王 婭,劉 彬,劉璐璐,張中興
(1. 東莞臺心醫(yī)院,廣東 東莞 523800 ;2. 東莞友華醫(yī)院內(nèi)科,廣東 東莞 523411)
近年來,我國腦卒中發(fā)病率逐年升高[1]。腦梗死是最常見的腦卒中類型,最新數(shù)據(jù)顯示,其占腦卒中的69.6% ~70.8%[2-3]。氯吡格雷是治療腦梗死的基石性藥物[4],但部分接受氯吡格雷治療的患者仍會復(fù)發(fā)缺血事件。大量研究顯示,CYP2C19、ABCBl、PONl、P2Y1等基因多態(tài)性是導(dǎo)致氯吡格雷抵抗的重要因素[5-7]。研究[8]顯示,CYP2C19 基因多態(tài)性與種族、地域相關(guān)性最大。本研究以腦梗死患者為對象,探討東莞地區(qū)腦梗死患者CYP2C19 相關(guān)基因多態(tài)性分布。
選擇2020 年9 月至2022 年1 月東莞臺心醫(yī)院收治的腦梗死患者348 例作為研究對象,所有患者均為東莞籍貫,男235 例,女113 例,年齡15 ~90 歲,平均61.48 歲;NIHSS 評分8 ~13 分,平均11.21 分。納入標(biāo)準(zhǔn):急性起?。慌R床資料完整;影像學(xué)檢查提示責(zé)任病灶或癥狀/ 體征持續(xù)24 h 以上。排除標(biāo)準(zhǔn):合并精神異常、血液系統(tǒng)疾病或TIA 者;白細(xì)胞計數(shù)低于0.3×109/L、合并自身免疫系統(tǒng)疾病或器質(zhì)性疾病者;非血管性病因或腦出血患者。
用EDTA 抗凝管采集患者的外周靜脈血2 mL,根據(jù)試劑盒說明書要求收集白細(xì)胞標(biāo)本。取試劑室溫下復(fù)溶1 ~3 min,離心15 s 以上,并加入1.5 μL 標(biāo)本離心15 ~20 s。采用雙Z 探針雜交及曲線分析法完成CYP2C19*3、CYP2C19*2、CYP2C19*17 三 個 位 點等位基因分布的檢測及解讀。本次研究共檢驗*1/*17、*17/*17、*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*3、*2/*2、*3/*3共8 種基因型。四種代謝型的判讀方法為:*1/*17、*17/*17 為超快代謝型;*1/*1 為快代謝型;*1/*2、*1/*3 為中間代謝型;*2/*3、*2/*2、*3/*3 為慢代謝型。
采用SPSS 26.0 軟件處理數(shù)據(jù),計數(shù)資料行χ2檢驗,采用n(%)表示,計量資料行t檢驗,采用±s表示,P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
采用以熒光原位雜交技術(shù)為基礎(chǔ)的多通道熒光定量分析儀檢測東莞腦梗死患者CYP2C19 基因型。本研究348 例患者中,CYP2C19 基因型由多到少分布為:*1/*1、*1/*2、*2/*2、*1/*3、*2/*3、*1/*17、*3/*3、*17/*17 ;基因代謝型由多到少分布為中間代謝型、快代謝型、慢代謝型、超快代謝型。詳見表1。
將348 例患者基因型和代謝型按性別進(jìn)行分組比較,各基因型、代謝型在不同性別中的比例,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
將348 例患者基因型和代謝型依照年齡進(jìn)行分組比較,<45 歲人群和≥45 歲人群CYP2C19 各基因型和代謝型分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
表1 東莞地區(qū)腦梗死患者CYP2C19 相關(guān)基因多態(tài)性分布
在CYP2C19 基因代謝型分布方面,東莞與廣州、佛山、河源、新疆等統(tǒng)計結(jié)果無顯著性差異(P>0.05),與汕頭有一定差異,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。
表2 與廣東其他地區(qū)以及新疆地區(qū)人群CYP2C19 基因代謝型分布的比較
根據(jù)藥物代謝速度的快慢,CYP2C19 被分為4 種代謝表型,包括超快代謝型、快代謝性型、中間代謝型和慢代謝型[14]。CYP2C19 基因突變可導(dǎo)致酶活性的缺失,影響氯吡格雷的代謝過程,出現(xiàn)不同程度的血小板抵抗現(xiàn)象,進(jìn)而進(jìn)一步引發(fā)心腦血管事件。研究[15]顯示,CYP2C19 慢代謝者發(fā)生主要不良心血管事件的比例顯著高于快代謝者。東莞處于沿海地帶,經(jīng)濟發(fā)達(dá),隨著外來人員的不斷涌入,導(dǎo)致遺傳群體遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。本研究針對東莞地區(qū)腦梗死患者CYP2C19 基因多態(tài)性和代謝表型進(jìn)行統(tǒng)計研究,結(jié)果顯示:東莞地區(qū)腦梗死患者CYP2C19 基因分布以*1/*1(40.23%)為主,其次為*1/*2(39.94%)、*2/*2(10.63%)。代謝型以中間代謝和快代謝為主,占比分別為45.40%和40.23%,慢代謝型、超快代謝型占比分別為13.79%、0.57%,說明在東莞地區(qū)有接近60% 的急性腦梗死患者存在不同程度的氯吡格雷抵抗。與超快代謝型和快代謝型相比,慢代謝型和中間代謝型的患者對氯吡格雷的敏感性下降,活性代謝物生成減少,抗血小板效果不佳且發(fā)生繼發(fā)性心血管事件的風(fēng)險增高,尤其是慢代謝的患者,美國FDA 建議慢代謝患者應(yīng)更換替格瑞洛等藥物或調(diào)整治療策略。該研究同時將研究人群分別按性別、年齡進(jìn)行分組比較。結(jié)果提示不同性別的患者CYP2C19 基因多態(tài)性和代謝型分布差異不明顯(P>0.05),不同年齡段患者CYP2C19基因多態(tài)性和代謝型分布差異明顯(P<0.05),尤其是在<45 歲人群中,慢代謝型和中間代謝型已超過60%,與≥45 歲人群存在一定差異,但這是其他相關(guān)研究中未發(fā)現(xiàn)的,需要更大樣本量的研究來進(jìn)一步驗證。
本研究還將相關(guān)數(shù)據(jù)與廣東其他城市以及新疆進(jìn)行了對比。結(jié)果提示:除汕頭外,CYP2C19 基因多態(tài)性在東莞地區(qū)的分布與廣州、佛山、新疆等其他地區(qū)無明顯差異(P>0.05)。而與汕頭的分布情況有顯著差異(P<0.05),可能與汕頭研究總體樣本量較少有關(guān)。在查閱資料的過程中,我們發(fā)現(xiàn)早期大多數(shù)研究未涉及*17 這個位點,*17 的突變檢測,主要用于判斷個體是否為超快代謝型,超快代謝型患者使用氯吡格雷的效果好,但更容易引起不良反應(yīng),因此也是有很大的檢測意義和臨床價值的。
本研究是關(guān)于東莞地區(qū)348 例腦梗死患者CYP2C19基因多態(tài)性分布的研究,結(jié)果提示東莞地區(qū)腦梗死患者CYP2C19 基因多態(tài)性以*1/*1、*1/*2 為主,中間代謝型和慢代謝型占比接近60%,說明東莞地區(qū)腦梗死患者CYP2C19 代謝功能基因缺失情況占比較大,應(yīng)加強患者臨床用藥前基因檢測,實現(xiàn)個體化精準(zhǔn)治療。