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    杭州地區(qū)獻(xiàn)血者紅細(xì)胞意外抗體檢出率及分布情況的回顧性分析

    2022-12-29 00:12:19吳亞玲凌霞俞廣舒石潔董杰祝宏
    關(guān)鍵詞:凝集素回顧性獻(xiàn)血者

    吳亞玲 凌霞 俞廣舒 石潔 董杰 祝宏

    紅細(xì)胞相合或者相容性輸注是保障臨床用血安全的基礎(chǔ),其中關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是準(zhǔn)確鑒定獻(xiàn)血者血液的血型和意外抗體,這有助于提升血液安全[1,2]。研究顯示部分獻(xiàn)血者血液中存在意外抗體,它們可引起血型鑒定困難和交叉配血不合等情形,從而延誤患者治療;此外,輸注存在意外抗體的血漿,可引起潛在輸血不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)[2,3]。因此,降低獻(xiàn)血者意外抗體引起的潛在風(fēng)險(xiǎn)具有重要的臨床意義,其中的方法之一是在血站對(duì)獻(xiàn)血者血液進(jìn)行意外抗體篩選[3~5],并根據(jù)篩選情況對(duì)血液進(jìn)行相應(yīng)的處理。本次研究回顧性分析了我中心獻(xiàn)血者意外抗體檢出率及分布情況。現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 回顧性分析2018 年1 月至2020 年12 月來(lái)浙江省血液中心參與無(wú)償獻(xiàn)血的獻(xiàn)血者標(biāo)本,所有標(biāo)本經(jīng)過(guò)知情同意后留取EDTA 抗凝全血待用。本次研究經(jīng)過(guò)本中心倫理委員會(huì)審批。

    1.2 ABO 血型檢測(cè) 采用血型血清學(xué)技術(shù)進(jìn)行ABO 血型的正定型、反定型[6]??笰、抗B 試劑來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司;反定型A、B 細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)室自配,采用已知A、B 血型的3 人以上同型血液混合配制。正定型、反定型操作在Beckman Coulter PK7300 全自動(dòng)血型儀上進(jìn)行,嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,并根據(jù)V 型板中凝集或不凝集情況,由儀器判讀軟件直接指定獻(xiàn)血者ABO血型。

    1.3 RhD血型檢測(cè) 采用血型血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)[7],抗D(IgM 型)試劑來(lái)自英國(guó)Alba 生物技術(shù)有限公司。在Beckman Coulter PK7300 全自動(dòng)血型儀上進(jìn)行檢測(cè),嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作和結(jié)果判定。

    1.4 意外抗體的篩選 所有標(biāo)本采用Beckman Coulter PK7300 微孔板法(鹽水介質(zhì)法原理)進(jìn)行意外抗體篩選,篩選細(xì)胞為3 人以上的O 型混合紅細(xì)胞(自制);RhD陰性標(biāo)本同時(shí)采用微柱凝膠卡法(抗人球蛋白法原理)進(jìn)行意外抗體篩選,篩選細(xì)胞來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。

    1.5 意外抗體的確認(rèn) 對(duì)ABO 血型正反定型不一致或者意外抗體篩選陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行意外抗體確認(rèn)。方法包括鹽水試管法和微柱凝膠卡法[2,7],譜細(xì)胞來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司和荷蘭Sanquin 公司。依據(jù)獻(xiàn)血者血漿與譜細(xì)胞反應(yīng)的格局,判定抗體的特異性。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。設(shè)P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 獻(xiàn)血者意外抗體分布情況 2018~2020 年共篩選獻(xiàn)血者354 286 例,意外抗體陽(yáng)性獻(xiàn)血者133 例,陽(yáng)性率為0.04%。常見(jiàn)的意外抗體為抗M、抗D、冷凝集素,分別為33 例(24.81%)、30 例(22.56%)、28 例(21.05%)。其他檢出抗體包括抗D+抗C 為6 例(4.51%)、抗E 為5 例(3.76%)、抗Lea+抗Leb、抗P1 各為3 例(分別占2.26%)、抗N 為2 例(1.50%)、抗c、抗Lea、抗Leb各為1 例(分別占0.75%)。此外有20 例(15.04%)獻(xiàn)血者標(biāo)本發(fā)現(xiàn)存在同種抗體,因樣本量不足未能分析出抗體特異性。

    2.2 無(wú)意外抗體和有意外抗體兩組獻(xiàn)血者血型和性別分布情況見(jiàn)表1

    由表1 可見(jiàn),在ABO 血型中,無(wú)意外抗體獻(xiàn)血者的A 型血比例低于有意外抗體獻(xiàn)血者(χ2=10.13,P<0.05),而O 型比例則高于有意外抗體獻(xiàn)血者(χ2=10.60,P<0.05)。在Rh 血型中,無(wú)意外抗體獻(xiàn)血者RhD-型比例低于有意外抗體獻(xiàn)血者(χ2=66.49,P<0.05)。男性、女性獻(xiàn)血者中意外抗體陽(yáng)性率分別為0.02%(46/206702)、0.06%(87/147584),女性獻(xiàn)血者的意外抗體陽(yáng)性率高于男性獻(xiàn)血者(χ2=30.90,P<0.05)。

    2.3 有意外抗體的獻(xiàn)血者年齡分布 133 例有意外抗體的獻(xiàn)血者年齡范圍為18~57 歲,其中18~20 歲為19 例(14.29%)、21~25 歲為14 例(10.53%)、26~30 歲 為10 例(7.52%)、31~35 歲 為30 例(22.56%)、36~40 歲為22 例(16.54%)、41~45 歲為9 例(6.77%)、46~50 歲為17 例(12.78%)、51~55 歲為10 例(7.52%)、56~57 歲為2 例(1.50%)。

    2.4 有意外抗體的獻(xiàn)血者獻(xiàn)血次數(shù)情況 獻(xiàn)血次數(shù)范圍為1~40 次,1 次獻(xiàn)血比例占比45.86%,最多的獻(xiàn)血者獻(xiàn)血次數(shù)為40 次。具體獻(xiàn)血次數(shù)分布如下:1 次獻(xiàn)血為61 例(45.86%),2 次獻(xiàn)血為18 例(13.53%),3 次獻(xiàn)血為12 例(9.02%),4 次獻(xiàn)血為9 例(6.77%),5 次獻(xiàn)血為7 例(5.26%),6 次和7 次獻(xiàn)血均為5 例(3.76%),9 次、10 次、12 次、13 次獻(xiàn)血均為2 例(1.50%),11 次、14 次、15 次、17 次、18 次、19 次、36 次、40 次均為1 例(0.75%)。

    3 討論

    意外抗體曾被稱(chēng)為不規(guī)則抗體,是指正常ABO血型中抗A、抗B 之外的血型抗體。篩選獻(xiàn)血者血液中的意外抗體,可避免這種抗體引起的輸血不良反應(yīng),有助于提升血液安全[3~5]。目前,國(guó)外部分國(guó)家強(qiáng)制性要求對(duì)獻(xiàn)血者血液進(jìn)行意外抗體篩選,但國(guó)內(nèi)法規(guī)并不要求開(kāi)展篩選,在實(shí)際工作中部分血站從血液安全角度出發(fā),已開(kāi)始對(duì)獻(xiàn)血者血液進(jìn)行意外抗體篩選[2,5,8~10]。本次研究報(bào)道的意外抗體檢出率明顯低于朱紅芹等[11]報(bào)道的江蘇南京獻(xiàn)血人群意外抗體檢出率(0.15%)和Solanki 等[4]報(bào)道的印度人群檢出率(0.17%),這可能與獻(xiàn)血人群組成和特性以及篩選方法等有關(guān)。

    本次研究發(fā)現(xiàn)獻(xiàn)血者中常見(jiàn)的意外抗體為抗M、抗D、冷凝集素??筂 屬于MNS 血型系統(tǒng)的抗體[12],大多屬于IgM 性質(zhì)[13];部分抗M、抗N 在37 ℃有生物活性,可能引起直接和延遲輸血反應(yīng)??笵屬于Rh血型系統(tǒng)的抗體,可引起新生兒溶血病和輸血反應(yīng)[14]。本次研究中所有抗D 獻(xiàn)血者均為女性,這可能與其胎母免疫刺激有關(guān)[7]。冷凝集素是冷反應(yīng)型的紅細(xì)胞抗體,屬于IgM 型性質(zhì),通常情況下低效價(jià)冷凝集素沒(méi)有臨床意義。當(dāng)冷凝集素效價(jià)過(guò)高[15],可以導(dǎo)致交叉配血不合。此外應(yīng)注意到本次研究中有20 例標(biāo)本同種抗體特異性不明,這主要是由于標(biāo)本量不足而引起。目前,血站針對(duì)存在意外抗體的獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)的血液采取不同的處理策略,全血捐獻(xiàn)者通常紅細(xì)胞制備成洗滌紅細(xì)胞供臨床使用,含有抗體的血漿進(jìn)行報(bào)廢處理;而單采血小板獻(xiàn)血者根據(jù)其意外抗體的特性,選擇保留或者屏蔽獻(xiàn)血者的方式。

    個(gè)體受到紅細(xì)胞抗原免疫刺激后可產(chǎn)生意外抗體,主要途徑包括輸血、移植和妊娠等,部分個(gè)體存在天然的意外抗體。本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)女性獻(xiàn)血者的意外抗體陽(yáng)性率高于男性獻(xiàn)血者,這可能與女性存在妊娠的免疫刺激有關(guān);從ABO 血型分布角度,A 型血比例略高,其原因有待于進(jìn)一步分析。本次研究中絕大多數(shù)獻(xiàn)血者是第一次獻(xiàn)血時(shí)發(fā)現(xiàn)存在意外抗體,但是有超過(guò)1/2 的獻(xiàn)血者存在2 次或多次獻(xiàn)血,提示獻(xiàn)血者意外抗體產(chǎn)生存在動(dòng)態(tài)過(guò)程,因此宜每次獻(xiàn)血時(shí)均篩選意外抗體。

    綜上所述,本次研究回顧性分析了杭州地區(qū)獻(xiàn)血者意外抗體情況,發(fā)現(xiàn)意外抗體主要為抗M、抗D、冷凝集素;女性獻(xiàn)血者的意外抗體陽(yáng)性率高于男性獻(xiàn)血者,而無(wú)意外抗體獻(xiàn)血者和有意外抗體獻(xiàn)血者的ABO 血型分布、RhD-型比例存在差異。但本次研究由于采用鹽水介質(zhì)法原理進(jìn)行意外抗體篩選,存在漏檢IgG 型意外抗體的風(fēng)險(xiǎn)。此外有15.04%標(biāo)本未能分析出抗體特異性,可能影響抗體種類(lèi)的分布數(shù)據(jù)。今后將改進(jìn)篩選的方法,不斷完善意外抗體篩選策略。

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