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    東北地區(qū)桑黃段木栽培技術(shù)

    2022-12-17 08:12:20杜忠偉魏森清胡志強(qiáng)
    食藥用菌 2022年6期
    關(guān)鍵詞:桑黃雜菌菌種

    杜忠偉 魏森清 胡志強(qiáng) 王 旭 李 健 王 鑫*

    (1.延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院,吉林 龍井 133400;2.延邊興旺生物科技有限公司,吉林 汪清 133100)

    桑黃是桑黃屬(Sanghuangporus)真菌的統(tǒng)稱。該屬目前已知有桑樹桑黃Sanghuangporus sanghuang、楊樹桑黃Sanghuangporus vaninii、暴馬桑黃Sanghuangporus baumii等14 個(gè)種[1,2]。桑黃藥用歷史悠久,在《藥性論》《本草綱目》和《神農(nóng)本草經(jīng)》等著作中均有桑黃及其藥效的明確記載,也被現(xiàn)代人稱為“森林黃金”[3]?,F(xiàn)代研究表明,桑黃主要活性成分有多糖類、多酚類和萜類等,具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎抑菌、降血糖等藥理作用[4,5]。

    隨著桑黃的藥用功效逐漸被人們所認(rèn)識(shí),近年來我國(guó)人工栽培桑黃產(chǎn)業(yè)得到快速發(fā)展,目前人工栽培的主要種類為楊樹桑黃(S.vaninii),栽培方式以段木栽培和代料栽培為主。但是因栽培菌種、栽培地區(qū)氣候、栽培基質(zhì)及栽培模式的不同,尚沒有統(tǒng)一的栽培標(biāo)準(zhǔn)。因地制宜開展桑黃人工栽培技術(shù)研究,是促進(jìn)桑黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要途徑。

    東北地區(qū)受溫帶季風(fēng)氣候影響,四季分明,夏季高溫多雨,冬季寒冷干燥,具有人工栽培桑黃的優(yōu)越氣候條件。夏秋季節(jié)是野生食藥用菌的高發(fā)期,也是人工栽培桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)的最佳時(shí)期,實(shí)踐證明適當(dāng)?shù)臏夭畲碳び欣谏|S子實(shí)體形成。本文對(duì)東北地區(qū)段木栽培桑黃的栽培設(shè)施要求、各級(jí)菌種制作、菌段制作、出黃管理、病蟲害防控等各環(huán)節(jié)技術(shù)進(jìn)行集成,旨在為桑黃生產(chǎn)者提供參考,為桑黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展做出貢獻(xiàn)。

    桑黃人工段木栽培流程:母種制作→原種制作→栽培種制作→菌段制作→菌段開口→催芽→出黃管理→采收。

    1 栽培設(shè)施要求

    1.1 場(chǎng)地選擇

    東北地區(qū)桑黃人工栽培通常在室外大棚內(nèi)進(jìn)行,搭棚場(chǎng)地一般選在遠(yuǎn)離村莊的林區(qū),周圍有水源,場(chǎng)地土質(zhì)保水性好、地勢(shì)平坦或稍有坡度。

    1.2 大棚搭建及消毒

    大棚一般采用鋼架結(jié)構(gòu),選擇有利于通風(fēng)的朝向搭建,要求棚長(zhǎng)不超過30 m,跨度10 m 左右,棚高2.6 m,大棚兩頭開寬2 m 的門,兩側(cè)設(shè)卷膜桿留通風(fēng)口,有利于通風(fēng)管理。大棚塑料膜外通常使用兩層遮陽網(wǎng)覆蓋,遮陽網(wǎng)遮陽率外層用75%,內(nèi)層用95%,使得棚內(nèi)光照強(qiáng)度在500 lx 左右,以利于桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)。在大棚兩側(cè)挖排水溝,防止棚內(nèi)積水。

    大棚在覆蓋塑料膜和遮陽網(wǎng)前,內(nèi)部的栽培場(chǎng)地一般是翻耕后陽光曝曬2 天,然后鋪上厚約5 cm的河沙或風(fēng)化砂。棚內(nèi)可作成3 個(gè)寬約2.8 m、長(zhǎng)與棚等長(zhǎng)的畦,畦與畦之間留有過道。大棚搭建好后需要對(duì)地面及棚內(nèi)進(jìn)行消毒,通常在地面撒上一層生石灰,并使用保菇王消毒粉(主要有效成分為二氯異氰尿酸鈉,使用量為8~10 g/m3),對(duì)大棚進(jìn)行熏蒸。

    2 桑黃人工段木栽培菌種生產(chǎn)流程

    2.1 菌種生產(chǎn)

    (1)母種(一級(jí)種,圖1)制作。選擇野生桑黃馴化后的種性清楚、農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的菌種作為種源。桑黃母種培養(yǎng)基可選用①PDA 培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g(去皮切成1 cm立方塊,加水煮沸15 min過濾取汁液)、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、瓊脂粉15 g、純凈水1 000 mL,pH 自然;②馬鈴薯木屑綜合培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g(處理方法同上)、木屑20 g(水煮30 min 過濾取濾液)、葡萄糖20 g、瓊脂粉15 g、水1 000 mL,pH自然。

    圖1 桑黃母種

    滅菌:制作好的培養(yǎng)基裝入試管,高溫高壓121 ℃下保持30 min,待溫度降至80 ℃左右時(shí),取出試管擺成斜面冷卻,3~5 天后觀察,確保無雜菌出現(xiàn)方可進(jìn)行母種生產(chǎn)。

    母種擴(kuò)繁:挑選無雜菌污染的菌種,將菌絲尖端接種至斜面試管中,置于30 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2 天,待菌絲萌發(fā)后將溫度調(diào)至28 ℃,繼續(xù)培養(yǎng)約10 天即可用于轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁,1 支試管通??梢詳U(kuò)繁30 支母種。

    培養(yǎng):接種后的試管放入28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)期間每天檢查并做好記錄,如發(fā)現(xiàn)有雜菌污染的試管須及時(shí)挑出。

    (2)原種(二級(jí)種,圖2)制作??刹捎霉攘E囵B(yǎng)基或木屑培養(yǎng)基。谷粒培養(yǎng)基:選用籽粒飽滿、無雜質(zhì)、無霉變的玉米?;蛐←溋#们逅?~7 天,期間每天更換一次清水以防變質(zhì),待谷粒充分吸水后,撈出加入5%左右的含水量為60%的木屑拌勻,再裝入500 mL 的透明玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶滅菌。

    圖2 桑黃原種

    木屑培養(yǎng)基:配方為優(yōu)質(zhì)新鮮柞木屑80%、麥麩16%、黃豆粉2%、蔗糖1%、石膏1%,使用篩料機(jī)將木屑雜質(zhì)去除,干料按比例混合均勻后加水?dāng)嚢?,使含水量?0%~65%后裝瓶滅菌。

    滅菌接種:一般采用常壓滅菌,105 ℃下保持8 h;高溫高壓滅菌為121 ℃下保持2 h。滅菌完畢后出鍋冷卻,在無菌接種室內(nèi)超凈工作臺(tái)上進(jìn)行接種,通常1 支試管母種可以接5~6 瓶原種。

    培養(yǎng):培養(yǎng)室保持溫度在28 ℃,暗培養(yǎng),每天早、晚各通風(fēng)20 min,30 天左右菌絲即可長(zhǎng)滿。

    (3)栽培種(三級(jí)種,圖3)制作。培養(yǎng)基配方:優(yōu)質(zhì)新鮮柞木屑82%、麥麩14%、黃豆粉2%、生石灰1%、石膏1%。菌袋選擇折徑16.1 cm、長(zhǎng)37 cm、厚0.005 cm 的聚乙烯塑料袋,使用裝袋機(jī)裝料,每袋裝濕料1.4 kg 左右,裝好后料高約21 cm,中心孔通透。使用窩口機(jī)向內(nèi)窩口,深3~4 cm,以能塞住菌塞又不碰到培養(yǎng)料為度。滅菌方法與原種相同。

    圖3 桑黃栽培種

    接種培養(yǎng):在無菌接種室內(nèi)的接種箱或超凈工作臺(tái)下完成接種,1 瓶原種可以接50~60 瓶栽培種;培養(yǎng)方法與原種相同。

    2.2 栽培菌段制作

    裝袋:選擇直徑4~12 cm、長(zhǎng)18~20 cm 的新鮮柞木段,將木段劈開后樹皮朝外裝入折徑24 cm、長(zhǎng)45 cm、厚0.014 cm 的聚乙烯塑料袋(重14 g)中,制成直徑16 cm 的圓柱形緊實(shí)木捆。裝袋時(shí)木塊間避免有大的縫隙,并防止扎破料袋,以免造成后期易感染雜菌。向裝好的袋內(nèi)加入150~200 g 蒸餾水,使袋內(nèi)含水量達(dá)60%左右,再用尼龍繩扎緊封口。

    滅菌:采用高壓滅菌,溫度118~119 ℃保持16 h。滅菌后置于冷卻室內(nèi)待冷卻后接種。

    接種:在接種室內(nèi)使用接種箱或在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。先將栽培種袋表用75%的酒精擦拭消毒,再剪去袋口,將菌種搗碎成直徑為1 cm 的顆粒,倒入木段中,使菌種完全覆蓋木段表面,然后封口,完成接菌。

    培養(yǎng):將接好種的栽培段轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)層架上避光培養(yǎng)(圖4),前一周溫度設(shè)定為30 ℃,待菌種定植后降到28 ℃,期間根據(jù)培養(yǎng)室實(shí)際情況控制通風(fēng)次數(shù),經(jīng)80~90 天培養(yǎng),菌絲可長(zhǎng)滿袋。

    圖4 菌段培養(yǎng)

    3 菌段轉(zhuǎn)色

    菌絲滿袋后的桑黃菌段,表面呈淡黃色或黃色,菌絲和菌袋貼合不夠緊密,此時(shí)菌絲不夠成熟,須進(jìn)行轉(zhuǎn)色管理。通過打開門窗和培養(yǎng)室燈光增加散射光照射的方法,待菌段表面菌絲老化,形成紅棕色菌皮及肉眼可見的瘤狀突起,菌袋收縮、緊實(shí)有彈性時(shí),即完成轉(zhuǎn)色(圖5)。這一過程通常需要15~20 天,只有轉(zhuǎn)色好的菌段才可以進(jìn)入大棚,進(jìn)行開口出菇。

    圖5 菌段轉(zhuǎn)色前后顏色變化

    4 菌段開口

    根據(jù)擺放的方式,菌段開口的方法有兩種,即底部開口和頂部開口。

    底部開口:將轉(zhuǎn)色好的菌段扎口處朝上直立擺放,使用75%酒精對(duì)菌段和開口刀具進(jìn)行消毒,在菌段底部距離邊緣2~3 cm 處開直徑為5 cm 的圓形口,便于菌段吸收水分;在菌段上部1/3 處,均勻開3個(gè)長(zhǎng)5~8 cm、寬1~2 cm的拱橋形出黃口,將開好口的菌袋在大棚內(nèi)呈“品”字形擺放,間距10~12 cm,底部埋入深約2 cm 的沙土,周邊壓實(shí),防止桑黃從底部長(zhǎng)出,徒耗菌段養(yǎng)分。

    頂部開口:將菌段頂部扎口處用剪刀剪去,倒立擺放,其他處理同底部開口法。

    5 催芽

    催芽即桑黃開口處菌絲恢復(fù)并長(zhǎng)出原基的過程。高溫高濕有利于開口處菌絲恢復(fù),桑黃菌段開口后,在生產(chǎn)中通常采取外罩黑色塑料袋的方法進(jìn)行催芽(圖6),既可防止開口處菌絲干燥死亡,又可避免水直接噴濺到開口處,影響菌絲恢復(fù)。保持棚內(nèi)空氣濕度在85%~90%,關(guān)閉棚門及通風(fēng)口,期間需要抖動(dòng)塑料袋,防止缺氧導(dǎo)致桑黃原基畸形。待桑黃子實(shí)體長(zhǎng)出0.5~1 cm 時(shí)可以摘去塑料袋,進(jìn)行出黃管理。

    圖6 開口后套袋催芽

    6 出黃管理

    出黃階段(圖7)主要通過覆蓋遮陽網(wǎng)、控制噴水和通風(fēng)的頻次調(diào)節(jié)大棚內(nèi)溫濕度和二氧化碳濃度等環(huán)境因素。桑黃出黃適宜溫度在26~28 ℃,過高易滋生雜菌;濕度宜80%~90%,最好采用霧化設(shè)備噴水,使達(dá)到地面濕潤(rùn)不積水、菌段和子實(shí)體有彈性的效果,避免子實(shí)體表面積水影響品相。

    圖7 出黃階段

    通風(fēng)次數(shù)和時(shí)間根據(jù)季節(jié)進(jìn)行調(diào)控,一般每天早晚各通風(fēng)10 min。段木栽培桑黃按季節(jié)分階段管理,每年8 月下旬至10 月中旬的夏秋時(shí)節(jié),桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)速度最快,是出黃管理的關(guān)鍵時(shí)期,直接影響桑黃產(chǎn)量。

    6.1 春季管理

    4 月末至5 月初,越冬后的桑黃開始進(jìn)行噴水管理,此時(shí)菌段失水較嚴(yán)重,采用少噴勤噴的方法,使菌段緩慢吸水并恢復(fù)生長(zhǎng)。又由于此時(shí)期棚內(nèi)地溫較低,晝夜溫差大,不利于子實(shí)體生長(zhǎng),因此每天要加強(qiáng)通風(fēng),避免子實(shí)體表面積水而產(chǎn)生綠色木霉等雜菌。

    6.2 夏季管理

    6 月隨著氣溫升高,大棚內(nèi)地溫也升高,桑黃子實(shí)體進(jìn)入生長(zhǎng)期,此時(shí)需要增加噴水次數(shù)和噴水量,噴水量以保證地面土質(zhì)有充足水分又不積水為度。但由于氣溫不穩(wěn)定,遇到氣溫較低的陰雨天時(shí),不宜噴水,需打開通風(fēng)口加大通風(fēng)量,防止雜菌產(chǎn)生。進(jìn)入伏天后,空氣潮濕悶熱,桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)緩慢,極易產(chǎn)生雜菌,此時(shí)大棚須增覆遮陽網(wǎng)、增加噴水,對(duì)菌段進(jìn)行降溫,大棚通風(fēng)口保持長(zhǎng)時(shí)間打開狀態(tài)。

    6.3 秋季管理

    秋季是桑黃生長(zhǎng)最佳時(shí)期。每年9 月以后,天氣逐漸涼爽,晝夜溫差較大,通過去掉大棚外一層遮陽網(wǎng),菌段上加蓋1 層遮陽網(wǎng),達(dá)到增加棚內(nèi)溫度、減小光照強(qiáng)度的目的。此時(shí)減少噴水次數(shù),通常白天噴水1~2 次,每次5 min。

    6.4 冬季管理

    冬季桑黃子實(shí)體進(jìn)入休眠期,當(dāng)室外溫度接近0 ℃時(shí),對(duì)棚內(nèi)地面澆透水,然后封閉大棚。期間做好大棚的加固工作,防止大風(fēng)和大雪破壞大棚。

    7 采收及儲(chǔ)存

    段木栽培桑黃通常培養(yǎng)至第三年時(shí)進(jìn)行采收,秋季當(dāng)桑黃菌蓋邊緣顏色變深、停止生長(zhǎng)并放射出大量的孢子(菌蓋表面可見黃綠色粉末)時(shí),標(biāo)志著桑黃子實(shí)體成熟。此時(shí)可停止噴水,打開大棚門及通風(fēng)口進(jìn)行通風(fēng),降低棚內(nèi)濕度,晾干子實(shí)體表面水分,經(jīng)一周左右即可進(jìn)行采收。采收后先清理子實(shí)體表面雜物,在晾曬場(chǎng)進(jìn)行初步晾曬,隨后置于烘干爐,烘干溫度設(shè)定40 ℃、45 ℃、50 ℃各1~2 h。裝爐時(shí)不可劃傷、弄臟子實(shí)體腹面,保持其色澤。烘干后按照桑黃子實(shí)體的品質(zhì)進(jìn)行等級(jí)分類,裝入自封袋內(nèi),置于通風(fēng)干燥室內(nèi)密封保存。

    8 病蟲害防治

    8.1 病害

    桑黃人工栽培過程中,病害主要為侵染性病害,發(fā)生在菌種培養(yǎng)期和出黃期間。其中,以青霉、木霉、黃曲霉為主的雜菌污染(圖8)對(duì)桑黃影響最大,發(fā)生在生產(chǎn)各個(gè)環(huán)節(jié),一旦發(fā)現(xiàn)要及時(shí)挑出,避免其成熟后產(chǎn)生孢子四散傳播,加重危害。并加強(qiáng)培養(yǎng)室和大棚的通風(fēng),使用75%酒精對(duì)發(fā)生區(qū)域進(jìn)行噴灑消毒。

    圖8 霉菌侵染桑黃子實(shí)體

    造成雜菌侵染的因素有多種,包括菌種不純,滅菌不徹底,接種環(huán)境不清潔、操作不規(guī)范,培養(yǎng)室消毒不徹底,菌袋有微孔等。發(fā)生在菌袋內(nèi)部的雜菌難以處理。出黃期間桑黃子實(shí)體受到雜菌侵染時(shí),可通過改變環(huán)境條件和科學(xué)使用藥品殺滅雜菌,同時(shí)對(duì)發(fā)生區(qū)域進(jìn)行全面消殺。

    8.2 蟲害

    蟲害主要發(fā)生在桑黃出黃階段,以菌蚊、夜蛾幼蟲及蛞蝓為主。其中,夜蛾幼蟲對(duì)桑黃的危害最大(圖9):成蟲將卵產(chǎn)到子實(shí)體腹面,幼蟲孵出后直接啃食子實(shí)體,使腹面出現(xiàn)傷口,乃至被吃光,對(duì)于剛長(zhǎng)出的桑黃甚至可以啃食殆盡。幼蟲為害時(shí),可在桑黃子實(shí)體的下方地面上看到黑色顆粒狀幼蟲糞便。

    圖9 被夜蛾幼蟲啃噬后的桑黃子實(shí)體腹面

    蟲害防治措施有抓好環(huán)境衛(wèi)生,清除大棚周圍雜草,使用黃色粘蟲板或蚊蟲燈誘殺成蟲,及時(shí)捕捉幼蟲,在棚外拉防蟲網(wǎng)阻擋害蟲進(jìn)入等[6]。

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