酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定常見問題的分析及對(duì)策

嚴(yán) 莉　雷 江

（四川省宜賓市第一人民醫(yī)院，四川 宜賓 644000）

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定常見問題的分析及對(duì)策

嚴(yán) 莉雷 江

（四川省宜賓市第一人民醫(yī)院，四川 宜賓 644000）

目的 對(duì)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定常見問題分析及對(duì)策進(jìn)行分析。方法選取2011年5月至2014年5月在我院采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定患者200例，隨機(jī)進(jìn)行分組，手工組100例患者，進(jìn)行手工酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，自動(dòng)組患者100例，進(jìn)行全自動(dòng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，對(duì)兩組患者在檢測(cè)中存在的問題進(jìn)行總結(jié)和分析。結(jié)果全自動(dòng)組患者準(zhǔn)確診斷比例、操作時(shí)間、重復(fù)性、污染比例對(duì)比手工組患者，無顯著性差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組監(jiān)測(cè)方法常見的問題均為凝血、較差污染、檢測(cè)結(jié)果誤差、環(huán)境問題，對(duì)其實(shí)施針對(duì)性的應(yīng)對(duì)策略。結(jié)論對(duì)于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，應(yīng)用全自動(dòng)生化儀進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定和手工酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，準(zhǔn)確診斷率和重復(fù)性、較差污染的比例無明顯的差異性，其中酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定主要存在的常見的問題均為凝血、較差污染、檢測(cè)結(jié)果誤差、環(huán)境問題，無明顯的差異，針對(duì)上述問題進(jìn)行針對(duì)性的處理措施，可有效的增加臨床準(zhǔn)確診斷率和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定準(zhǔn)確率。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定；常見問題分析；對(duì)策；全自動(dòng)生化分析；手工分析

酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是20世紀(jì)70年代在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種免疫測(cè)定技術(shù)，目前在臨床診斷中應(yīng)用較為廣泛，主要是進(jìn)行臨床疾病的診斷，為治療提供可靠的依據(jù)［1］。本文中對(duì)在我院進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定患者200例分別進(jìn)行全自動(dòng)分析和手工分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：選取2011年5月至2014年5月在我院采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定患者200例，其中男117例，女83例，年齡16～76歲，平均年齡（55.37±2.37）歲。將200例患者隨機(jī)分為兩組，手工組100例患者，其中男58例，女42例，年齡16～76歲，平均年齡（55.50±2.00）歲，自動(dòng)組患者100例，其中男59例，女41例，年齡18～75歲，平均年齡（55.00±2.50）歲，對(duì)比兩組患者的性別比例和平均年齡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）?；颊呙嘎?lián)免疫吸附測(cè)定方法為患者自愿選取。

1.2檢測(cè)方法：手工組100例患者，首先對(duì)患者的情況進(jìn)行準(zhǔn)確的掌握，對(duì)患者的病史進(jìn)行詳細(xì)的詢問，后進(jìn)行靜脈血采集，將血液標(biāo)本置于專用試管內(nèi)，后依據(jù)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法和試劑盒說明，進(jìn)行手工酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，同時(shí)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析［2］。

自動(dòng)組患者100例，患者成功采集標(biāo)本后，進(jìn)行處理，后將標(biāo)本置于自動(dòng)分析儀上進(jìn)行全自動(dòng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，對(duì)使用過后的血液標(biāo)本丟棄子專用的垃圾筒內(nèi)。

1.3統(tǒng)計(jì)方法：統(tǒng)計(jì)學(xué)分析選用SPSS11.0軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)表示，采用t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義為P＜0.05。

2　結(jié)　果

2.1對(duì)比兩組患者的檢測(cè)情況：全自動(dòng)組患者準(zhǔn)確診斷比例、操作時(shí)間、重復(fù)性、污染比例對(duì)比手工組患者，無顯著性差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

2.2酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定常見問題：常見的問題為凝血、交叉污染、檢測(cè)結(jié)果誤差、環(huán)境問題，對(duì)其實(shí)施針對(duì)性的應(yīng)對(duì)策略。主要措施為，定期進(jìn)行科內(nèi)人員的技術(shù)培訓(xùn)，提高檢驗(yàn)人員操作的熟練程度，對(duì)流程熟練掌握，并且能夠準(zhǔn)確的進(jìn)行；提高標(biāo)本的管理，降低操作過程中污染的發(fā)生，對(duì)檢驗(yàn)機(jī)器和環(huán)境嚴(yán)格消毒和定期進(jìn)行清理，減少其他標(biāo)本的殘留和污染，并且實(shí)施有效的管理措施，降低誤差。對(duì)檢驗(yàn)處存在傳染性疾病的標(biāo)本進(jìn)行針對(duì)的處理和銷毀，防治交叉污染發(fā)生，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生誤差［3］。

3　討　論

ELISA是一種利用免疫學(xué)原理檢測(cè)抗原或抗體的技術(shù)，可用于定量測(cè)定，測(cè)定的對(duì)象可以是抗體或抗原。ELISA是將酶與抗原或者抗體相結(jié)合形成酶標(biāo)志物，或者將酶與酶抗體相結(jié)合形成免疫復(fù)合物，這種酶標(biāo)志物或免疫復(fù)合物檢測(cè)與一般上午臨床化學(xué)或臨床血液學(xué)檢驗(yàn)不同，它具有高度的特異性和敏感性，且操作簡(jiǎn)單，避免了因標(biāo)本和試劑分配時(shí)間或分配量的不一致造成的檢測(cè)誤差。隨著醫(yī)院免疫檢測(cè)儀器的不斷更新和發(fā)展，目前醫(yī)院的許多檢驗(yàn)科免疫室都有半自動(dòng)酶標(biāo)儀和全自動(dòng)酶聯(lián)免疫儀［4］，由于檢測(cè)系統(tǒng)的不同，兩種儀器被同時(shí)使用，用于衡量檢驗(yàn)科免疫室的檢測(cè)質(zhì)量。因此每年都應(yīng)進(jìn)行儀器之間的比對(duì)。本研究通過比對(duì)［5］，同時(shí)對(duì)兩種操作方法的常見問題進(jìn)行分析。

本文對(duì)TECAN FREEDOMEVOLYZER-2200全自動(dòng)酶聯(lián)免疫儀的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明該儀器可滿足臨床工作需要，但手工操作方法與全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)操作方法存在一定的預(yù)期偏差，處于值附近臨床意義可疑的稱之為灰區(qū)的檢測(cè)結(jié)果不易判定時(shí)，需要考慮兩種操作方法間的預(yù)期，偏差使同一份標(biāo)本在不同操作系統(tǒng)的檢測(cè)，結(jié)果保持一致保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確穩(wěn)定［6-7］。

本文中對(duì)在我院進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定患者200例分別進(jìn)行全自動(dòng)分析和手工分析結(jié)果顯示，全自動(dòng)檢查分析患者準(zhǔn)確診斷比例、操作時(shí)間、重復(fù)性、污染比例對(duì)比手工檢測(cè)患者，無顯著性差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。常見的問題為凝血、較差污染、檢測(cè)結(jié)果誤差、環(huán)境問題，對(duì)其實(shí)施針對(duì)性的應(yīng)對(duì)策略［8］。

表1　對(duì)比兩組患者的情況（n=100）

綜上所述，對(duì)于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定應(yīng)用全自動(dòng)生化儀進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定和手工酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，準(zhǔn)確診斷率和重復(fù)性、較差污染的比例無明顯的差異性，其中酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定主要存在的常見問題為凝血、較差污染、檢測(cè)結(jié)果誤差、環(huán)境問題，針對(duì)上述問題進(jìn)行針對(duì)性的處理措施，可有效的增加臨床準(zhǔn)確診斷率和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定準(zhǔn)確率［9］。

［1］柳其芳.酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)在食品衛(wèi)生理化檢驗(yàn)中的應(yīng)用［J］.食品安全與檢測(cè)，2004，6（2）：60-61.

［2］江楓，肖明兵，倪潤(rùn)洲，等.血清檢測(cè)法的建立及初步應(yīng)用［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2011，29（4）：244-246.

［3］姚勇，相恒泉，石圓圓，等.全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)與手工操作方法的應(yīng)用比較［J］.臨床血液學(xué)雜志，2012，25（8）：482-487.

［4］鄒曉萍，駱展鵬，黎美君，等.大型酶免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)系統(tǒng)廠家校驗(yàn)后確認(rèn)方法的建立及應(yīng)用［J］.中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué)，2011，10（2）：124-129.

［5］Guethoff S，Meiser BM，Groetzne R.Ten-years results of a randomized trial comparing tacro limus versus cyclosporine a in combination with mycophenolate mofetil after heart transplantation［J］.Tramsplantation，2013，95（4）：629-634.

［6］蔡文娥，孫煦勇，秦科，等.酶放大免疫法監(jiān)測(cè)159 例腎移植患者他克莫司血藥濃度結(jié)果分析［J］.中國(guó)藥師，2011，14（11）： 1641-1642.

［7］Jahan N，Khatoon R，Ahmad S.A Comparison of Microscopy and Enzyme Linked Immunosorbent Assay for Diagnosis of Giardia lamblia in Human Faecal Specimens［J］.J Clin Diagn Res，2014，8（11）：DC04-6.

［8］程功，方桂艷，薛立光.淺談梅毒的各種方法檢測(cè)以及TRUST和TP-ELISA血清學(xué)檢測(cè)方法的比較［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（26）：388-389.

［9］彭明.喜酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)梅毒抗體假陽性的原因分析［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2006，18（2）：127-128.

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1671-8194（2015）11-0134-02