血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢在血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要性探討

陳微 遼寧省葫蘆島市中心醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室 （遼寧 葫蘆島 125000）

內(nèi)容提要： 目的：探討并分析血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢在血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要性。方法：選取200份2019年1月～2019年12月經(jīng)本院檢驗(yàn)科檢測的血液標(biāo)本，將結(jié)果異常的80份列為觀察組，將結(jié)果正常的120份列為對照組，對所有標(biāo)本均行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢，對各組檢驗(yàn)后假陽性率與假陰性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并比較。結(jié)果：觀察組80份標(biāo)本中，假陽性27份（33.75%），對照組120份標(biāo)本中，假陰性8份（6.67%），兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；所有標(biāo)本行全自動血液分析儀檢測和血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢后發(fā)現(xiàn)，最終有19份（9.50%）結(jié)果不相符。結(jié)論：在臨床檢驗(yàn)中，不論血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果顯示是否出現(xiàn)異常情況，均行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢，能夠及時發(fā)現(xiàn)異常血液標(biāo)本，對提高診斷準(zhǔn)確性、制定治療方案等均有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。

血常規(guī)檢驗(yàn)是臨床上對疾病進(jìn)行診斷的常用手段之一，其結(jié)果的準(zhǔn)確與否直接關(guān)系著治療方案的制定及患者預(yù)后的評估，因此，各診斷人員應(yīng)將其重視起來。但是在實(shí)際血常規(guī)檢驗(yàn)工作中，影響其檢驗(yàn)結(jié)果的因素比較多，常見的如標(biāo)本質(zhì)量不合格、送檢時間超時、操作人員技術(shù)較低、檢測設(shè)備落后等[1]。因此，加強(qiáng)對血常規(guī)檢驗(yàn)過程的控制，保證血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，對臨床診斷及治療均有著極其重要的意義[2]。本次研究選取了200份2019年1月～2019年12月經(jīng)本院檢驗(yàn)科全自動血液分析儀檢測的血液標(biāo)本，詳細(xì)分析了血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢在血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要性，具體如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選取200份2019年1月～2019年12月經(jīng)本院檢驗(yàn)科檢測的血液標(biāo)本，將結(jié)果提示異常的80份列為觀察組，將結(jié)果提示正常的120份列為對照組，對照組中男性64例，女性56例，年齡22～74歲，平均（48.52±10.21）歲，本組中肝硬化、貧血、肺炎、淋巴結(jié)腫大、其他患者分別為40例、31例、28例、12例和9例；觀察組中男性42例，女性38例，年齡21～72歲，平均（49.01±10.59）歲，本組中肝硬化、貧血、肺炎、淋巴結(jié)腫大、其他患者分別為31例、20例、17例、8例和4例。本次研究經(jīng)過了本院倫理委員會的批準(zhǔn)。兩組中的血液標(biāo)本情況一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

對所有標(biāo)本均行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢。受檢人員清晨空腹，抽取其2mL肘部靜脈血，將其置于抗凝試管中，對血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理，采用本院全自動血液離心儀（型號：himac MC 450），將離心儀的轉(zhuǎn)速和離心時間分別設(shè)置為3000r/min和15min，分離出上層血清和下層血漿，特別置于零下20°C的環(huán)境中待檢。采用本院全自動血液分析儀（型號：邁瑞B(yǎng)C 6600）對血液中的血小板、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞百分比、嗜酸性粒細(xì)胞百分比、嗜堿性粒細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比等進(jìn)行檢測，將檢測結(jié)果做好詳細(xì)的記錄；之后在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行復(fù)檢，采用1000倍顯微鏡，在鏡下對經(jīng)血液樣本制片、染色等處理過的有核細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并對有核細(xì)胞進(jìn)行分類，對淋巴細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量等進(jìn)行詳細(xì)的觀察和記錄。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)

對各組檢驗(yàn)后假陽性率與假陰性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并比較。假陽性：血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果顯示，全自動血液分析儀顯示異常，顯微鏡復(fù)檢顯示正常；假陰性：全自動學(xué)院分析儀顯示正常，顯微鏡復(fù)檢顯示異常。血液細(xì)胞形態(tài)的判定標(biāo)準(zhǔn)：在1000倍的顯微鏡下，對血液樣本進(jìn)行制片、分類和計(jì)數(shù)，詳細(xì)觀察發(fā)細(xì)胞情況、中性分葉核粒細(xì)胞、血小板等細(xì)胞形態(tài)的異常情況。并將常規(guī)檢查結(jié)果與顯微鏡觀察下得到的數(shù)據(jù)信息進(jìn)行比較。血紅蛋白（Hb）：成年男性正常值在120g/L～160g/L，成年女性正常值在110g/L～150g/L；紅細(xì)胞（RBC）：成年男性正常值在4.0×1012/L～5.5×1012/L，成年女性正常值在3.5×1012/L～5.0×1012/L；白細(xì)胞（WBC）：成年人正常值在4.0×109/L～10.0×109/L，新生兒正常值在15.0×109/L～20.0×109/L，7個月～24個月的嬰兒正常值在11.0×109/L～12.0×109/L。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0軟件，用（n，%）和χ2對計(jì)數(shù)資料進(jìn)行表示和檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

觀察組80份標(biāo)本中，假陽性27份（33.75%），對照組120份標(biāo)本中，假陰性8份（6.67%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。所有標(biāo)本行分析儀檢測和復(fù)檢后發(fā)現(xiàn)，最終有19份（9.50%）結(jié)果不相符。

表1. 各組檢驗(yàn)后假陽性率與假陰性率比較

3.討論

血常規(guī)檢驗(yàn)是臨床上常用的疾病診斷方式之一，其主要是通過不同形式的檢驗(yàn)分析儀對血液中的各指標(biāo)成分進(jìn)行檢測，從而為疾病的診斷提供可行性較強(qiáng)的理論依據(jù)。通過進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)，主要是對機(jī)體血液中的白細(xì)胞分類、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白水平以及紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等水平進(jìn)行檢測，一般情況下，成年男性機(jī)體中血紅蛋白含量在120～160g/L，成年女性稍低，在110～150g/L。成年男性和成年女性紅細(xì)胞水平在4.0～5.5×1012/L和3.5～5.0×1012/L之間，新生兒紅細(xì)胞水平在6.0～7.0×1012/L之間。當(dāng)人體血液中的紅細(xì)胞數(shù)量增多、血紅蛋白水平升高時，機(jī)體會表現(xiàn)出慢性組織缺氧、血液濃縮等現(xiàn)象。但是如果人體血液中的紅細(xì)胞數(shù)量減少，血紅蛋白水平降低時，機(jī)體又會表現(xiàn)出貧血癥狀。一般情況下成年人和新生兒白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平分別在4.0～10.0×109/L和15.0～20.0×109/L之間，隨著兒童年齡的增長，7個月～24個月大的嬰幼兒其血液中的白細(xì)胞水平較剛出生時逐漸降低，一般在11.0～12.0×109/L。所以，當(dāng)健康人血液中的白細(xì)胞水平升高時，提示機(jī)體可能出現(xiàn)出血傾向、炎性感染、中毒等癥狀。因此，血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果受到了醫(yī)院及患者的高度重視。但是目前，臨床上可能會對血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響的因素比較多，比如血液標(biāo)本的不合格、檢驗(yàn)技術(shù)水平比較低等，都會導(dǎo)致血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。使得血液細(xì)胞學(xué)形態(tài)學(xué)檢測常出現(xiàn)漏診及誤診等情況，對臨床診斷及治療均造成了極其嚴(yán)重的影響。甚至導(dǎo)致患者錯過了最佳的治療時機(jī)，生命安全受到了威脅。因?yàn)槿梭w血液主要由血細(xì)胞和液體兩部分組成，在進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)時，也就是要對血液中的血細(xì)胞進(jìn)行檢驗(yàn)，血液中有三種不同的細(xì)胞，即紅細(xì)胞白細(xì)胞和血小板。醫(yī)院檢驗(yàn)室實(shí)施的血常規(guī)鏡檢標(biāo)準(zhǔn)都非常嚴(yán)格。近年來，隨著我國臨床診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，診斷設(shè)備的不斷更新，血液細(xì)胞分析儀被廣泛地應(yīng)用在了血常規(guī)檢驗(yàn)中，其應(yīng)用效果也得到了各界人士的高度認(rèn)可。全自動血液分析儀，不但檢測速度比較快，并且操作工程比較簡單，檢測效率比較高，在很大程度上解決了檢測慢、效率低等問題[3]。

隨著臨床研究的逐步深入，全自動血液分析儀也得到了不斷的更新及升級，逐漸代替了常規(guī)的顯微鏡檢查。但是也有研究人員認(rèn)為，全自動血液分析儀雖然在檢驗(yàn)精細(xì)化要求方面得到了提升，并且檢驗(yàn)的時效性還比較快，臨床操作更加簡潔，但是由于細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)是一項(xiàng)比較復(fù)雜的檢驗(yàn)項(xiàng)目，因此采用全自動血液分析與檢驗(yàn)依然存在著一定的漏檢及錯檢等情況，導(dǎo)致不能為臨床檢驗(yàn)及治療提供科學(xué)、客觀的指導(dǎo)依據(jù)，從而對血常規(guī)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性造成了嚴(yán)重的影響，甚至對臨床治療造成了延誤[4]。隨著全自動血液檢驗(yàn)分析儀一些應(yīng)用弊端的出現(xiàn)，臨床研究學(xué)者[5]對全自動血液檢驗(yàn)分析儀應(yīng)用過程中造成漏檢、錯檢的因素進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，可能是由于全自動檢驗(yàn)分析儀對一些指標(biāo)的敏感性比較低，如果患者出現(xiàn)了一些輕微的細(xì)胞學(xué)形態(tài)改變，采用全自動血液分析儀可能不能完全準(zhǔn)確的檢出，導(dǎo)致出現(xiàn)了漏診及誤診等情況，甚至引發(fā)了一些醫(yī)患糾紛事件。

采用顯微鏡進(jìn)行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)，能夠準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)部的形態(tài)變化，這一點(diǎn)與全自動血液分析與檢驗(yàn)相比較而言存在著明顯的優(yōu)勢，顯微鏡檢驗(yàn)?zāi)軌蚣皶r檢測出細(xì)胞的形態(tài)異常情況，從而為臨床診斷及治療提供準(zhǔn)確的、客觀性的指導(dǎo)依據(jù)[6]。全自動血液分析儀雖然能夠有效提高醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)工作的效率及質(zhì)量，但是在檢驗(yàn)的過程中依舊存在著一些不可忽視的問題，如在對血細(xì)胞的類型進(jìn)行分類時雖然操作比較簡單，但是并不能準(zhǔn)確地觀察到細(xì)胞內(nèi)部的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)等。比如，對于白血病、重度感染的患者，不能觀察到細(xì)胞內(nèi)部形態(tài)及結(jié)構(gòu)的變化，極易誤診或者漏診。臨床研究學(xué)者在對全自動血液分析儀和顯微鏡進(jìn)行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)過程中所表現(xiàn)出的優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn)進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，及時采用全自動血液分析儀對細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行檢查，對于檢查過程中發(fā)現(xiàn)的一些異常的血液標(biāo)本再進(jìn)行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)顯微鏡下復(fù)檢，通過顯微鏡進(jìn)一步明確細(xì)胞的形態(tài)以及質(zhì)量，保證了檢驗(yàn)結(jié)果的客觀性和準(zhǔn)確性[7]。因此，對于患有重度感染性疾病患者在對其進(jìn)行全自動血液分析儀血常規(guī)檢驗(yàn)后，在特異度和靈敏度較低的情況下，還應(yīng)對其實(shí)施血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢，最大程度的規(guī)避漏診及誤診事件的發(fā)生，進(jìn)而提高臨床診斷準(zhǔn)確率。而血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢能夠直接的顯示出血小板的異常情況，但是需要注意，首先要保證涂片及染色的質(zhì)量，細(xì)胞涂片染色時，要嚴(yán)格按照相應(yīng)的步驟進(jìn)行各項(xiàng)操作。其次，涂片方式要正確，涂片兩邊盡量預(yù)留1～2cm的間隙，厚度也要適中，邊緣清晰，核細(xì)胞的分布情況清晰可見[8]。

本次研究結(jié)果顯示，觀察組假陽性率（33.75%）高于對照組（6.67%），所有標(biāo)本行全自動血液分析儀檢測和血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢后發(fā)現(xiàn)，最終有19份（9.50%）結(jié)果不相符。李智原[9]在研究中選取了200份分析儀檢測異常的血液標(biāo)本（Ⅰ組）和200份分析儀檢測正常的血液標(biāo)本（Ⅱ組），通過血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢后發(fā)現(xiàn)，Ⅰ組的假陽性率和Ⅱ組的假陰性率分別為34.00%和6.00%，且對所有標(biāo)本行分析儀檢測和復(fù)檢后發(fā)現(xiàn)，與結(jié)果不符的幾率高達(dá)10.00%。本次研究結(jié)果與其相接近。進(jìn)一步證實(shí)了自動血液分析儀檢測和血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢在疾病診斷中的優(yōu)勢。需要注意的是，經(jīng)過檢驗(yàn)后結(jié)果與正常值相比較，如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞增多，血紅蛋白增多，則患者可能存在慢性組織缺氧、血液濃縮等情況，如果紅細(xì)胞以及血紅蛋白含量減少，則患者可能存在貧血[10,11]；如果白細(xì)胞含量增多，則提示患者可能出現(xiàn)白血病、炎性感染、出血、中毒等情況，如果白細(xì)胞含量減少，則提示患者可能存在麻疹、流感等病毒性傳染病，病情較為嚴(yán)重的還可能會出現(xiàn)敗血癥、血液病等[12,13]。

綜上所述，在臨床檢驗(yàn)中，采用全自動血液分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)后再行血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢，能夠及時發(fā)現(xiàn)異常血液標(biāo)本，對提高診斷準(zhǔn)確性、制定治療方案等均有著重要的現(xiàn)實(shí)意義，各臨床檢驗(yàn)科檢驗(yàn)人員應(yīng)加強(qiáng)對血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡下復(fù)檢診斷方式的學(xué)習(xí)和掌握，將其熟練的應(yīng)用于血常規(guī)檢驗(yàn)中。