寧德地區(qū)部分規(guī)?；i場(chǎng)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查

葉裕香

（福建省寧德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建 寧德 352100）

豬偽狂犬?。≒orcine pseudorabies）是一種急性、高度接觸性傳染病，我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病。該病由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引發(fā)，各階段豬群均可感染：新生仔豬主要侵害神經(jīng)系統(tǒng)以及消化系統(tǒng)；妊娠母豬主要引起流產(chǎn)、死胎，公豬主要引起繁殖障礙；妊娠母豬及公豬均會(huì)出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)臨診癥狀。豬偽狂犬病屬于免疫抑制性疾病，感染后的豬不僅長(zhǎng)期帶毒、排毒，還易并發(fā)感染其他疾病，嚴(yán)重危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，是當(dāng)前養(yǎng)豬行業(yè)的重大疫病之一。

為了解寧德地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)豬偽狂犬病感染情況，本文對(duì)2019～2021年寧德地區(qū)部分規(guī)?；i場(chǎng)開展豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查，采集樣品如下：規(guī)模場(chǎng)血清樣品及環(huán)境拭子樣品各3240（頭）份，屠宰場(chǎng)組織樣品1080份、全血樣品1350份、環(huán)境拭子樣品1620份；分別對(duì)以上樣品進(jìn)行血清學(xué)、病原學(xué)檢測(cè)。之后，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析，得到我市豬偽狂犬病流行規(guī)律，為我市豬場(chǎng)防制豬偽狂犬病及主管部門制定科學(xué)防控措施提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源（1）血清學(xué)樣品 采集對(duì)象為寧德市9個(gè)縣（市、區(qū)）的27個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，平均每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)采集血清樣品、環(huán)境拭子樣品各20份，2019～2021年共采集6次，合計(jì)采集血清樣品、環(huán)境拭子樣品3240（頭）份。

（2）病原學(xué)樣品 采集對(duì)象為寧德市9個(gè)縣（市、區(qū)）的9個(gè)定點(diǎn)屠宰場(chǎng)：每個(gè)屠宰場(chǎng)采集組織樣品、全血樣品及環(huán)境拭子樣品20～30份，2019～2021年共采集6次，合計(jì)采集組織樣品1080份、全血樣品1350份、環(huán)境拭子樣品1620份。

1.1.2 主要試劑PRV（gB）及PRV（gE）抗體ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自愛德士生物科技有限公司，PRV熒光PCR檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司，其他化學(xué)試劑、耗材和藥品主要購(gòu)自生工生物工程(上海)股份有限公司。

1.1.3 主要設(shè)備 高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)、Brand可調(diào)微量移液器、Tecan infinite F50酶標(biāo)儀、電熱恒溫培養(yǎng)箱、QIAGEN TissueLyserⅡ、SW-CJ凈化工作臺(tái)、奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀、Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR Systems。

1.2 方 法

1.2.1 PRV（gB）及PRV（gE）抗體ELISA檢測(cè) 按照愛德士生物科技有限公司試劑盒使用說明書所提供的方法進(jìn)行檢測(cè)和結(jié)果判斷。

1.2.2 PRV病原檢測(cè)

1.2.2.1 核酸提取 使用奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀，結(jié)合試劑盒使用說明書，自動(dòng)提取RNA。

1.2.2.2 病毒擴(kuò)增 使用北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司PRV熒光PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增，按照試劑盒使用說明書進(jìn)行操作及結(jié)果判斷。

2 結(jié)果

本次流行病學(xué)調(diào)查，主要是對(duì)2019～2021年寧德地區(qū)部分規(guī)?；i場(chǎng)、屠宰場(chǎng)所采集的血清、組織、環(huán)境拭子等樣品采用ELISA方法和熒光定量PCR方法分別進(jìn)行抗體和病原檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如下。

2.1 規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)監(jiān)測(cè)情況

2019～2021年共檢測(cè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)162個(gè)（次）：檢測(cè)豬血清樣品3240頭份，檢得豬偽狂犬病gB抗體平均個(gè)體陽(yáng)性率83.86%，gE抗體平均個(gè)體陽(yáng)性率7.93%，檢出gE抗體陽(yáng)性場(chǎng)群82個(gè)（次），gE抗體場(chǎng)群陽(yáng)性率為50.62%；檢測(cè)豬場(chǎng)環(huán)境拭子樣品3240份，檢出陽(yáng)性樣品108份，檢出陽(yáng)性場(chǎng)群60個(gè)（次），平均個(gè)體陽(yáng)性率和場(chǎng)群陽(yáng)性率分別為3.33%和37.04%。（見表1和表2）。

表1 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查統(tǒng)計(jì)表

表2 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病病原學(xué)調(diào)查統(tǒng)計(jì)表

2.2 屠宰場(chǎng)點(diǎn)監(jiān)測(cè)情況

2019～2021年共檢測(cè)屠宰場(chǎng)點(diǎn)54個(gè)（次）：檢測(cè)組織樣品1080份，檢出陽(yáng)性樣品23份，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)22個(gè)（次），平均個(gè)體陽(yáng)性率和場(chǎng)點(diǎn)陽(yáng)性率分別為2.13%和40.74%；檢測(cè)全血樣品1350份，檢出陽(yáng)性樣品14份，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)14個(gè)（次），平均個(gè)體陽(yáng)性率和場(chǎng)點(diǎn)陽(yáng)性率分別為1.04%和25.93%；檢測(cè)環(huán)境拭子樣品1620份，檢出陽(yáng)性樣品63份，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)52個(gè)（次），平均個(gè)體陽(yáng)性率和場(chǎng)點(diǎn)陽(yáng)性率分別為3.89%和96.30%（見表3）。

表3 2019～2021年屠宰場(chǎng)點(diǎn)豬偽狂犬病病原學(xué)調(diào)查統(tǒng)計(jì)表

3 分析

3.1 規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

經(jīng)觀察可知，2019～2021年寧德地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病血清樣品gB抗體陽(yáng)性率均在80%以上，2020年較2019年陽(yáng)性率明顯上升，但2021年有所回落，呈現(xiàn)出先升后降的趨勢(shì)。gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率均在10%以內(nèi)，2020年較2019年陽(yáng)性率有所下降，但2021年則又上升至8.52%；gE抗體場(chǎng)陽(yáng)性率均在50%左右，與個(gè)體陽(yáng)性率相似，也呈現(xiàn)出先降后升趨勢(shì)，2021年場(chǎng)陽(yáng)性率甚至超過2019年（見圖1）。

圖1 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)陽(yáng)性率

3.2 規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病病原學(xué)調(diào)查

經(jīng)觀察可知，2019～2021年寧德地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病環(huán)境拭子樣品個(gè)體陽(yáng)性率在2%～4%，較平穩(wěn)，上下起伏波動(dòng)不大；2019年場(chǎng)陽(yáng)性率為35.19%，2020年有些許下降，降至33.33%，但2021年又急劇上升。病原學(xué)個(gè)體陽(yáng)性率及場(chǎng)陽(yáng)性率都呈現(xiàn)出先升后降的趨勢(shì)，且2021年二者都超過2019年（見圖2）。

圖2 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病病原學(xué)陽(yáng)性率

3.3 屠宰場(chǎng)點(diǎn)豬偽狂犬病病原學(xué)調(diào)查

經(jīng)分析，2019～2021年寧德地區(qū)屠宰場(chǎng)點(diǎn)豬偽狂犬病病原學(xué)陽(yáng)性率見圖3～4?？芍徽撌莻€(gè)體陽(yáng)性率還是場(chǎng)陽(yáng)性率，都表現(xiàn)出相同的流行趨勢(shì)，即：組織樣品與環(huán)境拭子樣品的流行趨勢(shì)都表現(xiàn)為先降低后升高，而全血樣品的流行趨勢(shì)則表現(xiàn)為逐年升高。

圖3 2019～2021年屠宰場(chǎng)點(diǎn)豬偽狂犬病病原學(xué)個(gè)體陽(yáng)性率

同時(shí)，通過觀察可以發(fā)現(xiàn)，屠宰場(chǎng)點(diǎn)樣品的個(gè)體陽(yáng)性率整體處于較低水平：環(huán)境拭子個(gè)體陽(yáng)性率為3%～5%、組織樣品個(gè)體陽(yáng)性率為1%～3%、全血樣品個(gè)體陽(yáng)性率則在2%以內(nèi)。而屠宰場(chǎng)點(diǎn)樣品的場(chǎng)陽(yáng)性率整體處于較高水平：環(huán)境拭子場(chǎng)陽(yáng)性率最高，均在80%以上，其中2019年、2021年的環(huán)境拭子場(chǎng)陽(yáng)性率均達(dá)100%；組織樣品場(chǎng)陽(yáng)性率次之，為25%～50%；全血樣品場(chǎng)陽(yáng)性率相對(duì)最低，為15%～40%。

圖4 2019～2021年屠宰場(chǎng)點(diǎn)豬偽狂犬病病原學(xué)場(chǎng)陽(yáng)性率

4 討論

上述部分規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病gB抗體檢測(cè)結(jié)果表明，寧德市大部分規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)都有免疫豬偽狂犬病疫苗，且免疫效果較好，豬群抗體水平整體較高，豬能夠獲得較好的免疫保護(hù)，避免了因該病而引發(fā)大規(guī)模疫情的可能。gE抗體檢測(cè)結(jié)果表明，在寧德市養(yǎng)殖場(chǎng)當(dāng)中普遍存在偽狂犬病野毒感染現(xiàn)象，雖然個(gè)體陽(yáng)性率均在10%以下，相對(duì)較低，但場(chǎng)陽(yáng)性率卻達(dá)50%左右；病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了偽狂犬病病毒在寧德市規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)中普遍存在的現(xiàn)狀。

根據(jù)2017～2019年寧德地區(qū)豬偽狂犬病流行情況調(diào)查，結(jié)合此次調(diào)查結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)gB抗體陽(yáng)性率于2017～2020年，一直高于80%，且呈現(xiàn)逐年升高趨勢(shì)，但2021年則出現(xiàn)下降的現(xiàn)象；而gE抗體陽(yáng)性率則正好相反，2017～2020年逐年降低，但2021年則升高。之所以出現(xiàn)上述現(xiàn)象，原因如下：（1）寧德市于2016年開始大力開展豬偽狂犬病凈化宣傳、推廣及試點(diǎn)示范工作，經(jīng)過幾年推廣，豬偽狂犬病gB抗體陽(yáng)性率升高、gE抗體陽(yáng)性率降低，成效顯著；（2）2018年8月非洲豬瘟傳入我國(guó)后，寧德市各養(yǎng)殖場(chǎng)主生物安全意識(shí)有所提高，生物安全措施到位，進(jìn)一步鞏固了所取得的成效；（3）自2021年初起，生豬價(jià)格持續(xù)走低，到2021年6月，豬價(jià)開始跌破成本線，而大豆、玉米等卻因動(dòng)蕩的國(guó)際局勢(shì)、價(jià)格飆升，價(jià)格使得養(yǎng)殖場(chǎng)主入不敷出，或多或少的降低了生物安全意識(shí)，進(jìn)而出現(xiàn)安全漏洞，最終導(dǎo)致2021年gB抗體陽(yáng)性率降低、gE抗體陽(yáng)性率升高。

屠宰場(chǎng)點(diǎn)豬偽狂犬病病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明，寧德市屠宰場(chǎng)點(diǎn)帶豬偽狂犬病毒的形勢(shì)極其嚴(yán)峻；特別是環(huán)境拭子樣品的場(chǎng)陽(yáng)性率，最高者可達(dá)100%，這需要各從業(yè)者及相關(guān)人員引起高度重視。屠宰場(chǎng)點(diǎn)環(huán)境拭子樣品的陽(yáng)性率之所以居高不下，主要原有：（1）由于豬偽狂犬病作為二類動(dòng)物疫病，其傳染性、危害性與非洲豬瘟、口蹄疫等重大動(dòng)物疫病相比要弱很多，屠宰場(chǎng)點(diǎn)工作人員對(duì)其認(rèn)知度要少很多、重視程度也自然不夠，使得該病在屠宰場(chǎng)點(diǎn)檢出率較高。（2）經(jīng)過對(duì)各屠宰場(chǎng)點(diǎn)實(shí)地調(diào)研可知，部分場(chǎng)點(diǎn)存在待宰間豬壓欄隔夜、屠宰間消洗不徹底及衛(wèi)生死角多等現(xiàn)象，這自然使得所采樣品的陽(yáng)性檢出率極高。

本流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告通過對(duì)寧德市部分規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的血清、環(huán)境拭子及屠宰場(chǎng)的組織、全血、環(huán)境拭子等樣品進(jìn)行檢測(cè)，再對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析，得到寧德市2019～2021年的流行現(xiàn)狀，并對(duì)結(jié)果加以討論，為寧德市豬偽狂犬病的防制提供了依據(jù)。同時(shí)，養(yǎng)殖場(chǎng)主等從業(yè)者可以根據(jù)以上豬偽狂犬病的抗原、抗體消長(zhǎng)規(guī)律制定或調(diào)整相應(yīng)的免疫程序，以保障豬健康，進(jìn)而保持豬場(chǎng)持續(xù)盈利。