四川省達州市2021年豬瘟疫苗免疫抗體監(jiān)測與分析

楊 青 徐倚天 劉俐君 趙小波 李清竹 張 蕾 黎丁箕

（達州市動物疫病預(yù)防控制中心，四川達州 635000）

豬瘟（Classical swine fever,CSF），俗稱“爛腸瘟”，在歐美一些地區(qū)被稱為豬霍亂（Hog Cholera）、豬熱病或古典豬瘟，是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起豬的一種高度接觸性傳染病，被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為必須報告的傳染病[1]。

豬瘟于1833年在美國首次被發(fā)現(xiàn)，1903年確定病原體是豬瘟病毒，隨后在世界各地廣泛流行。歐盟、北美和日本等通過免疫預(yù)防措施和逐級凈化，控制和消滅了豬瘟。我國將豬瘟列為一類動物疫病，是目前危害我國養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的主要疫病之一，也是我國重點防范的病種。2017年豬瘟退出了國家強制免疫計劃，但疫苗免疫仍然是預(yù)防豬瘟的主要手段，其效果直接影響該病的綜合防控[2,3]。

抗體水平檢測是有效評價動物防疫工作的重要指標(biāo)，加強對轄區(qū)內(nèi)某種動物疫病的抗體水平監(jiān)測，可以為制定動物疫病免疫程序和防控措施提供科學(xué)的依據(jù)。為掌握四川省達州市2021年豬瘟疫苗的免疫效果，達州市動物疫病預(yù)防控制中心實驗室對全市抽檢的1 605份豬血清進行了豬瘟免疫抗體水平監(jiān)測，并進行了數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析，以期為今后豬瘟的免疫工作開展及豬瘟防治與凈化工作提供有力的數(shù)據(jù)支撐和建議。

1 材料與方法

1.1 材料

樣品采集：從四川省達州市9個縣（市、區(qū)）下轄69個規(guī)模場、13個屠宰場、20個散養(yǎng)村里的100戶散養(yǎng)戶共采集豬血樣1605份。每頭豬前腔靜脈采血3～5mL，室溫自然凝固后分離血清，進行抗體檢測。

1.2 儀器設(shè)備

主要使用儀器有THERMO酶標(biāo)儀（型號：Multi-skan FC），37℃恒溫培養(yǎng)箱，美國伯騰高通量微孔板洗板機，Eppendorf電動八道可調(diào)間距移液器、8道微量移液器、單道微量移液器等。

1.3 試劑與方法

采用豬瘟病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒，試劑均購自青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心，生產(chǎn)批號分別為020012003、020012102、020012106、020012111。

原理及用途：試劑盒由預(yù)包被CSFV E2Ⅰ抗原的微孔板和抗CSFV E2Ⅰ酶標(biāo)記物及其組分配套組成，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫法檢測豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體，適用于豬瘟病毒的免疫效果監(jiān)測和抗體水平調(diào)查。

操作步驟：試劑盒使用前恢復(fù)室溫（20～25℃）并充分搖勻；向抗原包被板加入待檢豬血清20 μL及樣品稀釋液80μL，每孔100 μL；陰性、陽性對照各加2孔，每孔100 μL；輕輕振勻孔中樣品后置37℃恒溫箱中孵育30 min；反復(fù)洗板5次；加酶標(biāo)抗體100 μL，置37℃恒溫箱中孵育30 min；洗板5次，滴加顯色液，A、B各50 μL；置37℃恒溫箱避光孵育10～15 min；每孔加終止液50 μL，用酶標(biāo)儀測定450 nm波長處的OD值。

結(jié)果判定：陰性對照平均值（ODnc）≤0.3，陽性對照平均值（ODpc）≥0.6，試驗才能成立。閾值Cut Off=ODnc×2.1（若ODnc≥0.05則按實際值計算；若ODnc＜0.05則按0.05計算），樣品OD值≥Cut Off值，為陽性；反之為陰性。

2 結(jié)果

根據(jù)《2021年達州市動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃》方案，2021年共采集免疫豬血清1 605份，合格1 548份，合格率為96.45%。其中監(jiān)測規(guī)模養(yǎng)殖場豬血清1 245份，合格1 219份，合格率97.91%；監(jiān)測屠宰場豬血清260份，合格241份，合格率92.69%；監(jiān)測散養(yǎng)戶豬血清100份，合格88份，合格率88%。共監(jiān)測場點102個，合格94個，合格率92.16%，其中監(jiān)測規(guī)模養(yǎng)殖場點69個，合格67個，合格率97.1.16%；監(jiān)測屠宰場13個，合格12個，合格率92.31；監(jiān)測散養(yǎng)村20個，合格15個，合格率75%。檢測結(jié)果見表1。

表1 2021年達州市不同場點類型豬瘟免疫抗體合格率

從不同地區(qū)來看，達州市的9個縣（市、區(qū)）的豬瘟疫苗免疫抗體合格率分別為92.96%、93.48%、96%、100%、100%、92.8%、99.52%、99.52%、99.33%，均在90%以上，其中渠縣合格率最低，為92.8%，經(jīng)開區(qū)、開江縣最高，為100%，見表2。

表2 2021年達州市各縣 （市、區(qū)）豬瘟免疫抗體合格率

根據(jù)監(jiān)測計劃，2021年3—11月達州市分別進行了豬瘟疫苗免疫抗體采樣、檢測，其中3月份共檢測豬血清60份，合格50份，合格率83.33%；4月份共檢測豬血清140份，合格132份，合格率94.29%；5月份共檢測豬血清270份，合格269份，合格率99.63%；6月份共檢測豬血清230份，合格225份，合格率97.83%；7月份共檢測豬血清60份，合格54份，合格率90.00%；8月份共檢測豬血清70份，合格62份，合格率88.57%；9月份共檢測豬血清60份，合格55份，合格率91.67%；10月份共檢測豬血清420份，合格408份，合格率97.14%；11月份共檢測豬血清295份，合格293份，合格率99.32%，見表3、圖1。

表3 2021年達州市各月份豬瘟免疫抗體合格率

圖1 2021年四川達州各月份豬瘟疫苗免疫抗體對比圖

3 討論與分析

從免疫抗體合格率來看，四川省達州市2021年豬瘟疫苗的群體免疫抗體合格率均在70%以上，全部達到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部70%的規(guī)定標(biāo)準。豬瘟疫苗能夠?qū)ωi群提供免疫保護，表明達州市豬瘟疫苗強制免疫工作達到了預(yù)期效果，免疫效果較好，豬瘟疫情風(fēng)險發(fā)生概率較低。

從不同場點豬瘟疫苗免疫抗體檢測結(jié)果分析，免疫抗體合格率最高的是規(guī)模養(yǎng)殖場，其次是屠宰場，散養(yǎng)戶最低，說明豬瘟疫苗免疫存在不均衡性。主要原因可能是規(guī)模養(yǎng)殖場有專職的技術(shù)人員，能按照規(guī)范的免疫程序積極主動做好疫苗免疫工作；屠宰場生豬主要來源于養(yǎng)殖場，豬瘟免疫抗體水平相應(yīng)也比較高；而散養(yǎng)戶缺乏防疫意識，主要依靠春季、秋季的集中免疫時期村級防疫員來開展免疫，也可能存在漏免的情況，從而達不到理想的效果。

從場點合格率來看，個別規(guī)模養(yǎng)殖場豬瘟疫苗免疫抗體也存在不合格的情況，可能與養(yǎng)殖場補欄過程中是否及時進行豬瘟疫苗免疫有關(guān)；某些屠宰場、散養(yǎng)戶免疫抗體不合格，說明豬瘟散發(fā)風(fēng)險仍不可忽視。

從不同地區(qū)來看，各地方豬瘟疫苗免疫抗體合格率存在一定差異?？赡茉蛴?點，一是基層撤鄉(xiāng)并鎮(zhèn)、畜牧獸醫(yī)站“三權(quán)”下放、體制改革等因素，影響各地方免疫工作的確實展開；二是各地對豬瘟疫苗免疫工作的重視程度、防疫保障、人員配備及技術(shù)水平等存在差異，從而造成不同免疫結(jié)果。

從不同月份來看（見圖1），達州市2021年豬瘟疫苗免疫抗體合格率全年保持在80%以上，整體呈現(xiàn)良好狀態(tài)。其中3月份合格率最低，5月份、11月份合格率最高，分析原因，可能與免疫空檔期有關(guān)，達州市秋防集中免疫工作11月底結(jié)束，到第2年3月才開始春防集中免疫，這期間可能存在漏免、補免不及時等情況，使得3月的免疫抗體水平最低；而5月、11月為春季、秋季集中防疫期。各縣（市、區(qū)）春季、秋季集中免疫豬瘟疫苗取得了良好的效果，豬瘟免疫抗體合格率較高。

2020年達州市豬瘟免疫抗體合格率為95.76%，2021年與之相比，略微上升，近2年的豬瘟免疫抗體水平持續(xù)高位，說明養(yǎng)殖戶防疫意識不斷增強，免疫豬瘟疫苗積極性不斷提高，豬瘟疫苗的免疫效果得到提升，對全市動物疫病防控起到了積極的促進作用。

4 總結(jié)

達州市是全國生豬生產(chǎn)的優(yōu)勢地區(qū)，是全國優(yōu)質(zhì)肉豬戰(zhàn)略保障儲備基地，現(xiàn)有全國生豬調(diào)出大縣4個[4]。在黨中央、國務(wù)院和省委、省政府統(tǒng)一部署下，達州市36個國家級、255個省級生豬產(chǎn)能調(diào)控基地也即將全部完成掛牌工作，以形成長期穩(wěn)定的豬肉供應(yīng)保障能力。而豬瘟的防控成效也將直接影響生豬產(chǎn)業(yè)能否持續(xù)健康發(fā)展。近年來，達州市對豬瘟疫苗實行全面強制免疫，有效預(yù)防了豬瘟的發(fā)生和流行，但也存在部分豬場免疫抗體較低的情況。

建議繼續(xù)強化春季、秋季的豬瘟疫苗兩防集中免疫和日常補免工作，切實構(gòu)筑牢固的免疫屏障；進一步加強豬瘟防控知識宣傳，切實提高養(yǎng)殖戶的防疫意識和防控水平；完善免疫程序，制定更規(guī)范、更科學(xué)的免疫程序，確保免疫質(zhì)量。針對部分免疫抗體合格率較低的場點和豬群，認真分析研究抗體水平不高的原因，開展補免工作，加大對豬瘟疾病的防控力度；切實落實相關(guān)的防控策略，保障全市畜牧產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)發(fā)展；同時有計劃地開展凈化措施，倡導(dǎo)各養(yǎng)殖場不定期開展豬瘟疫苗抗體水平監(jiān)測，制定出符合本場的凈化措施，減少因患豬瘟帶來的經(jīng)濟損失。