參加動物防疫采樣工作發(fā)現(xiàn)的問題與思考

張曉敏 白唯

（陜西省大荔縣動物疫病預(yù)防控制中心 715100）

在重大動物疫病監(jiān)測中采樣工作至關(guān)重要。采樣方法、采樣數(shù)量及樣品質(zhì)量直接影響監(jiān)測結(jié)果的準(zhǔn)確性和監(jiān)測結(jié)論的科學(xué)性。因此，對負(fù)責(zé)采樣人員如何掌握采樣方法采樣技術(shù)多有特定要求，只有符合要求的技術(shù)人員才能獲得合格的樣品。

在現(xiàn)在基層防疫工作體系中，由于單位職責(zé)劃分和方便工作管理多年來長期形成了一套工作模式。在這套模式中實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測工作大多與采樣分離，主要負(fù)責(zé)接收樣品和實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測工作，采樣工作由縣級防疫工作人員組織相關(guān)技術(shù)人員指導(dǎo)基層站人員實(shí)施完成。

身為獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)工作人員，今年有幸被抽調(diào)參加省市對大荔縣春季動物免疫考核驗(yàn)收工作。采樣監(jiān)測是每年驗(yàn)收工作必不可少的一項，也是評價免疫效果最有效的科學(xué)依據(jù)之一。

1 采樣任務(wù)要求

根據(jù)上級文件要求，被抽查縣區(qū)內(nèi)隨機(jī)抽查4個規(guī)模場（1個雞場、1個豬場、1個牛場、1個羊場），每個場采樣15份。1個生豬屠宰場采樣15份；1個家禽屠宰場采樣15份。抽查2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，每個鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽查5～10個養(yǎng)殖戶，隨機(jī)抽取畜禽血樣各15份，共采集血清60份。

共采集家禽全血樣60份，家畜全血樣90份。

附件對春季重大動物疫病采樣要求：本次檢查采取全血樣品；同一規(guī)模場縣區(qū)不同日齡的動物采樣；散養(yǎng)采樣每村不少于5戶；采樣材料由各縣準(zhǔn)備，家畜樣品每份不少于5ml全血，家禽不少于2ml全血；血樣編號豬A01-A30、牛B01-B30、羊C01-C30、雞D01-D30；采樣時做好消毒和防護(hù)，同種動物采樣先到養(yǎng)殖場，再到散養(yǎng)戶。

2 采樣準(zhǔn)備及實(shí)施采樣

準(zhǔn)備防護(hù)服、一次性注射器、酒精棉球、一次性手套、非抗凝管等。在采樣工作中嚴(yán)格規(guī)范操作，采集完成了所要求的樣品種類和數(shù)量，并按要求編號，填寫采樣信息表格。但由于氣溫偏高，采集血樣很快凝集，在二次注入非抗凝管時推力對凝集的紅細(xì)胞造成破壞引發(fā)分離血清部分發(fā)生溶血。

3 本次采樣存在問題與思考分析

（1）文件采樣監(jiān)測的目的和要求不明確。實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測工作依據(jù)國家及省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳制定出臺的 《2021年動物疫病監(jiān)測方案》，2021年監(jiān)測方案重點(diǎn)動物疫病監(jiān)測 （高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、雞新城疫）包括免疫抗體監(jiān)測和病原學(xué)檢測。結(jié)合監(jiān)測方案，因?yàn)槲募?yàn)收中包括生豬屠宰場和家禽交易市場，本次采樣除了采集血清樣本還應(yīng)有病原學(xué)樣本泄殖腔、咽喉拭子樣本，頜下淋巴結(jié)樣本及食道-咽部分泌物 （O-P液）樣本。但由于文件只要求我們采集畜禽血清樣品沒有要求其他樣品采集工作。

（2）文件中提到防疫驗(yàn)收工作包含各縣非洲豬瘟防控工作，對非洲豬瘟采樣沒有明確要求。非洲豬瘟采樣要求采集抗凝血。有人對非洲豬瘟采樣和其他血清學(xué)采樣要求區(qū)別不清晰。

（3）由于氣溫偏高，采集血樣很快凝集，在注入非抗凝管時的推力對凝集的紅細(xì)胞造成破壞，導(dǎo)致分離時血清部分溶血。其實(shí)將血樣導(dǎo)入非抗凝管的做法，個人認(rèn)為是不正確的，既增加了工作量，又破壞了血清質(zhì)量，給實(shí)驗(yàn)室檢測取樣造成極大的不便。

（4）采集血樣應(yīng)根據(jù)檢測目的確定樣品種類，監(jiān)測免疫抗體 （禽流感、新城疫抗體、口蹄疫抗體、豬瘟抗體）需要采集血清樣品；檢測病原需要采集病原學(xué)樣品。

（5）基層獸醫(yī) （特別縣鄉(xiāng)）專業(yè)人員嚴(yán)重缺乏，年齡老化。據(jù)調(diào)查2009年畜牧體制改革，大荔縣為健全畜牧體系增強(qiáng)服務(wù)職能將鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站擴(kuò)編增強(qiáng)隊伍至90多人。10多年過去了，由于退休雖然編制數(shù)不變，但實(shí)有在職人員減少至65人。在職人員50歲以上占60%以上。近年來事業(yè)單位招考用人體制的推行，基層防疫體系將面臨越來越嚴(yán)峻的用人荒。

（6）本次采樣出現(xiàn)問題是由于文件要求血樣為全血，其本意要求現(xiàn)場采樣的用意，并沒有對盛血容器進(jìn)行具體要求。而所采血樣從一次性注射器二次倒入非抗凝管 （上級要求）主要受上級部門人員誤導(dǎo)，自身缺乏采樣監(jiān)測知識，造成耗材費(fèi)力起不到良好的效果。

4 對策與建議

（1）建議上級部門發(fā)文安排采樣工作時明確監(jiān)測目的和任務(wù)要求，貫徹完成 《2021動物疫病監(jiān)測方案》中重大動物疫病的檢測任務(wù)。單純針對驗(yàn)收考核動物防疫效果，只需要采集血清樣品即可；但本次文件上級部門驗(yàn)收考核的是春季防疫為主，包含重大動物疫病防控全方位工作，理應(yīng)有病原學(xué)樣本。

（2）非洲豬瘟的防控工作主要檢查驗(yàn)收生豬養(yǎng)殖場對上級畜牧獸醫(yī)部門制定的養(yǎng)殖場調(diào)運(yùn)出入環(huán)節(jié)、飼養(yǎng)環(huán)節(jié)、定期監(jiān)測等環(huán)節(jié)生物安全防控措施的貫徹落實(shí)情況。非洲豬瘟檢測屬于分子生物 （病原）學(xué)范疇。根據(jù)國家病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理條例及實(shí)驗(yàn)室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，非洲豬瘟聚合酶鏈反應(yīng) （PCR）的檢測應(yīng)在國家認(rèn)可的二級以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。其樣本采集要求EDTA（10%乙二胺四乙酸二鈉）抗凝血，市場上可買到EDTA抗凝血管和非抗凝管兩種。豬前腔靜脈用一次性軟長針管采血直接流入抗凝血管中，輕輕搖動使管中包被的抗凝劑充分混勻，防止凝固，即可得到非洲豬瘟檢測要求的EDTA抗凝血樣品。非抗凝管用于放置血清血樣品，靜置足夠時間可分離血清。

（3）檢測動物免疫抗體血清血樣品的采集用一次性采血管，基層如果沒有采血管可用5ml一次注射器即可。選擇動物合適的部位用一次性注射器采血2～5ml，將采好血的注射器輕輕后拉少許，使血液表面有一定斜面，斜靠靜置30min以上，血清即可析出。這時才可整理帶走，否則急于帶走搖晃會破壞紅細(xì)胞而溶血。

（4）動物防疫體系人員缺乏是多年困擾難題之一，主要由于行業(yè)歧視、待遇不公、教育受限、招考門檻高等諸多因素造成。要打破困擾，需要用人單位降低門檻，提高待遇，增加招聘崗位及人員數(shù)量，吸引專業(yè)人才投入畜牧獸醫(yī)行業(yè)中來。

5 結(jié)束語

此文旨在運(yùn)用自身知識和經(jīng)驗(yàn)對失誤情況進(jìn)行分析，不對之處請指出，以期對日后做好相關(guān)工作提供參考。