斷奶仔豬豬瘟單針免疫的臨床應(yīng)用及效果分析

張聚民，卞蘇舒，蘇 鵬，高連軍

(1.杭州市臨安區(qū)畜牧農(nóng)機(jī)發(fā)展中心，杭州 臨安 311300；2.杭州市臨安區(qū)河橋動物疫病診療所)

豬對豬瘟病毒(CSFV)具有較強(qiáng)的易感性[1]，無免疫力的豬群，一旦感染，通常引起大規(guī)模急性爆發(fā)，發(fā)病率和死亡率超過80%，損失十分嚴(yán)重[2]。全面實施疫苗免疫計劃，能有效地控制豬瘟的大規(guī)模爆發(fā)流行，但散發(fā)流行依然存在，甚至出現(xiàn)局部爆發(fā)[3]。臨安區(qū)規(guī)模豬場豬瘟一直實行程序化多次免疫，但即使這樣，臨床上慢性感染或非典型性感染也較為常見。在當(dāng)前豬病防控形勢下，探索豬瘟單針免疫而實現(xiàn)長久保護(hù)在生產(chǎn)上具有重要意義，為此，我們對斷奶仔豬進(jìn)行豬瘟單針免疫嘗試，并測定其不同日齡免疫抗體水平，驗證單針免疫的可行性。

1 材料與方法

1.1試驗動物 選擇臨安區(qū)某豬場，該場生產(chǎn)整體穩(wěn)定，豬瘟免疫長期使用國產(chǎn)同一品牌豬瘟細(xì)胞弱毒苗，近兩年該場商品豬豬瘟二免抗體合格率80%以上，符合國家免疫要求，保育豬偶見持續(xù)慢性腹瀉致僵現(xiàn)象。本試驗豬選取父本為同一杜洛克公豬，母本為經(jīng)產(chǎn)長加母豬，于2021年8月9日所產(chǎn)的4窩健康仔豬共52頭作為試驗基礎(chǔ)群。

1.2試驗設(shè)計 25日齡斷奶，30日齡按公母比例相近，體重接近的原則從基礎(chǔ)群選取仔豬40頭分成兩組，試驗組和對照組各20頭(表1)，空腹稱重記錄，采集血樣2.5 mL/頭，而后試驗組和對照組分別注射1頭份豬瘟弱毒苗(A)和2頭份豬瘟弱毒苗(B)。于60日齡采血(2.5 mL/份)檢測，采血后試驗組注射生理鹽水2 mL，對照組注射豬瘟疫苗(B)4頭份(2 mL)；于90日齡和180日齡分別采血檢測，每份2.5 mL，并在180日齡兩組空腹秤重。

試驗組豬瘟疫苗(A)：江蘇勃林格殷格翰生物制品有限公司生產(chǎn)，獸藥生字101597550批號FC2020002，(C株，PK/WRL傳代細(xì)胞源)。

對照組豬瘟疫苗(B): 某實業(yè)股份有限公司生物藥廠生產(chǎn)，獸藥生字140401115批號20201217，(細(xì)胞源)。

表1 試驗分組

1.3試驗環(huán)境及飼養(yǎng)管理 試驗豬在同一育肥舍飼養(yǎng)，試驗期間其飼喂方式、飼料種類、飼養(yǎng)密度、溫度、通風(fēng)等條件完全一致，每欄10頭，密度0.83頭/m2，溫度在26-30 ℃之間，通風(fēng)良好；保育料喂至90日齡，而后改用育肥料至180日齡；試驗期間兩組皆偶有腹瀉、咳嗽，采用口服或注射方式藥物治療，預(yù)后良好；除豬瘟免疫外其它免疫完全一致，其主要免疫有口蹄疫、偽狂犬、圓環(huán)病毒等。

1.4血樣采集及免疫抗體檢測 仔豬分別于30、60、90、180日齡時，用7 #采血器采集全血2.5 mL，離心分離血清，用ELISA方法檢測豬瘟抗體。

豬瘟抗體判定標(biāo)準(zhǔn)：陽性PI≥0.4，陰性PI<0.4。

豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒：北京金諾百泰生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號20210208。

1.5統(tǒng)計分析 采用Excel軟件整理試驗數(shù)據(jù)，用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析，P<0.05為差異顯著。*代表P<0.05，**代表P<0.01，***代表P<0.001。

2 結(jié)果與分析

2.1免疫后仔豬體重變化監(jiān)測與分析 30日齡的仔豬免疫前稱重，并于免疫后150 d(即為180日齡)時再次稱重，然后進(jìn)行比較。試驗結(jié)果表明試驗組與對照組仔豬在30日齡和180日齡的平均體重均沒有顯著性差異(P>0.05)(圖1)。通過對兩組仔豬體重的變異系數(shù)分析顯示，在180日齡時試驗組仔豬體重的變異系數(shù)小于對照組，說明經(jīng)過免疫后試驗組仔豬群體體重均一度更高(表2)。

圖1 不同日齡仔豬體重差異性分析

表2 不同日齡仔豬體重均勻度分析

2.2仔豬免疫后豬瘟抗體水平

2.2.1母源抗體 免疫前即30日齡時試驗組與對照組仔豬豬瘟母源抗體PI值均小于0.4，抗體水平檢測呈陰性，且試驗組與對照組不存在顯著性差異(P>0.05)，故試驗?zāi)冈纯贵w干擾差異性影響較?。?/p>

2.2.2免疫抗體水平 對兩組仔豬進(jìn)行豬瘟抗體水平的檢測,結(jié)果表明在免疫后的各階段試驗組與對照組仔豬豬瘟抗體PI值均大于0.4，說明抗體水平檢測皆呈陽性，但試驗組抗體上升更快，高位平穩(wěn)維持時間更長，且抗體平均水平試驗組均明顯高于對照組(圖2)。同時在60日齡和90日齡時試驗組抗體水平顯著性高于對照組(P<0.001)；但在180日齡時試驗組與對照組抗體水平不存在顯著性差異(P>0.05)(圖3)。

圖2 不同免疫組仔豬豬瘟抗體檢測結(jié)果

圖3 不同免疫組仔豬豬瘟抗體平均值加減標(biāo)準(zhǔn)差

2.2.3抗體的合格率和均一度 對兩組仔豬免疫后抗體的合格率和均一度進(jìn)行分析，結(jié)果表明試驗組仔豬免疫后不同日齡抗體合格率均為100%，而對照組仔豬在60、90和180日齡時抗體合格率分別為80%、100%和90%；此外試驗組仔豬在60、90和180日齡時群體抗體水平的變異系數(shù)均明顯小于對照組，從而說明試驗組仔豬免疫后整體的抗體水平均一度較好，均維持在較高水平(表3)。

表3 不同免疫組仔豬豬瘟抗體合格率及均勻度

2.3經(jīng)濟(jì)效益分析 從表4可見綜合人工成本因素，試驗組相比對照組節(jié)約成本1.2元/頭，對規(guī)模豬場而言使用單針免疫方法有較好地節(jié)約人工成本的效果。

表4 疫苗使用成本分析

3 討論

豬瘟是影響生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要疫病，預(yù)防該疾病的有效措施是接種疫苗，而抗體監(jiān)測是評價疫苗接種效果的重要手段之一[4]。本研究結(jié)果顯示仔豬30日齡時豬瘟抗體水平即為免疫前仔豬的母源抗體的水平，試驗組和對照組合格率均為0，說明在30日齡時仔豬的母源抗體基本耗盡，不存在對本試驗產(chǎn)生干擾。試驗組與對照組免疫后豬瘟抗體合格率均高于國家要求的70%合格率，試驗組單針免疫在60日齡時就可以使整體的合格率達(dá)到100%，且群體有很高的抗體整齊度。而對照組在60日齡時豬瘟抗體合格率為80%，未達(dá)到涂長春[5]提出的豬瘟群體免疫保護(hù)率高于85%時才能避免豬瘟發(fā)生的標(biāo)準(zhǔn)。對照組二次免疫之后即仔豬90日齡和180日齡抗體合格率分別為100%和90%，說明二次免疫與一次免疫相比,免疫效果有了明顯的提升。而對于試驗組的免疫疫苗，一次免疫后豬瘟抗體就可以達(dá)到理想的水平，且群體的抗體水平整齊度較高，說明對于豬瘟的防控來說，疫苗的選擇非常重要，這與李滿等[6]的研究結(jié)論一致。

本研究表明,選擇合適的豬瘟疫苗對當(dāng)前的豬場僅僅實施一次免疫即可使免疫豬群獲得較高和整齊的免疫抗體水平,有效地防控豬瘟疫病的發(fā)生，同時也可減少免疫次數(shù)，降低人力成本和生物安全風(fēng)險，這在生產(chǎn)實際中具有較大的推廣意義。