牡丹中藥潔面乳的制備及其性能研究*

張海麗，唐成名，蘇鈺，白振環(huán)，王文慧

(菏澤學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院，山東 菏澤 274015)

引言

目前，我國(guó)記載的害螨有500多種[1]，蠕形螨寄生于人和哺乳動(dòng)物的毛囊和皮脂腺內(nèi)，寄生于人體的有兩種，即毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨.毛囊蠕形螨感染率明顯高于皮脂蠕形螨，混合性皮膚感染率較高[2].螨蟲會(huì)導(dǎo)致人皮膚過敏，出現(xiàn)紅斑、瘙癢、毛囊炎等癥狀.

牡丹皮化學(xué)成分包括酚及酚苷類、單萜、黃酮類和多糖類等[3]，牡丹皮具有抗螨蟲[4]、抗菌、抗炎等藥理作用[5].丹皮始載于《本經(jīng)》具有清熱涼血、活血化瘀的功效，為歷版《中華人民共和國(guó)藥典》收載品種[6].丹皮酚是一種小分子酚類化合物化學(xué)名稱2-羥基-4-甲氧基苯乙酮[7]，一般認(rèn)為丹皮酚是牡丹皮中最主要的活性成分[8].現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，丹皮酚具有抗炎、抗自由基等作用[9-10]；丹皮酚還具有血管內(nèi)皮保護(hù)作用[11]，在香料、化工領(lǐng)域具有廣泛用途[12]，廣泛用于潔面乳、美容霜、孕婦防螨衣物、手洗液[13]等產(chǎn)品.

本文制備的中藥潔面乳以自由基衰老學(xué)說[14]為基礎(chǔ)，通過添加丹皮酚為功效成分，既能捕獲皮膚表層產(chǎn)生的自由基，延緩皮膚衰老還具有抑菌的功能.丹皮酚的常用提取工藝有蒸餾法、煎煮法及溶劑浸取法等[15].本實(shí)驗(yàn)采用乙醇回流提取法，以椰油酰胺丙基甜菜堿、烷基糖苷、珠光素等為表面活性劑[16]，制備性能溫和的中藥潔面乳，篩選出最佳配方.

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器

1.1.1實(shí)驗(yàn)材料

所用實(shí)驗(yàn)材料如表1所示.

表1 實(shí)驗(yàn)材料

續(xù)表

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

所用實(shí)驗(yàn)儀器如表2所示.

表2 實(shí)驗(yàn)儀器

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 丹皮酚提取工藝流程

丹皮酚的提取工藝流程為：洗凈牡丹根皮→干燥牡丹根皮→粉碎機(jī)粉碎→得到丹皮粉末→稱取18 g丹皮粉末→加150 mL蒸餾水到燒杯中→混合攪拌均勻→加入到蒸餾燒瓶中→水蒸汽蒸餾→冷藏蒸餾液→無(wú)水乙醇溶解→冷藏→無(wú)水乙醇復(fù)溶三次→得到干燥丹皮酚晶體.

1.2.2 中藥潔面乳的制備

中藥潔面乳配方如表3所示.

表3 中藥潔面乳配方

準(zhǔn)確稱量脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉、椰子油酰胺丙基甜菜堿、烷基糖苷、乙二醇二硬脂酸、尿囊素、乙二胺四乙酸二鈉和水置于燒杯中用恒溫水浴鍋邊攪拌邊加熱至75 ℃,移開恒溫水浴鍋繼續(xù)攪拌到原料溶解冷卻至55 ℃，加入庫(kù)拉索蘆薈凝膠凍干、二甲基二烯丙基氯化銨，繼續(xù)攪拌冷至40 ℃加入香精、少量防腐劑，繼續(xù)冷卻至室溫加入丹皮酚，最后用一水合檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為5.6，使用懸臂式高速攪拌器使其充分混合均勻，繼續(xù)攪拌2.5 h即成成品.

1.2.3 LB固體培養(yǎng)基

LB固體培養(yǎng)基配方如表4所示.

表4 LB固體培養(yǎng)基配方

LB液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基配方相同，不加瓊脂粉.LB固體培養(yǎng)基配制：使用電子天平稱取上述藥品.用玻璃棒攪拌使其充分溶解，加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為7.4.加入瓊脂粉，1 000 mL培養(yǎng)基被分為5瓶，用報(bào)紙做嚴(yán)格密封,在121 °C，經(jīng)過20 min，壓力為0.12 MPa.

1.2.4 細(xì)菌的培養(yǎng)

將滅菌后的培養(yǎng)基放到超凈工作臺(tái)中.超凈工作臺(tái)使用前要用75%酒精擦拭一遍，并打開紫外殺菌30 min左右，防止雜菌進(jìn)入.在-80 ℃醫(yī)用低溫冰箱中取出革蘭氏陽(yáng)性菌菌種和革蘭氏陰性菌菌種，將兩種菌分別加入滅完菌的液體培養(yǎng)基中，在空氣浴振蕩器37 ℃下200 r/min培養(yǎng)12～16 h，將培養(yǎng)完的種子菌按照1∶1 000的比例分別放入液體培養(yǎng)基中，在空氣浴振蕩器37 ℃下200 r/min培養(yǎng)3～5 h.

1.2.5 雙層固體培養(yǎng)基的制備

分別將等量擴(kuò)大培養(yǎng)后的菌液倒入離心管，在高速冷凍離心機(jī)內(nèi)離心5 min，轉(zhuǎn)速 5000 r/min，倒掉上清液，加無(wú)菌水溶解，再取新的離心管稀釋，利用紫外分光光度法，在波長(zhǎng)600 nm條件下測(cè)OD值，將OD值調(diào)整到1.0左右，再將菌液按照1∶1 000加入到固體培養(yǎng)基中，在滅菌的培養(yǎng)皿中倒入薄薄一層不加菌的固體培養(yǎng)基，凝固后倒入厚于第一層的加入菌液的固體培養(yǎng)基，等待凝固.

1.2.6 抑菌實(shí)驗(yàn)

用滅完菌的打孔器在培養(yǎng)基上打四個(gè)相同的孔，依次加入50 μL、100 μL、150 μL、200 μL中藥潔面乳產(chǎn)品，并且設(shè)置無(wú)菌水對(duì)照組，依次加入50 μL、100 μL、150 μL、200 μL無(wú)菌水，并做好標(biāo)記，檢測(cè)產(chǎn)品抑菌性能.上述步驟全部在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行.放入37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng).

2 結(jié)果與分析

2.1 丹皮酚晶體以及潔面乳的制備

2.1.1 丹皮酚晶體的制備

丹皮酚對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌等均有很強(qiáng)的抗菌活性，把丹皮酚添加到潔面乳中，得到溫和不刺激、清潔力好、保濕能力強(qiáng)、抑制痤瘡兼具美白潤(rùn)膚的產(chǎn)品.經(jīng)過制備，如圖1所示，丹皮酚以白色針狀結(jié)晶析出.

圖1 丹皮酚

2.1.2 中藥潔面乳的制備

如圖2A所示，制得的潔面乳為液體霜潔面乳，泡沫綿密豐富清潔力良好、溫和無(wú)刺激.圖2B為中藥潔面乳產(chǎn)品圖，瓶壁上的牡丹花圖案不僅體現(xiàn)出產(chǎn)品原料為牡丹，而且也凸顯了菏澤學(xué)院的?；眨纬删哂絮r明牡丹特色的中藥潔面乳，并以此產(chǎn)品為載體宣傳菏澤學(xué)院及菏澤牡丹文化.圖3為潔面乳泡沫情況：泡沫綿密.

A潔面乳實(shí)物

B潔面乳產(chǎn)品圖

圖3 潔面乳泡沫情況

2.2 中藥潔面乳的功能評(píng)價(jià)

2.2.1 中藥潔面乳抑菌效果

對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌以及革蘭氏陰性菌的抑菌實(shí)驗(yàn)各做三組重復(fù)實(shí)驗(yàn)，圖4為金黃色葡萄球菌抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果，A為無(wú)菌水對(duì)照，B、C、D為產(chǎn)品對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌結(jié)果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，牡丹中藥潔面乳對(duì)金黃色葡萄球菌有較高的抑制能力.

圖4 牡丹中藥潔面乳對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖5為大腸桿菌抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果，A為無(wú)菌水對(duì)照，B、C、D為產(chǎn)品對(duì)大腸桿菌的抑菌結(jié)果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)牡丹中藥潔面乳對(duì)大腸桿菌也具有抑制能力.

圖5 牡丹中藥潔面乳對(duì)大腸桿菌抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表5是牡丹中藥潔面乳對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的抑菌環(huán)直徑，三次生物學(xué)重復(fù)無(wú)顯著差異.

表5 牡丹中藥潔面乳對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的抑菌環(huán)直徑大小 cm

圖6是牡丹中藥潔面乳對(duì)兩種細(xì)菌的抑菌環(huán)直徑平均值及標(biāo)準(zhǔn)差，結(jié)果顯示對(duì)兩種細(xì)菌具有一定的抑菌能力，且生物學(xué)重復(fù)無(wú)顯著差異.

圖6 牡丹中藥潔面乳兩種菌抑菌環(huán)直徑平均值及標(biāo)準(zhǔn)差

綜上所述，中藥潔面乳對(duì)金黃色葡萄球菌以及大腸桿菌均有良好的抑菌能力，相同含量的中藥潔面乳對(duì)于金黃色葡萄球菌較大腸桿菌有更強(qiáng)的抑菌能力.

2.2.2 中藥潔面乳試用結(jié)果

選取有代表性的三位志愿者同學(xué)，如圖7、圖8、圖9所示.

圖7 一號(hào)志愿者使用情況

一號(hào)志愿者為敏感肌，皮膚暗沉、皮脂分泌旺盛，在使用之后皮膚明顯提亮、皮脂分泌減少、抑制皮膚出油效果明顯，該試用者試用之后無(wú)任何不良反應(yīng).

圖8 二號(hào)志愿者使用情況

二號(hào)志愿者為痘痘肌，皮膚干燥、有明顯的粉刺痘痘、皮膚暗沉；在使用一天后皮膚提亮效果明顯泛紅的痘痘得到緩解；在使用三天后皮膚狀態(tài)整體變好，泛紅的痘痘逐漸好轉(zhuǎn)、面部水潤(rùn)有氣色，二號(hào)志愿者試用之后無(wú)任何不良反應(yīng).

圖9 三號(hào)志愿者使用情況

從圖9中可以得出志愿者三號(hào)皮膚出油嚴(yán)重，皮膚暗沉無(wú)光澤，毛孔粗大；在使用一天之后皮膚滋潤(rùn)，祛除面部油光；在使用三天以后面部明顯提亮，泛紅的痘痘得到緩解消失，皮膚開始變得細(xì)膩，三號(hào)志愿者試用之后并無(wú)任何不良反應(yīng).

表6為本論文中藥洗面奶效果測(cè)評(píng)表，“++”表示特別滿意；“+”滿意；“-”不滿意；“--”十分不滿意.

表6 泡沫洗面奶效果測(cè)評(píng)表

從表6可以看出，大多數(shù)人對(duì)于此款牡丹中藥潔面乳在外觀、分散性、泡沫、清潔力、香氣、刺激性都比較滿意，與預(yù)期相符.據(jù)調(diào)查試用推測(cè)出超過90%左右的人群對(duì)于中藥潔面乳的外觀、分散性、泡沫、清潔力滿意；80%左右的人對(duì)于中藥潔面乳的香氣和刺激性滿意.

3 結(jié)論與討論

3.1 中藥潔面乳抑菌結(jié)果分析

大腸桿菌為革蘭氏陰性菌，易在普通培養(yǎng)基上增殖，常寄生在人體內(nèi)，注意臉部皮膚清潔，一般不會(huì)引起皮膚病.金黃色葡萄球菌是革蘭氏陽(yáng)性菌代表.葡萄球菌可通過多種途徑侵入人體，導(dǎo)致皮膚或器官的感染.

此抑菌試驗(yàn)很好的證明了中藥潔面乳對(duì)于大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌的抑菌能力，表明了此產(chǎn)品抑菌效果良好，有效的減輕、預(yù)防各種皮膚問題的發(fā)生.敏感肌、油痘肌在使用過程中也無(wú)任何不良反應(yīng).

3.2 對(duì)中藥潔面乳的展望

丹皮酚，是一種有機(jī)化合物，是從牡丹的干燥根皮中提取物出來(lái)的一種有效成分.具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌、抗氧化等作用，對(duì)皮膚瘙癢、帶狀瘡疹、濕疹具有較好的治療功效，牡丹皮具有抗螨蟲、抗菌、抗炎等藥理作用，在潔面乳中具有良好的效果.

烷基糖苷的成分取自純植物.現(xiàn)在市面上大多護(hù)膚品成分都取自純植物，所以潔面乳里含有的純植物成分，基本能滿足人們?cè)V求.烷基糖苷里含有羥基成分，因?yàn)榱u基親水，在水中不會(huì)電離，性能相對(duì)含有氨基酸的潔面乳而言更加穩(wěn)定.含有烷基糖苷潔面乳特別適合油皮、敏感肌的人們使用.烷基糖苷潔面乳是一種極其溫和的潔面清潔劑.烷基糖苷在酸性溶液和堿性溶液里能呈現(xiàn)相容性以及穩(wěn)定性.含有烷基糖苷的潔面乳對(duì)肌膚很溫和，對(duì)眼睛也沒有刺激.只含有烷基糖苷的清潔劑比較弱，很少能單獨(dú)起到清潔的作用，往往要摻雜其它元素才能有效清潔，減少對(duì)皮膚的刺激.我們制備的中藥潔面乳有助于為肌膚抑菌補(bǔ)水，改善肌膚干燥狀況，提亮膚色.

將來(lái)希望在丹皮的基礎(chǔ)上添加其它天然中藥成分，如黃柏，艾葉等天然中藥材.黃柏具有活血化瘀、清熱涼血、抑菌殺菌、平衡油脂分泌的作用.現(xiàn)代研究表明，黃柏具有除螨、殺菌、抑菌、促進(jìn)組織再生的作用，其含有的中藥成分能深入毛囊深處，平衡油脂.艾葉具有驅(qū)除螨蟲的作用，螨蟲對(duì)于艾葉的藥香味比較排斥，所以艾葉成分加入到潔面乳中可以驅(qū)除螨蟲，致使螨蟲遠(yuǎn)離皮膚，此外艾葉也對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白喉?xiàng)U菌有不同程度的殺滅作用，對(duì)流感病毒、皰疹病毒也有一定的抑制作用.在此基礎(chǔ)上做潔面乳的祛螨實(shí)驗(yàn)，以使中藥潔面乳達(dá)到抑菌、清潔、祛螨、滋潤(rùn)、溫和等多重功效.