陳永華
(江蘇省鹽城市大豐區(qū)大中街道畜牧獸醫(yī)站 224100)
豬丹毒病由豬丹毒桿菌感染所引起,以高熱和皮膚表面出現(xiàn)特異性的疹塊為特征,主要暴發(fā)于夏季和秋季,以2~8 月齡的豬發(fā)病為主,多為散發(fā)流行,全球都有報道[1]。我國主要流行于養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達的山東、河南、四川、廣東等省份,每年都會給養(yǎng)豬業(yè)造成較大的經(jīng)濟損失。
豬丹毒病的病原屬于丹毒絲菌屬的一種,革蘭氏染色呈陽性,新鮮病料染色觀察可見菌體實質(zhì)上是多形態(tài)樣的,在急性病例的組織或培養(yǎng)物中菌體很長,且直徑較細,為彎桿狀,大小約為0.2~0.4μm×0.8~2.6μm,一般單在,個別處于分裂期或剛完成二分裂繁殖的呈雙菌體,也能找到短鏈狀排列的菌群。在慢性病例的組織或陳舊培養(yǎng)物中多為長絲狀。丹毒菌在不良環(huán)境中不會形成芽孢體,表面無莢膜,無運動能力。光滑型的丹毒菌在血液瓊脂平板上菌落為圓形,邊緣整齊,表面光滑透明,呈現(xiàn)針尖樣,周圍有狹窄的草綠色溶血環(huán)。在肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)24~48h,培養(yǎng)物呈現(xiàn)出渾濁,管的底部有少量沉淀,該沉淀經(jīng)檢測大部分成分為菌體,培養(yǎng)物用力搖動可變?yōu)樾D(zhuǎn)的云霧狀。挑取菌落用接種針在明膠培養(yǎng)基中穿刺,于15~18℃的環(huán)境中培養(yǎng)4~8h,能見到該菌可沿穿刺線向四周呈現(xiàn)出側(cè)枝樣的生長,猶如一個試管刷狀。丹毒菌體外培養(yǎng)對營養(yǎng)的要求不高,對葡萄糖、乳糖等碳水化合物具有發(fā)酵作用。紫外線、高溫、干燥、強酸、強堿等環(huán)境均不利于丹毒菌的生存,臨床大多數(shù)種類的消毒劑都對其敏感,加強環(huán)境和帶豬消毒能明顯控制疫病的擴散[2]。
豬丹毒桿菌根據(jù)熱穩(wěn)定性抗原的不同可以分為多種血清型,不同的血清型又可以根據(jù)抗原表面的決定簇不同而引發(fā)的免疫學(xué)特征不同,再劃分多種血清亞型,這就使得該病通過接種疫苗來防控的難度加大。一則不同地區(qū)、不同豬場流行的血清型存在差別,二則即使是同一個豬場,在不同的季節(jié)和時段也可能感染不同的豬丹毒菌,故臨床免疫時一定要把控好當下最為流行的菌株,從而最大程度防控該病。不同的血清型菌株具有一種或多種共同的不耐熱抗原,同時也具有各自的特異型抗原。在疫苗選擇方面,目前市場存在兩種疫苗,一種為滅活苗,該苗由于對菌株進行了殺滅處理,安全性非常高,以氫氧化鋁吸附滅活疫苗、裂解疫苗以及豬丹毒—豬肺疫氫氧化鋁二聯(lián)滅活苗為主。滅活苗存在交叉免疫效果差的缺陷,同時接種后也只能產(chǎn)生體液免疫,不發(fā)生細胞免疫,應(yīng)用不是太廣泛。另一種是弱毒活疫苗,該苗進行了毒力弱化處理,不同血清型交叉免疫效果好,且接種后不但能發(fā)生體液免疫,還能產(chǎn)生細胞免疫,是當下各個豬場免疫的首選。
本病潛伏期差異較大,管理正規(guī)的豬場豬只抵抗力強,加上飼養(yǎng)密度小,感染后潛伏期較長,有的甚至能無癥狀耐過。管理水平低,飼養(yǎng)密度大的豬場感染后不到一周就可發(fā)病。根據(jù)疾病發(fā)生的緩急程度不同,本病分為最急性型、急性型和慢性型3 種。
最急性型病豬臨床較為少見,通常表現(xiàn)發(fā)病非常突然,大部分還未出現(xiàn)明顯癥狀就死亡。由于發(fā)病急,通常沒有時間治療,或者緊急用藥后藥物還未來得及發(fā)揮作用機體就已經(jīng)處于衰竭狀態(tài),此時即使藥物將病原菌殺滅,受感染的組織器官已經(jīng)發(fā)生器質(zhì)性病變,使得該型的病死率在95%以上,最終造成豬場嚴重的經(jīng)濟損失。
急性型是臨床發(fā)病最多的一種類型,感染豬多為敗血癥樣變化。發(fā)病初期體溫上升,最高可達43℃,采食量下降,部分豬甚至廢絕,精神高度沉郁,喜歡臥地不動,不愿行走,兩只眼睛潮紅,眼角常留淚斑,眼泡腫脹,有時出現(xiàn)嘔吐,尿液發(fā)紅,部分豬后期出現(xiàn)便秘或腹瀉。之后耳根、頸部、胸腹部、股內(nèi)側(cè)等皮膚較薄的地方出現(xiàn)不規(guī)則的疹塊,疹塊大小不同,早期為皮膚充血造成,手指按壓后疹塊消退,離開后又恢復(fù)原樣,后期疹塊為出血,指壓不褪色。疹塊出現(xiàn)后,體溫會快速下降至正常。
慢性型病例一部分為先天性發(fā)病較慢,另一部分為急性型轉(zhuǎn)化而來,由于皮膚長期病變,病程較長,使得頸部、背部、耳根處皮膚疹塊出現(xiàn)壞死,如皮革樣,有些脫落形成缺耳、斷尾,整個背部表面變?yōu)榧t色的油脂樣肉芽組織。還有些豬四肢關(guān)節(jié)腫脹,疼痛跛行,步履蹣跚,呼吸加快,心跳加速,經(jīng)常咳嗽,前期濕咳,后期轉(zhuǎn)為干咳,被毛粗亂,機體逐漸消瘦,最終因衰竭而死。
對病死豬進行剖檢,最急性型和急性型可見整個尸體表面有形態(tài)各異的暗紅色疹塊斑,其中有非常規(guī)則的菱形狀,這成為很多基層獸醫(yī)診斷本病的視病特征。胃腸粘膜發(fā)生炎癥,表現(xiàn)增厚、充血、出血,全身淋巴結(jié)腫大,呈紫紅色,切面緊張,多汁充血。脾臟也腫大,呈現(xiàn)出櫻桃紅色。腎臟腫大,表面為暗紅色的云霧狀樣,切開后皮質(zhì)部有暗紅色的小點,心包常有積水,心內(nèi)外膜有點狀出血。慢性型除了上述特征外,心臟的房室瓣有疣狀物出現(xiàn),形狀如菜花樣,關(guān)節(jié)腔內(nèi)可見到纖維素性滲出物。
通過病豬臨床的特征性表現(xiàn)一般都能進行初診,但有時由于體表的一些出血性病變和其他疾病存在相似之處,僅僅通過肉眼觀察和剖檢也難以下診斷結(jié)論,這就需要借助實驗室檢測進行確診。實驗室檢測主要采用血清學(xué)方法和分子生物學(xué)診斷法。
血清學(xué)方法主要適用于慢性型疾病的診斷,對急性敗血癥型診斷意義不大??蛇x用無自凝現(xiàn)象的光滑型豬丹毒桿菌接種于馬丁肉湯,培養(yǎng)24h 后,加入0.4%劑量的甲醛進行滅活處理,經(jīng)離心洗滌后,沉淀懸于1%甲醛生理鹽水中,制成含菌量約為60 億/ml 的菌懸液,加入20%甘油和0.001%結(jié)晶紫或煌綠,即可作為平板凝集試驗用抗原。試驗時取被檢豬的血液1滴,滴于清潔的玻板上,加上述制備的抗原1 滴,充分混合后,大約經(jīng)過60s 左右時間,如果混合液邊緣出現(xiàn)凝集塊則結(jié)果為陽性,表明豬有丹毒桿菌感染,反之結(jié)果為陰性。還有一種血清學(xué)診斷法,是用不同血清型的豬丹毒桿菌為免疫抗原,制備相應(yīng)血清型的高免血清,培養(yǎng)凝集試驗選用1 或2 型豬丹毒桿菌高免血清,使用時按照1:40~80 加入到蛋白?肉湯中,再加入抗生素防止污染,分裝后即得豬丹毒血清診斷液,該診斷液利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,通過體外觀察的免疫沉淀反應(yīng)來判斷分離的菌是否為豬丹毒。
分子生物學(xué)方法是利用丹毒菌特異性的核酸片段識別進行診斷的一種方法,主要是通過PCR 技術(shù),利用丹毒菌特有的引物對病料中的核酸進行擴增,若病料中感染有丹毒菌,則其核酸鏈片段就會大量復(fù)制,結(jié)果經(jīng)凝膠成像觀察即可判定。相較于血清型診斷法,分子生物學(xué)診斷法具有診斷速度快、靈敏度高、結(jié)果更為準確的優(yōu)勢,但對實驗室的硬件設(shè)備要求較高,檢測所使用的試劑盒價格也昂貴,使得檢測成本較高,通常資金雄厚的大型養(yǎng)殖集團、高校實驗室及科研院所使用較多。
預(yù)防本病需加強對健康豬群的免疫,提升豬場養(yǎng)殖水平,加強環(huán)境的消毒工作。
對健康豬群接種豬丹毒疫苗能最大程度控制本病的蔓延。疫苗接種后的2~3 周豬體內(nèi)即可產(chǎn)生合格滴度的抗體,從而抵御野毒的感染。需要提醒的是,疫苗接種針對的豬群是健康豬群,如果已經(jīng)感染豬丹毒桿菌,則疫苗接種后是無效的。另外,接種疫苗的毒株必須是與本地常流行毒株的血清型保持一致,這樣防疫才有針對性。接種疫苗的前后3d 不要使用對機體有免疫抑制的藥物,如地塞米松磷酸鈉、醋酸氟輕松、鹽酸潑尼松龍、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸鈉等。有條件的豬場可在免疫后的2 周左右檢測血清抗體水平,防止免疫失敗的現(xiàn)象出現(xiàn)。
養(yǎng)殖水平的高低關(guān)系到疾病發(fā)生率的高低,管理正規(guī)的豬場飼養(yǎng)密度合理,通風良好,豬舍環(huán)境溫度維持在15~25℃之間,相對濕度維持在40%~60%,豬生活良好,發(fā)病率低。中小型養(yǎng)殖場建議定期參加一些行業(yè)技術(shù)培訓(xùn)會,多與大型養(yǎng)殖場及行業(yè)技術(shù)專家交流,從而提升本場的管理水平。獸醫(yī)人員要經(jīng)常巡場,發(fā)現(xiàn)有精神不振,體表有出血斑的豬第一時間隔離診斷,若確診為豬丹毒桿菌感染,除了緊急治療外,同舍的其他豬采取藥物預(yù)防的措施防控擴散。飼料管理要得當,過期、發(fā)霉、變質(zhì)的飼料禁止飼喂。有本病流行的地區(qū)應(yīng)嚴控外來人員的拜訪,做好生物安全工作。
豬丹毒桿菌對大多數(shù)種類的消毒劑都敏感,建議每周至少全場整體消毒1 次,消毒劑可使用殺菌譜廣,價格不高,原料易采購的生石灰粉或火堿。每天進行1 次舍內(nèi)帶豬消毒,消毒劑可使用刺激性小且使用安全的新潔爾滅溶液、過硫酸氫鉀溶液或84 消毒液。外來車輛和人員必須在門口嚴格消毒后再允許進入,消毒劑可選擇刺激性小,殺菌譜廣的戊二醛癸甲溴銨溶液。豬場每日糞便需在遠離生產(chǎn)區(qū)的地方堆肥發(fā)酵處理,通過生物熱殺滅其中的病原。育肥豬在統(tǒng)一出欄后,空舍期間對舍內(nèi)所有區(qū)域不留死角地進行消毒,消毒前最好徹底進行衛(wèi)生打掃,之后地面和墻面噴涂石灰水,地面噴灑火堿溶液。料槽和飼喂器具清洗后表面噴灑消毒酒精或碘伏。豬在飼養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)皮膚有潰爛、出血或其他傷口時,及時用碘伏或草酸銨結(jié)晶紫消毒。
對豬丹毒菌敏感的抗生素以青霉素類為主,青霉素K、氨芐西林、阿莫西林、羧芐西林等都是治療本病的首選[3]。除此之外,磺胺類藥物也對丹毒菌敏感,如磺胺嘧啶鈉、磺胺六甲等,建議采用注射給藥的方式治療,連續(xù)用藥4~6d。除了抗生素外,中藥對本病也有較好的治療效果,中藥治療以清熱解毒或宣毒發(fā)表、透疹外出為原則,選用大青葉120g、生石膏40g、貝母40g、板藍根40g,一起混合后用粉碎機進行粉碎混合,拌入飼料中飼喂,采食量不佳者可進行煎煮,將藥渣過濾后濾液灌服,連用3~5d 可逐漸康復(fù)。