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    紅曲米粉對香鹵魷魚中晚期糖基終產(chǎn)物的影響

    2022-10-17 02:20:12陳晶晶李佳根李兆琦翁旭東
    肉類工業(yè) 2022年9期
    關(guān)鍵詞:效果影響

    陳晶晶 李佳根 李兆琦 翁旭東

    1.舟山旅游與健康職業(yè)學(xué)院 浙江舟山 316022 2.浙江海洋大學(xué)食品與藥學(xué)學(xué)院 浙江舟山 316022 3.浙江魚老大農(nóng)業(yè)科技有限公司 浙江衢州 324400

    香鹵魷魚是水產(chǎn)品加工產(chǎn)業(yè)重要產(chǎn)品,蛋白質(zhì)含量高、營養(yǎng)豐富、味鮮味美,深受市場和消費(fèi)者歡迎。而晚期糖基終產(chǎn)物(Advanced Glycation end-products,AGEs)是由蛋白質(zhì)和糖類物質(zhì)在較高溫度下,伴隨美拉德反應(yīng)生成的一類有害物質(zhì),可導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)改變,已被證實(shí)AGEs的積累與糖尿病、心腦血管疾病及人體衰老等都有密切關(guān)系[1,2]。因此,如何降低魷魚中AGEs含量成為當(dāng)前水產(chǎn)休閑食品的研究熱點(diǎn)。

    腌制和烘干是香鹵魷魚加工必備環(huán)節(jié)。受腌制輔料中糖及魷魚天然蛋白均含量較高的影響,更容易在腌制和烘干過程中產(chǎn)生AGEs,進(jìn)而給產(chǎn)品帶來食用安全隱患。目前,國內(nèi)外學(xué)者針對AGEs的生成,主要通過在食品加工中添加必要輔料來抑制其生成。翁婷[3](2020)等發(fā)現(xiàn)在餅干中添加L-半胱氨酸鹽可有效降低AGEs的生成;夏其樂[4](2018)等則發(fā)現(xiàn)楊梅多酚可抑制AGEs的產(chǎn)生;吳光杰[5](2007)等則發(fā)現(xiàn)以烏骨雞為原料制備的烏骨雞活性肽對AGEs的生成反應(yīng)具有較好的抑制效果。但總體而言,國內(nèi)外已有的關(guān)于AGEs的抑制研究成果中采用的AGEs抑制劑存在成本高、有異味及不符合現(xiàn)行食品添加劑標(biāo)準(zhǔn)等問題。因此,基于現(xiàn)有食品加工標(biāo)準(zhǔn),本文以赤道魷魚為原料,以紅曲米粉這類傳統(tǒng)調(diào)味料為研究對象,探討了紅曲米粉對香鹵魷魚中AGEs的生成抑制效果,以期尋找一種切合生產(chǎn)實(shí)際的方法,為提高魷魚這類大宗休閑食品的安全性提供借鑒。

    1 材料與方法

    1.1 材料與設(shè)備

    紅曲米粉及魷魚(冰鮮),購于舟山臨城華潤萬家超市;

    商品腌制液,由舟山漁業(yè)公司提供;

    鄰苯二胺(o-Phenylenediamine,OPD)、濃鹽酸、三氯乙酸、氫氧化鈉等試劑購于國藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑有限公司,分析純(批號:210505,220610,220410,210924);

    AGEs標(biāo)準(zhǔn)品(批號:220123),購于上海心語生物科技有限公司;

    5-羧甲基糠醛(5-Methylfurfural,HMF)、乙二醛(Glyoxal,GO)、丙酮醛(Methylglyoxal,MGO)等購于北京百靈威科技有限公司(批號:220112,220328,220426);

    高速組織搗碎機(jī)(BILON-DFT-200A,上海比朗);

    真空干燥箱(DZF-6050,上海精宏公司);

    高效液相色譜(1290 Infinity II,美國安捷倫公司);

    色譜柱(ZORBAX SB C18,4.6×250mm,5μm,美國安捷倫公司);

    色差儀(YS3060,深圳市三恩時(shí)科技有限公司)。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 香鹵魷魚

    香鹵魷魚按中國水產(chǎn)舟山漁業(yè)公司休閑食品加工廠工藝,具體操作為:魷魚剝皮后清水洗滌至無墨水,浸入到舟山漁業(yè)公司提供的腌漬調(diào)味液中浸漬2h(浸漬液溫度60℃),取出瀝干后于80℃條件烘干3h,即為香鹵魷魚。浸漬時(shí)分別添加不同紅曲米粉(紅曲米粉經(jīng)粉碎機(jī)處理后,過100目篩),紅曲米粉在浸漬液中濃度分別為0%、0.25%、0.50%、0.75%和1.0%。

    1.2.2 魷魚色度測定

    烘干后的魷魚冷量后,采用色差儀測定其亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*),每個(gè)處理重復(fù)3次。

    1.2.3 HMF測定

    精確稱取10g香鹵魷魚,組織粉碎機(jī)粉碎后取1.0g肉泥轉(zhuǎn)移至盛有20mL蒸餾水的三角瓶中,震蕩均勻后于12 000r/min離心10min,收集上清液,而后再加入20mL蒸餾水重復(fù)離心,重復(fù)收集并合并上清液,0.22μm膜過濾后進(jìn)行高效液相色譜分析;液相色譜條件為:5%甲醇溶液洗脫30min,進(jìn)樣量20μL,洗脫流速1.0mL/min,柱溫35℃[6]。

    1.2.4 GO與MGO測定

    GO與MGO的前處理同HMF。精確量取0.1mL OPD溶液(1.08g OPD溶于10mL甲醇,震蕩混合),與1mL所得上清液混合,震蕩均勻后置于60℃水浴鍋中避光保溫24h,而后混合液經(jīng)0.22μm膜過濾后進(jìn)行高效液相色譜分析。液相色譜條件為:采用甲醇梯度洗脫,0~15min(30%~44%),15~30min(45%~74%),30~45min(75%),進(jìn)樣量50μL,洗脫流速1.0mL/min,柱溫35℃[7]。

    1.2.5 熒光AGEs測定

    稱取10g香鹵魷魚,組織粉碎后稱取1.0g肉泥轉(zhuǎn)移至10mL蒸餾水中,超聲處理15min(超聲功率1 000w),而后于12 000r/min離心20min,取上清液,經(jīng)0.22μm膜過濾后重新定容到10mL。再精確量取0.1mL定容液,轉(zhuǎn)移到帶孔黑色平板,并在特定波長(325/440)下檢測熒光AGEs[4]。

    1.2.6 數(shù)據(jù)處理

    所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次,運(yùn)用SPSS17.0進(jìn)行顯著性分析,并使用Duncan進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)(p<0.05)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 紅曲米粉對香鹵魷魚色度的影響

    魷魚的色澤是影響其商品價(jià)值的重要因素。在腌漬液中添加不同用量的紅曲米粉對香鹵魷魚色度的影響見表1和圖1。

    表1 不同紅曲米粉對香鹵魷魚色度的影響

    由表1可以看出,隨著添加量的增大,各組的亮度也隨之增大,但總體增幅較??;而紅度是判斷物體紅綠的指標(biāo),數(shù)值越大則越偏向紅色。從表1可知,各組的紅度變化極為明顯,1.0%組的紅度達(dá)到26.2,顯著高于其他各組(p<0.01),這一結(jié)果與圖1對應(yīng);而黃度總體變化不大,僅空白組(未添加紅曲米粉)與其他組存在顯著差異(p<0.05),表明添加紅曲米粉對魷魚的色澤有顯著影響。

    圖1 不同處理后的香鹵魷魚色澤(A.0%;B.0.25%;C.0.5%;D.0.75%)

    由圖1可知,添加紅曲米粉后,不同劑量的香鹵魷魚色澤逐漸加深,添加量越大則色澤也越深,其中紅曲米粉添加量1.0%組的魷魚色澤過深,且產(chǎn)品外觀偏紅,與產(chǎn)品特征不符,這一組后續(xù)研究中舍棄;而添加量為0.5%的香鹵魷魚色澤最為誘人。

    2.2 紅曲米粉對香鹵魷魚HMF的影響

    HMF是食品加熱過程中極易產(chǎn)生的有害物質(zhì),富含蛋白質(zhì)和還原糖的食品更易產(chǎn)生[8]。圖2是不同紅曲米粉用量對香鹵魷魚中HMF含量的影響。

    圖2 紅曲米粉添加量對香鹵魷魚中HMF的影響

    從圖2中可以看出,空白組(0.0%)中HMF含量達(dá)到0.26g/kg,在所有實(shí)驗(yàn)組中含量最高,而紅曲米粉的加入會降低產(chǎn)品中HMF的含量,表明紅曲米粉具有抑制HMF生成的效果。此外,紅曲米粉對HMF的抑制效果同添加量呈正相關(guān),添加量越大,抑制效果越好,但在高劑量條件下(0.50%和0.75%)抑制效果的增加不明顯(p>0.05)。紅曲米是以大米或糯米為原料,經(jīng)紅酵母發(fā)酵制成。紅曲米中富含多種氨基酸,對人體具有多種生理功效。HMF是美拉德反應(yīng)的產(chǎn)物之一,HMF可以與部分含有巰基的氨基酸通過Michael加成反應(yīng)結(jié)合,使得HMF由對人體有害的游離態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)閷θ梭w無害的結(jié)合態(tài);而紅曲米中的蛋白質(zhì)經(jīng)酵母降解后,會產(chǎn)生部分含有巰基的氨基酸,這可能是紅曲米粉具有降低香鹵魷魚中HMF含量的原因。

    2.3 紅曲米粉對香鹵魷魚中GO與MGO的影響

    GO與MGO等均為羰基化合物,主要來源于美拉德反應(yīng)及糖和蛋白質(zhì)的氧化分解,不僅對人體有害,而且也是AGEs的前體物質(zhì),可以與蛋白質(zhì)反應(yīng)形成AGEs[9]。表2是不同添加量紅曲米粉對香鹵魷魚中GO和MGO的影響。

    表2 不同紅曲米粉對香鹵魷魚中GO、MGO的影響

    從表2中可以看出,同對照組相比,紅曲米粉添加組中GO和MGO含量顯著低于對照組(p<0.05),各添加組之間又呈現(xiàn)一定的劑量效應(yīng)(除0.50%和0.75%,GO),表明紅曲米粉可有效降低GO和MGO的含量;但同HMF類似,隨著添加量的增大,紅曲米粉對GO和MGO的抑制效果逐漸降低,表現(xiàn)為高劑量條件下,GO和MGO含量顯著不明顯(p>0.05)。GO和MGO是美拉德反應(yīng)的中間產(chǎn)物,能夠不可逆的修飾蛋白質(zhì)并形成AGEs,促使蛋白質(zhì)發(fā)生功能紊亂。有研究表明:多酚類物質(zhì)可有效清除這兩類物質(zhì),進(jìn)而能夠抑制AGEs的產(chǎn)生[10~12]。紅曲米粉具有降血脂、降血壓等多種生理工效,主要是其含有的紅曲霉衍生物具備強(qiáng)大的抗氧化特性。張紅林[13](2018)等從古田紅曲米中分離得到亞油酸、亞麻酸,證實(shí)這兩種脂肪酸是古田紅曲米抗氧化特性的主要成分;而胡均亮[14](2017)則發(fā)現(xiàn)普通紅曲米中多酚類物質(zhì)是其抗氧化活性的主要貢獻(xiàn)成分,主要包括沒食子酸、綠原酸。本研究中采用的紅曲米粉同屬普通紅曲米,因此推測其降低GO和MGO的功效同茶多酚等類似,均通過與GO和MGO的結(jié)合來降低這兩類有害物質(zhì)含量。

    2.4 紅曲米粉對香鹵魷魚中AGEs的影響

    不同紅曲米粉添加量對香鹵魷魚中AGEs含量的影響見圖3。

    圖3 紅曲米粉添加量對香鹵魷魚中AGEs的影響

    從圖3中可以看出,隨著紅曲米粉用量的增加,AGEs的熒光值逐漸降低。0.75%的紅曲米粉添加量對應(yīng)的熒光值比對照組低18.6%(p<0.05),表明紅曲米粉對AGEs的形成有較好的抑制效果;同樣,0.50%的紅曲米粉添加量也有較好的抑制效果,但與0.75%添加量之間無顯著性差異(p>0.05)。AGEs是已經(jīng)被證實(shí)的對人體有害的物質(zhì),其生成途徑較為復(fù)雜,通常認(rèn)為與美拉德反應(yīng)有關(guān)。從前述結(jié)果來看,紅曲米粉對HMF、GO及MGO等都有一定的抑制效果,通過抑制的累加,最終對AGEs的形成起到了較為明顯抑制。夏其樂[4](2018)等研究了楊梅多酚提取物對AGEs的體外抑制效果,發(fā)現(xiàn)濃度為100μg/mL的楊梅多酚提取物對AGEs的抑制率達(dá)97.6%,是通過清除AGEs形成的中間體(羥自由基、乙二醛等)來保護(hù)蛋白質(zhì),減少蛋白質(zhì)交聯(lián),最終抑制AGEs的生成。張朝紅[15](2014)等也研究了桑葚花色苷對AGEs的抑制效果,其抑制濃度也達(dá)到毫克級別。與這些已有成果不同的是,本研究中紅曲米粉用量較大,達(dá)到克的級別,而對AGEs的抑制效果確相對較弱。這主要是由于本研究未對紅曲米中的有效成份進(jìn)行提取所導(dǎo)致的;另外,從生產(chǎn)實(shí)際出發(fā),對紅曲米中AGEs抑制因子的提取需要較多成本,而單純提高紅曲米用量,又會對香鹵魷魚色澤產(chǎn)生巨大影響。綜合考慮后,確定紅曲米粉的添加量為0.50%為宜。

    3 結(jié)論

    在香鹵魷魚腌制過程中加入適量紅曲米粉具有改善產(chǎn)品外觀色澤和抑制HMF、GO、MGO和AGEs生成的多種功效。其中,紅曲米粉對多種有害因子的抑制效果呈現(xiàn)一定的劑量效應(yīng),但在高劑量條件下抑制效果無顯著差異;紅曲米粉對HMF等有害因子的抑制可能是通過紅曲米粉中含有的沒食子酸、綠原酸等酚類物質(zhì)有關(guān),這些物質(zhì)可與GO等AGEs的前體物質(zhì)結(jié)合,進(jìn)而減少AGEs的形成。從實(shí)際生產(chǎn)角度出發(fā),綜合確定香鹵魷魚中紅曲米粉的添加量為0.50%,該添加量能夠有效降低晚期糖基終產(chǎn)物等有害因子含量,同時(shí)在成本上也較為經(jīng)濟(jì)。

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