孕康口服液聯(lián)合不同淋巴細胞主動免疫療法治療次數(shù)對不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)患者影響對比

葛莉萍 葛春梅 楊 麗 王俊平

周口婦產(chǎn)醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南省周口市 466000

習(xí)慣性流產(chǎn)(RSA)是一種臨床常見婦產(chǎn)科疾病，是指女性在同一伴侶情況下連續(xù)3次胎兒丟失。RSA發(fā)病原因極為復(fù)雜，近50%的患者發(fā)病原因不明確，臨床稱其為不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)(URSA)[1]。目前尚無治療URSA的明確方案。孕康口服液具有調(diào)節(jié)機體免疫力、緩解子宮收縮等作用，是一種臨床常用安胎藥物[2]。淋巴細胞主動免疫療法(LIT)是將女性健康配偶或第三方新鮮淋巴細胞注入URSA患者皮內(nèi)或皮下以達到調(diào)節(jié)機體免疫功能的新型免疫療法，其在URSA患者治療中發(fā)揮了重要作用[3]。但目前關(guān)于不同LIT治療次數(shù)對URSA患者預(yù)后的影響臨床仍缺乏大量循證依據(jù)。基于此，本文以我院68例URSA患者為觀察對象，探討孕康口服液聯(lián)合不同LIT治療次數(shù)對患者預(yù)后的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2018年1月—2020年1月在我院行孕康口服液聯(lián)合LIT治療的68例URSA患者納入本次研究，根據(jù)患者LIT治療次數(shù)不同將其分為對照組和觀察組。對照組35例，年齡24～33歲，平均年齡(28.25±4.06)歲；流產(chǎn)次數(shù)3～5次，平均流產(chǎn)次數(shù)(3.98±0.42)次；體質(zhì)量42～68kg，平均體質(zhì)量(53.05±5.75)kg；月經(jīng)周期27～33d，平均月經(jīng)周期(29.37±3.14)d。觀察組33例，年齡23～34歲，平均年齡(28.31±4.10)歲；流產(chǎn)次數(shù)3～5次，平均流產(chǎn)次數(shù)(3.88±0.37)次；體質(zhì)量41～70kg，平均體質(zhì)量(53.12±5.68)kg；月經(jīng)周期26～33d，平均月經(jīng)周期(29.29±3.22)d。兩組基本資料無顯著差異(P>0.05)。本研究已獲得院倫理委員會批準。

1.2 選擇標準 (1)納入標準：①符合《復(fù)發(fā)性流產(chǎn)診治的專家共識》[4]中的相關(guān)診斷標準，流產(chǎn)次數(shù)≥3次；②年齡20～35歲；③治療前封閉抗體(BA)檢測陰性，且LIT治療2次后BA檢測仍為陰性；④支原體、衣原體、TORCH病毒檢查陰性；⑤無自身免疫性疾??；⑥配偶精液常規(guī)檢查正常；⑦簽署知情同意書。(2)排除標準：①其他明確原因?qū)е碌牧鳟a(chǎn)；②染色體異常；③夫妻任一人伴有傳染性、感染性疾??；④RH陰性；⑤凝血功能、內(nèi)分泌功能異常；⑥伴有生殖系統(tǒng)異常；⑦惡性腫瘤；⑧精神障礙。

1.3 方法 兩組均接受孕康口服液聯(lián)合LIT治療。LIT治療：抽取配偶靜脈血30ml，離心獲取淋巴細胞后使用生理鹽水稀釋成濃度為(20～50)×106/ml的懸液1ml，于孕婦前臂外側(cè)行皮內(nèi)注射，注射后觀察局部反應(yīng)，若出現(xiàn)紅腫、水泡給予針對性處理。每3周治療1次，治療2次后復(fù)查BA。接受2次LIT治療后BA仍為陰性且拒絕繼續(xù)LIT治療，并備孕者為對照組，其余繼續(xù)治療的為觀察組，觀察組再接受LIT治療2次，無論BA是否轉(zhuǎn)陽均備孕。受孕后給予兩組孕康口服液(江西九華藥業(yè)有限公司，國藥準字Z10920062)保胎，20ml/次，3次/d，早、中、晚空腹口服，共用藥2周。

1.4 觀察指標 (1)妊娠成功率：記錄兩組未妊娠、流產(chǎn)、早產(chǎn)和足月產(chǎn)情況，統(tǒng)計兩組妊娠成功率(足月產(chǎn)和早產(chǎn)胎兒存活)。(2)免疫功能：取兩組患者治療前后空腹靜脈血，使用免疫熒光法檢測 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。(3)細胞因子：取兩組治療前后空腹靜脈血，使用酶聯(lián)免疫法檢查轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)水平。(4)統(tǒng)計兩組不良反應(yīng)發(fā)生率。

2 結(jié)果

2.1 兩組妊娠成功率比較 觀察組妊娠成功率為84.85%，顯著高于對照組的51.43%(χ2=8.668，P=0.003<0.05)，見表1。

表1 兩組妊娠成功率比較[n(%)]

2.2 兩組治療前后免疫功能比較 治療后，兩組CD4+、CD4+/CD8+水平均較治療前上升，而CD8+水平較治療前下降，且觀察組優(yōu)于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組治療前后免疫功能比較

2.3 兩組治療前后細胞因子水平比較 治療后，兩組TGF-β1、PIBF水平均較治療前上升，且觀察組高于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組治療前后細胞因子水平比較

2.4 兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 對照組1例患者出現(xiàn)注射部位紅腫，發(fā)生率為2.86%(1/35)；觀察組2例患者出現(xiàn)注射部位紅腫，發(fā)生率為6.06%(2/33)；兩組不良反應(yīng)發(fā)生率無統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=0.413，P=0.520>0.05)。

3 討論

隨著外界環(huán)境、生活飲食習(xí)慣以及生育規(guī)律的改變，近年來我國女性URSA發(fā)病率在不斷提高，URSA不僅會給女性和家庭帶來極大的心理壓力，且流產(chǎn)反復(fù)發(fā)作還會損傷子宮內(nèi)膜、破壞宮腔環(huán)境，從而進一步增大胚胎著床難度，最終導(dǎo)致女性不孕發(fā)生。既往臨床治療URSA主要以孕后保胎治療為主。孕康口服液是一種保胎中成藥物，常用于腎虛型及氣血虛弱證型的先兆流產(chǎn)及RSA患者，其具有健脾固本、養(yǎng)血安胎之功效，含有黃芪、山藥、續(xù)斷、當歸等藥物是傳統(tǒng)中醫(yī)安胎的常用藥物，而現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示孕康口服液可降低子宮收縮能力，還可調(diào)節(jié)性腺軸內(nèi)分泌，改善子宮內(nèi)環(huán)境，進而促進胚胎著床和胎兒發(fā)育[5]。

目前，臨床對于URSA的研究和認識不斷加深，越來越多臨床證據(jù)顯示免疫失調(diào)與URSA的發(fā)生存在密切聯(lián)系，懷孕后，孕婦免疫系統(tǒng)會對胚胎內(nèi)存在的抗原進行識別，并通過BA分泌起到抑制淋巴細胞作用，進而避免孕婦免疫系統(tǒng)攻擊胎兒，而URSA患者多存在不同程度的BA缺乏和T淋巴細胞比例失衡，紊亂的免疫功能會對胚胎進行攻擊，最終導(dǎo)致反復(fù)流產(chǎn)發(fā)生[6]。LIT治療現(xiàn)已成為臨床治療URSA的重要手段，其通過將配偶或健康志愿者的淋巴細胞注入女性體內(nèi)以激活其免疫系統(tǒng)，“預(yù)演”胚胎半異體移植過程，增加BA陽性率，建立母—胎免疫平衡，從而避免妊娠后孕婦免疫系統(tǒng)異常攻擊胚胎，保證妊娠持續(xù)進行[7]。梁仲珍等[8]的一項Meta研究亦證實LIT治療可有效提高URSA患者BA陽性率、妊娠率及活產(chǎn)率，但目前尚不完全明確LIT治療次數(shù)對URSA患者的影響。

在既往研究中，BA轉(zhuǎn)陽是臨床中止LIT治療、患者進行備孕的常用標準，但亦有研究顯示BA是否轉(zhuǎn)陽與URSA患者妊娠情況并無顯著相關(guān)性，且LIT治療次數(shù)較多會進一步加重患者免疫功能紊亂情況，從而影響受孕和妊娠[9]。本文以接受2次LIT治療后BA仍未轉(zhuǎn)陽患者為觀察對象，探討是否繼續(xù)接受LIT治療對URSA患者的影響。結(jié)果顯示繼續(xù)接受LIT治療的觀察組妊娠成功率及CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組高，而CD8+水平較對照組低(P<0.05)，這表明在一定次數(shù)范圍內(nèi)，增加LIT治療可進一步改善URSA患者免疫功能，對改善妊娠結(jié)局有積極作用。分析原因：這可能是因為在一定時間內(nèi)多次免疫刺激才可有效調(diào)節(jié)患者T淋巴細胞平衡，并產(chǎn)生足夠的BA，最終達到改善妊娠結(jié)局的目的。本文結(jié)果顯示增加LIT治療次數(shù)還可調(diào)節(jié)機體TGF-β1、PIBF合成及分泌，TGF-β1是一種免疫抑制因子，其可通過抑制淋巴細胞增殖減輕免疫排斥反應(yīng)，從而發(fā)揮抗流產(chǎn)作用；而PIBF是一種孕激素調(diào)節(jié)劑，其不僅能反映女性孕酮水平，還可調(diào)節(jié)母體免疫微環(huán)境，保證胎兒免疫系統(tǒng)形成和妊娠持續(xù)[10]。而觀察組治療后TGF-β1、PIBF水平上升，則表明增加LIT治療次數(shù)能有效改善URSA患者母胎免疫環(huán)境，從而提高臨床治療效果。本文中兩組患者不良反應(yīng)均以注射部位紅腫為主，紅腫未經(jīng)治療自行緩解，且兩組不良反應(yīng)發(fā)生率無顯著差異，表明增加治療次數(shù)并不會增大治療風(fēng)險。

綜上所述，增加LIT治療次數(shù)聯(lián)合口服孕康口服液可有效調(diào)節(jié)URSA患者免疫功能和TGF-β1、PIBF表達，能有效改善患者妊娠結(jié)局，可資臨床借鑒。