基于數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡藥理學對腹瀉型腸易激綜合征的方證探討

王璐 饒穎 周佳林 戴琦

1.江西中醫(yī)藥大學 南昌 330000 2.江西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 3.江西省中醫(yī)消化病臨床研究基地

腸易激綜合征（irritable bowel syndrome，IBS）是一種以腹痛、腹脹為主要癥狀，與排便相關或伴有排便習慣改變的疾病[1]，臨床常規(guī)檢查尚無法解釋這些癥狀。羅馬Ⅳ標準將IBS的糞便性狀，稀水樣便的比例大于25%，塊狀便的比例小于25%的定義為腹瀉型腸易激綜合征（irritable bowel syndrome with predominant diarrhea，IBS-D）[2-3]。 中醫(yī)認為IBS-D屬于“泄瀉”“腹痛”的范疇，其病位在腸，與肝、脾、腎等多臟腑有關；病性可由實轉虛，虛實夾雜；病機為肝失疏泄，橫逆犯脾，脾失健運，濕從中生，脾虛日久，脾陽不足，累及腎陽，脾腎兩虛，并將其分為肝郁脾虛型、脾虛濕盛型、脾腎陽虛型、脾胃濕熱型和寒熱錯雜型[4]。中醫(yī)以整體觀念和辨證論治為治療原則，證型之間多有聯(lián)系，為了進一步探索證型、方藥之間的關聯(lián)，本研究以數(shù)據(jù)挖掘技術和網(wǎng)絡藥理學為基礎，對中藥治療脾虛濕盛型和脾腎陽虛型IBS-D的方證關系進行探討分析。

1 材料和方法

1.1 資料收集 對中國知網(wǎng)（China National Knowledge Infrastructure，CNKI）、中國生物醫(yī)學文獻服務系統(tǒng) （Chinese Biomedical Literature Service system，SinoMed）、萬方期刊數(shù)據(jù)庫（Wanfang Database）、維普中文期刊數(shù)據(jù)庫（VIP Database for Chinese Technical Periodicals）四大中文數(shù)據(jù)庫進行檢索。以“腹瀉型腸易激綜合征”“腸易激綜合征”“腹瀉”等為關鍵詞或主題詞，搜索從建庫至2020年12月的相關文獻，提取相關的證型、方藥等信息。根據(jù)納入標準和排除標準剔除不符合要求的文獻。

1.2 納入標準與排除標準

1.2.1 納入標準 采用中藥內治法治療脾虛濕盛型或脾腎陽虛型IBS-D的文獻，且治療有效，文獻有明確的方劑及藥物組成。

1.2.2 排除標準 （1）個案報道、綜述類、動物類或實驗類文獻；（2）資料來源不清，方劑、藥物不具體或信息嚴重缺失，且研究對象除IBS-D外合并有其他疾病的文獻；（3）重復發(fā)表、研究數(shù)據(jù)雷同者，只收錄其中發(fā)表時間最近的文獻。

1.3 名詞術語規(guī)范化 以衛(wèi)生部“十二五”規(guī)劃教材人民衛(wèi)生出版社（第二版）《中藥學》和2020年版《中華人民共和國藥典》為參照，對因用藥部位不同、存在別名、炮制方式等導致藥物名稱不統(tǒng)一情況進行規(guī)范，如：當歸、當歸身、當歸尾等統(tǒng)稱為當歸，金鈴子規(guī)范為川楝子，半夏曲、姜半夏統(tǒng)稱半夏；若功效有異，則保留原名，如生地黃和熟地黃等。

1.4 數(shù)據(jù)處理 通過雙人分別錄入的方法將文獻數(shù)據(jù)規(guī)范導入WPS Office Excel工作表，進行數(shù)據(jù)整理后篩選出高頻中藥，并利用IBM SPSS Modeler 18.1軟件對脾虛濕盛型和脾腎陽虛型相關處方進行關聯(lián)規(guī)則分析。

1.5 中藥活性成分及靶點收集 利用中藥系統(tǒng)藥理學數(shù)據(jù)庫與分析平臺（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP） 數(shù)據(jù)庫（http://tcmspw.com/tcmsp.php）、中醫(yī)藥百科全書（The Encyclopedia of Traditional Chinese Medicine，ETCM）數(shù)據(jù)庫（http://www.tcmip.cn/ETCM）對整理出的中藥進行活性成分收集，在TCMSP數(shù)據(jù)庫中設置口服利用度（oral bioavailability，OB）≥30%、類藥性（drug-likeness，DL）≥0.18。 利用UniProt數(shù)據(jù)庫（https://www.uniprot.org/）對收集到的活性成分進行靶點比對。

1.6 疾病靶點收集 利用基因疾病關聯(lián)數(shù)據(jù)庫（Gene-Disease Association Database，DisGeNET）（https://www.disgenet.org/）、 人類基因綜合數(shù)據(jù)庫（Human Gene Comprehensive Database，GeneCards） （https://www.genecards.org/）、人類孟德爾遺傳在線（Online Mendelian Inheritance in Man，OMIM）數(shù)據(jù)庫（https://www.omim.org/）檢索IBS-D相關靶點，篩重后進行記錄整理。

1.7 靶點整理和可視化 對脾虛濕盛型和脾腎陽虛型IBS-D中的核心中藥活性成分與疾病的交集靶點進行統(tǒng)計，并利用Cytoscape 3.9.0軟件構建成分-靶點圖。

1.8 蛋白互作網(wǎng)絡（protein-protein interactions，PPI）構建 將所得關鍵靶點導入STRING數(shù)據(jù)庫（https://string-db.org/），設置物種為人，置信度≥0.400，運用Cytoscape 3.9.0軟件進行可視化處理。

1.9 基因本體（gene ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析 將關鍵靶點導入DAVID數(shù)據(jù)庫（https://david.ncifcrf.gov/），設置物種為人，進行GO和KEGG富集分析，并對結果進行可視化處理。

2 結果

2.1 文獻檢索和數(shù)據(jù)匯總 文獻檢索提示脾虛濕盛型文獻182篇，處方188個，中藥145味，共使用2 149次；脾腎陽虛型文獻133篇，處方135個，中藥122味，共使用1 571次。

2.2 高頻中藥與關聯(lián)規(guī)則

2.2.1 脾虛濕盛型 脾虛濕盛型IBS-D的前10味高頻中藥分別為白術（171次）、甘草（155次）、茯苓（150次）、黨參（122次）、薏苡仁（87次）、陳皮（84次）、山藥（81次）、白芍（69次）、砂仁（69次）、白扁豆（63次）。 見表1。將數(shù)據(jù)導入IBM SPSS Modeler 18.1軟件，設置鏈接大小連續(xù)變化，其中線條粗細代表關聯(lián)強度，繪制關聯(lián)規(guī)則網(wǎng)絡圖，結果顯示白術、甘草、茯苓、黨參4味中藥互為關聯(lián)，且關聯(lián)度較強。見圖1。使用Apriori算法進行建模，進一步分析不同中藥的配伍關系，設置支持度≥45.00%（前后項藥物在所有處方中同時出現(xiàn)的概率），置信度≥90.00%（前項出現(xiàn)時后項藥物出現(xiàn)的概率），最大前項數(shù)5，提升度≥1（大于1表明前后項藥物之間的關聯(lián)有效），按置信度排序，得到11條結果。見表2。結合高頻藥物和關聯(lián)規(guī)則所示結果，推測白術、甘草、茯苓、黨參為脾虛濕盛型IBS-D的核心中藥配伍。

表1 治療脾虛濕盛型IBS-D前10味高頻中藥

圖1 中藥治療脾虛濕盛型IBS-D關聯(lián)規(guī)則網(wǎng)絡圖

表2 中藥治療脾虛濕盛型IBS-D關聯(lián)規(guī)則

2.2.2 脾腎陽虛型 脾腎陽虛型IBS-D的高頻中藥前10位分別為白術（111次）、補骨脂（94次）、肉豆蔻（91次）、茯苓（86次）、甘草（85次）、黨參（74次）、吳 茱萸（70次）、白芍（67次）、五味子（60次）、山藥（55次）。見表3。將數(shù)據(jù)導入IBM SPSS Modeler 18.1軟件進行關聯(lián)規(guī)則分析，結果顯示補骨脂-肉豆蔻、白術-補骨脂、白術-茯苓、白術-肉豆蔻、白術-甘草、白術-黨參、補骨脂-吳茱萸、補骨脂-甘草、肉豆蔻-吳茱萸關聯(lián)性強。見圖2。設置支持度≥45.00%，置信度≥90.00%，最大前項數(shù)5，提升度≥1，得到4條關聯(lián)規(guī)則結果，其中2藥2條，3藥2條，分別為黨參-白術；吳茱萸-補骨脂；吳茱萸+肉豆蔻-補骨脂；吳茱萸+補骨脂-肉豆蔻。見表4。結合高頻藥物和關聯(lián)規(guī)則結果，推測中藥治療脾腎陽虛型IBS-D核心配伍或為補骨脂、吳茱萸、肉豆蔻，并根據(jù)臨床情況辨證加入白術、甘草、黨參、茯苓等藥物。

圖2 中藥治療脾腎陽虛型IBS-D關聯(lián)規(guī)則網(wǎng)絡圖

表3 治療脾腎陽虛型IBS-D前10味高頻中藥

表4 中藥治療脾腎陽虛型IBS-D關聯(lián)規(guī)則

2.3 靶點收集 數(shù)據(jù)挖掘顯示脾虛濕盛型核心配伍或為白術、甘草、黨參、茯苓，脾腎陽虛型或為補骨脂、吳茱萸、肉豆蔻，利用TCMSP、ETCM數(shù)據(jù)庫對以上中藥進行活性成分和靶點收集。見表5。檢索DisGeNET、GeneCards、OMIM數(shù)據(jù)庫中IBS-D的相關靶點，去重后共收集到靶點554個。

表5 中藥有效活性成分和靶點數(shù)

2.4 交集靶點 統(tǒng)計兩個證型對應中藥與疾病IBS-D的交集靶點，結果顯示白術、甘草、茯苓、黨參與IBS-D交集靶點tar-one共78個，補骨脂、吳茱萸、肉豆蔻與IBS-D交集靶點tar-two共80個， 對tar-one和tar-two的交集靶點進行統(tǒng)計，得到tar-common靶點54個。見圖3。應用Cytoscape 3.9.0軟件制作中藥成分-疾病靶點圖，并進行拓撲分析。見圖4～5。

圖3 tar-one和tar-two交集靶點

圖4 tar-one中藥成分-疾病靶點可視化

圖5 tar-two中藥成分-疾病靶點可視化

圖4為白術、茯苓、甘草、黨參4味藥對IBS-D的中藥成分-疾病靶點網(wǎng)絡圖。淺紅色三角形為共有靶點tar-common，藍色v形為除外共有靶點的其他靶點，黃色圓形為茯苓的有效成分，紅色圓形為白術的有效成分，紫色圓形為黨參的有效成分，綠色圓形為甘草的有效成分。圖5為吳茱萸、補骨脂、肉豆蔻三味藥對IBS-D的中藥成分-疾病靶點網(wǎng)絡圖，淺紅色三角形為靶點tar-common，紫色v形為除外共有靶點的其他靶點，綠色圓形為補骨脂有效成分，藍色圓形為肉豆蔻有效成分，黃色圓形為吳茱萸有效成分。結合兩圖可發(fā)現(xiàn)，藥物治療IBS-D的關鍵靶點或為tar-one和tar-two交集靶點，即tar-common。

拓撲分析顯示，白術中3β-乙酰氧基蒼術酮（3β-acetoxyatractylone）， 甘草中槲皮素（quercetin），茯苓中常春藤皂苷元（hederagenin），黨參中木犀草素（luteolin），補骨脂中二十四烷酸（lignoceric acid），肉豆蔻中β-谷甾醇 （β-sitosterol），吳茱萸中槲皮素（quercetin）為藥物治療IBS-D的核心成分。

2.5 PPI結果可視化分析 分別將tar-one、tar-two、tar-common導入STRING數(shù)據(jù)庫，應用Cytoscape 3.9.0軟件將得到的結果進行可視化分析，按節(jié)點度值（degree）排序，節(jié)點越大、顏色越深表明度值越高。見圖6～8。 由圖可知，tar-one、tar-two中的關鍵靶點與tar-common相似，主要為細胞腫瘤抗原p53（tumor protein p53，TP53）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、 血管內皮生長因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGFA）、白介素-1B（interleukin-1B，IL-1B）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）。

圖6 tar-one PPI網(wǎng)絡

圖7 tar-two PPI網(wǎng)絡

圖8 tar-common PPI網(wǎng)絡

2.6 GO和KEGG富集分析 將tar-one、tar-two、tarcommon導入DAVID數(shù)據(jù)庫，進行GO和KEGG富集分析，設P≤0.05，GO富集分析中得到生物過程（biological process，BP） 條目tar-one共277條，tar-two共293條，tar-common共271條；KEGG分析結果tar-one共83條，tar-two共81條，tar-common共76條。對三組結果進行交集分析，發(fā)現(xiàn)按P值排列，tar-common中有228條GO分析和69條KEGG分析的條目均存在于tar-one和tar-two中。 見圖9～10。 對tar-common中GO分析及KEGG分析的前20條結果以及tar-one、tar-two的非交集部分進行可視化分析，其中非交集部分的GO富集分析條目較多，只取前10條。見圖11～12。

圖9 tar-one、tar-two和tar-common的GO交集分析

圖10 tar-one、tar-two和tar-common的KEGG交集分析

圖11 GO富集分析

圖12 KEGG富集分析

tar-common中GO富集分析主要為基因表達、轉錄調控、信號轉導、免疫反應、炎癥反應、細胞對脂多糖的反應、一氧化氮生物合成過程等。tar-common中KEGG通路富集分析主要為癌癥途徑、癌癥中蛋白聚糖、胰腺癌、膀胱癌、甲型流感、南美錐蟲?。乐掊F蟲?。⒗猜?、弓形蟲病、結核、丙型肝炎、乙型肝炎、炎癥性腸病、類風濕關節(jié)炎、瘧疾、阿米巴病、細胞因子-細胞因子受體相互作用、Toll樣受體（Toll-like receptors，TLR）信號通路、缺氧誘導因子-1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）信號通路、T細胞受體信號通路、NOD樣受體（NOD-like receptors，NLR）信號通路等。

tar-one中GO分析的非交集條目主要與γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）信號通路、激活磷脂酶C的G蛋白偶聯(lián)乙酰膽堿受體信號通路、腺苷酸環(huán)化酶抑制G蛋白偶聯(lián)乙酰膽堿受體信號通路、G蛋白偶聯(lián)乙酰膽堿受體信號通路、離子跨膜轉運、氯化物的運輸轉運、膽固醇代謝、平滑肌收縮正向調節(jié)等通路有關。KEGG分析包括逆行內源性大麻素信號、神經活性配體-受體相互作用、嗎啡成癮、尼古丁成癮、GABA能突觸、藥物代謝-細胞色素P450、脂肪細胞因子信號通路、膽堿能突觸、腎細胞癌、甲狀腺癌、細胞色素P450對異生素的代謝等。

tar-two中GO分析為疼痛的感官知覺、IL-6產生的負調節(jié)、IL-10產生的正向調節(jié)、對革蘭陰性菌的防御反應、平滑肌收縮的調節(jié)、血管收縮的調節(jié)、皮質肌動蛋白細胞骨架組織、細胞外調節(jié)蛋白激酶1（extracellular regulated protein kinases 1，ERK1）和ERK2級聯(lián)的調節(jié)、黏膜的先天免疫反應等。KEGG分析為醛固酮調節(jié)的鈉重吸收、胰島素分泌、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信號通路、環(huán)鳥苷酸-蛋白激酶G（cyclicguanosine-protein kinase G，cGMP-PKG）信號通路、 p53信號通路、催乳素信號通路、自然殺傷細胞介導的細胞毒性、EB病毒感染、胃酸分泌等。

3 討論

IBS是一種在全世界廣泛分布的疾病，研究表明全球IBS患病率約為11.2%[5]，其中IBS-D是一種重要亞型。目前認為，IBS發(fā)病與胃腸動力異常、內臟高敏感、腦腸軸調節(jié)異常、腸道菌群紊亂、腸道低度炎癥等有關，以對癥治療為主，如止瀉劑、益生菌等[1]。中醫(yī)認為該病涉及多個臟腑，脾胃虛弱或肝失疏泄是其重要病機[4]，從五臟辨證進行治療，常能取得不錯療效[6]。

本文對脾虛濕盛和脾腎陽虛兩證型進行數(shù)據(jù)挖掘分析，發(fā)現(xiàn)脾虛濕盛型的前10味高頻藥物為白術、甘草、茯苓、黨參、薏苡仁、陳皮、山藥、白芍、砂仁、白扁豆，大多為益氣健脾祛濕之藥，且前4味藥白術、甘草、茯苓、黨參為四君子湯的基本組成。關聯(lián)規(guī)則結果亦顯示這四味藥關聯(lián)性強，考慮為中藥治療脾虛濕盛型IBS-D的核心配伍。四君子湯是補氣健脾的經典方，白術健脾益氣、燥濕利水，黨參補脾益肺、養(yǎng)血生津，茯苓利水滲濕、健脾寧心安神，甘草甘平、炙用甘溫，有補脾益氣、緩急止痛、調和諸藥之效。網(wǎng)絡藥理結果顯示，白術中3β-乙酰氧基蒼術酮，甘草中槲皮素，茯苓中常春藤皂苷元，黨參中木犀草素為中藥治療IBS-D的重要成分。蒼術酮是白術揮發(fā)油中一種重要成分，其性質不穩(wěn)定，易于轉化，產物如白術內酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等有抗炎、促進胃腸運動等作用[7]。劉麗娜等[8]發(fā)現(xiàn)，槲皮素可減輕IBS模型大鼠結腸黏膜炎癥，增強腸屏障功能，改善內臟敏感性。另有研究顯示，常春藤皂苷元、木犀草素有抗炎、抗菌、抗抑郁等作用[9-11]。

脾腎陽虛型IBS-D的高頻藥物前10味為白術、補骨脂、肉豆蔻、茯苓、甘草、黨參、吳茱萸、白芍、五味子、山藥。補骨脂、吳茱萸、肉豆蔻、五味子為四神丸的基本組成，善溫脾暖腎、澀腸止瀉。白術、甘草、茯苓、黨參組成四君子湯，白芍柔肝止痛，山藥健脾祛濕。關聯(lián)規(guī)則分析表明，吳茱萸、肉豆蔻、補骨脂或為核心配伍，且常加黨參、白術等健脾益氣之藥增強療效。由此可知，臨床上治療脾腎陽虛型IBS-D時或以溫補脾腎為基礎，辨證加予健脾益氣、柔肝祛濕等藥，這與IBS-D病機相符。魏良兵等[12]發(fā)現(xiàn)，補骨脂-肉豆蔻對IBS有治療作用，能調節(jié)結腸組織中促腎上腺皮質激素釋放因子-環(huán)磷腺苷效應元件結合蛋白信號通路，降低內臟高敏感性。本研究顯示，補骨脂中二十四烷酸、肉豆蔻中β-谷甾醇、吳茱萸中槲皮素或為治療IBS-D的核心成分。研究顯示，β-谷甾醇有抗炎抗菌等作用[13]。有關上述化合物對IBS-D影響的文獻研究尚不多見，尚需進一步實驗支持。

PPI網(wǎng)絡顯示，IL-6、TP53、TNF、VEGFA、IL-1B為中藥治療IBS-D關鍵靶點。IL-6、TNF、IL-1B是促炎細胞因子，與IBS-D發(fā)病機制有一定聯(lián)系。Seyedmirzaee等[14]對74名IBS患者和75名健康者進行血清細胞因子比對，發(fā)現(xiàn)IBS患者血清中IL-6、TNF-α較健康者高。一項薈萃分析顯示，IBS患者IL-6水平高于對照組，且在IBS-D中更顯著[15]。另有研究發(fā)現(xiàn)，IL-1B能夠誘導腸道通透性增加，導致腸道炎癥的發(fā)生[16]。低度腸道炎癥是IBS發(fā)病機制之一，可能與腸道菌群紊亂，產生毒素刺激腸黏膜，導致炎癥因子生成有關。

tar-common的GO和KEGG富集分析顯示白術、茯苓、黨參、白術、補骨脂、吳茱萸、肉豆蔻7味中藥參與基因表達、轉錄調控、信號轉導、免疫反應、炎癥反應、細胞對脂多糖的反應、一氧化氮生物合成過程的正調控等多項途徑，并通過多種疾病通路、信號通路發(fā)揮治療作用。研究表明，一氧化氮參與多種信號傳導，具有調節(jié)胃動力的作用[17]，并與內臟超敏反應相關[18]。脂多糖會誘發(fā)腸道炎癥和內臟高敏感性，富含可發(fā)酵寡糖、二糖、單糖和多元醇的食物可通過這一途徑加劇IBS-D的癥狀[19-20]。TLR信號通路與炎癥因子表達有關，通過影響腸道通透性，介導IBS-D炎癥反應[21-23]。

tar-one的GO和KEGG分析顯示，四君子湯還可以通過GABA通路、激活或抑制G蛋白偶聯(lián)乙酰膽堿受體信號通路、離子跨膜轉運、氯化物的運輸轉運、平滑肌收縮正向調節(jié)等途徑發(fā)揮治療作用，并與多種疾病通路、信號通路、代謝通路、突觸通路密切相關。GABA、乙酰膽堿受體（acetylcholine receptor，Ach）為重要的中樞神經遞質，能夠通過腦腸軸完成腸-腦信號雙向交流，調節(jié)IBS-D癥狀。GABA是中樞神經系統(tǒng)中重要的抑制性神經遞質，腸神經細胞通過鈉-鉀-氯化物轉運體增高細胞內氯化物濃度，從而激活腸神經系統(tǒng)中GABA受體[24]。胃腸道的GABA受體可調節(jié)胃腸道的分泌與運動，影響內臟高敏性感[25]；并能通過改變促炎因子的表達，起到抗炎作用[26]。Ach是一種重要的興奮性神經遞質，研究顯示IBS患者結腸黏膜中的肥大細胞數(shù)量有所增加，其可激活肌腸神經元，通過釋放Ach，調控平滑肌收縮[27]。

tar-two的GO和KEGG分析顯示，補骨脂、肉豆蔻、吳茱萸治療IBS-D與疼痛的感官知覺、炎癥因子的表達、平滑肌收縮、血管收縮、免疫反應等生物過程有關，還有醛固酮調節(jié)的鈉重吸收、胰島素分泌以及多種信號通路參與。醛固酮主要作用于腎臟，通過促進腎臟對鈉的重吸收來維持水鈉平衡，Xiong等[28]研究表明補骨脂、肉豆蔻可通過調控鈉/氫交換因子3重組蛋白來維持水、電解質穩(wěn)態(tài)，抑制腹瀉的發(fā)生。胰島素分泌與糖尿病密切相聯(lián)，中醫(yī)常從脾對其進行論治[29]。有研究表明，IBS可能是糖尿病發(fā)病的一項高危因素[30]，且患有代謝性脂肪性肝病的糖尿病患者更易患IBS[31]。筆者推測，IBS-D尤其是脾腎陽虛型IBS-D與胰島素分泌有一定聯(lián)系，但具體機制還需進一步研究。

綜上可知，脾虛濕盛型與脾腎陽虛型雖皆為虛證，但前者陽氣微耗，尚以氣虛為主，其型經久不愈，耗損脾陽，累及腎陽，導致脾腎兩虛，漸以陽虛為導向。數(shù)據(jù)挖掘分析顯示，中藥治療脾虛濕盛型IBS-D的關鍵為健脾益氣，核心方藥為四君子湯；治療脾腎陽虛型IBS-D則在溫陽的同時顧護脾氣，核心方藥為四君子湯合四神丸加減。網(wǎng)絡藥理學分析表明，脾虛濕盛型和脾腎陽虛型的兩組核心藥物在治療靶點、通路上多有相似，都具有“多成分、多靶點、多通路”的特點，且作用機制大都與炎癥反應的調節(jié)有關。四君子湯治療脾虛濕盛型IBS-D還與腦腸軸中相關神經遞質的釋放有關，補骨脂、肉豆蔻、吳茱萸三藥治療脾腎陽虛型IBS-D還涉及到胰島素分泌、醛固酮調節(jié)的鈉重吸收等信號通路。