┧?DHA)、復(fù)合益生菌和低聚木糖等活性物質(zhì)。酵母水解物可促進(jìn)氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，促進(jìn)機(jī)體分泌消化酶并提高機(jī)體免疫力[2]。?；撬嶝S富的生理功能已被熟知[3-5]，對(duì)機(jī)體的消化、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)均具有積極的作用[6]。乳酸菌和雙歧桿菌等可以防止腸道高通透性，降低脂多糖依賴性的慢性低度炎癥。DHA是Omega-3不飽和脂肪酸的主要活性形式之一，由于其在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化效率比食物的攝取率低，而且富含這類脂肪酸的食物并不常見，因此常被建議額外添加作為營養(yǎng)補(bǔ)充劑。添加有益菌和Omega-3脂肪酸可以調(diào)節(jié)腸道微生物群[7]，調(diào)節(jié)腸道免疫，對(duì)改善老年人和肥胖者的腸道炎癥具有潛在作用。而低聚木糖能夠選擇性的促進(jìn)腸道雙歧桿菌增殖活性[8]，同時(shí)對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌等病原菌具有吸附作用，可以攜帶附著的病原菌從腸道排出體外，從而防止病原菌集群在體內(nèi)，起防止腹瀉的作用[9]。綜上，低敏寵物核心料中含有的生物活性物質(zhì)均具有不同程度的提高機(jī)體免疫機(jī)能、抗炎和改善腸道菌群結(jié)構(gòu)的作用。因而本試驗(yàn)旨在研究該低敏寵物核心料對(duì)腸道過敏小鼠的作用，并初步探討其可能的抗過敏機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

海辰低敏寵物核心料：主要含有酵母水解物、DHA、?；撬岬瘸煞?，由遼寧海辰寵物有機(jī)食品有限公司提供。卵清蛋白(OVA，A8040，北京索萊寶科技有限公司)；甲苯胺藍(lán)染色液(細(xì)胞專用)(G3660，北京索萊寶科技有限公司)；小鼠血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)、總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-PX)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)、免疫球蛋白E(immunoglobulin G，IgG)、組胺(histamine，HIS)、白細(xì)胞介素4(interleukin 4，IL-4)、白細(xì)胞介素10(interleukin 10，IL-10)試劑盒購于武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

80只體重(20±2)g雌性SPF級(jí)BALB/c小鼠購自遼寧長生生物技術(shù)有限公司[SCXK(遼)2020-0001]，飼養(yǎng)于沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，維持室溫狀態(tài)，濕度保持在50%左右，預(yù)飼養(yǎng)7 d后隨機(jī)分為4組。試驗(yàn)總共36 d，在試驗(yàn)開始第0和7天腹腔注射OVA，從第14天開始每隔2 d灌喂2 mL OVA誘導(dǎo)食源性過敏小鼠模型，一共灌胃5次。試驗(yàn)日糧均由遼寧海辰寵物有機(jī)食品有限公司提供，所有小鼠日糧符合國際標(biāo)準(zhǔn)日糧配方，其中正常對(duì)照組小鼠(C)飼喂標(biāo)準(zhǔn)日糧；低敏寵物核心料對(duì)照組小鼠(H)飼喂含有低敏寵物核心料的全價(jià)日糧；食源性過敏模型組小鼠(M)根據(jù)上述模型制備方法給予OVA致敏，飼喂標(biāo)準(zhǔn)日糧；干預(yù)組小鼠(MH)在致敏的同時(shí)給予含有低敏寵物核心料的全價(jià)日糧。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 日增重、采食量 試驗(yàn)期間，每周固定一天分別對(duì)每組進(jìn)行空腹稱重，計(jì)算平均日采食量(average daily feed intake，ADFI)、平均日增重(average daily gain，ADG)。

1.3.2 腸道組織形態(tài)學(xué)觀察 試驗(yàn)結(jié)束后，采集小鼠空腸，4%多聚甲醛固定48 h以上，制備石蠟切片，HE染色觀察小鼠腸道組織結(jié)構(gòu)變化。

1.3.3 一般狀態(tài)觀察 試驗(yàn)期間觀察小鼠過敏狀態(tài)，包括面部狀態(tài)、活動(dòng)及腹瀉情況等，在激發(fā)致敏40 min后，根據(jù)過敏癥狀評(píng)分表(表1)對(duì)每組小鼠的癥狀進(jìn)行評(píng)分，計(jì)算小鼠腹瀉率，同時(shí)測(cè)量每只小鼠的直腸溫度。

表1 過敏評(píng)分

1.3.4 免疫器官指數(shù) 試驗(yàn)結(jié)束后，取小鼠胸腺、脾，PBS沖洗后，濾紙吸干稱重，計(jì)算小鼠胸腺和脾指數(shù)(TI和SI)。

1.3.5 血清相關(guān)因子檢測(cè) 試驗(yàn)結(jié)束后，眼球取血，收集血清，按照說明書檢測(cè)血清中IgE、IgG、His、IL-4、IL-10、T-SOD、GSH-PX、MDA水平。

1.3.6 腹腔灌洗液中脫顆粒肥大細(xì)胞計(jì)數(shù) 無菌條件下向腹腔注射無菌PBS，小心揉捏腹部使其充分接觸，吸取20 μL滴于載玻片涂開，37 ℃晾干，滴加200 μL甲苯氨藍(lán)染色液5 min，光鏡下以肥大細(xì)胞周圍有明顯紫色滲出物為脫顆粒的肥大細(xì)胞，顯微鏡下每張標(biāo)本計(jì)數(shù)100個(gè)肥大細(xì)胞，計(jì)算脫顆粒比率。

1.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 整理后的數(shù)據(jù)用SPSS 22.0和Origin 2021進(jìn)行分析，按照平均數(shù)單因素方差法(AVOVA)分析組間的差異性，多重比較后采用事后檢驗(yàn)，計(jì)算數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)”表示，并用GraphPad Prism 8.0軟件繪制圖片，數(shù)據(jù)P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 生長性能檢測(cè)結(jié)果

由圖1可見，各組小鼠ADFI無顯著差異(P>0.05)；與C組小鼠相比，H組小鼠ADG無顯著差異(P>0.05)，M組小鼠平均ADG極顯著降低(P<0.01)，MH組與M組相比，小鼠ADG極顯著增加(P<0.01)，隨著時(shí)間的增長各組小鼠體重逐漸增加，其中，M組與其他組相比增長緩慢，且M組小鼠體重與C組相比，在第4周顯著降低(P<0.05)，MH組與M組相比，小鼠體重極顯著增加(P<0.01)。說明該低敏寵物核心料可以促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，在不增加日采食量的基礎(chǔ)上提高小鼠的日增重。

a.平均日增重；b.平均日采食量；c.體重。C.對(duì)照組；H.低敏寵物核心料對(duì)照組；M.食源性過敏模型組；MH.干預(yù)組(同時(shí)進(jìn)行M組和H組的處理)。*. P<0.05，**. P<0.01，NS. P>0.05。分組及統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)注同樣適用于下圖a. Average daily weight gain; b. Average daily feed intake; c. Weight. C. Control group; H. Hypoallergenic pet core material group; M. Food-borne allergic group; MH. Intervention group (combining treatment of M and H groups). *. P<0.05，**. P<0.01，NS. P>0.05. Grouping and statistical annotation are also applicable to the following figures圖1 低敏寵物核心料對(duì)小鼠生長性能的影響Fig.1 The effect of hypoallergenic pet core diet on the growth performance of mice

2.2 腸道組織形態(tài)學(xué)觀察

如圖2所示，C組與H組腸道組織結(jié)構(gòu)完整，無明顯的炎性細(xì)胞浸潤；M組腸黏膜上皮脫落、不完整，腸上皮細(xì)胞排列不整齊，杯狀細(xì)胞數(shù)量減少，并伴有少量的炎性細(xì)胞浸潤；MH組與M組相比，腸黏膜狀態(tài)有所改善，腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，杯狀細(xì)胞數(shù)量無明顯變化。說明添加低敏寵物核心糧能夠改善過敏小鼠腸道組織的結(jié)構(gòu)形態(tài)，減少炎性細(xì)胞的浸潤。

圖2 各組小鼠腸道組織HE染色切片(400×)Fig.2 Results of HE staining of intestinal tissue of mice in each group (400×)

由圖3可見，與C組小鼠相比，H組小鼠絨毛長度極顯著升高(P<0.01)、隱窩深度無差異(P>0.05)、V/C值顯著升高(P<0.05)，M組小鼠絨毛高度極顯著降低(P<0.01)、隱窩深度顯著降低(P<0.05)、絨毛高度隱窩深度比值(V/C)值極顯著降低(P<0.01)；與M組相比，MH組小鼠絨毛高度顯著增加(P<0.05)、隱窩深度無顯著差異(P>0.05)、V/C值極顯著增加(P<0.01)。以上結(jié)果說明OVA致敏后能夠破壞腸道屏障的完整性，使腸道屏障通透性增強(qiáng)，添加低敏核心料能夠改善過敏小鼠腸道組織結(jié)構(gòu)狀態(tài)。

2.3 低敏核心料對(duì)OVA誘導(dǎo)的過敏反應(yīng)的影響

從圖4a可見，C組和H組小鼠直腸溫度始終維持在36.9 ℃左右，無顯著變化(P>0.05)；M組小鼠隨著時(shí)間的增加直腸溫度降低，致敏20 min后，M組小鼠體溫為36.3 ℃，MH組小鼠體溫為36.5 ℃，差異不顯著(P>0.05)，致敏60 min后，MH組小鼠體溫較M組顯著升高(P<0.05)，增加0.44 ℃。說明低敏核心料可以抑制OVA致敏導(dǎo)致的小鼠直腸溫度降低，有效抑制過敏反應(yīng)的發(fā)生。

a.小腸絨毛高度；b.小腸隱窩深度；c.絨毛高度隱窩深度比值a. The height of the small intestinal villi; b. The depth of the small intestinal crypts; c. The ratio of villus height and crypt depth圖3 低敏寵物核心料對(duì)小鼠腸道形態(tài)的影響Fig.3 The effect of hypoallergenic pet core material on the intestinal morphology of mice

如圖4b所示，C組和H組小鼠無腹瀉的發(fā)生，隨致敏次數(shù)的增加，M組腹瀉率與C組相比極顯著升高(P<0.01)，在第3次致敏后腹瀉率達(dá)到86%，而MH組與M組相比顯著降低(P<0.05)，腹瀉率為45.56%，說明該低敏核心料可以顯著改善小鼠的腸道過敏狀態(tài)，降低腹瀉的發(fā)生。

圖4c可見，C組和H組小鼠幾乎無過敏現(xiàn)象發(fā)生，綜合評(píng)分為0，M和MH組小鼠過敏反應(yīng)評(píng)分隨著致敏次數(shù)的增加呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)，第3次致敏后，M組小鼠的過敏反應(yīng)評(píng)分較C組極顯著升高(P<0.01)，第5次致敏后，MH組較M組顯著降低(P<0.05)。

以上結(jié)果表明，OVA可以誘導(dǎo)小鼠的過敏反應(yīng)的發(fā)生，飼喂該低敏寵物核心料可以顯著抑制OVA導(dǎo)致的小鼠過敏反應(yīng)，減輕過敏癥狀。

a.直腸溫度；b.腹瀉率；c.過敏評(píng)分。與M組相比，*. P<0.05，**. P<0.01，NS. P>0.05a. Rectal temperature of mice; b. Diarrhea rate of mice; c. Anaphylactic score. Compared with the M group, *. P<0.05，**. P<0.01，NS. P>0.05圖4 低敏寵物核心料對(duì)小鼠過敏反應(yīng)癥狀的影響Fig.4 The effect of hypoallergenic pet core material on allergic reaction symptoms in mice

2.4 低敏核心料對(duì)組胺、細(xì)胞因子及肥大細(xì)胞脫顆粒的影響

由圖5和6可見，與C組小鼠相比，M組小鼠血清IgE、IgG、His、IL-4水平極顯著上升(P<0.01)，脫顆粒肥大細(xì)胞數(shù)顯著增加(P<0.05)，IL-10水平極顯著下降(P<0.01)；與M組相比，MH組小鼠血清IgE、IgG、His、IL-4水平較M組顯著降低(P<0.05或P<0.01)，肥大細(xì)胞脫顆粒比率顯著減少(P<0.05)。IL-10水平無差異(P>0.05)，但具有上升趨勢(shì)；說明該低敏寵物核心料可顯著抑制由OVA誘導(dǎo)的Th2型細(xì)胞的激活，進(jìn)而抑制B細(xì)胞釋放IgE及IgG，減少肥大細(xì)胞脫顆粒和組胺的釋放，減輕小鼠的過敏反應(yīng)及其癥狀，并且能通過抑制IL-4的升高，減輕炎性反應(yīng)。

a.血清IgE水平；b.血清IgG水平；c.血清組胺水平；d.腹腔灌洗液脫顆粒肥大細(xì)胞比率a. Serum immunoglobulin E level; b. Serum immunoglobulin G level; c. Serum His level; d. Ratio of degranulated mast cells in peritoneal lavage fluid圖5 低敏寵物核心料對(duì)小鼠過敏反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)的影響Fig.5 The effect of hypoallergenic pet core diet on the indexes related to allergic reaction in mice

2.5 低敏寵物核心料對(duì)免疫器官指數(shù)的影響

由圖7可見，與C組小鼠相比，M組小鼠SI、TI極顯著降低(P<0.01)，M組小鼠胸腺、脾受到OVA刺激，影響了正常免疫功能；而MH組小鼠SI、TI較M組小鼠均極顯著增加(P<0.01)，說明低敏寵物核心料可以提高腸道過敏小鼠胸腺和脾內(nèi)淋巴細(xì)胞的正常分化成熟，確保其正常的免疫功能。

2.6 低敏寵物核心料對(duì)抗氧化能力的影響

由圖8可見，與C組相比，M組小鼠GSH-PX、T-SOD水平極顯著降低(P<0.01)，MDA水平顯著升高(P<0.05)，而MH組小鼠血清GSH-PX和T-SOD較M組顯著增加(P<0.05)，MDA水平較M組顯著下降(P<0.05)，說明低敏寵物核心料可顯著抑制由OVA導(dǎo)致的小鼠氧化應(yīng)激的發(fā)生，并能增加機(jī)體的抗氧化能力。

a.脾指數(shù)；b.胸腺指數(shù)a. Spleen index; b. Thymus index圖7 低敏寵物核心料對(duì)小鼠免疫器官指數(shù)的影響Fig.7 The effect of hypoallergenic core diet on the immune organ index of mice

a.血清SOD活性；b.血清GSH-PX水平；c.血清MDA水平a. Serum SOD activity; b. Serum GSH-PX level; c. Serum MDA level圖8 低敏寵物核心料對(duì)小鼠抗氧化能力的影響Fig.8 Effect of hypoallergenic core diet on antioxidant capacity of mice

3 討 論

過敏反應(yīng)是機(jī)體在免疫異常情況下產(chǎn)生的一種對(duì)機(jī)體有害的病理過程。在寵物飼養(yǎng)中常見的過敏反應(yīng)主要以FA為主，F(xiàn)A會(huì)引起皮膚瘙癢、紅腫，還可產(chǎn)生嘔吐、腹瀉等胃腸癥狀[10]。FA是由IgE介導(dǎo)的I型速發(fā)型超敏反應(yīng)[11]。OVA是蛋清中最常見的容易引起過敏和含量最多的蛋白質(zhì)之一[12]。OVA添加鋁佐劑是制備動(dòng)物過敏模型中最常用的方法[13-15]，有研究顯示，OVA誘導(dǎo)的BALB/c小鼠的過敏模型比其他品系的鼠更接近IgE介導(dǎo)的FA模型。FA的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜多樣，可能與腸道菌群失衡和口服不耐受相關(guān)[16]。

根據(jù)過敏類型的不同，過敏反應(yīng)能夠引起機(jī)體產(chǎn)生不同的癥狀，嚴(yán)重的會(huì)引起休克，危及生命。本研究結(jié)果顯示，各組小鼠日采食量沒有顯著變化；但M組小鼠的體重增長緩慢，平均日增重極顯著降低，這與前人研究中OVA誘導(dǎo)的過敏小鼠日增重均降低一致[17-18]。這種變化可能與機(jī)體在不同免疫狀態(tài)下對(duì)食物消化吸收的利用率不同有關(guān)。因?yàn)闋I養(yǎng)物質(zhì)的吸收主要發(fā)生在小腸前段[19]，過敏小鼠腸道屏障受到破壞，小腸對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收能力下降[20]，體重減輕。MH組小鼠平均日增重顯著升高，基本恢復(fù)正常水平。說明添加低敏寵物核心料能夠改善過敏小鼠體重降低的狀況，這與前人研究結(jié)果相似。低敏寵物核心料中含有的低聚木糖、復(fù)合益生菌和DHA能增加機(jī)體免疫力并改善腸道屏障功能[18,21-22]，可在不影響采食量的前提下，通過減輕腸道損傷，保護(hù)腸道屏障，進(jìn)而提高機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收率，使過敏小鼠的ADG升高。作為評(píng)價(jià)小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的特征性指標(biāo)，小腸絨毛高度、隱窩深度以及V/C值能夠直接顯示小腸的結(jié)構(gòu)和功能狀態(tài)。很多研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)A可破壞腸道組織結(jié)構(gòu)，影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，這在本試驗(yàn)中也得到了同樣的驗(yàn)證。而MH組小鼠較M組絨毛高度顯著增加，結(jié)合體重和采食量的結(jié)果，說明該低敏寵物核心料能通過增加腸道絨毛高度，促進(jìn)腸道營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高小鼠的體重，這可能是低敏寵物核心料中含有的DHA和益生菌所發(fā)揮的作用。

FA主要是由于IgE誘導(dǎo)的I型過敏反應(yīng)，在食物攝入后的幾分鐘到幾小時(shí)內(nèi)會(huì)立即出現(xiàn)過敏的臨床癥狀，通過觀察OVA灌胃后1 h內(nèi)各組小鼠的精神狀態(tài)并對(duì)其進(jìn)行過敏評(píng)分，檢測(cè)直腸溫度和腹瀉率，能夠直觀地反映出每組小鼠的過敏反應(yīng)狀態(tài)。本試驗(yàn)中OVA誘導(dǎo)的過敏小鼠與正常組小鼠相比，體溫降低，腹瀉率增加，這與其他過敏原介導(dǎo)的過敏反應(yīng)一致，在花生提取物(PE)誘導(dǎo)的過敏試驗(yàn)中，過敏組小鼠與正常小鼠相比過敏評(píng)分升高，直腸溫度降低，IL-4水平升高[23]。而本試驗(yàn)添加低敏寵物核心料后小鼠的過敏癥狀有所改善。Diesner等[24]研究表明，益生菌可以調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)或腸道微生物群的組成，有效緩解過敏癥狀。Ren等[25]發(fā)現(xiàn)短雙歧桿菌(Bb)通過降低IL-4水平和激活Tregs對(duì)BALB/c小鼠產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)和抗過敏作用，這與本研究結(jié)果相似，說明該低敏寵物核心料能夠改善動(dòng)物的過敏癥狀，而且推測(cè)對(duì)其他過敏源誘導(dǎo)的過敏反應(yīng)也可能具有潛在效果。

食物過敏原經(jīng)樹突細(xì)胞遞呈后，Th2型細(xì)胞會(huì)大量釋放IL-4、IL-5等細(xì)胞因子，激活B細(xì)胞，促進(jìn)B細(xì)胞生成大量漿細(xì)胞，進(jìn)而分泌IgE、IgG等抗體，這些抗體可與肥大細(xì)胞結(jié)合形成復(fù)合物并使機(jī)體處于致敏狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體再次接觸過敏源時(shí)，可使細(xì)胞發(fā)生脫顆粒，并釋放組胺、IL-4、TNF-α等過敏介質(zhì)和炎性因子，引起過敏反應(yīng)及炎性反應(yīng)[26]。在過敏反應(yīng)機(jī)制中，Th1/Th2細(xì)胞的失衡及相應(yīng)細(xì)胞因子的失衡也是過敏反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制之一，在Th1/Th2平衡的調(diào)控中，Treg會(huì)通過釋放IL-10等發(fā)揮免疫調(diào)控的恢復(fù)作用，IL-10是一種具有免疫抑制功能的抗炎因子，其分泌水平在一定程度上與過敏反應(yīng)程度呈反比。M組小鼠血清中HIS、IL-4、IgG和IgE水平顯著高于C組，肥大細(xì)胞脫顆粒比例也明顯升高。在花生和α-雙加氧酶片段(ADF)誘導(dǎo)的食源性過敏試驗(yàn)中，過敏模型組IL-4、IgE極顯著升高[27-28]。PE誘導(dǎo)的過敏組小鼠組胺水平顯著升高[29]，而本試驗(yàn)中MH組與M組相比，上述指標(biāo)明顯降低，說明低敏寵物核心料能夠抑制食源性過敏所引起的促炎因子和組胺水平升高，降低肥大細(xì)胞脫顆粒比例，從而減輕機(jī)體的過敏反應(yīng)。然而M組小鼠血清IL-10水平顯著低于C組和H組，但與MH組相比無顯著差異。DHA能夠改善食物過敏引起的腸道菌群失調(diào)[30]，通過調(diào)節(jié)腸道微生物的種類和數(shù)量，改善腸道屏障功能狀態(tài)[31]，并抑制腸道炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病的發(fā)展。除此之外，DHA還能調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子的生成[32]，降低促炎因子IL-4和免疫球蛋白IgG、IgE的表達(dá)水平，升高抗炎因子IL-10的表達(dá)水平[32-33]。這與本研究結(jié)果相似。說明低敏寵物核心料發(fā)揮其抗過敏反應(yīng)的機(jī)制可能與低敏寵物核心料中含有的DHA、復(fù)合益生菌有關(guān)。并且低敏寵物核心料不僅能減輕OVA誘導(dǎo)的FA的過敏反應(yīng)，還對(duì)花生等過敏原引起的食源性過敏反應(yīng)具有潛在效果。

過敏反應(yīng)不僅會(huì)引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生一些過敏癥狀，也會(huì)使機(jī)體的免疫狀態(tài)發(fā)生改變，當(dāng)機(jī)體受到刺激引起免疫功能低下時(shí)，免疫器官中免疫細(xì)胞的正常分化、成熟則會(huì)減少，從而導(dǎo)致器官萎縮[34]，質(zhì)量下降。M組小鼠SI和TI均明顯降低，說明OVA致敏后小鼠免疫器官萎縮，免疫功能有所下降，而MH組小鼠SI和TI明顯升高，說明添加該低敏寵物核心料可促進(jìn)動(dòng)物免疫器官發(fā)育，增進(jìn)動(dòng)物免疫器官機(jī)能，提高機(jī)體免疫力。

SOD、GSH-PX、MDA作為動(dòng)物機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的重要成員，是反映機(jī)體抗氧化能力的特征性指標(biāo)[35]。本研究結(jié)果顯示，M組小鼠SOD和GSH-PX水平顯著降低，MDA水平顯著增加[34]，而添加低敏寵物核心料后這3個(gè)指標(biāo)均顯著改善。研究顯示，牛磺酸能下調(diào)MDA表達(dá)水平，具有抗氧化作用。且牛磺酸的抗氧化作用已經(jīng)在很多試驗(yàn)中被證實(shí)[36-38]。說明添加該低敏寵物核心料能夠改善因過敏引起的抗氧化能力的降低。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)采用OVA成功誘導(dǎo)了小鼠的過敏反應(yīng)，低敏寵物核心料對(duì)健康小鼠無顯著影響，但可抑制OVA誘導(dǎo)的小鼠腸道過敏反應(yīng)的發(fā)生，減輕過敏反應(yīng)癥狀，其機(jī)理一方面是通過抑制OVA誘導(dǎo)的Th2型細(xì)胞的激活，進(jìn)而抑制B細(xì)胞釋放IgE，減少肥大細(xì)胞脫顆粒及組胺的釋放，減輕小鼠的過敏反應(yīng)及其癥狀；另一方面可減輕過敏小鼠的氧化應(yīng)激，增加其抗氧化機(jī)能，修復(fù)組織細(xì)胞的損傷，進(jìn)而提高機(jī)體的抗過敏能力。