葛根素對(duì)牙周炎大鼠Th17/Treg 細(xì)胞免疫平衡及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響

詹樂，馬瑞堉，萬妮，莫禮文，陳薈穎，張黎

（1）海南醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院，海南 海口 570102;2）蘭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000）

牙周炎已發(fā)展成為人類最普遍的慢性感染性的口腔疾病之一[1]。相關(guān)調(diào)查與研究表明，成人牙周炎發(fā)病率約達(dá)70%，一旦治療不及時(shí)，會(huì)引起牙槽骨不可逆性損傷，最后導(dǎo)致牙齒松動(dòng)，這也是成年人失牙的最主要原因[2]。牙周病的病因很復(fù)雜，其具體的發(fā)生機(jī)制目前還不清楚。

目前研究指出，在牙周病的病理破壞過程中，牙周病的始動(dòng)因子為牙菌斑生物膜，宿主免疫的過度炎癥反應(yīng)通常是加重牙周軟硬組織破壞的主要損害因素[3]。有關(guān)學(xué)者提出有關(guān)于調(diào)控宿主防御反應(yīng)方法，被稱為宿主免疫調(diào)節(jié)治療（host modulatory therapies，HMT），通過研究抑制牙周組織的不可逆性的損傷破壞[4]。在常規(guī)牙周防治手段的基礎(chǔ)上，輔助應(yīng)用宿主免疫調(diào)節(jié)藥物以達(dá)到理想的防治效果。其中主要以六位地黃丸為研究基礎(chǔ)的固齒膏及固齒丸等[5-6]。近年研究表明，一些植物中藥提取物常?？梢暂o助治療牙周病，例如：姜黃素、白藜蘆醇等。葛根素（Puerarin）屬于異黃酮類，也是防治牙周病的有效成分。有相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究初步證實(shí)，葛根素具有抗炎、抑制相關(guān)基質(zhì)金屬蛋白酶（matrixmetalloproteinase，MMPs）、骨保護(hù)等生物活性功能，同時(shí)有較高的相關(guān)生物的安全性，是對(duì)牙周炎宿主調(diào)節(jié)治療的最有效藥劑之一[7]。Wang等[8]研究表明輔助性 T細(xì)胞17（Th17）、調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Treg）之間比值失衡所導(dǎo)致的自身免疫反應(yīng)，會(huì)引起牙周組織病理發(fā)病機(jī)制。目前，在牙周病的發(fā)展過程中，葛根素藥物通過調(diào)節(jié)Th17/Treg 細(xì)胞免疫平衡，以減少牙周組織病理性破壞的主要機(jī)制還需要進(jìn)一步證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)采用牙周炎大鼠，并給予200 mg/（kg·d）葛根素液灌胃處理，以進(jìn)一步去觀察葛根素液對(duì)牙周炎大鼠Th17/Treg 細(xì)胞免疫狀態(tài)平衡的影響，為開發(fā)慢性牙周炎藥物提供新的分子靶點(diǎn)，同時(shí)為治療慢性牙周炎提供新的方法和理論依據(jù)，揭示葛根素老藥新用的臨床轉(zhuǎn)化價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上海斯萊克實(shí)驗(yàn)室提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，SPF 級(jí)Sprague-Dawley（SD）大鼠，8 周齡，雄性，體重（260 ± 20）g，許可證號(hào)：SCXK（蘇）2019-0005，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房，許可證號(hào)：SYXK（浙）2020-0015 。本研究經(jīng)浙江杭州赫貝科技有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)審批（審批號(hào)：HB2010037）。

1.1.2 主要試劑及儀器葛根素注射液（國藥準(zhǔn)字H20033292，規(guī)格 2 mL∶100 mg，生產(chǎn)批號(hào)：20 060 472）山東華信制藥集團(tuán)股份有限公司；PE anti-rat CD25 Antibody、Foxp3 Antibody、IL-17A Monoclonal Antibody、PE-Cyanine7、Fixation/Permeabilization 和 Permeabili-zation Buffer（eBioscience，USA）；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。MicroCT設(shè)備（瑞 士 SCANCO Medical AG，μCT100）。微量加樣儀（Thermo 公司）；高速冷凍離心泵（H1650R，上海盧湘儀）；流式細(xì)胞儀（Accuri C6，BD 公司）。

1.2 方法

1.2.1 牙周炎大鼠建模、實(shí)驗(yàn)分組Sprague-Dawley（SD）大鼠36只，SPF級(jí)，雄性，8 周齡，體重為（260 ± 20）g，無牙周疾病，健康狀況良好。試驗(yàn)前在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)房環(huán)境中適應(yīng)1 周。聚丙烯的合成塑料大鼠小籠分籠飼養(yǎng)，溫度（24 ± 2）℃，相對(duì)濕度為40%～60%，明暗周期12 h/12 h。自由飲水、飲食，清潔飼料的環(huán)境。隨機(jī)分為3 組：正常對(duì)照組（A組）、牙周炎模型組（B組）、葛根素組（C組），每組各12只，A 組不做任何處理，B 組和C 組大鼠雙側(cè)上頜第1 磨牙頰舌側(cè)正中牙齦下，注入含20 g/L 的大腸桿菌內(nèi)毒素（ELPS）的生理鹽水50 μL，注入藥物前1 d 絲線結(jié)扎，每間隔48 h 牙齦下注射1 次E-LPS，共注射4次，A 組則每次在同一部位注入等量的生理鹽水。在術(shù)后每天仔細(xì)觀察大鼠牙周狀況，通過檢查牙齦形態(tài)、菌斑指數(shù)、探診出血狀況、探診牙周袋的深度，還有牙槽骨的吸收情況，從而判斷口腔衛(wèi)生情況、牙齦情況及牙周情況。第4 周牙周炎模型構(gòu)建完成后，C 組按照葛根素液200 mg/（kg·d）灌胃給藥，B 組、C 組進(jìn)行等量生理鹽水灌胃，均連續(xù)灌胃14 d。

1.2.2 牙槽骨吸收情況評(píng)估用頸椎脫臼法處死大鼠后，取上頜骨，并去除不符合實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的軟組織，再用4%多聚甲醛固定24 h后，再進(jìn)行顯微 CT 掃描檢查，并用 NRecon 軟件進(jìn)行三維重建。牙槽骨吸收的標(biāo)準(zhǔn)主要從以下兩個(gè)方面判斷：（1）定性分析：選擇大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙頰側(cè)及舌側(cè)的近中、中間、遠(yuǎn)中共6 個(gè)位置，測(cè)量從釉牙骨質(zhì)界（cementoenamel junction，CEJ）至牙槽嵴頂（alveolar bone crest，ABC）的垂直度間距（CEJ-ABC）；（2）定量分析：通過對(duì)比不同組大鼠牙槽骨骨小梁厚度（trabecular thickness）、骨小梁分離度（trabecular separation）、骨小梁數(shù)量（trabecular number）骨體積分?jǐn)?shù)（BV/TV）、骨礦化密度（bone mineral density，BMD）等骨骼生物參數(shù)，定量分析牙槽骨吸收狀況。

1.2.3 HE 染色觀察大鼠牙周組織變化情況各組隨機(jī)選擇3 只大鼠，用頸椎脫臼法處死大鼠后，再收集上頜骨組織，4%甲醛溶液固定，3～5 d后取出組織，修整所需厚度及形態(tài)，將組織經(jīng)過不同濃度乙醇脫水加工處理，石蠟包埋組織，待蠟塊冷卻后放置-20 ℃溫度冷凍，制作切片，厚度5 μm，65 ℃的恒溫箱儲(chǔ)存6～12 h，HE 試劑盒對(duì)標(biāo)本染色，HE 染色觀察牙周組織及骨組織的再生。

1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)全血細(xì)胞中 Th17 和 Treg細(xì)胞比例分布的變化情況取各組大鼠抗凝全血，離心5 min后，細(xì)胞沉淀，洗滌后、計(jì)數(shù)重懸。將100 μL 的細(xì)胞懸液放置于EP管，依次同時(shí)加5 μL 的CD4，F(xiàn)ITC 和5 μL IL-17、5 μL CD25，PECyanine7；避蔭孵育，離心棄上清液；用500 μL的Flow Cytometry staining buffer 重懸細(xì)胞，均勻后上機(jī)測(cè)定CD4+IL-17+細(xì)胞比例、CD4 +CD25+Foxp3+細(xì)胞所占的淋巴細(xì)胞比例。采用Accur C6 軟件解析，以 IL-17 染色表示Th17、Foxp3 染色表示Treg，分析2 種細(xì)胞變化的情況。

1.2.5 免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)大鼠牙周組織中 IL-10、IL-17、RORγt 和 Foxp3 蛋白的表達(dá)情況取0.1 mg 牙周組織，加入500 μL 裂解液，準(zhǔn)備出所需蛋白樣，蛋白濃度值采用BCA 方法測(cè)定，制膠，聚丙烯酰胺凝膠電泳，預(yù)先配置1 L 轉(zhuǎn)移緩沖液并冷卻至4 ℃，制成PVDF 轉(zhuǎn)膜，孵育所需抗體，緩沖液洗膜后，再加入ECL 的化學(xué)發(fā)光顯影劑附著在膜的表面，再置入凝膠圖像分析儀中，以化學(xué)光敏模式曝光顯影。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS22.0 軟件，對(duì)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析，計(jì)量資料以（）表示，組間對(duì)比采用單因素方差分析，兩兩對(duì)比采用q檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 葛根素對(duì)大鼠牙槽骨吸收的影響

與牙周炎模型組對(duì)比，其他2 組大鼠牙槽骨礦物質(zhì)密度、骨質(zhì)量和硬度均明顯升高，牙周炎大鼠經(jīng)葛根素干預(yù)處理治療后，骨體積分?jǐn)?shù)減少。模型組與對(duì)照組相比BV/TV 數(shù)值下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；葛根素治療組與模型組對(duì)比，BMD 數(shù)值升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1、表1。

圖1 各組Micro-CT 掃描重建圖Fig.1 Micro-CT scan reconstruction for each group

表1 各組Micro-CT 掃描分析后骨體積分?jǐn)?shù)、骨礦物質(zhì)密度值（n=12，）Tab.1 BV/TV and BMD values of each group obtained by micro-CT scan analysis（n=12，）

表1 各組Micro-CT 掃描分析后骨體積分?jǐn)?shù)、骨礦物質(zhì)密度值（n=12，）Tab.1 BV/TV and BMD values of each group obtained by micro-CT scan analysis（n=12，）

與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05。

2.2 葛根素對(duì)牙周組織病理形態(tài)學(xué)的影響

對(duì)照組的牙周膜可見微量炎癥細(xì)胞聚集，牙槽骨結(jié)構(gòu)正常。模型組的牙周膜可見大量炎癥細(xì)胞聚集，牙槽骨被炎癥細(xì)胞破壞。葛根素組的牙根部可見明顯新生骨細(xì)胞增生，牙周膜可見少量炎癥細(xì)胞聚集，牙槽骨結(jié)構(gòu)較整齊，見圖2。

圖2 HE 染色觀察牙周組織形態(tài)學(xué)特征變化（×100）Fig.2 Observation of histomorphological changes in periodontal tissue by HE staining（×100）

2.3 葛根素對(duì)全血中Th17/Treg 細(xì)胞比例的影響

與對(duì)照組比較，模型組的TH17、Treg 細(xì)胞比例均升高，且TH17/Treg 的細(xì)胞比例也呈顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，葛根素組的TH17、Treg 細(xì)胞比例均下降，且TH17/Treg 的細(xì)胞比例也是下降的，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見圖3～圖7。

圖3 全血細(xì)胞中TH17 細(xì)胞比例Fig.3 Percentage of Th17 cells in whole blood

圖4 全血細(xì)胞中Treg 細(xì)胞比例Fig.4 Percentage of Treg cells in whole blood

圖5 全血細(xì)胞中Th17/Treg 細(xì)胞比例Fig.5 Th17/Treg cell ratio in whole blood

圖6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)全血細(xì)胞中各組Th17 細(xì)胞比例變化Fig.6 Change in the proportion of Th17 cells in whole blood detected by flow cytometry

圖7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)全血細(xì)胞中各組Treg 細(xì)胞比例變化Fig.7 Change in the proportion of Treg cells in whole blood detected by flow cytometry

2.4 葛根素對(duì)牙周組織中IL-10、IL-17、RORγt和 Foxp3 蛋白的表達(dá)影響

IL-10、Foxp3：與對(duì)照組相比，模型組蛋白的表達(dá)量有所減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，葛根素組蛋白表達(dá)量明顯上調(diào)，有差異（P＜0.05）。IL-17、RORγt ：與對(duì)照組相比，模型組蛋白表達(dá)量明顯上調(diào)，有差異性（P＜0.01）；與模型組相比，葛根素組的蛋白量呈明顯下降趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見圖8～圖12。

圖8 WB 檢測(cè) IL-17、RORγt、IL-10、Foxp3 蛋白表達(dá)Fig.8 Western blot detection of IL-17，RORγt，IL-10，and Foxp3 protein expression

圖9 各組牙周組織中IL-10 蛋白表達(dá)分析圖Fig.9 Analysis of IL-10 protein expression in periodontal tissues

圖10 各組牙周組織中IL-17 蛋白表達(dá)分析圖Fig.10 Analysis of IL-17 protein expression in periodontal tissues

圖11 各組牙周組織中Foxp3 蛋白表達(dá)分析圖Fig.11 Analysis of Foxp3 protein expression in periodontal tissues

圖12 各組牙周組織中RORγt 蛋白表達(dá)分析圖Fig.12 Analysis of RORγt protein expression in periodontal tissues

3 討論

牙周病的基本病理進(jìn)程中，典型的臨床表現(xiàn)是牙齦組織血管炎癥性充血、牙周袋產(chǎn)生、牙槽骨吸收和牙齒松動(dòng)等，是一種牙周組織破壞性病變[9-10]。研究結(jié)果顯示在建立大鼠牙周炎模型過程中，大鼠牙周組織炎癥有一定的自愈性，這可能與大鼠自身宿主免疫反應(yīng)有關(guān)，病理檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大鼠牙周炎與人體牙周炎表現(xiàn)極為相似[11]。本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)大鼠雙側(cè)上頜第1 磨牙牙頸部結(jié)扎，結(jié)合大腸桿菌內(nèi)毒素（E-LPS）齦下注射的方式，成功構(gòu)建了實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎模型，在術(shù)后第4周，牙周炎模型組和葛根素組大鼠均出現(xiàn)牙齒牙齦紅腫，探診出血明顯，頰側(cè)探診深度至1～2 mm，而對(duì)照組大鼠牙周相關(guān)檢查均無明顯異常。MicroCT 定量及定性分析模型成功后，對(duì)葛根素組連續(xù)給藥14 d后，牙槽骨高度測(cè)定結(jié)果表明，牙周炎組6 個(gè)位點(diǎn)測(cè)定值均顯著超過對(duì)照組和葛根素組，提示在牙周炎組的牙槽骨周圍發(fā)生了明顯炎癥吸收。以上結(jié)果表明，分離牙齒游離齦，用絲線結(jié)扎的第1 磨牙牙頸部，結(jié)合大腸桿菌內(nèi)毒素（E-LPS）在齦下注射4 周可誘導(dǎo)形成實(shí)驗(yàn)性的牙周炎大鼠模型，葛根素對(duì)大鼠牙周炎牙槽骨吸收作用可能產(chǎn)生了相應(yīng)的抑制效果。

葛根素（Puerarin）亦名葛根黃酮，其功能有降血糖、降低膽固醇、抗感染、保護(hù)血管、抗氧化應(yīng)激等，不良反應(yīng)較小，故稱為"植物雌激素"[12]。已有研究證實(shí)葛根素具有抗炎活性且具有較高的生物安全性，異黃酮是調(diào)節(jié)抗炎作用的主要活性成分[6]。吳琳琳等[13]發(fā)現(xiàn)葛根素在適宜的含量濃度影響下，可有效促使人牙周膜干細(xì)胞（hPDLSCs）向成骨細(xì)胞分化，為在口腔中有效防治牙槽骨吸收所引起的牙周病提供有關(guān)理論依據(jù)。上述研究均證實(shí)了葛根素可以有效控制牙槽骨吸收，而且在本次研究中發(fā)現(xiàn)，與牙周炎模型組對(duì)比，葛根素組CEJ 到ABC 距離的減小，經(jīng)葛根素處理治療后骨體積分?jǐn)?shù)有所減少，且病理學(xué)檢測(cè)也顯示，葛根素組牙槽骨炎癥細(xì)胞浸潤情況對(duì)比其他2 組均相對(duì)較少，以上結(jié)果表明葛根素可減輕或終止大鼠牙周組織的破壞，但對(duì)于具體影響機(jī)制，目前尚不明確，本研究初步探索葛根素對(duì)牙周炎大鼠Th17/ Treg 細(xì)胞免疫平衡的相關(guān)影響。

近期科學(xué)研究證實(shí)，Th17、Treg 細(xì)胞之間比例的失調(diào)，與牙周炎的發(fā)生密切相關(guān)[14]。研究發(fā)現(xiàn)CD4 陽性T 細(xì)胞的2 種亞類：Treg 細(xì)胞和Th17 細(xì)胞，前者產(chǎn)生IL-10 和TGF-β，主要控制相關(guān)免疫反應(yīng)；后者主要分泌IL-17，IL-17 為最早參加抗感染的免疫效應(yīng)細(xì)胞，在人類固有免疫中起關(guān)鍵作用[15]。據(jù)有關(guān)科學(xué)研究證實(shí)，Th17細(xì)胞可誘導(dǎo)炎癥的產(chǎn)生與傳播，而Treg 細(xì)胞則可以維持自身耐受性，進(jìn)而控制自身免疫[16]?，F(xiàn)今，Th17 細(xì)胞與Treg 細(xì)胞的免疫平衡狀態(tài)通常是診斷治療相關(guān)自身免疫病變的關(guān)鍵性靶點(diǎn)。Th17 常常以釋放促炎因子IL-17 為其主要的特點(diǎn)，有STAT 依賴的特異性的轉(zhuǎn)錄因子維甲酸相關(guān)孤核受 體（retinoid-related orphan nuclear receptor γt，RORγt ）的加入?yún)⑴c，啟動(dòng)了其受體生長增殖與分化過程，有獨(dú)特的調(diào)控機(jī)制，誘導(dǎo)RORγt 蛋白表達(dá)并促進(jìn)了Th17 細(xì)胞分化[17]。2008年，Cardoso等[18]應(yīng)用免疫熒光法，雙標(biāo)定位CD4 和IL-17，第一次發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了牙周炎患者牙周組織中存在大量Th17 細(xì)胞。Mistry等[19]研究表明，經(jīng)過治療的牙周炎病人齦溝液中IL-17 的濃度含量已顯著減少，因此IL-17 可用作評(píng)價(jià)防治牙周炎有效性的重要指標(biāo)。Glowczy等[20]通過減少Th17 細(xì)胞的含量，從而減弱宿主免疫炎性反應(yīng)和骨破壞作用。本次實(shí)驗(yàn)研究通過測(cè)定每組12 只大鼠，觀察全血中Th17 細(xì)胞比例的變化，檢測(cè)結(jié)果顯示牙周炎模型組對(duì)比葛根素組，Th17 細(xì)胞比例顯著升高，而且，轉(zhuǎn)錄因子RORγt 同分泌因子 IL-17 的蛋白表達(dá)量也升高，經(jīng)過葛根素治療干擾之后，其結(jié)果相反，說明在牙周炎病理進(jìn)展中，Th17 細(xì)胞分化產(chǎn)生RORγt、IL-17，進(jìn)一步加劇了牙周組織炎癥反應(yīng)，同時(shí)也提示葛根素可調(diào)控Th17 細(xì)胞減緩牙周組織的炎性反應(yīng)。

調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞是一類CD4+Foxp3+T 細(xì)胞亞群，擁有調(diào)控其他白細(xì)胞數(shù)量的特殊功能[21]。Treg 細(xì)胞可以通過控制自身免疫、調(diào)控免疫應(yīng)答來減少有關(guān)炎癥性的反應(yīng)，其特異性轉(zhuǎn)錄因子：Foxp3，主要分泌因子：IL-10。在牙周炎的病理變化過程中，Treg 細(xì)胞數(shù)量顯著增加，能更有效起到對(duì)宿主防護(hù)的效果。Parachuru等[22]研究也證實(shí)，對(duì)比牙周炎模型組，健康對(duì)照組中Foxp3、IL-10 蛋白表達(dá)量高，說明Treg 細(xì)胞及其相關(guān)因子Foxp3、IL-10，可調(diào)控牙周炎的產(chǎn)生。Nakajima等[23]研究表明在牙周炎中，對(duì)比觀察牙齦炎、健康對(duì)照組，F(xiàn)oxp3、TGF-β 以及IL-10 的表達(dá)量明顯增高。Kei等[24]的研究結(jié)果表明，在牙周炎小鼠齦下局部注入煙草提取物質(zhì)后，在牙周組織中，Treg 細(xì)胞活力大幅下降且Foxp3、IL-10 表達(dá)水平也明顯降低，而與此相反，Th17 細(xì)胞活力、RORγt 和IL-17 蛋白表達(dá)水平則大幅度增高，因此小鼠的牙周組織炎性反應(yīng)增加，常常伴隨著牙槽骨吸收的增加。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，牙周炎模型組的Th17 細(xì)胞與Treg 細(xì)胞值均升高，Th17/Treg 細(xì)胞的比例也顯著增高，而葛根素組Th17 細(xì)胞和Treg 細(xì)胞值均下降，Th17/Treg細(xì)胞的比例也處于持續(xù)降低，這提示葛根素治療干預(yù)之后，牙周炎引起的相關(guān)免疫系統(tǒng)反應(yīng)可選擇性地去重新招募Treg 細(xì)胞，從而進(jìn)一步有效抑制牙周組織炎癥反應(yīng)。進(jìn)一步分析葛根素干預(yù)后的牙周炎大鼠，其全血中Th17 細(xì)胞表達(dá)量明顯減少，而Treg 細(xì)胞表達(dá)量顯著增加，同時(shí)Th17/Treg 細(xì)胞比值也明顯下降，說明葛根素干預(yù)治療后牙周宿主免疫反應(yīng)在向著促進(jìn)牙周組織愈合的有利方向發(fā)展，通過控制Th17/Treg 細(xì)胞表達(dá)量來緩解牙周組織的炎癥性反應(yīng)。

綜上所述，菌斑微生物常常是口腔牙周炎的始動(dòng)因子，而宿主免疫反應(yīng)正是造成牙周組織損害的最重要的因素。如果牙周組織中炎癥持續(xù)存在，免疫細(xì)胞活躍，參與炎癥反應(yīng)過程中發(fā)揮雙重作用，有利方面是吞噬病原菌，阻止細(xì)菌入侵;不利于牙周組織愈合方面是免疫細(xì)胞分泌各種細(xì)胞因子，最終導(dǎo)致牙周支持組織的損傷甚至喪失[25-27]。此次研究結(jié)果提示葛根素可以調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎Th17/Treg 細(xì)胞表達(dá)量，進(jìn)而影響相關(guān)因子表達(dá)，使Th17/Treg 細(xì)胞及相關(guān)因子向有利于牙周組織愈合方向發(fā)展，降低相關(guān)炎癥因子的表達(dá)，從而減少牙周組織炎癥水腫反應(yīng)及牙周組織破壞。但是，葛根素對(duì)牙周炎大鼠具體作用機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究探討。