獸藥殘留分析中樣品前處理技術(shù)綜述

袁 勻 周寧縣獅城鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 福建周寧 355300

獸藥殘留不僅對(duì)人體有害，還會(huì)造成生態(tài)毒性。保證畜禽產(chǎn)品的安全，離不開可靠的獸藥殘留分析技術(shù)，獸藥殘留分析技術(shù)中至關(guān)重要的步驟便是獸藥殘留樣品前處理，本文對(duì)已報(bào)道的獸藥殘留前處理技術(shù)進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述。

1 液-液萃取

液-液萃?。↙LE）是最常見的純化方法。它可用有機(jī)溶劑從溶液中提取出分析物，或者從有機(jī)相或水相提取物中除去干擾物。液-液萃取成本低，無(wú)需特定的試驗(yàn)設(shè)備，不足之處是在萃取過(guò)程中會(huì)乳化、有機(jī)溶劑的消耗量大。羅瑞漣[1]建立了鹽析液液微萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，檢測(cè)牛奶中4種四環(huán)素類獸藥殘留，其回收率為81.71%～109.06%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于8%。

2 固相萃取

固相萃取（SPE）是一種利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理的微量樣品處理技術(shù)。與液-液萃取相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)：采用高效、高選擇性吸附劑（固定相），可以凈化小體積樣品，處理過(guò)程中不會(huì)乳化，不需要大量不混溶溶劑，可以明顯降低溶劑的使用量，簡(jiǎn)化樣品，降低成本[2]。彭英等[3]采用固相微萃取與高效液相色譜相結(jié)合，建立了牛乳中4種典型磺胺類藥物殘留的分析方法，平均加標(biāo)回收率為68.2%～100.3%。

3 基質(zhì)固相分散萃取

基質(zhì)固相分散萃?。∕SPD）是一種基于SPE的改進(jìn)的樣品處理方法。其原理是將涂有各種聚合物（如C18）的單體固相萃取材料與樣品一起研磨，得到半干混合物，將其作為填料裝柱，再用各種溶劑洗柱，洗去待測(cè)物質(zhì)。MSPD具有簡(jiǎn)單快速、樣品和溶劑消耗低、對(duì)血液和各種動(dòng)物組織等復(fù)雜樣品的處理有顯著優(yōu)勢(shì)。處理大量樣品時(shí)，可以明顯減少樣品的前處理工作量，節(jié)約有機(jī)溶劑的使用量，降低污染[4]。趙善貞等[5]建立了基質(zhì)固相分散萃取-同位素稀釋-液相色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中的100種獸藥，該方法加標(biāo)回收率為70%～120%。

4 磁性固相萃取

磁性固相萃?。∕-SPE）技術(shù)，是以磁性或可磁化材料作為吸附基質(zhì)。萃取過(guò)程中，磁性吸附劑不是直接填充到吸附柱，而是被添加到樣品溶液或懸浮液中，目標(biāo)待測(cè)物被分散的磁性吸附劑表面吸附，待測(cè)物與吸附劑在外部磁場(chǎng)作用下一起移動(dòng)，再用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵摚瑢⒋郎y(cè)物從樣品的基體中分離出來(lái)。采用M-SPE進(jìn)行食品樣品前處理，具有如下優(yōu)點(diǎn)：比表面積大、超順磁性、吸附位點(diǎn)多，濃縮后便于痕量分析；改性后易與分析物進(jìn)行特異性吸附，可避免食品中有機(jī)酸、脂肪等雜質(zhì)的干擾[6]。王澤嵐等[7]采用磁性固相萃取牛乳中4種痕量磺胺類抗生素，結(jié)合高效液相色譜-質(zhì)譜法，其回收率為69.7%~99.6%。

5 免疫親和色譜

免疫親和色譜（IAC）是一種基于抗原與抗體特異性可逆免疫結(jié)合反應(yīng)原理的色譜技術(shù)?；玖鞒淌菍⒖贵w與惰性基質(zhì)（如珠狀瓊脂糖、鍵合相硅膠）耦合，形成固相填充柱。當(dāng)樣品通過(guò)免疫親和色譜柱時(shí)，固定化的抗體選擇性地與分析物結(jié)合，其他未知樣品雜質(zhì)自由流出IAC柱，經(jīng)過(guò)洗滌和消除雜質(zhì)，抗原抗體復(fù)合物分解，分離后洗脫分析物，純化樣品。該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于待測(cè)物可被高效、高選擇性保留下來(lái)，對(duì)于復(fù)雜樣品痕量組分的凈化與富集特別適用[8]。袁中珍等[9]建立免疫親和柱凈化/高效液相色譜法檢測(cè)動(dòng)物源性食品中16種磺胺類藥物殘留，平均回收率為62%~104%。

6 超臨界流體萃取

超臨界流體萃?。⊿FE）是一種利用超臨界流體作為提取劑的萃取技術(shù)。超臨界流體的溶解能力與其密度密切相關(guān)，壓力、溫度等條件變化，超臨界流體的密度也將發(fā)生大幅度改變，得到不同溶解能力的超臨界流體并與待分離樣品結(jié)合，萃取分離出不同成分。余向陽(yáng)等[10]利用超臨界CO2萃取氣相色譜測(cè)定魚肌肉中的毒死蜱（有機(jī)殺蟲劑、殺螨劑）殘留量，同時(shí)完成萃取和分離兩步操作，添加回收率為77.3%~105.1%，分離率高且環(huán)保。

7 QuEChERS方法

QuEChERS方法一種基于SPE和MSPD的預(yù)處理方法。其原理是利用均質(zhì)的樣品經(jīng)過(guò)乙腈（或酸化乙腈）提?。辉偈褂幂腿←}鹽析分層；基于基質(zhì)固相分散原理，使用吸附劑與基質(zhì)中的干擾物結(jié)合；最后通過(guò)離心去除干擾物，從而達(dá)到凈化。李娜等[11]采用改進(jìn)的QuEChERS方法對(duì)豬肉、豬肝、雞肉、雞肝樣品提取和凈化后，用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）檢測(cè)樣品中4類、29種禁限用獸藥殘留。29種獸藥的平均回收率為71.5%~93.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.8%~7.7%，該方法操作簡(jiǎn)便，純化效果好。

8 結(jié) 語(yǔ)

樣品的前處理，是獸藥殘留檢測(cè)的重要一環(huán)，對(duì)樣品的分離、純化和回收都有影響。合適的樣品前處理技術(shù)可以提高檢測(cè)率。樣品前處理技術(shù)正朝著更簡(jiǎn)單、更高效、減少樣品消耗、自動(dòng)檢測(cè)和減少影響因素的方向發(fā)展。