現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷和防治中的應(yīng)用

代芳平

（甘肅省靜寧縣畜牧獸醫(yī)中心 743400）

從近幾年豬病流行特點來看，口蹄疫、非洲豬瘟的發(fā)病率依然很高，嚴重威脅豬只健康，如2018年遼寧地區(qū)發(fā)生的非洲豬瘟疫情危害性極大，死亡率高達100%。另外，非典型性疫病增多與新疫病不斷涌現(xiàn)也是當前豬病流行的顯著特點，均對豬只養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展造成很大影響。從豬病診斷與防治角度看，當前發(fā)生的豬病越來越復(fù)雜，多種病原混合感染現(xiàn)象越來越多，如豬肺疫與豬鏈球菌混合感染。與普通豬病相比，這類混合性感染病例無論是診斷難度還是防治難度均很大，有很高的死亡率，單純使用傳統(tǒng)的生物技術(shù)無法實現(xiàn)最佳防治效果。近些年來，在生物技術(shù)快速發(fā)展下，有越來越多的現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用于豬病診斷和防治中，且可以取得良好的應(yīng)用效果，推廣應(yīng)用價值非常高，因而值得進一步明確和探究。

1 現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷中的應(yīng)用

1.1 蛋白表達純化技術(shù)

在以往豬病診斷中，需要使用細菌采集培養(yǎng)方式，在分析病毒結(jié)構(gòu)和病毒特點后方可開展后續(xù)治療，此過程需要花費較多的時間，往往會錯過最佳治療時間，應(yīng)用效果不佳。而蛋白表達純化技術(shù)的出現(xiàn)與廣泛應(yīng)用很好地解決了這一問題，可大大提升豬病診斷效率。具體來說，蛋白表達純化技術(shù)是當前一種非常常用的生物技術(shù)，其優(yōu)勢在于可以精準判斷豬病類型、病原和病因，且診斷時間短，可以在短時間內(nèi)制定出科學(xué)有效的治療方案[1]。在診斷過程中，蛋白表達純化技術(shù)可以利用免疫抗原基因?qū)ωi病加以診斷，一些特殊和復(fù)雜的豬病可以在免疫反應(yīng)過程中被確定，且誤診率較低。

1.2 免疫標記技術(shù)

與蛋白表達純化技術(shù)一樣，免疫標記技術(shù)在豬病診斷中也非常常用。在實際應(yīng)用過程中，免疫標記技術(shù)可以通過兩種特性來完成豬病的診斷，即標記分子的高敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性，應(yīng)用效果十分顯著。目前來看，免疫標記技術(shù)中可用的技術(shù)類型較多，尤其是熒光抗體標記技術(shù)、酶標記抗體技術(shù)。如在豬流行性腹瀉診斷中，因為與豬傳染性胃炎的臨床癥狀存在較大的相同性，極易出現(xiàn)誤診情況，為確保診斷結(jié)果的準確性，必須對病豬致病病原做好調(diào)查，此時可以使用免疫標記技術(shù)。在實際應(yīng)用免疫標記技術(shù)時，診斷人員先取病豬的小腸病變組織，而后進行冰凍切片處理，而后可以使用熒光抗體標記技術(shù)來檢查，當發(fā)現(xiàn)標記細菌時即可以確診，在診斷過程中無需花費太多的時間，且診斷準確率高。

1.3 血清學(xué)檢查

在豬病診斷中，血清學(xué)檢查主要有兩種方式，一是沉淀試驗，二是凝集試驗，均有很好的診斷價值。以沉淀試驗為例，病毒性可溶性抗原與血清在與抗體結(jié)合后，電解質(zhì)會轉(zhuǎn)化為肉眼可見的沉淀物質(zhì)，通過分析沉淀物質(zhì)可以精準確定出病豬的疾病類型。從當前沉淀試驗的應(yīng)用來看，其在豬傳染性水皰、豬肺炎、豬鏈球菌病中可以取得很好的診斷效果。另外，沉淀實驗在應(yīng)用方式上也較為多樣、靈活，主要有環(huán)狀沉淀試驗和免疫電泳技術(shù)，不過兩種技術(shù)在豬病診斷范圍方面具有一定的差異，免疫電泳技術(shù)廣泛應(yīng)用于豬傳染性水皰診斷中，環(huán)狀沉淀試驗廣泛應(yīng)用在豬鏈球菌血清鑒定中。

再以凝集試驗為例，在應(yīng)用時將細菌或病毒吸附到細胞表面，確?？梢耘c抗體相結(jié)合，隨后加入電解質(zhì)促使其發(fā)生反應(yīng)，這樣可以讓細菌或病毒有效地凝聚成團塊，此時便可通過檢測物質(zhì)來判斷病原與病因。在應(yīng)用凝集試驗時需要特別注意，當診斷內(nèi)容不同時要采取不同的吸附介質(zhì)，在診斷豬支原體病時可以使用紅細胞；在診斷豬鏈球菌時可以使用載玻片；在診斷豬偽狂犬病時可以使用乳膠；在診斷豬氣喘病時可以使用血液。

2 現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病防治中的應(yīng)用

2.1 亞單位疫苗

亞單位疫苗的原理是憑借微生物表面的抗原成分，此時可以激發(fā)豬只體內(nèi)的免疫反應(yīng)。在長期的實踐應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，亞單位疫苗有非常好的緊急免疫控制效果，尤其是在豬圓環(huán)病毒防治中的效果更佳。

2.2 活載體疫苗

在豬病治療中，目前所使用的活載體疫苗可以分為兩大類，即非復(fù)制性活載體、復(fù)制性活載體。以非復(fù)制性活載體疫苗為例，其優(yōu)勢在于有很強的免疫能力，當注射至豬只體內(nèi)后，可迅速刺激豬只保護免疫系統(tǒng)，起到應(yīng)有的防護作用 [2]。更為有利的一點是，在使用非復(fù)制性活載體疫苗后，豬只體液免疫系統(tǒng)和體內(nèi)細胞免疫系統(tǒng)均被刺激，可有效阻止病毒的進一步入侵，可最大限度去抑制疫病的發(fā)生。另外，這種非復(fù)制性活載體疫苗的使用量少，藥效長，且成本低。不過在長時間應(yīng)用過程中也發(fā)現(xiàn)非復(fù)制性活載體疫苗存在一定缺陷，當病豬的PRV基因缺失時，非復(fù)制性活載體疫苗會與其他病毒重組，繼而導(dǎo)致病毒毒性增加，豬只肉質(zhì)會有所下降，極易對消費者身體造成影響。復(fù)制性活載體疫苗可以刺激豬只免疫機能，最大限度去提升免疫力，以此有效防控豬病。

2.3 干擾素

干擾素的廣泛應(yīng)用與現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展有著十分密切的關(guān)系，在豬病防治中有很好的效果。從目前干擾素的應(yīng)用看，在豬流行性腹瀉、豬圓環(huán)病毒病與藍耳病、豬傳染性胃腸炎、口蹄疫的防治中均有很好的應(yīng)用效果[3]。如在豬傳染性胃腸炎防治中可以向豬只肌注干擾素，為提升防治效果可以考慮聯(lián)用雙黃連注射液。再比如防治豬圓環(huán)病毒病與藍耳病時，可以按照0.1ml/kg的劑量向豬只肌肉注射干擾素，同樣可以取得很好的防治效果。

2.4 添加劑與生菌劑的應(yīng)用

在豬只飼養(yǎng)過程中，若是沒有及時清理圈舍，或圈舍光照通風不足，極易產(chǎn)生有害氣體和致病菌，豬只長期生存在這樣環(huán)境下更易致病，尤其是會對消化系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)健康造成影響。在近年的生物技術(shù)發(fā)展中憑借DNA重組技術(shù)，科學(xué)家已研究出寡肽和寡糖類添加劑，將其添加至豬只飼料中可以有效促進豬只胃腸蠕動和水解作用，最大限度的減少飼養(yǎng)環(huán)境對豬只健康的影響。除此之外，一些飼料中含有一定的重金屬和化學(xué)物質(zhì)，這對豬只健康有很大影響，極易導(dǎo)致豬只患病，損失嚴重。為確保解決這一問題，近年來，科學(xué)家在生物技術(shù)的支撐下，研發(fā)出了生菌劑，當使用生菌劑后，豬只消化能力可以得到很大程度地提升，體內(nèi)的有害物質(zhì)可以有效排出，疫病的發(fā)生概率也可大大降低。

3 結(jié)語

現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷與防治中發(fā)揮著十分關(guān)鍵的作用，非常值得推廣應(yīng)用。目前使用的免疫標記技術(shù)、活載體疫苗、血清學(xué)試驗、蛋白表達純化技術(shù)不僅有很好的應(yīng)用效果，且有很大的發(fā)展空間，因而后續(xù)要進一步加大研究力度，以便掌握更多的生物技術(shù)知識，更好地將其應(yīng)用到豬病防疫中。