宮頸癌組織中CHI3L1、NRIP1蛋白及LCoR的表達(dá)與臨床病理特征、預(yù)后的相關(guān)性

敬文娜 朱崢燕

宮頸癌為臨床常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，患病率較高，且呈逐年上升趨勢[1-2]?，F(xiàn)階段，臨床針對宮頸癌患者多通過放化療、手術(shù)等措施進(jìn)行治療，雖能在一定程度上控制病情，然而治療效果與臨床的預(yù)期尚存一段距離，患者死亡幾率仍處于較高水平[3]。伴隨臨床醫(yī)學(xué)手段的快速進(jìn)步，分子靶向治療現(xiàn)已逐步發(fā)展為臨床診治宮頸癌的新型方式，但臨床尚未對該病的具體發(fā)病機(jī)制進(jìn)行全部明晰，因而臨床缺少與之對應(yīng)的分子治療靶點。因此，臨床需積極的尋求宮頸癌的發(fā)病機(jī)制，探尋有關(guān)分子標(biāo)志物，以指導(dǎo)臨床施行個體化的治療。幾丁質(zhì)酶-3樣蛋白-1(CHI3L1)由巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等多種細(xì)胞釋放，在多種腫瘤細(xì)胞內(nèi)均存異常表達(dá)。而核受體相互作用蛋白1(NRIP1)在腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡內(nèi)存在重要的調(diào)控能力，在各不相同的腫瘤細(xì)胞內(nèi)均異常表達(dá)[4]。而配體依賴性輔助抑制因子(LCoR)是核受體有關(guān)蛋白的配體依賴輔助抑制因子，能夠?qū)δ[瘤的發(fā)生、發(fā)展造成一定影響[5]。本研究以72例宮頸癌患者為研究對象，探究CHI3L1、NRIP1、LCoR在宮頸癌組織內(nèi)的表達(dá)意義及其與臨床病理特征、預(yù)后的聯(lián)系，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年2月至2019年2月收治的72例宮頸癌患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：全部宮頸癌患者均經(jīng)病理檢查證實；所有患者的病歷資料齊全；患者納入均遵循自愿原則，依從性較高，且簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在精神疾患者；伴有凝血功能異常者；合并嚴(yán)重的腦器質(zhì)性疾病者；存在其他惡性腫瘤者；合并其他婦科疾病者；存在血液系統(tǒng)病癥者。所有患者年齡34～62歲，平均年齡(49.57±5.36)歲；體重指數(shù)18.3～27.6 kg/m2，平均體重指數(shù)(23.59±1.46)kg/m2；國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期：13例Ⅰ期，15例Ⅱ期，32例Ⅲ期，12例Ⅳ期；腫瘤浸潤深度：31例淺肌層，41例深肌層；腫瘤最大直徑：40例<3 cm、32例≥3 cm；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：34例未轉(zhuǎn)移，38例轉(zhuǎn)移；病理類型：35例鱗癌，37例腺癌。

1.2 方法

標(biāo)本采集：于手術(shù)過程中采集全部患者的癌組織與癌旁組織(距腫瘤組織邊緣≥5 cm)標(biāo)本，用10%甲醇溶液固定24 h，常規(guī)石蠟包埋處理，制作為4 μm的組織切片。免疫組織化學(xué)法測定CHI3L1、NRIP1、LCoR表達(dá)情況：將制作完畢的石蠟標(biāo)本放在二甲苯溶液之中施行10 min的脫蠟處理，然后調(diào)換二甲苯溶液再一次的放置10 min，以梯度酒精施以脫水；將標(biāo)本放在蛋白酶修復(fù)液中，并于常溫環(huán)境之下進(jìn)行30 min的孵育，之后將標(biāo)本放在3%過氧化氫溶液內(nèi)，以去過氧化物酶封閉液封存，孵育10 min過后用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)清洗；放入山羊血清后封閉30 min，滴加一抗，于室溫下靜置3 h，并采用PBS清洗3次，2 min/次，滴加二抗，于室溫環(huán)境之下孵育0.5 h，PBS清洗3次，2 min/次，然后采用蘇木精施行染色，脫水并封片。由兩名高年資的病理醫(yī)師進(jìn)行結(jié)果的判讀，在顯微鏡下觀察，依照染色細(xì)胞百分比與染色程度評分評判表達(dá)情況。染色細(xì)胞百分比：0分：在5%之下；1分：≥5%～25%；2分：>25%～50%；3分：>50%之上。染色強(qiáng)度：0分：無色；1分：淺黃色；2分：棕黃色；3分：棕褐色，染色細(xì)胞百分比與染色強(qiáng)度得分相乘為總分，0～2分為陰性，3～9分為陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)癌組織及癌旁組織中CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)率。(2)CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。(3)CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)率

癌組織中CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)率均高于癌旁組織，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。見表1。

表1 CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)率對比(例，%)

2.2 CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

宮頸癌組織內(nèi)CHI3L1、NRIP1、LCoR表達(dá)水平與年齡、病理類型無關(guān)(P>0.05)，與FIGO分期、腫瘤浸潤深度、腫瘤最大直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 宮頸癌組織中CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

2.3 CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系

Kaplan-Meier結(jié)果顯示：CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)患者的3年生存率均低于陰性表達(dá)，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。見圖1-3。

圖1 CHI3L1陽性表達(dá)者Kaplan-Meier生存曲線分析

圖2 NRIP1陽性表達(dá)者Kaplan-Meier生存曲線分析

圖3 LCoR陽性表達(dá)者Kaplan-Meier生存曲線分析

3 討論

宮頸癌在臨床的患病率較高，在女性惡性腫瘤中僅次于乳腺癌[6]。宮頸癌發(fā)病早期臨床表現(xiàn)較為隱匿，或缺乏典型性，患者常不重視，繼而造成大部分的患者經(jīng)臨床證實時病情已發(fā)展到中晚期，從而錯過最佳手術(shù)根治時間，加大臨床治療難度，給患者生命安全造成威脅[7-8]。伴隨分子診斷與靶向治療措施的持續(xù)改進(jìn)，宮頸癌患者的短期死亡率呈明顯降低趨勢，然而此類患者的整體預(yù)后情況仍處在相對較差水平[9-10]。由于臨床對于宮頸癌檢查缺乏早期的診斷標(biāo)志物，從而導(dǎo)致誤診、漏診率處于較高水平，探尋相關(guān)生物標(biāo)志物對宮頸癌患者預(yù)后進(jìn)行準(zhǔn)確預(yù)測至關(guān)重要[11]。

CHI3L1為分泌型糖蛋白，屬哺乳動物幾丁質(zhì)酶樣蛋白家族，可通過調(diào)節(jié)氧化損傷、炎癥小體激活等，在抵抗病原體、抗原誘導(dǎo)的損傷等方面發(fā)揮重要作用[12]。CHI3L1在多種人類腫瘤中過高表達(dá)，如乳腺癌、卵巢癌等，CHI3L1表達(dá)的異常與轉(zhuǎn)移性癌患者預(yù)后不良與生存周期縮短聯(lián)系緊密。NRIP1可與各不相同的蛋白發(fā)生相互作用，以此對細(xì)胞凋亡與機(jī)體免疫等信號傳導(dǎo)過程進(jìn)行干擾[13]。LCoR可通過與甲狀腺激素受體相互結(jié)合來起到抑制功效，從而對炎癥、腫瘤發(fā)生構(gòu)成影響。本研究結(jié)果顯示，癌組織中CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)率均高于癌旁組織，提示在宮頸癌患者的病灶組織內(nèi)CHI3L1、NRIP1、LCoR呈明顯的異常表達(dá)狀態(tài)，對上述三項指標(biāo)進(jìn)行早期的檢測，可及時明晰宮頸癌患者病情。其原因為腫瘤細(xì)胞之中的凋亡抑制因子會使得NRIP1產(chǎn)生泛素化，且還能夠改變泛素化NRIP1的構(gòu)象，使得其與生存激酶1結(jié)合，最終加速腫瘤細(xì)胞的增殖。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌組織內(nèi)CHI3L1、NRIP1、LCoR與FIGO分期、腫瘤浸潤深度、腫瘤最大直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，表明三項指標(biāo)與宮頸癌的局部浸潤與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移聯(lián)系緊密。本研究Kaplan-Meier結(jié)果顯示：CHI3L1、NRIP1、LCoR陽性表達(dá)患者的3年生存率均低于陰性表達(dá)。由此可見，臨床可將CHI3L1、NRIP1、LCoR作為宮頸癌患者預(yù)后評估的重要參考指標(biāo)。

綜上所述，宮頸癌患者的病灶組織內(nèi)CHI3L1、NRIP1、LCoR表現(xiàn)為過高水平，三者與患者FIGO分期、腫瘤浸潤深度等密切聯(lián)系，參與癌癥的發(fā)生、發(fā)展過程，且陽性表達(dá)患者的生存率更低，預(yù)后更差，監(jiān)測CHI3L1、NRIP1、LCoR可為宮頸癌患者預(yù)后評估及治療方案的制定提供參考。