子宮內(nèi)膜癌組織中甲狀腺激素受體β1和肝癌衍生生長因子的表達與臨床生物學(xué)行為和預(yù)后的關(guān)系

許運巧 剛小青 徐 霞

子宮內(nèi)膜癌(Endometrial cancer)作為常見的婦科惡性腫瘤，已呈現(xiàn)總體發(fā)病年齡提前和發(fā)病率上升的趨勢[1-2]。根據(jù)國家腫瘤中心的數(shù)據(jù)顯示，2015年中國新出現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌病例63 400例，死亡21 800例[3]。大多數(shù)子宮內(nèi)膜癌患者在早期被診斷出并能得到及時治療，但是有少數(shù)子宮內(nèi)膜癌患者被發(fā)現(xiàn)已為晚期或發(fā)生復(fù)發(fā)等情況，其治療療效以及預(yù)后均較差，且缺少特效的治療方法，其5年生存率只有25%～30%[4-5]。研究表明甲狀腺激素受體β1(TRβ1)在多種腫瘤組織中表達均降低甚至完全缺失，推測TRβ1可能是一種抑癌基因，可以抑制腫瘤的發(fā)生，但TRβ1在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的表達研究尚少[6-7]。肝癌衍生生長因子(hepatoma-derivedgrowth factor,HDGF)是一種肝素結(jié)合蛋白，不僅能促進多種細(xì)胞的增生和血管生成，還與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[8-9]。因此本研究分析TRβ1和HDGF水平與子宮內(nèi)膜癌中的臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性，旨在為子宮內(nèi)膜癌確立生物標(biāo)志物的進一步研究提供數(shù)據(jù)參考。現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取2015年2月至2018年2月本院收治子宮內(nèi)膜癌患者58例，年齡36～71歲，平均(54.25±6.87)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《子宮內(nèi)膜癌診治規(guī)范》[10]中關(guān)于子宮內(nèi)膜癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，術(shù)后病理診斷為子宮內(nèi)膜癌，且患者行手術(shù)治療；②患者術(shù)前未行放、化療等其他治療；③患者的臨床資料完整；④患者及家屬已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并患有婦科炎癥患者；②合并其他惡性腫瘤；③合并處于妊娠狀態(tài)患者。

1.2 免疫組化分析TRβ1和HDGF水平

用免疫組織化學(xué)檢測TRβ1和HDGF表達，以鼠抗人TRβ1和HDGF單克隆抗體為一抗，用已知陽性切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照，用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，參考文獻標(biāo)準(zhǔn)[7]判斷，TRβ1和HDGF陽性產(chǎn)物均位于細(xì)胞核，視野中出現(xiàn)粗細(xì)一致的棕黃色為陽性染色，無棕色反應(yīng)為陰性染色。在陽性顆粒密集部位隨機選取10個200倍視野，計數(shù)每個視野中細(xì)胞的染色情況，取平均值。根據(jù)陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)對其進行分級，陰性為陽性細(xì)胞數(shù)<10%；陽性為陽性細(xì)胞數(shù)>10%。

1.3 收集臨床資料以及隨訪資料

收集患者年齡、性別、組織學(xué)分級、腫瘤最大徑等臨床資料。采用電話及門診或住院復(fù)查等方式進行隨訪3年，了解患者生存情況。隨訪時間截止2021年2月。根據(jù)隨訪結(jié)果將患者分為死亡組(n=22)和生存組(n=36)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 TRβ1和HDGF與子宮內(nèi)膜癌患者的臨床生物學(xué)行為的關(guān)系

免疫組化結(jié)果顯示：TRβ1陽性6例，陰性52例；HDGF表達陽性50例，陰性8例。根據(jù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TRβ1和HDGF與浸潤深度、分化程度無關(guān)(P均>0.05)，與臨床分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，見表1。

表1 TRβ1和HDGF與子宮內(nèi)膜癌患者的臨床生物學(xué)行為關(guān)系/例

2.2 生存組與死亡組 TRβ1和HDGF表達情況比較

生存組的 TRβ1表達陽性率明顯高于死亡組(P<0.05)，生存組的 HDGF表達陽性率明顯低于死亡組(P<0.05)，見表 2。

表2 生存組與死亡組 TRβ1和HDGF表達情況比較/例

2.3 影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后多因素logistic分析

多因素logistic 回歸分析顯示，TRβ1和HDGF均為影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨立危險因素(P<0.05)， 見表3。

表3 影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的多因素logistic分析

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是臨床常見的女性生殖道惡性腫瘤，發(fā)病率在近年來呈不斷上升的趨勢，一般50～70歲年齡段高發(fā)，且有年輕化發(fā)展的趨勢[11]。在我國，每年子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率為0.634% ，病死率為0.218%[12]。手術(shù)為主的綜合治療可提高子宮內(nèi)膜癌患者生存率，但侵襲或轉(zhuǎn)移者仍預(yù)后不良[13]。癌癥的發(fā)生為多機制、多因素的復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生被認(rèn)為是一個多步驟的過程，涉及激素調(diào)節(jié)、基因突變、粘附分子和細(xì)胞凋亡的協(xié)調(diào)相互作用，但是目前子宮內(nèi)膜癌確切的病理機制尚未明確[14-15]。

TRβ1是一種甲狀腺激素受體蛋白，在甲狀腺和乳腺中均有表達[16]。研究表明突變體TRβ1具有致癌活性，可與p85α持續(xù)結(jié)合，激活PI3K-AKT-ERK/STAT3信號通路，從而促進細(xì)胞增殖和侵襲，抑制細(xì)胞凋亡[17-18]。HDGF的基因位于染色體1q21-23上，是一種肝素結(jié)合生長因子，最初是從人類肝癌細(xì)胞系HuH7條件下的培養(yǎng)基中純化出來的[19-20]。HDGF在正常組織和腫瘤細(xì)胞系中普遍表達[21]。最近的研究報道稱，HDGF可作為SREBP1介導(dǎo)的脂肪生成基因轉(zhuǎn)錄的共激活劑[22]。HDGF被表征為許多細(xì)胞類型的有絲分裂原并定位于細(xì)胞核，這是其有絲分裂活性所必需的[23]。 HDGF促進生長、抑制分化和表現(xiàn)出血管生成特性等特征表明其在癌癥誘導(dǎo)和腫瘤進展中發(fā)揮作用[24]。因此，許多研究關(guān)注到HDGF作為預(yù)后標(biāo)志物的重要性，并證明了其對口腔癌、食管癌、胃腸道間質(zhì)瘤、腦膜瘤、肝細(xì)胞癌和子宮內(nèi)膜癌的影響[25-27]。本研究中TRβ1和HDGF與臨床分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，TRβ1在抑制子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的同時還可以減少淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，HDGF和β-catenin在誘發(fā)子宮內(nèi)膜癌的同時，還可以增強侵襲轉(zhuǎn)移，加快疾病的進展。生存組的TRβ1表達水平明顯高于死亡組，生存組的HDGF表達水平明顯低于死亡組。TRβ1和HDGF均為影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨立危險因素。這提示其和子宮內(nèi)膜癌預(yù)后有一定關(guān)系，通過測定其表達情況能夠輔助預(yù)后的評價。

綜上所述，子宮內(nèi)膜癌組織中TRβ1和HDGF的表達失調(diào)，能夠反映腫瘤的臨床生物學(xué)行為，可作為子宮內(nèi)膜癌預(yù)后評價的輔助指標(biāo)。然而本研究存在偏移，首先是中心單一以及樣本量偏少，以及隨訪時間短，因此未來還需要多中心以及更大樣本量的前瞻性試驗來證實此結(jié)果。