貯藏時間與蒙藥黃芩對紫花苜蓿草顆粒維生素和化學(xué)成分的影響

摘要：為有效保全苜蓿草顆粒貯藏過程中維生素及營養(yǎng)品質(zhì)，本研究以紫花苜蓿草顆粒為研究材料，研究貯藏時間（0，60，120，180，240 d，冷凍240 d）與蒙藥黃芩（0%，0.5%，1.0%，1.5%）對其維生素含量和營養(yǎng)品質(zhì)的影響。結(jié)果表明：在貯藏過程中，與其他添加量相比，添加1.5%黃芩有利于保存苜蓿草顆粒維生素B5、維生素C和α-維生素E含量。貯藏60 d及以上顯著降低了苜蓿草顆粒維生素B1、維生素B3、維生素C和維生素E含量；貯藏120 d時苜蓿草顆粒DM含量趨于穩(wěn)定；苜蓿草顆粒貯藏180 d后其CP含量顯著降低；貯藏0～180 d期間，隨著貯藏時間的延長，苜蓿草顆粒NDF和ADF含量顯著升高。與常溫貯藏240 d相比，冷凍貯藏相同時間有利于保存苜蓿草顆粒中維生素B1、維生素B5、α-維生素E和OM含量，顯著降低DM、NDF和ADF含量。因此，1.5%黃芩添加劑有利于保存苜蓿草顆粒維生素含量，且常溫貯藏時間不宜超過60天。

關(guān)鍵詞：紫花苜蓿；草顆粒；黃芩；維生素；化學(xué)成分

中圖分類號：S963.22文獻標識碼：A文章編號：1007-0435（2023）04-1242-12

Effects of Storage Time and Mongolia Medicinal Scutellaria Baicalensis

Addition on the Vitamin Content and Chemical Composition of Alfalfa Pellet

SUN Lin XIAO Yan-zi DU Shuai ZHANG Fu-jin LIU Guang-hua ZHANG Xin-xin Wunier Nana ZHAO Yi XUE Yan-lin

（1. College of Life Science， China West Normal University， Nanchong， Sichuan Province 637002， China; 2. Inner Mongolia Academy of

Agricultural amp; Animal Husbandry Sciences， Hohhot， Inner Mongolia 010031， China; 3. Hulunbeier University， Hulun Buir Inner Mongolia

021000， China; 4. Zhejiang University， Hangzhou， Zhejiang Province 310058， China; 5. Inner Mongolia Agricultural and Livestock Product

Quality and Safety Center， Hohhot， Inner Mongolia 010010， China）

Abstract：The aim of this study was to provide theoretical basis for preserving vitamin and nutrient quality of alfalfa pellets during their storage. This study investigated the effects of storage time （0，60，120，180，240 d，freezing for 240 d） and the Mongolia medicinal Scutellaria baicalensis （hereafter abbreviated SB） addition at a range of concentrations （0%，0.5%，1.0%，1.5%） on the vitamin content and chemical composition of alfalfa pellets. The results showed that addition of 1.5% of SB was beneficial to the preservation of vitamin B5，vitamin C and α-vitamin E contents in alfalfa pellets during the storage compared to other concentrations. Storage for 60 d and longer significantly reduced the contents of vitamin B1，vitamin B3，vitamin C and vitamin E. The DM content of alfalfa pellets tended to be stable after storage of 120 d. The crude protein content of alfalfa pellets decreased significantly after storage of 180 d. During storage of 0～180 d，the contents of acid detergent fiber and neutral detergent fiber of alfalfa pellets increased significantly with the extension of storage time. Compared with storage of 240 d at room temperature，freezing storage for the same time was beneficial to the preservation of the contents of vitamin B1，vitamin B5，α-vitamin E and organic matter in alfalfa pellets，but significantly decreased the contents of DM，NDF and ADF. In conclusion，the addition of 1.5% Scutellaria baicalensis is beneficial to the preservation of vitamin content in alfalfa pellets，and the storage time should not exceed 60 days at ambient temperature.

Key words：Alfalfa;Pellet;Scutellaria baicalensis;Vitamin;Chemical composition

維生素是反芻動物營養(yǎng)和維持正常生理機能所必需的微量有機化合物，因其特殊的功能而受到廣泛關(guān)注［1］。維生素雖然不是能量的來源，但絕大多數(shù)不能由動物有機體合成，因此必須在飼料中提供。新鮮或貯藏牧草是反芻動物天然維生素的重要飼料來源［2］。牧草中維生素的含量對動物有機體及其乳肉制品的質(zhì)量至關(guān)重要［3］。維生素E是反芻動物所必需卻不能自主合成的微量有機營養(yǎng)物質(zhì)。牧草中維生素E因其抗氧化性能參與各種氧化應(yīng)激相關(guān)的過程［4-5］而受到廣泛關(guān)注，其中α-生育酚具有最高的維生素E活性［3］。B族維生素通常主要以輔酶或輔助因子的形式參與動物體內(nèi)碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂肪以及核酸等代謝，是動物體不可或缺的一種維生素，其需求量隨著機體代謝活動的增強而增加。反芻動物自身合成的B族維生素的量已不能完全滿足高產(chǎn)動物的代謝需求［6］。反芻動物飼料中缺乏B族維生素將導(dǎo)致不同程度的代謝紊亂［2］。維生素K是合成動物凝血因子所必需的，也被稱為抗出血維生素［7］。維生素C在奶牛生產(chǎn)中發(fā)揮著極其重要的作用，這從添加維生素C可以提高奶牛乳脂［8］、乳成分、乳產(chǎn)量［9-11］以及牛奶氧化穩(wěn)定性［12-13］中得到證實。

在世界許多地區(qū)，苜蓿干草不僅是奶牛飼料中重要的粗蛋白質(zhì)和可消化纖維原料來源，而且是奶牛補充礦物質(zhì)和維生素的重要來源［14］。紫花苜蓿草顆粒是我國草食畜牧業(yè)發(fā)展的主要利用方式之一［15］，但長時間貯藏致使其中營養(yǎng)物質(zhì)和維生素大量損失，嚴重影響了其產(chǎn)業(yè)發(fā)展，因此，有必要在苜蓿草顆粒貯藏期找到合適的添加劑降低貯藏損耗。維生素的穩(wěn)定性取決于其化學(xué)結(jié)構(gòu)以及許多外部因素，如溫度、氧、光和水分［16］。氧化反應(yīng)是一種重要的化學(xué)現(xiàn)象，會導(dǎo)致生物損傷，可能影響貯藏期間苜蓿草顆粒的營養(yǎng)含量。在飼料中添加抗氧化劑可以降低氧化反應(yīng)的不利影響。一些抗氧化劑是化學(xué)合成的，其在體內(nèi)毒理學(xué)上的安全性是一個有很大爭議的問題。這促使人們尋找適合替代合成抗氧化劑的天然化合物，以增加飼料的穩(wěn)定性。由于化學(xué)添加劑存在諸多弊端，而植物提取物取材容易、經(jīng)濟實惠、殺菌效果好，對畜體和環(huán)境無危害，因此研究人員將注意力轉(zhuǎn)向了自然資源，利用天然藥用植物作為添加劑已成為當(dāng)今熱點。

蒙藥黃芩（Scutellaria baicalensis Georgi，SB），俗稱黃芩，是一種具有較強體外抗菌作用的蒙藥［17］，黃芩的主要有效成分是黃酮，有研究表明其中總黃酮對動植物細胞和器官具有抗氧化、抗炎和抗菌保護作用［18-19］。黃酮類化合物在自然資源中發(fā)揮著重要的作用，作為抗氧化劑可能對人類有益，因此引起了研究者的關(guān)注［20］。有研究證實從傳統(tǒng)蒙藥植物黃芩中提取的親脂性黃酮類苷黃芩苷能夠再生β-胡蘿卜素［21］。我們推測黃芩可能更有助于紫花苜蓿顆粒貯藏期間的維生素含量的保存。然而，目前關(guān)于牧草中維生素含量的報道有限還沒有數(shù)據(jù)可以評價貯藏時間和黃芩添加劑濃度對紫花苜蓿草顆粒中維生素含量的影響，因此，本研究開展貯藏時間和黃芩添加劑對苜蓿草顆粒維生素含量與化學(xué)成分的影響研究，以期更加合理地選擇飼料添加劑或縮短貯藏時間來減少貯藏期苜蓿草顆粒維生素的損失。

1材料與方法

1.1試驗地概況

試驗于2019年4月1日—2020年12月31日，在內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院試驗基地進行。該基地位于內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市清水河縣，111°43′33″E，39°45′15″N，屬于典型的半干旱大陸性氣候。年均溫7.4℃。年均降雨量410 mm，年均日照時間2 900 h，無霜期136 d。

1.2試驗材料與設(shè)計

試驗材料為種植第3年第2茬次現(xiàn)蕾至初花期（留茬5～6 cm）刈割的準格爾紫花苜蓿；收獲后采用不壓扁自然晾曬，適時監(jiān)測含水量變化規(guī)律，當(dāng)含水量下降至12%～14%時，用電動粉碎機（FW80型，常州市國旺儀器制造有限公司）粉碎苜蓿干草，粉碎粒度為5 mm。蒙藥材黃芩于呼和浩特市惠豐堂藥店購買，粉碎后過1 mm篩，備用。部分用來測定維生素含量，每個測定3次重復(fù)。部分用來測定營養(yǎng)成分，每個測定3次重復(fù)。

試驗采用黃芩粉添加劑和貯藏時間4×6 ［黃芩（SB）×貯藏時間（D）］完全隨機設(shè)計。試驗設(shè)置添加黃芩粉0%（SB-0，對照）、0.5%（SB-0.5）、1%（SB-1.0）、1.5%（SB-1.5）4個處理，3次重復(fù)。將紫花苜蓿草粉和黃芩粉攪拌均勻，調(diào)節(jié)其含水量為22%～24%?；旌喜莘壑苯咏?jīng)SKJ 250型顆粒機（曲阜市啟航機械有限公司生產(chǎn)，顆粒直徑6 mm）制粒，冷卻后將一部分苜蓿草顆粒置于儲備庫內(nèi)有氧（-8.5℃～24℃））貯藏，于貯藏0，60，120，180，240 d時取樣。另一部分苜蓿草顆粒置于冷凍冰箱（-20℃）貯藏240 d（以下表格縮寫為FS_240），取樣，待測草顆粒的化學(xué)成分和維生素含量。

1.3試驗方法

1.3.1維生素含量的測定方法100 g樣品用真空冷凍干燥機（Free Zone 4.5 L，美國密蘇里州堪薩斯城LABCONCO公司）冷凍干燥2 d，冷凍干燥的樣品粉碎后過1.0 mm的篩，每份樣品設(shè)置2個平行，采用高效液相色譜法測定維生素含量。維生素K1（V_K1）、維生素C（V_C）、維生素B1（V_B1）、維生素B2（V_B2）、維生素B3（V_B3）、維生素B5（V_B5）和維生素E（V_E）含量分別參照GB 5009.158-2016［22］、GB 7303-2018［23］、GB/T 14700-2018［24］、GB/T 14701-2019［25］、GB/T 17813-2018［26］、GB/T 18397-2014［27］和GB/T 17812-2008［28］方法測定。試驗所測樣品的V_E各組分中，僅α-生育酚（α-V_E）和γ-生育酚（γ-V_E）可檢測到，因此，V_E各組分含量計算與統(tǒng)計以α-V_E和γ-V_E含量為主。

1.3.2營養(yǎng)品質(zhì)指標的測定方法試驗樣品于65℃鼓風(fēng)干燥箱烘干，用微型植物粉碎機進行粉碎后過1 mm篩，保存于密封袋中備用。將粉碎樣品置于105℃烘箱中烘3 h，測定干物質(zhì)（Dry matter，DM）含量；粗蛋白質(zhì)含量（Crude protein，CP）采用半微量凱氏定氮法測定；粗脂肪（Extract ether，EE）含量采用索氏抽提法測定；酸性洗滌纖維（Acid detergent fiber，ADF）和中性洗滌纖維（Neutral detergent fiber，NDF）采用Van Soets法測定。粗灰分（Ash）含量采用電爐碳化后，經(jīng)馬弗爐550℃灼燒3小時后測定；有機物質(zhì)計算公式：有機物質(zhì)（Organic matter，OM）%=干物質(zhì)%-粗灰分%。以上指標均參照張麗英［29］描述的方法測定。

1.4統(tǒng)計分析

運用Excel 2007進行初步處理。采用SAS 9.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，利用Duncan多重檢驗比較均值的差異顯著性。因子數(shù)學(xué)模型為：

Y_ijk = μ+α_i+ β_j+ αβ_ij+ ε_ijk

其中，Y_ijk為觀察值，μ為均值，α_i為黃芩添加量的影響（i=0%，0.5%，1.0%，1.5%），β_j為貯藏時間的影響（j=0，60，120，180，240，冷凍240 d）；αβ_ij為黃芩添加量（SB）和貯藏時間（D）交互效應(yīng)，即黃芩添加量（SB）×貯藏時間（D），ε_ijk為誤差。

2結(jié)果分析

2.1貯藏時間與黃芩對紫花苜蓿草顆粒維生素B和C含量的影響

黃芩的維生素含量中V_C含量為（71.97±11.92）mg·kg^-1，V_B1含量為（0.84±0.39）mg·kg^-1，VB2含量為（16.16±0.45）mg·kg^-1，V_B3含量為（2.10±0.21）mg·kg^-1，V_B5含量為（5.68±0.14）mg·kg^-1。4個添加劑處理中，當(dāng)貯藏至60 d時，紫花苜蓿草顆粒V_C含量顯著降低（Plt;0.05）（表1）；在SB-0處理中，常溫貯藏240 d時，其V_C含量顯著低于其他貯藏時間（Plt;0.05），冷凍貯藏240 d時，其V_C含量與常溫貯藏60 d無顯著差異，但顯著高于常溫貯藏240 d（Plt;0.05）；然而，添加了黃芩添加劑后，冷凍和常溫貯藏240 d草顆粒的V_C含量差異不顯著。常溫貯藏0 d時，SB-1.5處理的V_C含量顯著高于其他處理（Plt;0.05）；常溫貯藏240 d時，SB-0處理的V_C含量顯著低于其他處理（Plt;0.05）。SB-0、SB-0.5和SB-1.5處理中，當(dāng)貯藏60 d時，其V_B1含量顯著降低（Plt;0.05）；而在SB-1.0處理中，不同貯藏時間紫花苜蓿草顆粒V_B1含量差異不明顯；常溫貯藏至240 d時，SB-0.5處理V_B1含量顯著高于其他處理（Plt;0.05）。4個添加劑處理中，貯藏0 d的V_B2含量顯著低于其他貯藏時間（Plt;0.05）；SB-0處理中，常溫貯藏120 d和冷凍貯藏240 d紫花苜蓿草顆粒V_B2含量分別為42.74 mg·kg^-1和42.63 mg·kg^-1，二者無顯著差異，但顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05）；SB-0.5處理中，貯藏120 d紫花苜蓿草顆粒V_B2含量為43.24 mg·kg^-1，顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05）；SB-1.0處理中，常溫貯藏60，120，180，240 d和冷凍貯藏240 d紫花苜蓿草顆粒V_B2含量為37.57～40.77 mg·kg^-1，無顯著差異；貯藏60 d時，SB-0處理V_B2含量顯著低于其他處理（Plt;0.05）。SB-0處理中，貯藏0 d紫花苜蓿草顆粒V_B3含量為2.10 mg·kg^-1，當(dāng)貯藏至60 d時V_B3含量顯著降低至1.54 mg·kg^-1，直到貯藏至240 d時，其V_B3含量無顯著變化；然而，SB-0.5、SB-1.0和SB-1.5處理中，隨著貯藏時間的延長，其V_B3含量波動變化顯著；貯藏120 d時，SB-1.5處理的V_B3含量為2.20 mg·kg^-1，顯著高于其他處理（Plt;0.05）。4個添加劑處理中，貯藏0 d時的紫花苜蓿草顆粒V_B5含量顯著低于其他貯藏時間（Plt;0.05）；SB-0和SB-0.5處理中，當(dāng)貯藏時間延長至120 d，其V_B5含量顯著升高至14.76～15.64 mg·kg^-1；冷凍貯藏240 d，其V_B5含量顯著高于常溫貯藏240 d（Plt;0.05）。SB-1.0處理中，貯藏60至240 d，其V_B5含量差異不顯著；SB-1.5處理中，貯藏120 d和240 d，其V_B5含量無顯著差異，但顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05）。SB-1.0和SB-1.5處理中，冷凍240 d貯藏，其V_B5含量與常溫貯藏240 d無顯著差異。

黃芩添加劑（Plt;0.000 1）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（Plt;0.000 1）對紫花苜蓿草顆粒V_C含量影響顯著（表2）。SB-1.5處理的VC含量為12.28 mg·kg^-1，與SB-0.5處理無顯著差異，但顯著高于SB-0和SB-1.0（Plt;0.05）；貯藏0 d時，紫花苜蓿草顆粒V_C含量為14.68 mg·kg^-1，顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05），而常溫貯藏240 d，其V_C含量顯著低于其他常溫貯藏時間（Plt;0.05），與冷凍貯藏240 d無顯著差異。黃芩添加劑（P=0.003 3）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（P=0.001 7）對紫花苜蓿草顆粒V_B1含量影響顯著；SB-0.5處理V_B1含量（3.56 mg·kg^-1）與SB-0處理無顯著差異，但顯著高于SB-1.0和SB-1.5處理（Plt;0.05）；貯藏60和120 d時，紫花苜蓿草顆粒的V_B1含量為3.44～3.46 mg·kg^-1，顯著低于0 d（Plt;0.05），與冷凍貯藏240 d無顯著差異，但顯著高于常溫貯藏240 d（Plt;0.05）。黃芩添加劑（P=0.021 5）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（P=0.026 5）對紫花苜蓿草顆粒V_B2含量影響顯著；SB-0.5處理V_B2含量（37.38 mg·kg^-1）與SB-0和SB-1.5處理無顯著差異，但顯著高于SB-1.0處理（35.99 mg·kg^-1）；貯藏120 d時，紫花苜蓿草顆粒V_B2含量為42.01 mg·kg^-1，顯著高于其他常溫貯藏時間（Plt;0.05），但與冷凍貯藏240 d無顯著差異。黃芩添加劑（Plt;0.000 1）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（P=0.000 5）對紫花苜蓿草顆粒V_B3含量影響顯著；SB-1.5處理V_B3含量為1.73 mg·kg^-1，與SB-0無顯著差異，但顯著高于SB-0和SB-1.0處理（1.50～1.54 mg·kg^-1）；隨著貯藏時間的延長，紫花苜蓿草顆粒V_B3含量顯著降低（Plt;0.05）。黃芩添加劑（Plt;0.000 1）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（P=0.015 6）對紫花苜蓿草顆粒V_B5含量影響顯著；SB-1.5處理的V_B5含量為13.28 mg·kg^-1，顯著高于SB-1.0處理（Plt;0.05）；貯藏120 d時，紫花苜蓿草顆粒V_B5含量為14.65 mg·kg^-1，顯著高于其他常溫貯藏時間（Plt;0.05），但與冷凍貯藏240 d無顯著差異。

2.2貯藏時間與黃芩對紫花苜蓿草顆粒維生素E和K1含量的影響

黃芩的α-生育酚（α-V_E）和γ-生育酚（γ-V_E）分別為（7.57±0.54）mg·kg^-1和（117.91±39.24）mg·kg^-1。未檢出維生素K1（V_K1）含量。4個添加劑處理中，當(dāng)貯藏至60 d時，紫花苜蓿草顆粒α-V_E含量顯著降低（Plt;0.05）（表3）；在SB-0處理中，當(dāng)冷凍貯藏240 d時，其α-V_E含量顯著高于貯藏60～240 d（Plt;0.05）；在SB-0.5和SB-1.5處理中，常溫貯藏0～240 d與冷凍貯藏240 d無顯著差異；在SB-1.0處理中，冷凍貯藏240 d時，其α-V_E含量與常溫貯藏60 d無顯著差異；常溫貯藏0 d和240 d時，SB-1.5處理的α-V_E含量分別為278.73和12.91 mg·kg^-1，顯著高于其他處理（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d時，SB-0.5和SB-1.5處理α-V_E含量顯著高于SB-0和SB-1.0處理。SB-0處理中，貯藏0 d和貯藏180 d，紫花苜蓿草顆粒γ-V_E含量分別為42.01 mg·kg^-1和135.61 mg·kg^-1，二者無顯著差異。添加黃芩的3個處理中，草顆粒γ-V_E含量在貯藏60 d后都顯著降低（Plt;0.05）。貯藏0 d時，SB-1.0和SB-1.5處理草顆粒γ-V_E含量顯著高于SB-0和SB-0.5處理（Plt;0.05）。貯藏120 d時，SB-1.5處理草顆粒γ-V_E含量為10.87 mg·kg^-1，顯著低于其他處理（Plt;0.05）。4個添加劑處理中，與貯藏0 d相比，常溫貯藏120～240 d，紫花苜蓿草顆粒V_K1含量顯著升高（Plt;0.05）。所有處理中，冷凍貯藏240 d時，其VK1含量與常溫貯藏60～240 d無顯著差異。貯藏0 d時，SB-1.5處理草顆粒VK1含量與SB-0無顯著差異，但顯著高于其他處理（Plt;0.05）。貯藏60 d時，SB-1.0處理VK1含量為14.04 mg·kg^-1，顯著高于其他處理（Plt;0.05）。

黃芩添加劑（Plt;0.000 1）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（Plt;0.000 1）對紫花苜蓿草顆粒α-V_E含量影響顯著（表4）。SB-1.5處理的α-V_E含量為56.94 mg·kg^-1，顯著高于其他添加劑處理（Plt;0.05）；貯藏0 d時，紫花苜蓿草顆粒α-V_E含量為245.74 mg·kg^-1，顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05），冷凍貯藏240 d，其α-V_E含量顯著高于常溫貯藏60～240 d（Plt;0.05）。黃芩添加劑（P=0.501 5）對紫花苜蓿草顆粒γ-V_E含量影響無顯著差異，而貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（Plt;0.000 1）對紫花苜蓿草顆粒γ-V_E含量影響顯著；貯藏0 d時，紫花苜蓿草顆粒的γ-V_E含量為63.11 mg·kg^-1，顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05），冷凍與常溫貯藏240 d對草顆粒的γ-V_E含量無顯著差異。貯藏時間（Plt;0.000 1）對紫花苜蓿草顆粒V_K1含量影響顯著，然而黃芩添加劑（P=0.289 9）和兩因素互作（P=0.286 2）對其V^K1含量無顯著影響。貯藏0 d時，紫花苜蓿草顆粒的V_K1含量為4.08 mg·kg^-1，顯著低于其他貯藏時間（Plt;0.05），冷凍與常溫貯藏240 d對草顆粒的V_K1含量無顯著差異。

2.3貯藏時間與黃芩對紫花苜蓿草顆粒化學(xué)成分的影響

黃芩的DM含量為（95.18±0.21）%，Ash含量為（4.89±0.06）%，CP為（2.96±0.12）%，中性洗滌纖維NDF含量為（18.94±1.93）%，ADF含量為（14.67±1.21）%，EE含量為（2.88±0.77）%。4個添加劑處理中，當(dāng)貯藏至120 d時，紫花苜蓿草顆粒DM含量顯著升高（Plt;0.05）（表5），貯藏120～240 d，DM含量差異不顯著；所有處理中冷凍貯藏240 d，其DM含量顯著低于其他時間。冷凍貯藏240 d時，SB-0處理DM含量顯著低于其他處理（Plt;0.05）。SB-1.0和SB-1.5處理中，常溫貯藏240 d時，其OM含量顯著低于SB-0和SB-0.5處理（Plt;0.05）；除貯藏120 d和240 d SB-1.5處理與其他處理無顯著差異外，其他貯藏時間SB-1.5處理的OM含量顯著低于其他處理（Plt;0.05）。SB-0處理中，隨著貯藏時間的延長，其CP含量逐漸降低，當(dāng)貯藏至240 d時，CP含量顯著降低至14.28%，與貯藏0 d相比，降低了1.52%，然而冷凍貯藏240 d，其CP含量為15.15%，顯著高于常溫貯藏180和240 d；SB-0.5處理中，貯藏0～120 d和冷凍貯藏240 d，其CP含量無顯著差異；SB-1.0處理中，貯藏0～120 d，其CP含量無顯著差異，但顯著高于其他貯藏時間；SB-1.5處理中，貯藏120 d，CP含量為16.42%，顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d，CP含量顯著高于常溫貯藏180～240 d（Plt;0.05）。4個處理中，貯藏0～180 d期間，隨著貯藏時間的延長，草顆粒的NDF和ADF含量顯著增加；貯藏至240 d時，所有處理的NDF和ADF含量顯著降低（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d草顆粒NDF和ADF含量顯著低于常溫貯藏240 d（Plt;0.05）。貯藏0 d和冷凍貯藏240 d，SB-1.5處理NDF和ADF含量顯著低于SB-0.5處理（Plt;0.05）。SB-0處理中，貯藏0～120 d期間苜蓿草顆粒EE含量差異不顯著，但顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d，其EE含量顯著低于常溫貯藏240 d；SB-0.5和SB-1.0處理中，貯藏至180 d時，其EE含量顯著高于其他貯藏時間；SB-1.5處理中，貯藏180 d與0 d時的EE含量差異不顯著，但顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05）。

黃芩添加劑（P=0.002 8）、貯藏時間（Plt;0.000 1）及兩因素互作（Plt;0.000 1）對紫花苜蓿草顆粒DM含量影響顯著（表6）。SB-0處理的DM含量為91.05%，顯著低于其他添加劑處理（Plt;0.05）；貯藏0 d時，紫花苜蓿草顆粒DM含量為85.74 %，顯著低于其他常溫貯藏時間（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d，其DM含量顯著低于各貯藏時間（Plt;0.05）。SB-1.5處理OM含量為90.64%，顯著低于其他各添加劑處理（Plt;0.05）；常溫貯藏240 d，其OM含量顯著低于各貯藏時間（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d，其OM含量與貯藏0 d無顯著差異。SB-1.5處理草顆粒CP含量為15.43%，與SB-0無顯著差異，但顯著高于其他處理（Plt;0.05）；常溫貯藏0～120 d，其CP含量無顯著差異，但貯藏180～240 d，CP含量顯著降低（Plt;0.05）；冷凍貯藏240 d，其CP含量顯著高于常溫貯藏240 d（Plt;0.05）。SB-1和SB-1.5處理草顆粒NDF含量顯著低于SB-0.5處理（Plt;0.05），與SB-0無顯著差異；添加黃芩添加劑處理的ADF含量為39.38%～41.23%，無顯著差異；貯藏0-180 d，隨著貯藏時間的延長，NDF含量由42.94%顯著升高至68.24%，ADF含量由32.95%升高至51.31%；冷凍貯藏240 d，其NDF和ADF含量顯著低于常溫貯藏240 d處理（Plt;0.05）。黃芩添對苜蓿草顆粒EE含量影響顯著（P=0.001 0），添加0.5%和1.5%黃芩顯著提高了草顆粒EE含量，但添加1.0%黃芩對EE含量無顯著影響。貯藏180 d時，草顆粒EE含量為5.97%，顯著高于其他貯藏時間（Plt;0.05），冷凍240 d，其EE含量顯著低于常溫貯藏240 d（Plt;0.05）。

3討論

3.1黃芩與貯藏時間對苜蓿草顆粒維生素含量的影響

迄今為止，從黃芩中已鑒定出40多種成分，其中黃芩多糖具有抗氧化、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等作用［30］。黃芩提取物的抗氧化活性與提取物中總酚含量呈正相關(guān)。黃芩可以作為一種有效的膳食抗氧化劑，添加1.5%黃芩可顯著提高紫花苜蓿草顆粒V_C和α-V_E含量［14，31-32］。本研究結(jié)果表明，添加1.5%黃芩有利于保存苜蓿草顆粒貯藏過程中V_C、α-V_E含量，但不利于V_B1保存，表明1.5%黃芩不僅可以提高加工過程中紫花苜蓿草顆粒V_C和α-V_E的保存，還可以保存貯藏過程中的上述兩種維生素的含量，這可能歸功于黃芩的抗氧化性。高濃度黃芩（1.0%和1.5%）不利于V_B1保存，這可能是由于相對較高濃度的黃芩破壞了V_B1的化學(xué)結(jié)構(gòu)，具體原因有待進一步研究。

貯藏時間是影響維生素穩(wěn)定性的重要因素。趙金偉等［33］研究表明，存儲60 d復(fù)合預(yù)混合飼料V_A的損失率為24.86%～64.78%。孔凡科等［34］研究表明，存儲時間能顯著增加飼料V_A、V_D3、V_E的損失率。有研究表明，除了濕度和氧化還原反應(yīng)單一條件能破壞B族維生素穩(wěn)定性外，其他單一條件必須與其他因素結(jié)合才可能破壞維生素的穩(wěn)定性［35］。還有研究表明，水分、多不飽和脂肪酸的氧化和微量礦物質(zhì)是貯藏飼料中影響維生素穩(wěn)定性最關(guān)鍵的因素［36］。本試驗研究表明，貯藏240 d顯著降低了苜蓿草顆粒V_B1、V_B2和V_B5含量，這可能是由于空氣中的水分、氧氣及熱量，這些因素都會隨著時間的延長使V_B1、V_B2和V_B5的穩(wěn)定性遭到破壞［37］；而冷凍貯藏有利于保存苜蓿草顆粒中V_B1和V_B5含量，這是因為低溫、避光，隔絕氧氣接觸減緩了這兩種維生素的流失［37］。Gadient等［38-39］研究報道，無論在高溫、室溫還是低溫環(huán)境下V_B2和V_B3穩(wěn)定性都很好。本研究中，常溫和冷凍貯藏240 d相比，苜蓿草顆粒的V_B2和V_B3含量無顯著變化，表明V_B2和V_B3具有較強的穩(wěn)定性。V_C是很難保留在飼料中的，因為許多環(huán)境因素對它的破壞比較敏感，特別是氧氣。劉笑笑等研究表明［40］，V_C對貯藏時間和溫度非常敏感，延長貯藏時間會造成黃瓜中V_C大量損失。這與前人在南瓜［41］、紅香酥梨［42］和甜櫻桃［43］等果實貯藏試驗中得到的結(jié)果一致。本試驗結(jié)果表明，貯藏60 d及以上顯著降低了苜蓿草顆粒V_C含量，進一步說明V_C的易破壞性。劉笑笑等［40］研究結(jié)果表明，低溫貯藏對黃瓜V_C含量的保持率高于室溫貯藏。本研究中，未添加黃芩添加劑的（SB-0）處理中，冷凍貯藏240 d苜蓿草顆粒的V_C含量（9.76 mg·kg^-1）顯著高于其常溫貯藏240 d（6.18 mg·kg^-1）。而添加了黃芩的所有處理中，兩種貯藏方式并未對苜蓿草顆粒的V_C含量產(chǎn)生顯著影響，這可能是由于黃芩能顯著提高紫花苜蓿V_C含量所致［14］。新鮮紫花苜蓿中含有豐富的V_E，但V_E非常不穩(wěn)定，氧化作用可迅速破壞天然V_E，而熱、濕、酸敗和微量元素可以加速V_E的氧化［32］。本試驗研究表明，貯藏60 d及以上顯著降低了苜蓿草顆粒V_E含量，這是由于貯藏過程中，V_E因氧化作用而降解。本試驗結(jié)果還表明，冷凍貯藏有利于保存苜蓿草顆粒中α-V_E含量，這是由于低溫下草顆粒中VE的穩(wěn)定性好［44］。V_K1也稱為葉綠醌，存在于綠葉植物中，其化學(xué)性質(zhì)不太穩(wěn)定。紫花苜蓿草顆粒貯藏60 d后，其V_K1含量有升高的趨勢，該現(xiàn)象的原因有待進一步研究。與低溫貯藏相比，常溫貯藏有利于保存苜蓿草顆粒中V_K1含量，主要原因可能是低溫或高溫條件下引起了V_K1分解，導(dǎo)致其含量減少［45］。

3.2黃芩與貯藏時間對苜蓿草顆?；瘜W(xué)成分的影響

牧草從收獲到家畜利用，一般都要貯藏一段時間。在草顆粒壓制過程中，加入抗氧化劑，使草顆粒更耐貯藏，營養(yǎng)成分損失更少［46］。干物質(zhì)是評價牧草有機物積累與化學(xué)物質(zhì)總量的一個重要指標。本試驗中，黃芩添加劑處理紫花苜蓿草顆粒的DM含量顯著高于未添加處理，這主要是由于一方面加入的黃芩本身含有較高的干物質(zhì)含量，另一方面，黃芩具有抗氧化作用，抑制了草顆粒營養(yǎng)物質(zhì)的損失。此外，本研究表明，當(dāng)貯藏至120 d時，紫花苜蓿草顆粒DM含量顯著升高，貯藏120～240 d，DM含量差異不顯著，即貯藏至120 d時DM含量趨于穩(wěn)定，這是因為貯藏前期天然牧草顆粒的水分蒸發(fā)較快導(dǎo)致水分含量下降，DM含量增加幅度較大。這與孫林等［47］的研究結(jié)果相似。本試驗中，貯藏240 d時，低溫貯藏與常溫相比，前者的DM含量顯著低于其他時間。這主要由于低溫冷凍冰箱環(huán)境濕度大，草顆粒吸附了一定的水分，致使其含水量增加，DM含量較低。本試驗結(jié)果表明，添加1.5%黃芩顯著降低了紫花苜蓿草顆粒OM含量。這與孫林等［14］的研究結(jié)果一致，可能是黃芩添加劑中含有較多的微量元素所致。本試驗結(jié)果表明常溫貯藏240 d，苜蓿草顆粒OM含量顯著降低至最低（90.28%）；冷凍貯藏240 d，其OM含量與貯藏0 d無顯著差異，說明長時間貯藏降低了OM含量，這可能與長時間貯藏導(dǎo)致苜蓿草顆粒部分營養(yǎng)物質(zhì)流失有關(guān)［48］，而冷凍貯藏可以顯著保存草顆粒OM含量，這與低溫可在一定程度上抑制真菌活動，進一步降低真菌對營養(yǎng)物質(zhì)的分解有關(guān)。粗蛋白質(zhì)含量的多少可以作為評定紫花苜蓿草顆粒優(yōu)劣的指標［49］。本研究結(jié)果表明，貯藏前期（180 d內(nèi)），紫花苜蓿草顆粒CP含量無顯著變化，而貯藏后期（180 d后）其CP含量顯著降低，這說明隨著草顆粒貯藏時間的延長，其粗蛋白質(zhì)可能因微生物、光化學(xué)反應(yīng)和自身的呼吸消耗而損失部分粗蛋白質(zhì)［48］。本試驗結(jié)果還表明，貯藏240 d時，低溫貯藏與常溫相比，前者保存了較高的CP含量，由此可見，低溫能夠有效減緩草顆粒中CP的流失。孫林等［14］和劉廣華等［32］分別研究報道添加1%黃芩顯著降低了紫花苜蓿和天然牧草顆粒中CP含量。本研究中，與對照相比，添加0.5%和1.0%黃芩顯著降低了CP含量，而添加1.5%黃芩處理，苜蓿草顆粒CP含量與對照無顯著差異，這可能是黃芩的CP含量（2.96%）較苜蓿低得多，添加一定量黃芩后，間接地降低了苜蓿草顆粒中CP的含量，這有待進一步通過試驗論證。牧草中ADF和NDF含量的多少是衡量其營養(yǎng)品質(zhì)的一個重要指標［50］。貯藏0～180 d，隨著貯藏時間的延長，NDF含量由42.94%顯著升高至68.24%，ADF含量由32.95%升高至51.31%，這與孫蕾蕾等［51-52］研究結(jié)果一致。冷凍貯藏240 d，其NDF和ADF含量顯著低于常溫貯藏240 d處理，進一步說明冷凍貯藏有利于草顆粒營養(yǎng)物質(zhì)的保存。本研究中，冷凍保存顯著降低了苜蓿草顆粒EE含量，可能是低溫破壞了脂肪酸的結(jié)構(gòu)，這有待進一步通過試驗核實。

4結(jié)論

在貯藏過程中，添加1.5%黃芩有利于保存苜蓿草顆粒V_B5、V_C和α-V_E含量。貯藏60 d及以上顯著降低了苜蓿草顆粒V_B1、V_B3、V_C和V_E含量；貯藏180 d后苜蓿草顆粒的CP含量顯著降低，而隨著貯藏時間（0～180 d）的延長，NDF和ADF含量顯著升高。冷凍貯藏240 d有利于保存苜蓿草顆粒中V_B1、V_B5、α-V_E和OM含量，而顯著降低DM、NDF和ADF含量。因此，1.5%黃芩添加劑有利于保存苜蓿草顆粒維生素含量，且常溫貯藏時間不宜超過60天。

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（責(zé)任編輯彭露茜）