宮頸癌上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)長(zhǎng)鏈非編碼RNA的研究進(jìn)展

辛文虎，王芳

(1.蘭州大學(xué)第二醫(yī)院 a.婦科,b.生殖醫(yī)學(xué)科，蘭州 730030； 2.蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，蘭州 730030)

宮頸癌是全球女性第四大惡性腫瘤，也是女性癌癥死亡的第四大疾病類(lèi)型[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2020年全世界宮頸癌新發(fā)病例為60.4萬(wàn)，死亡人數(shù)為34.2萬(wàn)[1]，且年輕人群宮頸癌的患病風(fēng)險(xiǎn)逐年上升[2]，對(duì)女性的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。盡管隨著人乳頭瘤病毒疫苗的廣泛應(yīng)用和宮頸癌早期篩查的逐漸普及，宮頸癌在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率和病死率均呈下降趨勢(shì)[3]，但中晚期宮頸癌患者的預(yù)后仍不理想，尤其是出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和腫瘤復(fù)發(fā)往往預(yù)示著預(yù)后不良[4]。因此，尋找新的治療靶點(diǎn)和預(yù)后生物標(biāo)志物以提高宮頸癌患者的生存率尤為重要。

宮頸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素、多步驟、連續(xù)級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程。有研究表明，上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transformation，EMT)作為連續(xù)級(jí)聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，在宮頸癌的侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用，而間質(zhì)細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化可抑制宮頸癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力及腫瘤干細(xì)胞的增殖[5]，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)傳統(tǒng)細(xì)胞毒藥物及放療的敏感性，從而降低轉(zhuǎn)移和臨床復(fù)發(fā)的可能性，這為宮頸癌的治療提供了新思路。近年來(lái)，隨著新一代基因測(cè)序和微陣列技術(shù)的快速發(fā)展，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)在腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要調(diào)控作用，多種lncRNA與EMT的多個(gè)核心轉(zhuǎn)錄因子相互作用，影響腫瘤的EMT進(jìn)程，從而影響宮頸癌進(jìn)展[6]?，F(xiàn)就宮頸癌進(jìn)展中與EMT過(guò)程相關(guān)的lncRNA研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為進(jìn)一步探索lncRNA在宮頸癌EMT過(guò)程中的具體作用機(jī)制提供參考。

1 lncRNA

lncRNA是一類(lèi)二級(jí)結(jié)構(gòu)高度保守且長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸的非編碼RNA，由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄形成，因缺乏開(kāi)放閱讀編碼框而不參與蛋白質(zhì)編碼，因此不具有生物學(xué)功能[7]，曾被普遍認(rèn)為是基因組“暗物質(zhì)”或“轉(zhuǎn)錄噪音”。近年來(lái)，隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展及廣泛應(yīng)用，越來(lái)越多的研究表明lncRNA廣泛參與基因表達(dá)調(diào)控，與細(xì)胞增殖、分化、自噬、遷移、免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)過(guò)程密切相關(guān)，尤其在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[8-9]。目前認(rèn)為，lncRNA可與RNA、DNA和蛋白質(zhì)等相互作用，通過(guò)參與表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平的基因表達(dá)調(diào)控而影響腫瘤進(jìn)展[10]，部分lncRNA的異常表達(dá)在腫瘤中發(fā)揮著潛在的癌基因或抑癌基因的作用，如LINC00472、膀胱癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1和乳酸脫氫酶A的α復(fù)合體4等lncRNA已被確定為多種癌癥的腫瘤促進(jìn)因子或腫瘤抑制因子[11-12]；lncRNA尿路上皮癌抗原1作為腫瘤細(xì)胞增殖生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子，可以促進(jìn)腫瘤的新生血管形成、侵襲和轉(zhuǎn)移，在子宮內(nèi)膜癌中發(fā)揮作用；lncRNA?；撬嵘险{(diào)基因1(taurine upregulated gene 1,TUG1)上調(diào)可促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖和遷移[13]。多種lncRNA已被證實(shí)可作為新型腫瘤生物標(biāo)志物來(lái)評(píng)價(jià)腫瘤惡性程度和預(yù)測(cè)腫瘤進(jìn)展結(jié)局，如lncRNA A174084可作為區(qū)分胃上皮良性病變與胃惡性腫瘤的生物標(biāo)志物[14]。此外，部分lncRNA在指導(dǎo)個(gè)體化綜合治療方面發(fā)揮一定作用，lncRNA HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA(HOX transcript antisense RNA，HOTAIR)可以預(yù)測(cè)卵巢癌對(duì)不同鉑類(lèi)化療藥物治療的敏感性差異[5]。由此可見(jiàn)，多種lncRNA對(duì)腫瘤性疾病的診治以及預(yù)后評(píng)估具有一定的指導(dǎo)價(jià)值，但大多數(shù)lncRNA在腫瘤疾病中的生物學(xué)功能及確切調(diào)控機(jī)制尚不清楚，需要進(jìn)一步研究。

2 EMT

EMT是指在某些生理或病理情況下，細(xì)胞失去典型的上皮特征并獲得間質(zhì)特性且以高度可塑性和動(dòng)態(tài)方式進(jìn)行轉(zhuǎn)換的一系列協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)錄和形態(tài)程序[15]。EMT是一個(gè)受過(guò)渡態(tài)和微環(huán)境影響的動(dòng)態(tài)過(guò)程，調(diào)節(jié)EMT的機(jī)制包括表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、選擇性剪接、蛋白質(zhì)穩(wěn)定和亞細(xì)胞定位以及自噬調(diào)節(jié)等，其在胚胎發(fā)育、傷口愈合、組織再生、器官纖維化、腫瘤發(fā)生進(jìn)展等方面發(fā)揮重要作用[16]。EMT是機(jī)體正常的、復(fù)雜且受?chē)?yán)格調(diào)控的發(fā)育程序，一旦這種有序調(diào)控失控就會(huì)觸發(fā)腫瘤的侵襲及發(fā)展。研究表明，EMT是惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟，癌細(xì)胞在特定微環(huán)境中響應(yīng)Snail、Zeb、Twist等信號(hào)因子發(fā)生EMT重塑細(xì)胞骨架，使上皮細(xì)胞表型發(fā)生改變，上皮鈣黏素、閉鎖小帶蛋白-1、橋粒蛋白等細(xì)胞黏附蛋白表達(dá)減少，而神經(jīng)鈣黏素、波形蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶等間質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)志物表達(dá)增加[15]，從而導(dǎo)致細(xì)胞間黏附力下降或喪失，上皮基底細(xì)胞極性喪失，細(xì)胞游走性明顯增加，這是惡性腫瘤出現(xiàn)周?chē)M織侵襲及發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的重要生物學(xué)變化過(guò)程[17]。有研究發(fā)現(xiàn)，循環(huán)腫瘤細(xì)胞具有上皮細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和從上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞過(guò)渡細(xì)胞3種亞型，進(jìn)一步證實(shí)多種信號(hào)誘發(fā)EMT使腫瘤細(xì)胞原位浸潤(rùn)分離，并表現(xiàn)出腫瘤干細(xì)胞樣特性，進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)后轉(zhuǎn)移至遠(yuǎn)處，在遠(yuǎn)隔器官出現(xiàn)間充質(zhì)細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而觸發(fā)遷移停止，誘導(dǎo)相同的細(xì)胞增殖并孕育出新的腫瘤，可見(jiàn)上皮細(xì)胞與間充質(zhì)細(xì)胞之間相互轉(zhuǎn)化在腫瘤細(xì)胞侵襲、遷移過(guò)程中發(fā)揮重要作用[18]。目前研究顯示，EMT與宮頸癌、胃癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等的腫瘤周?chē)?rùn)和繼發(fā)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[19]。有研究證實(shí)，宮頸癌、肺癌、乳腺癌等惡性腫瘤的化療耐藥與EMT相關(guān)[16]，但具體機(jī)制仍未完全闡明。

綜上所述，多種lncRNA與宮頸癌的侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程密切相關(guān)，通過(guò)測(cè)定宮頸癌組織與正常宮頸組織的特定lncRNA表達(dá)差異，同時(shí)檢測(cè)不同生物學(xué)狀態(tài)下腫瘤細(xì)胞表型蛋白差異發(fā)現(xiàn)，部分lncRNA表達(dá)水平與決定細(xì)胞類(lèi)型的表型蛋白存在緊密聯(lián)系，且存在多個(gè)共同調(diào)控通路，這為宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移機(jī)制研究提供了新方向。

3 宮頸惡性腫瘤中EMT相關(guān)的lncRNA

研究報(bào)道，多種lncRNA在宮頸癌EMT相關(guān)的侵襲、轉(zhuǎn)移和放化療抵抗中發(fā)揮重要作用[20],其作用機(jī)制涉及與多梳抑制復(fù)合體2相互作用、調(diào)控EMT信號(hào)通路、介導(dǎo)EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子及標(biāo)志蛋白表達(dá)等[21]，部分lncRNA可與微RNA(microRNA，miRNA/miR)相互作用通過(guò)多個(gè)通路促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。

3.1lncRNA肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1) lncRNA MALAT1位于染色體11q13.1，長(zhǎng)度為8 707 nt，在多種腫瘤中高度富集，是一種轉(zhuǎn)移標(biāo)志物和預(yù)后因子。研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA MALAT1在宮頸癌細(xì)胞和組織中的表達(dá)水平顯著升高，是腫瘤進(jìn)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與腫瘤大小、國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，其作為miR-145的“分子海綿”與宮頸癌放療抵抗密切相關(guān)[22]。lncRNA MALAT1基因敲除可上調(diào)上皮細(xì)胞中緊密連接蛋白和上皮鈣黏素等上皮標(biāo)志蛋白，下調(diào)β聯(lián)蛋白和波形蛋白等間充質(zhì)標(biāo)志蛋白，從而抑制宮頸癌細(xì)胞的局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，同時(shí)發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)EMT的轉(zhuǎn)錄因子Snail在轉(zhuǎn)錄物和蛋白質(zhì)水平上同樣下調(diào)間充質(zhì)標(biāo)志蛋白，表明lncRNA MALAT1通過(guò)EMT調(diào)節(jié)宮頸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移[23]。周莉等[24]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA MALAT1通過(guò)下調(diào)miR-124-3p/胰島素樣生長(zhǎng)因子2信使RNA結(jié)合蛋白1分子軸促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲和EMT，為臨床宮頸癌早期診斷、治療提供潛在的分子靶點(diǎn)。因此，lncRNA MALAT1可能通過(guò)調(diào)控EMT過(guò)程中的關(guān)鍵基因表達(dá)影響腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移。

3.2lncRNA HOTAIR lncRNA HOTAIR位于染色體12q13.13，長(zhǎng)度為2 158 nt，被認(rèn)為是癌癥轉(zhuǎn)移的有效預(yù)測(cè)因子。研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA HOTAIR在晚期宮頸癌組織中高表達(dá)，與不良預(yù)后預(yù)測(cè)因子人乳頭瘤病毒致癌基因E7呈正相關(guān)，是宮頸癌患者轉(zhuǎn)移和死亡增加的危險(xiǎn)因素之一，宮頸癌細(xì)胞中HOTAIR的促轉(zhuǎn)移潛能與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、基質(zhì)金屬蛋白酶9和EMT相關(guān)基因密切相關(guān)[25]，lncRNA HOTAIR過(guò)表達(dá)可促進(jìn)其5′區(qū)域與多梳抑制復(fù)合物結(jié)合，介導(dǎo)組蛋白的甲基化，調(diào)控并影響EMT進(jìn)程，最終促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移[26]。此外，lncRNA HOTAIR過(guò)表達(dá)可通過(guò)激活Wnt途徑促進(jìn)細(xì)胞增殖，下調(diào)宮頸癌細(xì)胞lncRNA HOTAIR表達(dá)可通過(guò)阻斷Wnt信號(hào)通路減少自噬和逆轉(zhuǎn)EMT，從而提高對(duì)放療的敏感性[27]。從理論上講，lncRNA HOTAIR的活性可通過(guò)特定的干擾小RNA沉默、小分子干擾、miRNA競(jìng)爭(zhēng)性調(diào)節(jié)、功能結(jié)構(gòu)域屏蔽以及高級(jí)結(jié)構(gòu)破壞等方式進(jìn)行阻斷，也可以利用藥物直接干預(yù)其下游通路達(dá)到治療目的，因此針對(duì)宮頸癌組織中l(wèi)ncRNA HOTAIR高表達(dá)可設(shè)計(jì)多種藥物從不同角度對(duì)宮頸癌進(jìn)行干預(yù)治療。可見(jiàn)，lncRNA HOTAIR可作為宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移、疾病進(jìn)展的有效預(yù)測(cè)因子，且可作為治療晚期宮頸癌的候選靶點(diǎn)。

3.3lncRNA漿細(xì)胞瘤多樣異位基因1(plasmacytoma variant translocation 1，PVT1) lncRNA PVT1位于染色體8q24.21，長(zhǎng)度為1 716 nt，其通過(guò)與多種轉(zhuǎn)錄因子(如p15、p16、增殖相關(guān)核仁蛋白和c-MYC)相互作用促進(jìn)癌性疾病發(fā)展[28]。研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌組織中l(wèi)ncRNA PVT1的表達(dá)明顯高于癌旁組織，lncRNA PVT1的表達(dá)水平與患者的總生存期呈負(fù)相關(guān)，敲低宮頸癌Siha細(xì)胞株中l(wèi)ncRNA PVT1表達(dá)水平，細(xì)胞增殖、侵襲和遷移能力均顯著下降，同時(shí)宮頸癌細(xì)胞株對(duì)順鉑的藥物反應(yīng)性顯著增加，表明lncRNA PVT1可能通過(guò)驅(qū)動(dòng)細(xì)胞增殖、侵襲、遷移而促進(jìn)子宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，并與宮頸癌細(xì)胞的順鉑耐藥性密切相關(guān)[29]。Sun等[30]證實(shí)lncRNA PVT1可以通過(guò)增強(qiáng)miR-195啟動(dòng)子區(qū)域的組蛋白H3K27me3或直接競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-195來(lái)降低宮頸癌抑癌基因、EMT抑制因子miR-195的表達(dá)，增加腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力，同時(shí)lncRNA PVT1/miR-195軸可通過(guò)調(diào)節(jié)EMT影響宮頸癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性[31]。此外，lncRNA PVT1還可以通過(guò)負(fù)性調(diào)控其靶基因miR-424、miR-200b的表達(dá)促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖及遷移[32]。由此可見(jiàn)，lncRNA PVT1可能作為特定miRNA海綿，在宮頸癌進(jìn)展中吸附特定miRNA，介導(dǎo)加速EMT進(jìn)程，從而促進(jìn)宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移。因此，lncRNA PVT1及其靶向調(diào)控的miRNA均有望成為子宮頸癌治療的新靶點(diǎn)。

3.4lncRNA TUG1 lncRNA TUG1位于人染色體22q12，全長(zhǎng)7.1 kb，主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞，可通過(guò)影響細(xì)胞周期調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡，是潛在的腫瘤生物標(biāo)志物及疾病治療靶點(diǎn)。lncRNA TUG1在宮頸癌組織中表達(dá)上調(diào)，與腫瘤體積大、國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期晚、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和細(xì)胞分化程度低相關(guān)，lncRNA TUG1通過(guò)上調(diào)Bcl-2的表達(dá)抑制胱天蛋白酶3的活化，通過(guò)調(diào)控Bcl-2/胱天蛋白酶3軸促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖，減少細(xì)胞凋亡，敲除lncRNA TUG1基因可激活宮頸癌細(xì)胞橋粒蛋白的表達(dá)，降低波形蛋白和纖維連接蛋白等間充質(zhì)標(biāo)志蛋白的表達(dá)，部分解釋了該病的轉(zhuǎn)移機(jī)制與EMT有關(guān)[13]。此外，Hu等[13]證實(shí)lncRNA TUG1通過(guò)EMT促進(jìn)癌細(xì)胞侵襲和放療耐受?？梢?jiàn)，lncRNA TUG1在宮頸癌進(jìn)展相關(guān)的EMT進(jìn)程中扮演重要角色，降低lncRNA TUG1表達(dá)可抑制宮頸癌的侵襲及轉(zhuǎn)移，提高腫瘤的放療敏感性。

3.5lncRNA 鋅指E盒結(jié)合同源異型盒1反義基因1(Zinc finger E-box binding homeobox 1 antisense 1，ZEB1-AS1) lncRNA ZEB1-AS1包括2個(gè)外顯子和1個(gè)內(nèi)含子，位于染色體10p11.22，長(zhǎng)度約2 535 nt[33]。研究表明，lncRNA ZEB1-AS1基因敲除可以誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞中上皮鈣黏素上調(diào)和神經(jīng)鈣黏素下調(diào)，從而抑制EMT過(guò)程，茴香霉素作為p38促分裂原活化的蛋白激酶通路激活劑可以逆轉(zhuǎn)lncRNA ZEB1-AS1對(duì)HeLa細(xì)胞EMT的抑制作用，提示lncRNA ZEB1-AS1可能通過(guò)阻斷p38促分裂原活化的蛋白激酶信號(hào)通路抑制HeLa細(xì)胞EMT和遷移[34]。此外，lncRNA ZEB1-AS1被首次證明可能通過(guò)調(diào)控ZEB1促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，ZEB1是一種通過(guò)誘導(dǎo)EMT促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)錄因子，其在多種人類(lèi)癌癥中表達(dá)異常已有報(bào)道[35]。Cheng等[36]研究發(fā)現(xiàn)，ZEB1的激活是miR-101-3p過(guò)表達(dá)引發(fā)EMT的原因，miR-101-3p/ZEB1信號(hào)通路在宮頸癌EMT過(guò)程中發(fā)揮重要作用。血管生成擬態(tài)在腫瘤形成、侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中扮演重要角色，lncRNA ZEB1-AS1與血管生成擬態(tài)關(guān)系密切[35]，這可能與lncRNA ZEB1-AS1調(diào)控相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子、改變EMT細(xì)胞腫瘤微環(huán)境成分、表達(dá)EMT細(xì)胞的干細(xì)胞特性等環(huán)節(jié)密切相關(guān)，這將為lncRNA在宮頸癌進(jìn)展中的作用機(jī)制研究提供新思路。

3.6lncRNA核旁斑組裝轉(zhuǎn)錄本1(nuclear paraspeckle assembly transcript 1，NEAT1) lncRNA NEAT1是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的位于人染色體11q13.1，長(zhǎng)約3.7 kb的新型lncRNA。據(jù)報(bào)道，與鄰近正常組織相比，宮頸癌組織中l(wèi)ncRNA NEAT1表達(dá)上調(diào)，lncRNA NEAT1表達(dá)增強(qiáng)與腫瘤體積大、細(xì)胞分化不良、國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和總生存率下降均顯著相關(guān)，因此是宮頸癌的預(yù)后標(biāo)志物[37]。lncRNA NEAT1通過(guò)調(diào)節(jié)靶點(diǎn)miRNA功能在癌癥中發(fā)揮重要作用，有研究證實(shí)lncRNA NEAT1在宮頸癌中通過(guò)miR-361/熱激蛋白90軸促進(jìn)宮頸癌侵襲及EMT進(jìn)程，其中miR-361被確定為lncRNA NEAT1的抑制靶點(diǎn)[38]。研究表明，lncRNA NEAT1基因的敲除可以抑制宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，并通過(guò)調(diào)節(jié)miR-133a/性別決定區(qū)相關(guān)高遷移率族蛋白4通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，lncRNA NEAT1還充當(dāng)miR-9-5p的分子海綿，促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖和遷移[39]。此外，lncRNA NEAT1的過(guò)表達(dá)影響EMT進(jìn)程，通過(guò)調(diào)節(jié)miR-124/核因子κB通路促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的遷移和侵襲[39]。上述研究為宮頸癌發(fā)生進(jìn)展相關(guān)的侵襲、轉(zhuǎn)移機(jī)制提供了新的理論基礎(chǔ)。

3.7lncRNA母系表達(dá)基因3(maternally expressed gene 3，MEG3) lncRNA MEG3位于染色體14q32.3，長(zhǎng)度為1 600 nt，是具有10個(gè)外顯子組成的單拷貝印記基因，也是首個(gè)被發(fā)現(xiàn)的具有腫瘤抑制功能的lncRNA[40]。Zhang和Gao[41]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA MEG3在宮頸癌組織中表達(dá)明顯下調(diào)，且其表達(dá)下調(diào)與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、高危型人乳頭瘤病毒感染呈負(fù)相關(guān)，lncRNA MEG3在宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)缺失部分是由于lncRNA MEG3啟動(dòng)子區(qū)和基因間差異甲基化區(qū)的超甲基化所致；另外，lncRNA MEG3過(guò)表達(dá)可降低miR-21-5p表達(dá)水平，從而通過(guò)激活p53抑制宮頸癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡。張艷等[42]通過(guò)檢測(cè)lncRNA MEG3、miR-9-5p和細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制物5在宮頸癌組織和細(xì)胞系中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)MEG3/miR-9-5p/細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制物5軸可能抑制宮頸癌細(xì)胞侵襲、遷移和EMT進(jìn)程，成為宮頸癌治療的潛在靶點(diǎn)。侯歌等[43]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA MEG3具有增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞放射敏感性的作用，其機(jī)制可能與靶向負(fù)調(diào)控miR-181a-5p并激活人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因/蛋白激酶B信號(hào)通路有關(guān)，為放射抵抗性宮頸癌的治療提供了新方向。

3.8其他lncRNA 近年來(lái)，還有許多l(xiāng)ncRNA被研究證實(shí)與宮頸癌進(jìn)展中的EMT進(jìn)程密切相關(guān)。Bo等[44]通過(guò)分析CRN、MethCH和UCSC XENA數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)，lncRNA肌動(dòng)蛋白絲相關(guān)蛋白1反義RNA 1在宮頸癌中的表達(dá)水平明顯升高且呈低甲基化，且其高表達(dá)與患者不良預(yù)后密切相關(guān)，表明沉默宮頸癌細(xì)胞肌動(dòng)蛋白絲相關(guān)蛋白1反義RNA 1表達(dá)主要通過(guò)調(diào)控EMT相關(guān)基因表達(dá)和影響Rho/Rac信號(hào)通路來(lái)介導(dǎo)抗腫瘤作用。Tian等[45]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA分化拮抗非編碼RNA在宮頸癌組織和細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào)，且與腫瘤體積增大、國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期進(jìn)展及預(yù)后惡化呈正相關(guān)，lncRNA分化拮抗非編碼RNA/miR-335-5p/Ras同源物相關(guān)卷曲螺旋蛋白激酶1軸在促進(jìn)宮頸癌EMT進(jìn)程中形成了一個(gè)新的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[46]；LINC00861在宮頸癌組織以及caski和Me180細(xì)胞系中的表達(dá)水平顯著下調(diào)，LINC00861表達(dá)水平下調(diào)與宮頸癌患者的國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期晚、淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移和總生存率下降等密切相關(guān)，LINC00861/miR-513b-5p軸通過(guò)人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路抑制宮頸癌進(jìn)展的EMT過(guò)程[47]；Wu等[48]首次揭示了人第10號(hào)染色體上磷酸酶及張力蛋白同源缺失性基因假基因1/miR-27a-3p/早期生長(zhǎng)反應(yīng)因子1軸在宮頸癌中可抑制細(xì)胞遷移、侵襲和EMT；Fan等[49]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA SPRY4內(nèi)含轉(zhuǎn)錄因子1通過(guò)調(diào)節(jié)miR-101-3p/ZEB1軸促進(jìn)宮頸癌EMT，SPRY4內(nèi)含轉(zhuǎn)錄因子1/miR-101-3p/ZEB1調(diào)控網(wǎng)絡(luò)可能對(duì)宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有一定指導(dǎo)意義；Yang等[50]證實(shí)LINC00319通過(guò)調(diào)節(jié)miR-3127-5p/核糖核酸酶P/MRP25亞基軸，促進(jìn)宮頸癌的遷移、侵襲和EMT過(guò)程，為宮頸癌的治療提供了新的干預(yù)靶點(diǎn)。盡管目前已發(fā)現(xiàn)多個(gè)與宮頸癌EMT過(guò)程密切相關(guān)的lncRNA下游通路，但宮頸癌患者腫瘤組織或血液中與正常人群差異表達(dá)的多個(gè)lncRNA的共同關(guān)鍵基因或信號(hào)通路仍不明確，需要進(jìn)一步深入研究。

4 展 望

腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移是宮頸癌預(yù)后不良的重要影響因素，盡管越來(lái)越多的證據(jù)表明大量lncRNA參與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)的EMT過(guò)程，但lncRNA在宮頸癌EMT過(guò)程中的確切機(jī)制仍不明確。一方面，需要更多的基礎(chǔ)研究來(lái)探索其確切作用機(jī)制，如不斷探索不同種類(lèi)lncRNA下游途徑和相關(guān)分子、發(fā)現(xiàn)與宮頸癌EMT進(jìn)程密切相關(guān)的lncRNA下游共同分子或共同通路等，為研發(fā)治療宮頸癌的藥物提供理論基礎(chǔ)及治療靶點(diǎn)；另一方面，要解決基于lncRNA診療技術(shù)在臨床應(yīng)用方面的挑戰(zhàn)，如開(kāi)發(fā)便捷有效的檢測(cè)技術(shù)、實(shí)現(xiàn)脫靶效應(yīng)的最小化、避免lncRNA在人體體液中的降解、探尋循環(huán)lncRNA的可行組織來(lái)源。影響宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的因素較多，目前基于單個(gè)基因的研究或診斷具有一定的片面性，如何將多種lncRNA與目前已確定的鱗狀細(xì)胞癌抗原、凋亡抑制因子Bcl-2、環(huán)加氧酶2等指標(biāo)有機(jī)結(jié)合、綜合分析，為患者制訂個(gè)體化治療、隨訪方案也是值得關(guān)注的重要課題。因此，未來(lái)的研究應(yīng)在大量理論研究的基礎(chǔ)上，深入探究宮頸癌EMT相關(guān)lncRNA的作用機(jī)制及共同靶點(diǎn)，更多關(guān)注循環(huán)lncRNA的存在形式和具體功能，以進(jìn)行高效的臨床診斷，研制新的靶向lncRNA的治療藥物。