刺五加治療帕金森病的研究進(jìn)展

張淑香，藍(lán)海菲，田 偉，彭玉婷，王秋月，劉樹民*

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，哈爾濱 150040）

帕金森?。≒arkinson’s disease，PD）是一種由于黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元丟失而導(dǎo)致的神經(jīng)退行性疾病，患者由于缺乏多巴胺，會(huì)出現(xiàn)不同程度的行為障礙，最典型的運(yùn)動(dòng)特征包括休息性震顫、運(yùn)動(dòng)遲緩、僵直和姿勢(shì)不穩(wěn)定，到晚期患者生活無(wú)法自理，嚴(yán)重威脅患者的健康和生命，因此，尋找一種安全、有效治療PD 的藥物刻不容緩[1-3]。傳統(tǒng)的藥物治療雖然可以控制PD 癥狀，但也存在局限性，左旋多巴就是最典型的例子，它是目前治療PD 效果最好的藥物，但它與損耗反應(yīng)、運(yùn)動(dòng)障礙、劑量惡化等并發(fā)癥有聯(lián)系，存在不良反應(yīng)，甚至?xí)?dǎo)致藥物失效[4]。近年來(lái)，人們對(duì)于刺五加作為預(yù)防和治療PD的手段越來(lái)越感興趣。刺五加具有抗氧化、抗輻射、抗衰老、抗炎等功能[5]，關(guān)于刺五加治療PD 也多有報(bào)道，本文關(guān)于查閱近10 年相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)刺五加治療PD 的作用、作用機(jī)制及臨床研究進(jìn)行總結(jié)，以便為刺五加治療帕金森的新藥開發(fā)及臨床應(yīng)用提供參考。

1 刺五加治療帕金森病的作用

1.1 改善行為障礙 不同程度的自主行為障礙是PD患者不同時(shí)期的癥狀表現(xiàn)[6]，目前研究中發(fā)現(xiàn)刺五加可以改善行為障礙。陳專等[7]以魚藤酮誘導(dǎo)果蠅致病作為PD 模型，用刺五加進(jìn)行干預(yù)，觀察對(duì)比果蠅攀爬能力，測(cè)定果蠅腦部多巴胺含量，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)給藥高劑量組攀爬時(shí)間和腦部多巴胺含量和正常組相近，說(shuō)明刺五加可以提高多巴胺含量，改善果蠅的攀爬能力。

1.2 保護(hù)多巴胺神經(jīng)元 PD 患者a-突觸核蛋白（a-synuclein）的過(guò)表達(dá)會(huì)損傷多巴胺能神經(jīng)元發(fā)生退行性改變甚至死亡，導(dǎo)致多巴胺的分泌嚴(yán)重不足[8]，調(diào)整多巴胺水平是目前帕金森對(duì)癥治療的手段之一。盧芳等[9]以人類a-synuclein 轉(zhuǎn)基因的小鼠模型為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用qRT-PCR 和Western blot 分析方法，研究刺五加有效組分對(duì)a-synuclein 高表達(dá)的PD 模型微小核糖核酸（microRNA）-mRNA-蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的干預(yù)作用，結(jié)果表明刺五加有效組分可顯著抑制a-synuclein 的過(guò)表達(dá)及其他與PD 相關(guān)的蛋白質(zhì)的異常表達(dá)，還會(huì)激活中腦多巴胺能神經(jīng)元的自我保護(hù)。何曉桐等[10]用刺五加有效組分干預(yù)所構(gòu)建的PD 細(xì)胞模型，并運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)了PC12 細(xì)胞中miRNA-433、miRNA-205、miRNA-153mRNA 的表達(dá)，證實(shí)了被刺五加干預(yù)過(guò)的PD 細(xì)胞模型，相關(guān)的miRNA 的表達(dá)增強(qiáng)，能夠明顯的保護(hù)細(xì)胞損傷、減弱PC12 細(xì)胞活力的抑制，甚至可以保護(hù)中腦多巴胺能神經(jīng)元。

1.3 抑制神經(jīng)元細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡受基因調(diào)控，是一種自然、主動(dòng)選擇的過(guò)程，不管是哪種因素導(dǎo)致的帕金森本質(zhì)上都是因?yàn)楹谫|(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元的凋亡，也就是說(shuō)多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞凋亡是導(dǎo)致帕金森的主要原因。因此，治療PD 從細(xì)胞凋亡入手是一個(gè)著手點(diǎn)。安麗鳳等[11]對(duì)MPP+誘發(fā)的PC12 細(xì)胞（制作體外PD 細(xì)胞模型），給予刺五加有效部位進(jìn)行干預(yù)后發(fā)現(xiàn)給藥治療組的PC12 細(xì)胞形態(tài)完整且狀態(tài)良好，證實(shí)了刺五加有效成分可以通過(guò)降低LDH、NOS、MDA、NO 的含量來(lái)實(shí)現(xiàn)抑制細(xì)胞凋亡。楊婷婷等[12]用MPTP 誘導(dǎo)C57BL/6 小鼠致病進(jìn)行造模，用刺五加有效部位連續(xù)給藥20 d 及爬桿實(shí)驗(yàn)測(cè)定小鼠黑質(zhì)紋狀體，發(fā)現(xiàn)小鼠爬桿時(shí)間增加，給藥組TH 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量增多、GABA 陽(yáng)性表達(dá)的神經(jīng)元明顯增多。

2 刺五加治療帕金森病的作用機(jī)制

2.1 抗線粒體功能障礙 線粒體能量代謝紊亂、線粒體DNA 損傷及凋亡通路等影響著神經(jīng)功能，導(dǎo)致急性腦損傷的病理反應(yīng)及大腦老化，這是PD 等神經(jīng)退行性疾病的早期突出狀況[13]。已有研究表明，刺五加可以改善線粒體部分異常情況。LIU S M 等[14]用四氫吡啶給藥造模誘導(dǎo)小鼠致病，檢測(cè)PD 小鼠腦中線粒體神經(jīng)元的功能和完整性并用爬桿實(shí)驗(yàn)觀察小鼠的行為，發(fā)現(xiàn)致病小鼠的線粒體懸液吸光度及線粒體模電位值對(duì)比正常值明顯下降，并出現(xiàn)慵懶、震顫、行動(dòng)遲緩，毛發(fā)豎立等明顯的行為障礙癥狀，用刺五加對(duì)PD 小鼠進(jìn)行治療后，線粒體懸液吸光度及線粒體電位值上升甚至恢復(fù)到原來(lái)水平。張帥男等[15]用同位標(biāo)記法和絕對(duì)定量技術(shù)對(duì)野生型a-synuclein 型小鼠進(jìn)行刺五加干預(yù)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)iTRAQ 分析，刺五加可以糾正a-synuclein、脂肪酸合成酶、線粒體ATP 合成酶α 亞基等與路易斯小體、線粒體能量代謝的蛋白質(zhì)的異常表達(dá)。

2.2 抗氧化應(yīng)激 PD 患者體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)減弱，體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧化系統(tǒng)平衡被破壞，線粒體代謝產(chǎn)生的活性氧（ROS）不能及時(shí)被清除，黑質(zhì)致密部出現(xiàn)氧化應(yīng)激狀態(tài)，最終會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能障礙、脫氧核糖核酸（DNA）損傷、脂質(zhì)過(guò)氧化甚至可以導(dǎo)致細(xì)胞死亡[16]。神經(jīng)細(xì)胞受到活性氧的攻擊，細(xì)胞膜通透性增加會(huì)引起DNA 斷裂損傷。刁波等[17]的刺五加苷預(yù)保護(hù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)刺五加多糖可以通過(guò)上調(diào)Bax蛋白，下調(diào)BC1-2 蛋白的表達(dá)來(lái)減輕過(guò)氧化氫引起的大鼠海馬神經(jīng)元氧化應(yīng)激損傷?；钚匝跻鸬闹|(zhì)過(guò)氧化會(huì)生成丙二醛（MDA），引起蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)聚合，對(duì)細(xì)胞有毒性。趙紅曄等[18]的研究表明刺五加苷B 能夠?qū)a2S2O4誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型進(jìn)行預(yù)保護(hù)，可以降低脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，增加抗氧化酶系的活力，能夠通過(guò)抑制活性氧（ROS）的產(chǎn)生來(lái)保護(hù)大鼠海馬神經(jīng)元氧化應(yīng)激損傷。張仁文[19]采用刺五加提取物對(duì)氧化損傷細(xì)胞進(jìn)行抗氧化實(shí)驗(yàn)，測(cè)定體外抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)刺五加水提取物對(duì)DPPH 自由基清除率59.3%、脂質(zhì)氧化抑制率81.8%。研究表明，刺五加有很強(qiáng)清除自由基的能力，可以防止自由基堆積導(dǎo)致的蛋白質(zhì)功能障礙、DNA 損傷和細(xì)胞死亡等一系列問(wèn)題。刺五加超強(qiáng)的抗氧化應(yīng)激能力是其治療帕金森病的機(jī)制之一。

2.3 抗炎 小膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)度激活、功能失調(diào)，可能會(huì)誘發(fā)有害的神經(jīng)毒性作用，分泌各種促炎介質(zhì)，炎癥反應(yīng)會(huì)損害多巴胺神經(jīng)元[20]，甚至加速大腦多巴胺神經(jīng)元的死亡，有研究認(rèn)為炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致帕金森的機(jī)制之一。JIN M L 等[21]研究發(fā)現(xiàn)刺五加可以通過(guò)激活核相關(guān)因子（Nrf2）異位和增加Nrf2 啟動(dòng)子活性來(lái)誘導(dǎo)血紅素氧化酶的表達(dá)，誘導(dǎo)的血紅素氧化酶通過(guò)P38 結(jié)合蛋白通路表達(dá)在抗神經(jīng)炎癥和神經(jīng)保護(hù)反應(yīng)的產(chǎn)生中發(fā)揮重要作用。林秋葉[22]發(fā)現(xiàn)刺五加水提取物可以有效的抑制小鼠巨噬細(xì)胞分泌的NO、H2O2等促炎介質(zhì)的釋放從而發(fā)揮抗炎作用。

2.4 調(diào)節(jié)胃腸道功能障礙 PD 早期患者出現(xiàn)的胃腸功能障礙的癥狀遠(yuǎn)遠(yuǎn)早于其他癥狀，病理狀態(tài)中帕金森產(chǎn)生的胃腸功能障礙是由于腦干迷走神經(jīng)背核變性導(dǎo)致神經(jīng)元缺失，相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)分泌不足引起了胃蠕動(dòng)減弱[23]，出現(xiàn)胃腸功能障礙是早期的病理表現(xiàn)，隨著患期增加，PD 的癥狀還會(huì)逐漸表現(xiàn)出來(lái)，胃腸功能障礙還會(huì)進(jìn)一步影響，引發(fā)患者的其他癥狀甚至影響治療藥物的吸收，有研究猜測(cè)胃腸功能障礙是帕金森發(fā)病機(jī)制之一。郗穎等[24]采用刺五加注射液研究阿托品引起的胃腸道功能障礙，作者認(rèn)為刺五加可能通過(guò)抑制乙酰膽堿酯酶活性，最終使腦內(nèi)乙酰膽堿分泌增多這一途徑來(lái)改善胃腸功能障礙。

2.5 降低LRRK2 蛋白的不良反應(yīng) 研究發(fā)現(xiàn)，遺傳可引起PD。PKRK 基因突變導(dǎo)致a-synuclein 大量分泌促炎因子損失多巴胺神經(jīng)元，最終導(dǎo)致了PD 的發(fā)生。PKRK 基因編碼的LRRK2 蛋白突變、異常聚集等都可能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡從而引起帕金森病。LRRK2 具有提高蛋白激酶活性的功能，可間接調(diào)控神經(jīng)退行性系統(tǒng)。大部分?jǐn)?shù)據(jù)都顯示，LRRK2 基因是PD 常染色體顯性遺傳致病基因突變率最高的。潘思文等[25]用MPP ＋誘導(dǎo)PCl2 細(xì)胞進(jìn)行刺五加干預(yù)實(shí)驗(yàn)，并用免疫細(xì)胞化學(xué)法和WesternBlot 測(cè)定PCl2 細(xì)胞的LRRK2 蛋白的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，刺五加干預(yù)后的給藥組的LRRK2 的蛋白表達(dá)比模型組低，得出刺五加可以降低LRRK 2 基因的毒性作用，推測(cè)刺五加可以下調(diào)LRRK2 蛋白的表達(dá)進(jìn)而防止LRRK2 蛋白對(duì)神經(jīng)元的毒性作用。刺五加可以減少和防止LRRK2 蛋白對(duì)神經(jīng)元的毒性，同時(shí)，也為遺傳性帕金森的治療打開了一條新思路，為帕金森靶點(diǎn)基因治療的藥物研究提供了參考。

3 刺五加治療帕金森病的有效成分及藥代動(dòng)力學(xué)研究

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，刺五加中的活性成分主要包括皂苷、黃酮類化合物、葉黃素、揮發(fā)油和異嗪皮啶等，其中皂苷類及異嗪皮啶對(duì)PD 有較好的療效。董楊等[26]用刺五加苷B 治療MPP+誘導(dǎo)的PC12 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了刺五加的酚苷類化合物苷B 作為有效成分之一可以抑制p-ERK 的表達(dá)，下調(diào)c-fos、c-jun 基因的表達(dá)來(lái)抑制細(xì)胞凋亡，發(fā)揮治療PD 的作用。劉樹民[27]確定50%乙醇洗脫組為刺五加有效成分后對(duì)PD 模型小鼠進(jìn)行給藥治療，發(fā)現(xiàn)了刺五加有效成分可以提高PD 小鼠GABA、TH 的陽(yáng)性表達(dá)，并檢測(cè)和分離刺五加有效成分，發(fā)現(xiàn)了4 種活性成分：刺五加苷B、刺五加苷D、刺五加苷E 和異嗪皮啶，并且這4 種活性成分均可提高M(jìn)PP+誘導(dǎo)的PC12 損傷細(xì)胞的存活率。研究發(fā)現(xiàn)刺五加活性成分可為刺五加新藥的開發(fā)提供新思路，現(xiàn)有的刺五加藥動(dòng)學(xué)研究也可以更好地為刺五加的臨床用藥和用量提供參考。盧芳等[28]用魚藤酮制作PD小鼠模型，手術(shù)安裝探針導(dǎo)管于小鼠左側(cè)紋狀體區(qū)，用刺五加有效成分異嗪皮啶灌胃給藥后用微透析技術(shù)間隔取樣，發(fā)現(xiàn)給藥后的5 min 即可在小鼠紋狀體細(xì)胞外液檢測(cè)到，15 min 時(shí)，異嗪皮啶濃度達(dá)到峰值。在另一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，盧芳等[29]對(duì)大鼠進(jìn)行刺五加提取物灌胃，分別提取并檢驗(yàn)給藥后大鼠的膽汁、血漿、尿液和糞便，通過(guò)UPLC-Q-TOF-MS 分析，只檢測(cè)到異嗪皮啶原型，發(fā)現(xiàn)刺五加苷B 在大鼠體內(nèi)主要以脫糖基、脫甲基化、乙?；?、葡萄糖醛酸化等形式代謝，而刺五加苷D 是在脫葡萄糖后，以脫甲基化和葡萄糖醛酸化代謝，異嗪皮啶則以原型葡萄糖醛酸苷為中間產(chǎn)物后又以原型排出體外。血腦屏障透過(guò)率高，進(jìn)一步說(shuō)明刺五加有望成為治療PD 的新藥物。

4 刺五加在帕金森病的臨床應(yīng)用

況時(shí)祥等[30]將60 例帕金森原發(fā)性患者，隨機(jī)分為對(duì)照組和治療組，60 例患者原有治療都是服用左旋多巴，個(gè)別加服用安坦、溴隱亭，在各自用藥用量不變的情況下，治療組前10～15 d 靜脈滴注刺五加注射液后改為口服刺五加口服液。3 個(gè)療程結(jié)束后，治療組webester 評(píng)分明顯優(yōu)于對(duì)照組，劑末少動(dòng)患者癥狀也有所改善，開關(guān)現(xiàn)象患者開期延長(zhǎng)，甚至有2 例消失。程秀蘭等[31]對(duì)20 例單用美多巴、8 例服用美多巴加服安坦的PD 患者加服刺五加片，3 個(gè)月后，患者M(jìn)DRSPD 評(píng)分均有進(jìn)步，血常規(guī)、肝腎功能、尿常規(guī)等與治療前變化不大，證實(shí)刺五加治療PD 的安全、有效。

綜上所述，刺五加治療PD 療效確切，成分相對(duì)清晰，機(jī)制相對(duì)明確，不良反應(yīng)較低，是一味值得進(jìn)一步挖掘和開發(fā)的治療PD 的藥物。目前對(duì)于刺五加治療PD 的研究大多停留在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)上，作用機(jī)制研究還不夠深入；臨床研究相對(duì)較少，若是用于人體可能會(huì)存在一定偏差和不穩(wěn)定因素。希望未來(lái)能有更多的臨床實(shí)踐去挖掘刺五加治療PD 的價(jià)值，尋求潛在、安全的治療靶點(diǎn)，加快刺五加的開發(fā)與應(yīng)用。