圍產(chǎn)期母豬飼糧添加大豆異黃酮和山花黃芩提取物對母仔豬抗氧化功能和繁殖性能的影響

劉 霜 肖俊峰 吳有林 柳成東 毛昌發(fā) 張 軍 陳鑫珠 劉 景 溫慶琪

(1.福建傲農(nóng)生物科技集團股份有限公司 福建 漳州 363000；2.福建省生豬營養(yǎng)與飼料重點實驗室 福建 漳州 363000；3.福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013；4.江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 南昌 330045）

圍產(chǎn)期是母豬繁殖周期中特殊的一段時期，隨著胎兒生長發(fā)育加速和臨近分娩，母豬抗氧化系統(tǒng)將發(fā)生巨大的變化。母豬妊娠后期胎兒不斷增長的營養(yǎng)需求，導致母體和胎盤的代謝強度增加，進而導致活性氧自由基的產(chǎn)生增加[1-2]，而活性氧自由基會引起脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的過氧化[3]，導致母體正常的生理機能衰退，嚴重時甚至影響子宮內(nèi)胎兒的生長發(fā)育和引發(fā)流產(chǎn)[4-5]，圍產(chǎn)期母豬的營養(yǎng)對母仔豬健康和生產(chǎn)性能有著重要影響[6]，甚至影響母豬使用年限。大豆異黃酮（Soy Isoflavone，SI）和山花黃芩提取物 （Extracts of Scutellaria baicalensis and Lonicera confusa，SL）均來自天然植物、具有一定功能的飼料添加劑，具有無毒性、無藥物殘留和添加劑量小等優(yōu)點[7-8]。大豆異黃酮是一種從大豆中提取的具有弱雌激素作用的化合物，可以作為雌激素的受體的激動劑或拮抗劑發(fā)揮作用，具有多種生物活性，能促進動物的生長，提高其繁殖性能，促進動物乳腺的發(fā)育，增加泌乳量[7,9]。山花黃芩提取物是由一定比例的山銀花提取物、黃芩提取物組成，其主要有效成分為綠原酸和黃芩苷，綠原酸是植物體在有氧呼吸過程中形成的一種苯丙素類化合物，通過破壞細菌細胞壁和細胞膜的結(jié)構(gòu)，增加細胞膜的通透性，從而發(fā)揮其抗菌作用[10]；而黃芩苷是從中藥黃芩中提取的黃酮類化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等作用[11]。本試驗通過日糧中添加大豆異黃酮和山花黃芩提取物驗證其改善母仔豬抗氧化功能和繁殖性能的效果，為養(yǎng)豬生產(chǎn)者提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗設(shè)計及飼糧 選取胎次（第3胎）、體重(300±15)kg接近的妊娠90 d長×大母豬60頭，隨機分為3組，分別為對照組、大豆異黃酮組、山花黃芩提取物組，每組20頭。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，是參照美國NRC（2012）營養(yǎng)需要配制的顆粒配合飼料，組成及營養(yǎng)水平見表1。大豆異黃酮組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg大豆異黃酮（購自市場，主要成分為4,7-二羥基異黃酮，含量≥1.0%）的試驗飼糧，山花黃芩提取物組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg山花黃芩提取物（購自市場，主要成分為綠原酸2.2 mg/g、黃芩苷22.0 mg/g）的試驗飼糧。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗期間，每天07:30和15:00飼喂母豬，懷孕90 d至產(chǎn)前第1～2 d每頭母豬飼喂2.6 kg/d。母豬分娩前第3 d進入產(chǎn)房飼養(yǎng)，母豬生活區(qū)和仔豬活動區(qū)均為漏縫地板，欄內(nèi)設(shè)仔豬保溫箱。產(chǎn)前第1～2 d飼喂2.0 kg/d，產(chǎn)仔當天不喂料，產(chǎn)后第1 d飼喂1.0 kg，第2 d飼喂2.0 kg，產(chǎn)后第3 d喂料3.0 kg，產(chǎn)后第4～7 d飼喂4.0 kg，第7～10 d飼喂4.0～6.0 kg，自由飲水。試驗時間從母豬妊娠第90 d至分娩后第8 d結(jié)束。嚴格按照豬場防疫和飼養(yǎng)管理制度進行操作。

1.3 樣品采集 母豬分娩當天，采集每頭母豬所產(chǎn)9頭仔豬臍帶血，以初生時間相近的3頭仔豬臍帶血作為1個檢測樣本，共采集3個樣本（每頭10 mL，每個樣本30 mL）；在母豬分娩過程中，對試驗母豬經(jīng)耳緣靜脈采血10 mL。將所采集的血液樣品4℃靜置30 min，3 500 r/min離心15 min，收集上清液即血清，將所收集血清分裝在1.5 mL離心管中，-20℃保存待測。

1.4 生產(chǎn)性能指標測定 母豬分娩當天分別記錄每頭母豬的產(chǎn)活仔數(shù)、產(chǎn)程（首頭仔豬產(chǎn)出到胎衣排出的時間間隔），并稱量仔豬初生窩重和平均初生重，于產(chǎn)后第8 d稱量仔豬窩重，并計算產(chǎn)后7 d仔豬平均日增重。

1.5 母豬、仔豬血清抗氧化指標的測定 按試劑盒說明測定母豬和仔豬血清總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）活性以及還原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）和丙二醛（MAD）含量。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理 試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示，采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件的t檢驗法進行組間差異顯著性比較，P＜0.05表示差異顯著，0.05＜P＜0.1表示有降低或增加的趨勢。

2 結(jié)果與分析

2.1 大豆異黃酮、山花黃芩提取物對圍產(chǎn)期母豬血清抗氧化指標的影響 由表2可知，圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加大豆異黃酮、山花黃芩提取物對母豬血清中CAT、GSH-Px的活性以及T-AOC、GSSG的含量無顯著影響（P＞0.05）；相比于對照組，大豆異黃酮添加組母豬血清T-SOD的活性顯著提高（P＜0.05），MDA含量顯著降低（P＜0.05），且分別提高20.6%和降低33.4%，母豬血清中GSH含量有提高的趨勢（0.1＞P＞0.05）；相比于對照組，山花黃芩提取物添加組母豬血清MDA含量顯著降低（P＜0.05），且降低26.9%，T-SOD的活性和GSH含量有提高的趨勢（0.1＞P＞0.05）。

表2 圍產(chǎn)期母豬飼糧添加大豆異黃酮、山花黃芩提取物對母豬血清抗氧化指標的影響（n=20）

2.2 大豆異黃酮、山花黃芩提取物對新生仔豬血清抗氧化指標的影響 由表3可知，圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加大豆異黃酮、山花黃芩提取物對仔豬臍帶血血清中CAT、GSH-Px的活性以及T-AOC、MDA、GSH、GSSG的含量無顯著影響（P＞0.05）；相比于對照組，大豆異黃酮添加組的仔豬臍帶血血清中TSOD的活性顯著提高（P＜0.05），且提高19.3%，GSH-Px的活性有提高的趨勢（0.1＞P＞0.05）；相比于對照組，山花黃芩提取物添加組的仔豬臍帶血血清中T-SOD的活性顯著提高（P＜0.05），且提高9.5%，GSH-Px的活性有提高的趨勢（0.1＞P＞0.05）。

表3 圍產(chǎn)期母豬飼糧添加大豆異黃酮、山花黃芩提取物對新生仔豬血清抗氧化指標的影響（n=20）

2.3 大豆異黃酮、山花黃芩提取物對圍產(chǎn)期母豬繁殖性能和仔豬生長性能的影響 由表4可知，圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加大豆異黃酮、山花黃芩提取物對母豬產(chǎn)程、產(chǎn)活仔數(shù)、仔豬平均初生重、產(chǎn)后7 d仔豬平均日增重無顯著影響（P＞0.05），但相比于對照組，大豆異黃酮有提高仔豬初生窩重的趨勢（0.1＞P＞0.05）。

表4 飼糧添加大豆異黃酮、山花黃芩提取物對母豬繁殖性能的影響

3 討 論

3.1 飼糧中添加大豆異黃酮和山花黃芩提取物對母仔豬抗氧化功能的影響 在母豬妊娠后期和哺乳期，由于胎兒生長發(fā)育所需的營養(yǎng)、乳腺的發(fā)育、泌乳量增加，母豬在營養(yǎng)攝入不足的情況下為維持正常的繁殖生產(chǎn)，母豬機體會有嚴重的分解代謝[12-13]，從而產(chǎn)生大量的活性氧，導致氧化應(yīng)激，而氧化應(yīng)激在現(xiàn)代高效化養(yǎng)殖生產(chǎn)中對母豬的繁殖性能產(chǎn)生巨大的影響[14]。

大豆異黃酮由于其類雌激素結(jié)構(gòu)，在動物抗氧化功能中具有一定的作用。陳豐等[15]在母豬泌乳4～21 d飼糧中添加15 mg/kg大豆異黃酮，結(jié)果顯示，母豬血漿T-AOC含量提高，肝臟GSH-Px活性提高，MDA含量顯著降低，說明大豆異黃酮能提高哺乳母豬的抗氧化能力。Hu Y J等[16]研究表明，在一胎母豬妊娠后期到泌乳飼糧中分別添加0、15、30、45 mg/kg大豆黃素，母豬CAT和T-AOC含量無顯著影響，且T-SOD活性只在哺乳18 d顯著提高，GSH-Px活性只在分娩當天顯著提高，母豬初乳和常乳中MDA含量均顯著降低。在本研究中，圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加500 mg/kg大豆異黃酮對母豬血清中CAT、GSH-Px的活性以及T-AOC、GSSG的含量無顯著影響，相比于對照組，大豆異黃酮添加組母豬血清T-SOD的活性顯著提高，MDA含量顯著降低，且分別提高20.6%和降低33.4%，母豬血清中GSH含量有提高的趨勢；仔豬臍帶血血清中CAT、GSHPx的活性以及T-AOC、MDA、GSH、GSSG的含量無顯著影響，相比于對照組，大豆異黃酮添加組的仔豬臍帶血血清中T-SOD的活性顯著提高，且提高19.3%，GSH-Px的活性有提高的趨勢，這與陳豐等[15]和Hu Y J等[16]的結(jié)果相似，表明大豆異黃酮在一定程度上能增強母仔豬的抗氧化功能。

山花黃芩提取物中的綠原酸和黃芩苷都具有較強的自由基清除能力，綠原酸能夠提供一定量的氫自由基來消除活性氧和羥基自由基，且其結(jié)構(gòu)中的鄰二酚羥基極易發(fā)生氧化，從而能夠保護組織免受氧化損傷[17]，而黃芩苷也可以直接清除自由基、超氧陰離子等氧自由基，具備良好的抗氧化性[18]。肖霞[19]研究表明，在母豬圍產(chǎn)-泌乳期飼糧中添加山花黃芩提取物極顯著提高母豬分娩和泌乳14 d血清CAT活性，顯著提高母豬哺乳14 d的T-AOC含量，在妊娠-泌乳全期添加山花黃芩提取物極顯著提高母豬分娩CAT活性，顯著提高分娩和哺乳14 d的T-AOC含量。王力[20]研究表明，在妊娠和哺乳期飼糧中添加1 000 mg/kg金銀花黃芩提取物，能顯著提高母豬分娩時血清T-SOD活性，但對母豬分娩時T-AOC含量無顯著影響，對仔豬血清中T-SOD以及T-AOC也無顯著影響。在本研究中，圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加山花黃芩提取物對母豬血清中CAT、GSH-Px的活性以及T-AOC、GSSG的含量無顯著影響，相比于對照組，山花黃芩提取物添加組母豬血清MDA含量顯著降低，且降低26.9%，T-SOD的活性和GSH含量有提高的趨勢；仔豬臍帶血血清中CAT、GSH-Px的 活 性 以 及T-AOC、MDA、GSH、GSSG的含量無顯著影響，相比于對照組，山花黃芩提取物添加組的仔豬臍帶血血清中T-SOD的活性顯著提高，且提高9.5%，GSH-Px的活性有提高的趨勢。本研究結(jié)果與肖霞的研究結(jié)果一致，表明山花黃芩提取物能增強母仔豬的抗氧化能力。

3.2 飼糧中添加大豆異黃酮和山花黃芩提取物對母豬繁殖性能和仔豬生長性能的影響 圍產(chǎn)期母豬的健康狀況對于母豬的繁殖性能和新生仔豬的生長性能都有重要的影響。一些研究表明，大豆異黃酮一定程度上會影響母豬的繁殖性能和哺乳仔豬的生長性能。韋習會等[21]研究表明，在妊娠85 d至產(chǎn)后28 d的母豬飼糧中分別添加5 mg/kg和8 mg/kg大豆異黃酮，對仔豬初生個體重和窩重均無顯著影響，哺乳仔豬20日齡個體重和窩重均極顯著高于對照組，且28日齡斷乳仔豬個體重和窩重也顯著高于對照組，對母豬的下一胎繁殖性能（斷乳后發(fā)情時間、發(fā)情期受胎率、產(chǎn)仔數(shù)、初生重）也無顯著影響。Hu Y J等[16]研究表明，在初產(chǎn)母豬妊娠后期到泌乳飼糧中分別添加0、15、30、45 mg/kg大豆黃素對母豬產(chǎn)活仔數(shù)、木乃伊胎、死胎數(shù)以及初生窩重均無顯著影響，但斷乳窩重和哺乳期仔豬日增重顯著提高。本研究中圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加500 mg/kg大豆異黃酮對母豬產(chǎn)程、產(chǎn)活仔數(shù)、健仔數(shù)、弱仔、死胎、仔豬平均初生重無顯著影響，有提高仔豬初生窩重的趨勢，這與韋習會等[21]和Hu Y J等[16]的研究結(jié)果基本相同，但在仔豬生長性能方面的研究結(jié)果有所不同，圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加500 mg/kg大豆異黃酮對仔豬產(chǎn)后7 d的日增重無顯著影響，可能是與試驗期不同有關(guān)，本研究主要針對圍產(chǎn)期而不涉及哺乳中后期，對哺乳階段的母仔豬影響有限。

一些學者的研究也表明，山花黃芩提取物對于母仔豬的生產(chǎn)性能有所提高。肖霞[19]研究表明，在母豬圍產(chǎn)期和泌乳期飼糧中添加1 000 mg/kg山花黃芩提取物，對母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、健仔數(shù)和泌乳期采食量均無顯著影響，但對哺乳仔豬生長性能和育成率均有顯著提高，特別是極顯著提高斷乳仔豬的窩重和窩增重。Gheisar M M等[22]研究表明，在妊娠94 d到泌乳24 d母豬飼糧中添加500 mg/kg金銀花、黃芩提取物可以顯著提高仔豬斷乳窩重和日增重，但對窩產(chǎn)活仔數(shù)、初生重均無顯著影響。Liu W C等[23]研究表明，在泌乳期飼糧中添加5 000 mg/d和10 000 mg/d金銀花、黃芩提取物復合制劑，可顯著提高仔豬斷乳窩重和日增重。從母豬繁殖性能看，本研究中圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加500 mg/kg山花黃芩提取物對母豬的產(chǎn)程、產(chǎn)活仔數(shù)、初生窩重、仔豬平均初生重均無顯著影響，這與其他學者[19-21]的研究結(jié)果相似，但不同的是，本研究中圍產(chǎn)期母豬飼糧中添加500 mg/kg大豆異黃酮及山花黃芩提取物對仔豬產(chǎn)后7 d的日增重無顯著影響，這可能與試驗階段和添加量不同有關(guān)。

4 結(jié) 論

圍產(chǎn)期母豬飼糧中分別添加500 mg/kg大豆異黃酮和500 mg/kg山花黃芩提取物，增強了母仔豬的抗氧化功能，但對母豬繁殖性能無顯著影響。