CEUS多參數(shù)聯(lián)合血清外泌體CD82、孕激素受體膜組分1檢測對乳腺癌早期篩查的臨床價值

李海芬 付趙虎 戴 林 李俊青*

（1.邢臺市第三醫(yī)院體檢中心，邢臺 054000；2邢臺市第三醫(yī)院超聲科 邢臺 054000）

乳腺癌是美國女性中第二大最常見的癌癥。據(jù)美國癌癥協(xié)會估計，美國女性一生中某個時間患乳腺癌的平均風險約為12%［1］。乳腺癌的早期篩查對預后至關重要。乳腺癌篩查主要基于乳房X光檢查，癥狀出現(xiàn)之前檢測癌癥可以更好地治療，從而降低乳腺癌相關的發(fā)病率和死亡率。從本質(zhì)上講，導管原位癌，尤其是高級別導管原位癌的檢測和治療，甚至可以被視為乳腺癌發(fā)展的一級預防形式［2］。對乳房X光檢查隨機對照試驗的幾項薈萃分析表明，參加篩查的女性死亡率降低了約20%，并且實際接受篩查的女性死亡率降低了更高。乳房X線照相術未能在癥狀階段之前檢測到大量癌癥，因此在篩查輪次之間表現(xiàn)為間隔癌。特別是對于纖維腺體組織相對比例較大的女性，即乳房“致密”的女性，在兩次篩查之間檢測到高達50%的癌癥?；既橄侔╋L險增加的女性通常更容易患上乳腺癌，因此，做好早期篩查尤為重要［3,4］。Yang等人首先報道了CD82是乳腺癌轉(zhuǎn)移的潛在標志物，Huang等人研究表明，與CD82陽性腫瘤相比，CD82陰性腫瘤的5年無病生存率明顯降低，因此，表明CD82表達的降低與腫瘤復發(fā)相關［5］。研究發(fā)現(xiàn)，PGRMC1在乳腺癌中過度表達。過表達與較差的患者預后相關，并在某些孕激素和雌激素聯(lián)合治療時促進乳腺細胞增殖。近年來，在動物和人類研究使用基于微泡的藥劑的對比增強超聲（CEUS）已經(jīng)調(diào)查了淋巴系統(tǒng)的評估。本研究探討CEUS多參數(shù)聯(lián)合血清外泌體CD82、孕激素受體膜組分1檢測對乳腺癌早期篩查的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年10月～2020年12月入邢臺市第三醫(yī)院的92例乳腺癌早期患者作為研究對象。本研究由經(jīng)醫(yī)院倫理委員會同意。入選標準：①經(jīng)針刺活檢或局部切除確診的早期乳腺癌；②未轉(zhuǎn)移至腋窩淋巴結(jié)；③未合并慢性糖尿病患者；④患者自愿參加本研究；⑤完整的病歷資料。排除標準：①嚴重的心腦血管及消化道疾病；②高血壓及自身免疫??；③懷孕或哺乳；④對超聲造影劑過敏；⑤腋窩手術史。

1.2 方法

CEUS檢查：經(jīng)皮CEUS用于識別病變側(cè)乳房上的淋巴管和腋窩淋巴結(jié)。在乳暈周圍12、3、6和9點鐘位置用2%利多卡因進行皮下局部浸潤麻醉。在每個麻醉點皮內(nèi)注射0.5mL Sonovue混懸液（共2.0mL），輕輕按摩注射部位5s～10s，以促進造影劑向淋巴管引流。注射后可立即在CPS上看到皮下淋巴管。通過沿著通道移動探頭可以檢測到增強的淋巴結(jié)。第一組或第一組增強淋巴結(jié)被認為是前哨淋巴結(jié)沿著增強的淋巴管，動態(tài)實時對乳腺腫物增強模式、腫物內(nèi)血管形態(tài)、造影后邊界、有無粗大血管、造影后腫物大小變化等進行觀察并記錄3 min，同時將動態(tài)圖像記錄存盤，分析時間-強度曲線，并記錄。

1.3 觀察指標

1.3.1 兩組患者的一般資料

搜集患者的年齡、體重指數(shù)、初潮年齡、CHOL、TG、FTG及CA153等一般資料情況。

1.3.2 兩組CEUS定量參數(shù)

分析兩組患者的峰值強度、區(qū)域血流量及腫瘤直徑等參數(shù)。

1.3.3 PGRMC1濃度

分析乳腺良惡性腫瘤兩組患者的血清PGRMCl濃度情況。

1.3.4 CD82表達量

采用ELISA檢測兩組外泌體CD82表達情況。

1.3.5 CEUS增強特征間分析

乳腺良惡性腫物的CEUS增強特征間的比較分析。

1.3.6 CEUS定量參數(shù)診斷價值

CEUS定量參數(shù)診斷乳腺癌的診斷效能分析以及CEUS定量參數(shù)聯(lián)合CD82、PGRMCl診斷乳腺癌的診斷效能分析。

1.4 統(tǒng)計學方法

使用統(tǒng)計軟件Stata 20.0進行分析。定量變量表示為（xˉ±S），使用獨立t檢驗（針對正態(tài)數(shù)據(jù)）和Mann-WhitneyU檢驗（針對偏斜數(shù)據(jù)）來比較各組之間的平均值/中值。使用配對t比較平均值的變化-test（對于正態(tài)數(shù)據(jù)）和Wilcoxon符號秩檢驗（對于偏態(tài)數(shù)據(jù)）。所有檢驗均為雙尾檢驗，P＜0.05被認為具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組患者的臨床特點

兩組患者在年齡、體重指數(shù)、初潮年齡及CHOL比較無統(tǒng)計差異，而空腹血糖（FTG）和糖基類抗原153（CA153）的比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 比較兩組患者的臨床資料

2.2 比較兩組CEUS定量參數(shù)

良性組峰值強度、區(qū)域血流量及腫瘤直徑顯著性小于乳腺癌組（P＜0.05），平均通過時間顯著性大于乳腺癌組（P＜0.05），見表2。

表2 比較兩組CEUS定量參數(shù)

2.3 比較兩組患者血液PGRMC1濃度

良性組中PGRMC1濃度為（41.58±16.28)ng/L，乳腺癌組中PGRMC1濃度為（39.24±10.57)ng/L；其中Ⅰ期（56.48±12.27)ng/L，Ⅱ期（60.52±16.05)ng/L，Ⅲ期（94.27±16.41)ng/L，Ⅳ期（113.24±40.24)ng/L，組間PGRMC1濃度有明顯差異（P＜0.05)，見表3。

表3 比較乳腺良惡性腫瘤血液PGRMC1濃度

2.4 檢測兩組血清外泌體CD82表達量

相比良性組，乳腺癌組的CD82表達量更高（P＜0.05)，見圖1。

圖1 檢測兩組血清外泌體CD82表達量

2.5 比較乳腺良惡性腫物的CEUS增強特征間分析

乳腺良惡性腫物間的增強強度與腫物內(nèi)血管形態(tài)間比較，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），腫瘤的造增強方式及有無灌注缺損比較，無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），見表4。

表4 比較乳腺良惡性腫物的CEUS增強特征間分析

2.6 CEUS定量參數(shù)診斷乳腺癌的診斷效能分析

PEAK診斷乳腺癌的敏感度 為45.37%、特異性為75.02%、準確度為54.42%、陽性預測值為80.02%及陰性預測值為38.54%，見表5。

表5 CEUS定量參數(shù)診斷甲狀腺癌的診斷效能分析

2.7 CEUS定量參數(shù)聯(lián)合CD82、PGRMC1診斷乳腺癌的診斷價值

CEUS與CD82、PGRMC1聯(lián)合 診斷 甲狀 腺癌的特異度和準確度分別高于單獨應用CEUS(P＜0.05)，見圖2。

3 討論

乳腺癌是女性最常見的癌癥類型，也是許多國家癌癥患者死亡的主要原因［6］。惡性腫瘤中的血清腫瘤標志物對腫瘤的早期診斷比較關鍵，屬于分子生物學水平的多糖或蛋白片段。臨床指南針對分子水平診斷并不推薦，但想實現(xiàn)整體提高乳腺癌患者的防治水平，分子水平占據(jù)一定的優(yōu)勢，雖然目前臨床多中心、大數(shù)據(jù)臨床數(shù)據(jù)的缺乏，尚不足以作為乳腺癌相關指南循證支持。在監(jiān)測乳腺癌轉(zhuǎn)移或者復發(fā)方面，大部分指南對于腫瘤標志物的臨床價值做出了客觀的評價［7,8］。關于乳腺癌中PGRMC1的表達水平，之前有報道稱，在不按類型或等級區(qū)分的大約50%的乳腺腫瘤中，PGRMC1表達較高。與相應的正常組織相比，PGRMC1蛋白和mRNA在其他幾種癌癥中同樣升高［9,10］。本研究旨在CEUS多參數(shù)聯(lián)合血清外泌體CD82、孕激素受體膜組分1檢測對乳腺癌早期篩查的臨床價值。

先前研究揭示，經(jīng)皮CEUS是評估乳腺癌的重要技術，因為它無創(chuàng)、無輻射、易于使用且具有成本效益［11］。本研究表明，在良性組峰值強度、區(qū)域血流量及腫瘤直徑顯著性小于乳腺癌組，平均通過時間顯著性大于乳腺癌組，且良性組中PGRMC1濃度組間有明顯差異，相比良性組，乳腺癌組的CD82表達量更高［12-14］。研究報道，在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中，CD82的蛋白表達在組織、血液和外泌體中發(fā)生動態(tài)變化。CD82作為抑癌基因在乳腺癌組織中的表達下降。外周血中CD82水平與健康人和乳腺良性疾病患者外周血中CD82水平無明顯差異。但在外周血提取的外泌體中明顯增高，與乳腺良性疾病患者和健康人群相比。乳腺良惡性腫物間的增強強度與腫物內(nèi)血管形態(tài)間比較，腫瘤的造增強方式及有無灌注缺損比較無差異，說明惡性腫物超聲造影表現(xiàn)主要為高增強、以放射狀及穿支狀增強為主。Zhou等［15］研究顯示治療反應性較好的患者血管灌注指數(shù)及峰值強度下降更明顯，Saracco等［16］等研究則顯示治療反應性較好的患者腫瘤內(nèi)造影劑流入量顯著性小于治療反應性較差的瘤體。PEAK診斷乳腺癌的敏感度為45.37%、特異性為75.02%、準確度為54.42%、陽性預測值為80.02%及陰性預測值為38.54%。CEUS與CD82、PGRMC1聯(lián)合診斷甲狀腺癌的特異度和準確度分別高于單獨應用CEUS。CEUS的原理是通過不同的路徑注入造影劑，增加與組織的對比度，增加組織、器官和病灶的顯示。目前已廣泛應用于臨床診斷腹表器官腫瘤，鑒別腎臟良惡性。CEUS檢查為發(fā)現(xiàn)和預測SLN轉(zhuǎn)移的存在或不存在提供了新的思路［17-19］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CEUS可以為乳腺癌患者的檢測提供有價值的信息，并且CEUS對于SLN的定位和術前轉(zhuǎn)移預測具有較高的臨床價值。

綜上所述，CEUS可以有效指導早期乳腺癌患者診斷，聯(lián)合CD82、PGRMC1具有廣闊的臨床診斷應用前景，但我們的研究病例有限，未來的研究需要進一步明確CEUS在乳腺癌早期診斷中的作用。