補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)哺乳期馬駒生長發(fā)育和血漿生化指標(biāo)的影響

陳 暉，賀林嬌，李佳豪，經(jīng)宏鑫，黃新新，竇晶晶

（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆肉乳用草食動(dòng)物營養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆烏魯木齊 830052）

鞣花酸（Ellagic Acid）是一種普遍分布于蔬菜、水果等植物的多酚類化合物，具有抗氧化、抗腫瘤、抗突變及抗炎等生物學(xué)作用[1]。趙銘偉等[2]研究顯示，鞣花酸可顯著提高斷奶仔豬空腸和回腸絨毛高度，顯著降低空腸隱窩深度，促進(jìn)胃腸道發(fā)育，改善胃腸道機(jī)能，從而促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育。謝凱桓等[3]研究發(fā)現(xiàn)，鞣花酸因具有抗菌作用，可以抑制胃腸道中有害菌繁殖，從而改善畜禽腸道健康，并促進(jìn)動(dòng)物采食量，在一定程度上提高畜禽的生長發(fā)育與生產(chǎn)性能。陳暉等[4]研究顯示，給大鼠灌胃含有鞣花酸的補(bǔ)喂劑能夠改善大鼠生長發(fā)育，顯著提高大鼠體重。以上研究說明鞣花酸能夠通過改善動(dòng)物胃腸道健康，提高動(dòng)物生長性能，促進(jìn)生長發(fā)育。3～6 月齡馬駒生長發(fā)育快，對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)需要量高，補(bǔ)飼成為保證此階段馬駒健康生長的主要手段。同時(shí)，馬駒要面對(duì)液體母乳逐漸更換為固體飼糧、飼養(yǎng)環(huán)境改變、斷奶等應(yīng)激。飼糧中纖維飼料含量逐漸增加，大量纖維的攝入會(huì)改變馬駒胃腸道機(jī)能和結(jié)構(gòu)。此階段馬駒腸道機(jī)能結(jié)構(gòu)、微生物細(xì)菌穩(wěn)定性較差，容易受到病原菌危害，抑制正常菌定植和增殖，從而影響馬駒健康和生長發(fā)育。本試驗(yàn)旨在探究補(bǔ)喂不同劑量鞣花酸對(duì)3 月齡哺乳期馬駒生長發(fā)育、血漿指標(biāo)的影響，為鞣花酸在調(diào)控哺乳期馬駒健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn) 試驗(yàn)于2020 年7 月至9 月在新疆昭蘇縣喀拉蘇鎮(zhèn)伊犁馬研究繁育中心進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料 鞣花酸購自湖北省五峰赤誠生物科技股份有限公司，其中鞣花酸含量≥90.00%，淺灰色，粉末狀。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選擇出生日期相近、體重（143.33±16.10）kg的3 月齡純血馬母馬駒18 匹，按照體重相近的原則隨機(jī)分為3 組，每組6 匹。在相同的飼養(yǎng)管理和日糧條件下，對(duì)照組馬駒飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組馬匹每天每匹分別補(bǔ)喂鞣花酸15、30 mg/kg BW。試驗(yàn)期60 d。

1.4 飼養(yǎng)管理 結(jié)合馬場對(duì)馬駒的飼養(yǎng)管理模式進(jìn)行試驗(yàn)。用電子分析天平準(zhǔn)確稱量鞣花酸，每天09:00 倒入各馬駒專用料盆內(nèi)單獨(dú)給每匹馬駒補(bǔ)喂，觀察至馬駒全部舔食鞣花酸。各組馬駒其余時(shí)間與母馬一起飼養(yǎng)，可自由采食母乳、飲水，自由活動(dòng)。精料補(bǔ)充料根據(jù)NRC（2007）哺乳階段馬駒營養(yǎng)需要量設(shè)計(jì)，精料的補(bǔ)喂量按照每匹馬駒每天補(bǔ)喂0.65 kg/100 kg BW。精料補(bǔ)充料組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 精料補(bǔ)充料組成及營養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.5 樣品采集及指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 體重、體尺測(cè)定 分別于試驗(yàn)第0、15、30、45、60 天早晨空腹稱量馬駒的體重，測(cè)量馬駒的體尺（體高、體斜長、胸圍和管圍），記錄數(shù)據(jù)。

1.5.2 血樣采集及及指標(biāo)測(cè)定 在試驗(yàn)第60 天早晨空腹頸部靜脈采集馬駒血樣于肝素鈉抗凝管，3 500 r/min 離心15 min，取上清保存，-20℃冷凍保存，待測(cè)。丙氨酸基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿酸（UA）、尿素氮（UREA）、肌酐（CREA）、葡萄糖（GLU）均使用邁瑞全自動(dòng)生化分析儀（BS-240Vet），生化分析儀和生化試劑盒均為深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司產(chǎn)品。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 使用Excel 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，再使用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan's 法進(jìn)行各組間的多重比較，試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒體重的影響 由表2 可知，試驗(yàn)0、15、30、45 d，各試驗(yàn)組馬駒體重與對(duì)照組差異不顯著。試驗(yàn)60 d 時(shí)，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒的體重分別比對(duì)照組提高了6.91%和7.15%（P＜0.05）。整個(gè)試驗(yàn)期間，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒的總增重和平均日增重分別比對(duì)照組提高了31.08%和41.22%、32.65%和42.85%（P＜0.05）。

表2 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒體重的影響 kg

2.2 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒體尺的影響 由表3 可知，15 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒體高總增長和平均日增長分別比對(duì)照組提高了64.75% 和66.67%（P＜0.05）；整個(gè)試驗(yàn)期間，30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒體高與15 mg/kg BW 鞣花酸組和對(duì)照組均無顯著性差異。補(bǔ)喂鞣花酸0～45 d 時(shí)，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒各階段體斜長均與對(duì)照組無顯著差異，60 d 時(shí)，30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒體斜長比對(duì)照組提高了5.24%（P＜0.05），體斜長總增長和平均日增長分別比對(duì)照組提高了43.75%和42.31%（P＜0.05）。由表4 可知，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒各階段胸圍、管圍、總增長和平均日增長與對(duì)照組均無顯著差異。

表3 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒體高和體斜長的影響 cm

表4 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒胸圍和管圍的影響 cm

2.3 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒血漿氮代謝相關(guān)指標(biāo)的影響 由表5 可知，給馬駒補(bǔ)喂鞣花酸能夠提高馬駒血漿中總蛋白、白蛋白的濃度，30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒血漿中總蛋白和白蛋白濃度分別比對(duì)照組提高了13.79%和32.77%（P＜0.05）；15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒血漿中尿素氮和肌酐濃度與對(duì)照組無顯著差異，尿酸濃度分別比對(duì)照組降低了30.25%和18.53%（P＜0.05）。

表5 補(bǔ)喂不同水平鞣花酸對(duì)馬駒血漿氮代謝的影響

2.4 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒血漿糖、脂相關(guān)指標(biāo)的影響 由表6 可知，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組血漿中葡萄糖濃度、甘油三酯、總膽固醇及低密度脂蛋白的濃度與對(duì)照組無顯著差異。30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒血漿高密度脂蛋白比對(duì)照組提高了33.02%（P＜0.05）。

表6 補(bǔ)喂不同水平鞣花酸對(duì)馬駒血漿糖、脂代謝的影響 mmol/L

2.5 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒血漿酶活力的影響 由表7 可知，在整個(gè)試驗(yàn)期，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒血漿中血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶濃度與對(duì)照組均無顯著差異。

表7 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)馬駒血漿酶活力的影響 U/L

3 討 論

3.1 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)哺乳期馬駒生長發(fā)育的影響 哺乳期馬駒正處于快速生長階段，依靠母乳獲取營養(yǎng)很難滿足其生長需要，并且幼齡動(dòng)物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率較低，消化道器官均處于發(fā)育階段，功能尚不健全[5]。鞣花酸具有廣泛的生物學(xué)作用，有利于抵御癌癥、氧化[6]、炎癥[7]、真菌[8]、毒素[9]等各類疾病，因此被廣泛應(yīng)用。在小鼠和虹鱒魚的研究中發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)喂鞣花酸可以提高其生長性能，改善血液生化水平，增強(qiáng)免疫和抗氧化能力[10-11]。趙銘偉等[2]研究發(fā)現(xiàn)，用鞣花酸飼喂仔豬能使仔豬腸道黏膜更為完整，可顯著增加仔豬的平均日增重，從而促進(jìn)其生長發(fā)育。本研究中，15、30 mg/kg BW 鞣花酸組馬駒總增重、平均日增重、體高和體斜長較對(duì)照組均明顯增加，表明鞣花酸對(duì)動(dòng)物體重增加和體尺增長有一定促進(jìn)作用。其作用機(jī)制可能是鞣花酸及其代謝產(chǎn)物尿石素在脂肪沉積和肌肉發(fā)育中起作用[12]。

3.2 補(bǔ)喂鞣花酸對(duì)哺乳期馬駒血漿生化指標(biāo)的影響 血漿中的各項(xiàng)指標(biāo)可反映機(jī)體的健康狀況[13]。血漿總蛋白、白蛋白含量可反映馬駒對(duì)日糧中粗蛋白質(zhì)的吸收、代謝以及氮沉積能力；肌酐、尿素氮和尿酸分別為機(jī)體肌肉、蛋白質(zhì)和嘌呤的代謝產(chǎn)物，是反映腎功能的重要生物標(biāo)志物[14]；甘油三酯、高密度脂蛋白與低密度脂蛋白可以很好地預(yù)測(cè)機(jī)體健康狀況[15]。本研究結(jié)果表明，給馬駒補(bǔ)喂鞣花酸能夠改善馬駒氮代謝相關(guān)指標(biāo)的水平，30 mg/kg BW 鞣花酸組血漿中總蛋白、白蛋白顯著高于對(duì)照組，試驗(yàn)組尿酸均顯著低于對(duì)照組。補(bǔ)喂鞣花酸可使馬駒腎臟對(duì)尿酸的排泄能力增強(qiáng)，證明補(bǔ)喂鞣花酸提高了馬駒氮代謝的水平和利用，但是具體機(jī)制需要進(jìn)一步深入研究。鞣花酸通過對(duì)膽固醇的代謝的影響，以及對(duì)脂質(zhì)合成與分解相關(guān)基因脂質(zhì)代謝調(diào)控因子固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、脂蛋白脂肪酶（LPL）mRNA 相對(duì)表達(dá)量的影響，從而調(diào)控機(jī)體脂質(zhì)的合成與代謝[16]。本研究中，馬駒血漿中甘油三酯和膽固醇的含量隨著鞣花酸補(bǔ)喂劑量的增加而增加，說明鞣花酸對(duì)馬駒脂質(zhì)合成具有一定上調(diào)作用。同時(shí)，馬駒血漿肌酐、尿素氮、甘油三酯水平與肝中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶、總膽固醇指標(biāo)均處于正常范圍內(nèi)。這與鞣花酸能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)合成、提高脂肪代謝相關(guān)。

血漿葡萄糖是反映機(jī)體對(duì)葡萄糖吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和基礎(chǔ)代謝率的重要指標(biāo)。在腹腔注射胰島素耐受性試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，鞣花酸和尿石素能夠在15、20 min 顯著改善胰島介導(dǎo)的葡萄糖水平下降以及降低血液甘油三酯水平[17]。本研究中，試驗(yàn)組與對(duì)照組血漿中葡萄糖含量無顯著差異，可能與鞣花酸參與馬駒葡萄糖代謝和胰島素抵抗有關(guān)，從而維持了馬駒血糖水平正常。

4 結(jié) 論

綜合分析本研究結(jié)果，給哺乳期3～6 月齡馬駒補(bǔ)喂鞣花酸可以促進(jìn)其生長發(fā)育，并提高其對(duì)日糧粗中粗蛋白質(zhì)的吸收、代謝以及氮沉積能力，有益于馬駒維持健康，其中補(bǔ)喂30 mg/kg BW 鞣花酸效果最佳。