• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    中藥醇沉前濃縮液質(zhì)控指標(biāo)的完善及標(biāo)準(zhǔn)建立——以黨參醇沉為例

    2022-10-14 12:14:34潘晶晶任丹丹瞿海斌龔行楚
    中草藥 2022年19期
    關(guān)鍵詞:濃縮液黨參性質(zhì)

    潘晶晶,任丹丹#,瞿海斌, 3,龔行楚, 3*

    中藥醇沉前濃縮液質(zhì)控指標(biāo)的完善及標(biāo)準(zhǔn)建立——以黨參醇沉為例

    潘晶晶1, 2,任丹丹1, 2#,瞿海斌1, 2, 3,龔行楚1, 2, 3*

    1. 浙江大學(xué)藥學(xué)院,藥物信息學(xué)研究所,浙江 杭州 310058 2. 組分中藥國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室浙江大學(xué)交叉創(chuàng)新中心,浙江 杭州 310058 3. 浙江大學(xué)金華研究院,浙江 金華 321016

    完善中藥醇沉前濃縮液質(zhì)控指標(biāo),并建立濃縮液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。制備多批次黨參濃縮液,研究密度與濃縮液其他性質(zhì)間的關(guān)系。將黨參炔苷保留率、與乙醇充分混合的濃縮液質(zhì)量百分比以及單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量作為醇沉工藝評(píng)價(jià)指標(biāo),開(kāi)展膜分散醇沉實(shí)驗(yàn)研究,篩選濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)并建立其與上述評(píng)價(jià)指標(biāo)的定量模型?;谒P?,采用預(yù)測(cè)誤差傳播的方法建立黨參濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。濃縮液密度與固含量之間具有良好的線性關(guān)系。相比密度,濃縮液黏度能更靈敏地體現(xiàn)出不同批次濃縮液的性質(zhì)差異。篩選出濃縮液的黏度和固含量為濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)。建立的二階多項(xiàng)式模型2大于0.97。建立了不等式組作為濃縮液質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果表明,模型預(yù)測(cè)性能較好,建立的黨參濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較為可靠。建議增加黏度作為濃縮液品質(zhì)的控制指標(biāo),并建立綜合考慮密度和黏度的濃縮液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)放行控制提高醇沉工藝效果及批次間一致性。

    中藥醇沉;濃縮液質(zhì)量控制;黨參;黏度;黨參炔苷;葡萄糖;果糖;蔗糖;總黃酮

    《中國(guó)藥典》2020年版一部通過(guò)規(guī)定藥材和飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定“制法”項(xiàng),規(guī)定部分中間體質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),以及規(guī)定制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[1],體現(xiàn)了對(duì)中成藥質(zhì)量的全流程控制。該質(zhì)量控制思路與國(guó)際公認(rèn)的藥品“質(zhì)量源于設(shè)計(jì)”理念不謀而合[2],即通過(guò)加強(qiáng)原料、中間體和制藥過(guò)程控制,提高藥品質(zhì)量的控制水平。但是,《中國(guó)藥典》2020年版一部中對(duì)中間體標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定明顯少于對(duì)藥材和制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。目前,學(xué)術(shù)界和產(chǎn)業(yè)界對(duì)制藥中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究較少。

    濃縮液是中藥生產(chǎn)中常見(jiàn)的中間體,后續(xù)經(jīng)常是干燥、沉淀或者與其他物料混合等工藝[3-5]。工業(yè)生產(chǎn)中大多以密度作為指標(biāo)控制濃縮終點(diǎn)。但工業(yè)生產(chǎn)中也觀察到密度相同的濃縮液,后續(xù)處理所得產(chǎn)液性質(zhì)相差較大的情況。這提示僅以密度作為濃縮液質(zhì)量指標(biāo)可能是不夠的。

    醇沉是中藥濃縮液的下游工藝之一,能部分除去糖、蛋白質(zhì)和鹽類等強(qiáng)極性成分[6-8],具有成本低、易操作、安全性高、除雜能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)[9-10]。為減少醇沉中活性成分包裹損失,工業(yè)中常用“慢加快攪”或長(zhǎng)時(shí)間靜置的方法[11]。課題組前期提出以“與乙醇充分混合的濃縮液質(zhì)量比例”(well-mixing ratio,WMR)作為定量描述包裹現(xiàn)象的指標(biāo)[12];WMR值越接近于100%,說(shuō)明包裹現(xiàn)象越少。本課題組采用微混合器加醇,能有效減少包裹損失現(xiàn)象[13]。張寒等[14]和閆安憶等[15]采用了偏最小二乘和逐步回歸等方法建立濃縮液和醇沉工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的定量關(guān)系,進(jìn)而發(fā)現(xiàn)濃縮液中其他理化性質(zhì)也可能是影響醇沉工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的關(guān)鍵物料屬性。如果增加其他指標(biāo)控制濃縮液品質(zhì),會(huì)要求新指標(biāo)能夠快速低成本地測(cè)量,以確保工業(yè)應(yīng)用的可行性。黨參醇沉是參芪扶正注射液的重要純化工藝[16]。本實(shí)驗(yàn)以黨參醇沉前的濃縮液為研究對(duì)象,測(cè)定多批次濃縮液的理化性質(zhì),研究密度與其他性質(zhì)的關(guān)系。進(jìn)一步根據(jù)濃縮液理化性質(zhì)和醇沉工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的關(guān)系,確定濃縮液的關(guān)鍵性質(zhì)。最后采用預(yù)測(cè)誤差傳播的方法建立黨參濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并根據(jù)所得標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行濃縮液質(zhì)量控制。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器

    Rotavapor R-200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,瑞士Buchi公司;2 PB-20005II型平流泵,北京興達(dá)科技發(fā)展有限公司;CT3001F型齒輪泵,保定瑞福流體科技有限公司;03-1型磁力攪拌機(jī),杭州儀表電機(jī)有限公司;DHG-9146A型烘箱,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;DDBJ-350型便攜式電導(dǎo)率儀,杭州啟威儀器有限公司;Cary60型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),美國(guó)Agilent公司;DMA5000M型密度測(cè)量?jī)x、AMVn型黏度測(cè)量?jī)x,奧地利Anton Paar GmbH公司;Milli-Q型超純水系統(tǒng),美國(guó)Millipore公司;Agilent 1100型高效液相色譜儀,配備G1314C型VWD檢測(cè)器、Agilent 1260型高效液相色譜儀,配備G4260B型ELSD檢測(cè)器,美國(guó)Agilent公司。

    1.2 試劑與材料

    對(duì)照品-果糖(批號(hào)200519,質(zhì)量分?jǐn)?shù)>99.5%)、檸檬黃(批號(hào)201206,質(zhì)量分?jǐn)?shù)>95.0%)均購(gòu)自上海阿拉丁試劑有限公司;對(duì)照品-葡萄糖(批號(hào)200917)購(gòu)自上海生工生物工程有限公司,質(zhì)量分?jǐn)?shù)>99.8%;對(duì)照品蔗糖(批號(hào)200620)購(gòu)自上海Sigma-Aldrich公司,質(zhì)量分?jǐn)?shù)>99%;對(duì)照品黨參炔苷(批號(hào)200311)、蘆丁(批號(hào)190623)購(gòu)自上海融禾醫(yī)藥科技有限公司,質(zhì)量分?jǐn)?shù)均>98%。三乙胺購(gòu)自上海阿拉丁試劑有限公司;乙腈購(gòu)自德國(guó)默克股份有限公司;95%乙醇購(gòu)自浙江常青化工有限公司;超純水由Milli-Q型超純水系統(tǒng)制備。黨參藥材來(lái)源和批號(hào)見(jiàn)表1。

    2 方法

    2.1 膜分散微混合器

    課題組前期設(shè)計(jì)制作了膜分散微混合器[13],能夠?qū)崿F(xiàn)乙醇和濃縮液的連續(xù)高效混合。膜分散微混合器材質(zhì)為聚四氟乙烯,其結(jié)構(gòu)和具體尺寸見(jiàn)之前的工作[13],采用了平均孔徑為18 μm的不銹鋼膜。

    2.2 黨參濃縮液的制備

    黨參藥材和水分別按1∶8、1∶6的比例加熱回流提取2次,每次提取0.5 h,濾過(guò)后合并濾液,通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮制得密度約為1.2 g/mL的濃縮液。所得濃縮液的編號(hào)見(jiàn)表1。

    表1 黨參藥材來(lái)源、批號(hào)及所得濃縮液的編號(hào)

    Table 1 Source and batch number of CodonopsisRadix and number of concentrates

    批號(hào)藥材來(lái)源濃縮液編號(hào)批號(hào)藥材來(lái)源濃縮液編號(hào) 191022亳州元豐堂農(nóng)副產(chǎn)品經(jīng)銷有限公司N6190816甘肅岷縣易盛德中藥材有限責(zé)任公司N3 191025亳州元豐堂農(nóng)副產(chǎn)品經(jīng)銷有限公司N14190825甘肅岷縣易盛德中藥材有限責(zé)任公司N7 190929亳州元豐堂農(nóng)副產(chǎn)品經(jīng)銷有限公司N9190908甘肅岷縣易盛德中藥材有限責(zé)任公司N10 191006亳州元豐堂農(nóng)副產(chǎn)品經(jīng)銷有限公司N2190827甘肅岷縣易盛德中藥材有限責(zé)任公司N12 200423亳州永剛飲片廠有限公司N1191018山西潞州參源堂黨參銷售店N15 200331亳州永剛飲片廠有限公司N5191025山西潞州參源堂黨參銷售店N4 191221亳州永剛飲片廠有限公司N8191007山西潞州參源堂黨參銷售店N13 190805甘肅岷縣易盛德中藥材有限責(zé)任公司N11

    2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

    選擇N1、N2、N8、N9、N12、N14共6批黨參濃縮液,只改變濃縮液固含量,進(jìn)行膜分散微混合器醇沉實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)裝置圖如圖1所示。

    使用平流泵、齒輪泵分別將乙醇溶液及黨參濃縮液泵入微混合器中。收集出口混合物于錐形瓶中并置于攪拌機(jī)上攪拌5 min后濾過(guò),收集上清液。實(shí)驗(yàn)后,依次用0.05% Na2CO3溶液和乙醇洗滌該裝置。其中,各批次濃縮液固含量分別為50%、55%、60%。

    固定工藝條件如下:醇料比為1.5∶1.0,濃縮液體積流量為60 mL/min,乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%,攪拌時(shí)間為5 min。具體實(shí)驗(yàn)條件如表2所示。

    圖1 實(shí)驗(yàn)裝置圖

    2.4 黨參濃縮液中指標(biāo)成分及相關(guān)物理參數(shù)的定量測(cè)定

    2.4.1 黨參炔苷含量測(cè)定

    (1)對(duì)照品溶液的制備:精密稱取黨參炔苷對(duì)照品適量,加20%乙腈溶解并定容至量瓶中,制成0.465 mg/mL黨參炔苷對(duì)照品儲(chǔ)備液。

    表2 不同性質(zhì)濃縮液醇沉實(shí)驗(yàn)條件及結(jié)果

    Table 2 Experimental conditions and results of ethanol precipitation of concentrates with different properties

    編號(hào)實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)結(jié)果編號(hào)實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)結(jié)果 濃縮液濃縮液固含量/%WMR/%黨參炔苷保留率/%單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量/(g?g?1)濃縮液濃縮液固含量/%WMR/%黨參炔苷保留率/%單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量/(g?g?1) 1N95099.9895.580.24211N125599.9593.570.461 2N1250100.0094.900.33712N25599.1593.080.499 3N25099.9694.910.36913N145598.4590.570.519 4N145099.9094.510.37414N15598.2890.390.562 5N145099.7492.920.40815N85598.1689.100.614 6N1450100.0093.570.40616N96085.6784.090.366 7N145099.0992.810.40117N126084.0278.240.605 8N15099.9994.030.46918N26081.8176.040.666 9N85099.9194.150.47419N16080.0773.450.716 10N95599.9793.940.335

    (2)供試品溶液的制備:精密量取適量黨參醇沉上清液,加20%乙腈溶解并定容至2mL,搖勻,靜置。經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)后,取續(xù)濾液作為供試品溶液。

    (3)色譜條件:黨參炔苷含量測(cè)定采用HPLC法[15]。色譜柱為Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫30 ℃;進(jìn)樣量10 μL;檢測(cè)波長(zhǎng)269 nm;流動(dòng)相為乙腈-水(20∶80),等度洗脫;體積流量為1.0 mL/min。典型色譜圖如圖2所示。

    圖2 黨參炔苷對(duì)照品(a)、黨參醇沉上清液(b)的典型HPLC-UV圖

    (4)線性關(guān)系考察:精密量取黨參炔苷對(duì)照品儲(chǔ)備液,分別加入20%乙腈稀釋至93.00、46.50、27.90、18.60、9.40 μg/mL的系列對(duì)照溶液,以上系列對(duì)照溶液進(jìn)樣檢測(cè)后,以峰面積為縱坐標(biāo)(),對(duì)照溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)()制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,測(cè)得黨參炔苷的線性回歸方程為=17.81-9.102,=0.999 7,線性范圍為9.40~93.00 μg/mL。在此范圍內(nèi),黨參炔苷質(zhì)量濃度與峰面積線性關(guān)系良好。

    (5)精密度試驗(yàn):取由黨參醇沉上清液[17]制備得到的供試品溶液,按“2.4.1(3)”項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次,以黨參炔苷峰面積計(jì)算精密度RSD為1.3%,表明儀器的精密度良好。

    (6)重復(fù)性試驗(yàn):用黨參醇沉上清液[17]分別制備6份供試品溶液,按“2.4.1(3)”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè),以黨參炔苷質(zhì)量濃度計(jì)算重復(fù)性RSD為1.7%,表明該方法具有較好的重復(fù)性。

    (7)穩(wěn)定性試驗(yàn):取黨參醇沉上清液[17]制備得到的供試品溶液,分別于0、3、6、9、12、15 h按“2.4.1(3)”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè),黨參炔苷峰面積的RSD為0.7%,表明供試品溶液在15 h內(nèi)穩(wěn)定。

    (8)加樣回收率試驗(yàn):分別取已測(cè)定黨參炔苷含量的由黨參醇沉上清液[17]制備得到的供試品9份,分為3組,每組3份。分別按照樣品中質(zhì)量與加入量之比為1.0∶0.8、1.0∶1.0、1.0∶1.2,精密加入黨參炔苷對(duì)照品適量,加20%乙腈定容至2 mL,搖勻,靜置,經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液按“2.4.1(3)”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè),結(jié)果黨參炔苷的平均加樣回收率為103.8%,RSD為1.56%,說(shuō)明建立的分析方法準(zhǔn)確,可用于黨參炔苷含量的測(cè)定。

    (9)樣品測(cè)定:將樣品按“2.4.1(2)”項(xiàng)中方法配制成供試品溶液,再按“2.4.1(3)”項(xiàng)下色譜條件對(duì)樣品進(jìn)樣檢測(cè),測(cè)定其中的黨參炔苷含量。

    2.4.2 葡萄糖、果糖和蔗糖含量測(cè)定

    采用HPLC-ELSD法測(cè)定樣品中葡萄糖、果糖和蔗糖的含量[18]。

    (1)對(duì)照品溶液的制備:分別精密稱取果糖、葡萄糖、蔗糖對(duì)照品適量,置25 mL量瓶中,用85%乙腈超聲溶解并定容,制成對(duì)照品貯備液。將貯備液定量稀釋,制成系列不同質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液。

    (2)供試品溶液的制備:分別取適量黨參濃縮液以適量85%乙腈為溶劑進(jìn)行稀釋定容。溶液經(jīng)離心后,用0.22 μm濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液作為供試品溶液。

    (3)色譜條件:色譜柱為XBridge BEH Amide柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫為34 ℃;體積流量為0.9 mL/min,進(jìn)樣量為5 μL。流動(dòng)相A為0.3%三乙胺水溶液,流動(dòng)相B是0.3%三乙胺-乙腈溶液,梯度洗脫:0~37 min,85%~76% B;37~38 min,76%~60% B;38~48 min,60%~100% B;后運(yùn)行時(shí)間為10 min。ELSD操作參數(shù)如下:霧化器溫度為65 ℃,蒸發(fā)器溫度為60 ℃,氣體體積流量為1.8 L/min。典型色譜圖如圖3所示。

    2.4.3 總黃酮含量測(cè)定 采用紫外分光光度法測(cè)定濃縮液中的總黃酮含量[19]。定量移取濃縮液于10mL容量瓶中,依次加入5.0% NaNO2溶液、10% Al(NO3)3溶液、1.0 mol/mL NaOH溶液[17]。用50%乙醇定容至10 mL,搖勻,于510 nm處測(cè)定其吸光度()值[17]。以蘆丁作為對(duì)照品,定量稀釋后測(cè)定值,以蘆丁含量計(jì)算得樣品中總黃酮含量。

    圖3 混合對(duì)照品(a)、黨參濃縮液(b) 的典型HPLC-ELSD圖

    2.4.4 密度和黏度測(cè)定 濃縮液密度通過(guò)密度測(cè)量?jī)x測(cè)定,不同固含量、不同溫度下的濃縮液密度用表示。濃縮液黏度通過(guò)黏度測(cè)量?jī)x測(cè)定,使用落球黏度計(jì),根據(jù)落球時(shí)間計(jì)算樣品黏度。不同固含量、不同溫度下的濃縮液黏度用表示。

    2.4.5 其他指標(biāo)的測(cè)定

    (1)總固體含量測(cè)定:采用重量法[13]。準(zhǔn)確稱取適量樣品,置于恒定質(zhì)量的稱量瓶中,置于烘箱中,在105 ℃下干燥至恒定質(zhì)量后稱定。重復(fù)3次。

    (2)電導(dǎo)率:將濃縮液用水稀釋至總固含量為2%,在25 ℃下通過(guò)便攜式電導(dǎo)率儀測(cè)量其電導(dǎo)率。

    (3)色素:以檸檬黃作為對(duì)照品,采用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定濃縮液中色素的含量[20]。波長(zhǎng)設(shè)置為430 nm。濃縮液稀釋后測(cè)定值。以檸檬黃含量計(jì)算樣品中色素含量。

    2.5 數(shù)據(jù)處理

    用課題組前期提出的WMR法表征醇沉過(guò)程中混合情況的好壞[12]。WMR值和黨參炔苷保留率的計(jì)算方法分別見(jiàn)公式(1)、(2)。

    WMR=(1/0+22/0)/(0+0/2-1) (1)

    黨參炔苷保留率=22/00(2)

    0為總固體質(zhì)量濃度,0為黨參炔苷的質(zhì)量濃度,0為醇沉中濃縮液用量,1為乙醇溶液用量,2為所得上清液的總質(zhì)量,2為上清液中總固體質(zhì)量濃度,2為上清液中黨參炔苷質(zhì)量濃度,濃縮液與乙醇混合越充分,WMR值越接近1

    選擇黨參炔苷保留率、WMR以及單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量作為醇沉工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)。采用多元線性回歸法,用公式(3)建立工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)和濃縮液性質(zhì)的定量模型,篩選出濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)。

    (3)

    為平方根反正弦變化后的黨參炔苷保留率、平方根反正弦變化后的WMR值、單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量,0為常數(shù)項(xiàng),a為各項(xiàng)的偏回歸系數(shù)X為濃縮液各性質(zhì)

    采用逐步回歸法對(duì)模型進(jìn)行簡(jiǎn)化,添加及刪除模型中各項(xiàng)的顯著性水平設(shè)為0.1,模型中剩余的項(xiàng)認(rèn)為是濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)。數(shù)據(jù)分析由V 11.0.0 Design Expert(美國(guó)Stat-Ease公司)軟件完成。

    用2階多項(xiàng)式模型擬合工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)與關(guān)鍵濃縮液性質(zhì)的定量模型,如公式(4)所示。通過(guò)向后逐步回歸法簡(jiǎn)化方程,值設(shè)置為0.10。

    (4)

    3 結(jié)果

    3.1 不同批次濃縮液的理化性質(zhì)

    不同來(lái)源、不同批號(hào)的黨參藥材制備所得15批黨參濃縮液的理化性質(zhì)見(jiàn)表3。其中包括電導(dǎo)率(1,固含量45%)、黨參炔苷含量(2)、果糖含量(3)、葡萄糖含量(4)、蔗糖含量(5)、色素含量(6)、總黃酮含量(7)、密度(固含量45%,25 ℃,,8)、黏度(固含量45%,25 ℃,,9)。各批濃縮液中所測(cè)得的黨參炔苷、葡萄糖、果糖、蔗糖、色素和總黃酮含量的總和為濃縮液總固體的25.64%~73.00%,提示不同批次黨參濃縮液化學(xué)組成相差較大。在相同溫度和固含量下,15批濃縮液密度的RSD為1.078%,是所有指標(biāo)中變化最小的,提示密度指標(biāo)不適合用于體現(xiàn)不同批次藥材所得濃縮液的差異。黨參炔苷含量、蔗糖含量、色素含量和黏度的RSD均超過(guò)了40%。

    3.2 密度與濃縮液其他性質(zhì)之間的關(guān)系

    3.2.1 密度與濃縮液其他性質(zhì)的相關(guān)性 計(jì)算了表3中濃縮液密度與濃縮液其他性質(zhì)的Pearson相關(guān)系數(shù),結(jié)果如表4所示。在檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05的情況下,認(rèn)為濃縮液密度(8)與電導(dǎo)率(1)、總黃酮含量(7)均有正相關(guān)關(guān)系,與黨參炔苷含量(2)存在負(fù)相關(guān)關(guān)系。因?yàn)橄嚓P(guān)系數(shù)檢驗(yàn)值大于0.05,所以認(rèn)為濃縮液密度(8)與果糖含量、葡萄糖含量、蔗糖含量、色素含量、黏度之間的線性相關(guān)關(guān)系不顯著。

    3.2.2 密度與濃縮液溫度的關(guān)系 測(cè)定了15批濃縮液密度與溫度的關(guān)系,結(jié)果如圖4所示。濃縮液的密度與溫度是線性關(guān)系,且隨溫度的上升而下降。用線性公式=0+1擬合,結(jié)果如表5所示,各方程2均大于0.99,擬合效果較好。

    表3 濃縮液理化性質(zhì)

    Table 3 Physicochemical properties of concentrates

    濃縮液Z1/(mS?cm?1)Z2/(μg?g?1)Z3/(mg?g?1)Z4/(mg?g?1)Z5/(mg?g?1)Z6/(mg?g?1)Z7/(mg?g?1)Z8/(g?mL?1)Z9/(mPa?s) N120.08341.8306.979.5056.274.1383.7091.216101.88 N222.20453.0343.089.4331.184.0115.1071.20359.41 N319.91313.8324.896.8649.391.6353.6321.20546.43 N423.00405.5284.070.12117.621.3704.2041.21341.82 N521.10431.5174.156.6419.491.9623.8031.210101.45 N621.60434.9308.375.01103.801.5864.2961.21450.74 N718.61684.0379.661.14147.601.5845.2761.20978.30 N818.09351.3373.490.8175.402.4032.7941.187111.66 N924.0018.5585.9136.720.001.5265.8751.22619.36 N1020.10542.2409.466.75138.511.4803.6721.21356.55 N1119.44391.3336.7102.2149.213.8764.4441.18759.80 N1216.58589.0438.861.96154.140.8292.8591.19031.06 N1321.40144.2504.1106.9456.362.9166.0291.23238.41 N1418.98294.8450.796.1468.652.5884.2381.21287.60 N1520.40137.2444.592.9760.172.3804.1121.21741.32 平均值20.37368.9377.685.5475.182.2864.2701.20961.72 標(biāo)準(zhǔn)差1.93175.699.921.4147.141.0400.9600.01328.17 RSD/%9.5047.5926.4525.0262.7045.5122.491.07845.64

    表4 密度(Z8)與濃縮液的部分其他性質(zhì)的Pearson相關(guān)系數(shù)及其檢驗(yàn)的P值

    Table 4 Pearson correlation coefficient and P value between density (Z8) and some other properties of concentrates

    理化性質(zhì)Pearson相關(guān)系數(shù)P值理化性質(zhì)Pearson相關(guān)系數(shù)P值 Z10.6490.009Z5?0.2370.395 Z2?0.5220.046Z6?0.0640.821 Z30.3380.218Z70.6420.010 Z40.2790.315Z9?0.3060.267

    3.2.3 密度與濃縮液固含量的關(guān)系 選擇理化性質(zhì)相差較大的2批濃縮液N1和N12,改變固含量測(cè)定其密度,結(jié)果見(jiàn)圖5??梢钥吹?,濃縮液的密度隨固含量的提高而增大,相同固含量的不同批次濃縮液在相同溫度下的密度差別較小。嘗試用線性方程=0+1擬合濃縮液密度與固含量,得0=0.517±0.009,1=0.973±0.005,2=0.995。從結(jié)果來(lái)看,濃縮液固含量和密度之間的線性關(guān)系相當(dāng)好,提示濃縮液固含量和密度指標(biāo)在很大程度上可以相互替代。黃慧敏等[21]研究濃縮液固含量和密度之間的關(guān)系時(shí),也得到類似結(jié)論??紤]到濃縮液密度大小受實(shí)驗(yàn)室溫度影響,所以后續(xù)實(shí)驗(yàn)中以固含量代替密度。

    3.3 濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)篩選

    不同性質(zhì)濃縮液的醇沉實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。由于WMR值、黨參炔苷保留率均為百分率數(shù)據(jù),所以建模前將WMR值、黨參炔苷保留率進(jìn)行平方根反正弦變換。采用公式(3)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行處理,建立濃縮液性質(zhì)與平方根反正弦變化后的WMR值(1)、平方根反正弦變化后的黨參炔苷保留率(2)和單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量(3)的定量模型,進(jìn)而識(shí)別出濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)。

    公式(3)是一個(gè)多元線性回歸模型,為了避免自變量之間的多重共線性現(xiàn)象,與密度具有較高相關(guān)性的電導(dǎo)率、總黃酮和黨參炔苷含量不參與建模。逐步回歸后所得偏回歸系數(shù)及方差分析結(jié)果如表6所示。各模型的顯著水平<0.000 1,說(shuō)明模型顯著。模型2均大于0.75,說(shuō)明可以解釋大部分變異。根據(jù)模型結(jié)果可知,濃縮液的關(guān)鍵性質(zhì)為固含量和黏度。

    圖4 濃縮液密度隨溫度變化

    表5 密度隨溫度變化的擬合結(jié)果

    Table 5 Fitting results of density and temperature

    濃縮液c0/(×10?4 g·mL?1·℃?1)c1/(g·mL?1)R2濃縮液c0/(×10?4 g·mL?1·℃?1)c1/(g·mL?1)R2 N1?5.347±0.1361.229±0.0010.998 1N9?5.855±0.1211.241±0.0010.998 7 N2?5.225±0.1401.216±0.0010.997 8N10?5.475±0.1341.226±0.0010.997 6 N3?5.346±0.1371.218±0.0010.998 0N11?5.896±0.2271.201±0.0010.995 6 N4?5.442±0.1301.227±0.0010.998 2N12?5.323±0.1451.203±0.0010.997 8 N5?5.369±0.1251.223±0.0010.997 8N13?5.661±0.2541.246±0.0010.998 5 N6?5.422±0.1381.227±0.0010.997 6N14?5.475±0.1331.226±0.0010.997 6 N7?5.386±0.1401.222±0.0010.997 9N15?5.456±0.1391.230±0.0010.997 4 N8?5.900±0.2271.202±0.0010.995 6

    圖5 濃縮液密度隨固含量變化

    密度變化能夠較準(zhǔn)確地體現(xiàn)出濃縮液中水含量變化,所以工業(yè)生產(chǎn)中以密度作為指標(biāo)來(lái)控制濃縮終點(diǎn)是很合理的??紤]到密度與固含量的高相關(guān)性,表6中自然地篩選出固含量作為關(guān)鍵性質(zhì)。但是從表6結(jié)果來(lái)看,僅以密度作為濃縮液質(zhì)量指標(biāo)是不夠的。黏度同樣是與醇沉效果相關(guān)的重要指標(biāo)??紤]到黏度也可以采用在線黏度計(jì)測(cè)定,在實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)中能夠?qū)崿F(xiàn)快速低成本的檢測(cè),所以建議工業(yè)生產(chǎn)中同時(shí)將密度和黏度作為濃縮液關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行控制。

    表6 多元線性回歸模型的偏回歸系數(shù)及方差分析

    Table 6 Partial regression coefficient and variance analysis of multiple linear regression model

    模型項(xiàng)Y1Y2Y3 偏回歸系數(shù)P值偏回歸系數(shù)P值偏回歸系數(shù)P值 常量3.372 8?2.592 2??1.073 4? 固含量???0.000 70.032 00.002 5<0.000 1 黏度?0.036 0<0.000 1?0.023 8<0.000 10.025 5<0.000 1 R20.789 30.833 60.853 1 Radj20.776 90.812 80.833 6 P值<0.000 1<0.000 1<0.000 1

    3.4 濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)對(duì)膜分散黨參醇沉工藝效果的影響

    將濃縮液的黏度取自然對(duì)數(shù),WMR值、黨參炔苷保留率進(jìn)行平方根反正弦變換,采用公式(4)研究濃縮液固含量(1)、濃縮液黏度的自然對(duì)數(shù)(2)與平方根反正弦變化后的WMR值(1)、平方根反正弦變化后的黨參炔苷保留率(2)、單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量(3)的定量關(guān)系,建模結(jié)果如表7所示。模型的值均小于0.05,說(shuō)明模型顯著;模型2均大于0.90,說(shuō)明可以解釋大部分變異。各指標(biāo)的等高線圖如圖6所示。WMR值和黨參炔苷保留率隨濃縮液固含量、濃縮液黏度的增加而降低,說(shuō)明較大的濃縮液黏度及固含量都不利于濃縮液和乙醇的充分混合。單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀的質(zhì)量隨濃縮液固含量、濃縮液黏度的增加而增加,說(shuō)明濃縮液黏度越大,其所含的不溶于乙醇的可沉淀物質(zhì)越多。

    3.5 濃縮液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立

    濃縮液是中藥生產(chǎn)中重要的中間體,其質(zhì)量影響后續(xù)的醇沉等精制過(guò)程,因此,建立濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)非常重要。本研究采用WMR值、黨參炔苷保留率以及單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量為指標(biāo)建立黨參濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。以固含量和濃縮液黏度對(duì)平方根反正弦變化后的WMR(1)、平方根反正弦變化后的黨參炔苷保留率(2)、單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量(3)建模,所建立的模型如公式(5)所示。

    表7 二階多項(xiàng)式回歸模型的偏回歸系數(shù)及方差分析

    Table 7 Partial regression coefficients and variance analysis of second-order polynomial regression models

    模型項(xiàng)Y1Y2Y3 偏回歸系數(shù)P值偏回歸系數(shù)P值偏回歸系數(shù)P值 常量?13.240??8.330?0.209? X158.345<0.000 136.389<0.000 1?0.499<0.000 1 X2?0.0440.000 80.215<0.000 1?0.286<0.000 1 X1X2???0.4790.005 80.7750.054 3 X12?56.826<0.000 1?33.744<0.000 1?? R20.975 40.982 50.916 6 Radj20.970 40.977 50.900 0 P值<0.000 1<0.000 1<0.000 1

    圖6 WMR值(Y1)、黨參炔苷保留率(Y2)和單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量(Y3)的等高線圖

    1=?13.240+58.3451-0.0442-56.82612

    2=?8.330+36.3891+0.2152-0.47912-33.74412

    3=0.209-0.4991-0.2862+0.77512(5)

    采用預(yù)測(cè)誤差傳播的方法對(duì)濃縮液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)算[22]。假設(shè)殘差服從均值為零的正態(tài)分布,正態(tài)分布的標(biāo)準(zhǔn)差與殘差相同,即分別為0.024 9、0.013 1、0.039 4。若要求WMR值大于95%的概率為90%,黨參炔苷保留率大于90%的概率為90%,單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量大于0.300 g/g的概率為90%,則根據(jù)公式(5)建立不等式組(6)。

    1=?13.240+58.3451-0.0442-56.82612-0.1×SDresidual1≥1.345

    2=?8.330+36.3891+0.2152-0.47912-33.74412-0.1×SDresidual2≥1.249

    3=0.209-0.4991-0.2862+0.77512-0.1×SDresidual3≥0.300 (6)

    其中0.1為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布的臨界值,即1.282。將不等式組(6)化簡(jiǎn)得不等式組(7)。

    58.3451-0.0442-56.82612-14.616 9≥0

    36.3891+0.2152-0.47912-33.74412-9.595 8≥0

    ?0.4991-0.2862+0.77512-0.141 5≥0 (7)

    符合不等式組(7)的為合格濃縮液,應(yīng)予以放行直接投入醇沉工藝,不符合不等式(7)的為不合格濃縮液,可在合規(guī)的情況下稀釋后再投入醇沉工藝生產(chǎn)。使用MATLAB(R2016a,美國(guó)The Math Works公司)依據(jù)不等式(7)做圖,濃縮液性質(zhì)的具體可行范圍如圖7所示。

    3.6 濃縮液質(zhì)量控制的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

    選擇編號(hào)為N5、N11、N15的濃縮液進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),將N5濃縮液的固含量稀釋至55%,N15濃縮液固含量稀釋至53%,N11的濃縮液分別稀釋至52%和56%。進(jìn)行4組驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(V1~V4)。將濃縮液性質(zhì)代入不等式組(7),固含量為53%的N15、固含量為52%的N11滿足不等式組(7),是合格濃縮液。固含量為55%的N5、固含量為56%的N11不滿足不等式組(7),為不合格濃縮液。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)條件及結(jié)果分別見(jiàn)表8及圖7所示。從驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,預(yù)測(cè)值和實(shí)驗(yàn)值接近,說(shuō)明所建模型有較好的預(yù)測(cè)性能。V1和V3實(shí)驗(yàn)所得的黨參炔苷保留率低于90%,未達(dá)到預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)。V2和V4的實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果符合預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)。說(shuō)明采用不等式組(7)能夠較好地控制濃縮液品質(zhì)。

    圖7 濃縮液性質(zhì)的可行范圍及驗(yàn)證點(diǎn)

    3.7 濃縮液黏度和濃縮液部分其他性質(zhì)之間的相關(guān)性

    表9列出了濃縮液黏度與濃縮液部分其他性質(zhì)之間Pearson相關(guān)系數(shù)及值。發(fā)現(xiàn)黏度(9)與其他測(cè)得的性質(zhì)相關(guān)性不強(qiáng)(>0.1)。表3中不同批次濃縮液黏度相差較大(RSD=45.64%),說(shuō)明影響濃縮液黏度的可能是某些本實(shí)驗(yàn)中未檢測(cè)的物質(zhì),比如一些相對(duì)分子質(zhì)量較大的成分。這也意味著濃縮液黏度提供了一些其他檢測(cè)指標(biāo)未能反映出來(lái)的信息,檢測(cè)黏度會(huì)有利于全面表征出不同批次濃縮液中固體成分的差異。

    表8 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)點(diǎn)條件及工藝指標(biāo)考察結(jié)果

    Table 8 Verification experimental points conditions and process index investigation results

    試驗(yàn)點(diǎn)是否滿足不等式濃縮液濃縮液固含量/%固含量45%、25 ℃下黏度/(mPa?s)黨參炔苷保留率/%WMR/%單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量/(g·g?1) 實(shí)測(cè)值預(yù)測(cè)值實(shí)測(cè)值預(yù)測(cè)值實(shí)測(cè)值預(yù)測(cè)值 V1否N555101.4587.5189.1998.1197.880.5700.582 V2是N115259.8093.7793.84100.2199.760.4300.428 V3否N115659.8087.4888.9097.4997.130.5310.535 V4是N155341.3293.8293.65100.3599.790.4190.409

    表9 濃縮液黏度(Z9)與濃縮液部分其他性質(zhì)之間Pearson相關(guān)系數(shù)及P值

    Table 9 Pearson correlation coefficient and P value between viscosity and some other properties of concentrates

    理化性質(zhì)Pearson相關(guān)系數(shù)P值理化性質(zhì)Pearson相關(guān)系數(shù)P值 Z1?0.3720.172Z5?0.0730.769 Z20.2910.293Z60.3820.160 Z3?0.5280.043Z7?0.3960.144 Z4?0.3610.186Z8?0.3060.267

    3.8 濃縮液固含量與黏度的關(guān)系

    選擇2批濃縮液N1和N12,改變固含量測(cè)定其黏度,并嘗試用指數(shù)型關(guān)系式=0×e1x(0、1為常數(shù)項(xiàng))進(jìn)行擬合,擬合結(jié)果如圖8和表10所示。濃縮液的黏度隨固含量的增加而增大。在固含量較大時(shí),黏度隨固含量的增加上升明顯。與濃縮液N12相比,濃縮液N1的黏度隨固含量的增加上升較快。

    圖8 濃縮液黏度隨固含量變化

    表10 黏度隨固含量變化的擬合結(jié)果

    Table 10 Fitting results of viscosity and solid content

    濃縮液批號(hào)f0/(mPa?s)f1R2 N10.014 0±0.009 018.319±1.0070.994 5 N120.001 7±0.001 019.594±1.0720.994 7

    3.9 濃縮液黏度與溫度的關(guān)系

    測(cè)定了15批濃縮液黏度與溫度的關(guān)系,結(jié)果如圖9所示。濃縮液黏度隨溫度的上升而下降。用指數(shù)公式=0×e1x(0、1為常數(shù)項(xiàng))擬合,結(jié)果如表11所示,各方程2均大于0.99,擬合效果較好。根據(jù)圖9,當(dāng)溫度較低時(shí),不同批次的濃縮液黏度相差較大;隨著溫度的升高,不同批次濃縮液黏度的差距變小。

    4 討論

    本研究首先制備了不同批次的黨參濃縮液,并測(cè)定了濃縮液的理化性質(zhì)。發(fā)現(xiàn)相同溫度和固含量下,密度的RSD是所有指標(biāo)中變化最小的,提示密度不適合用于體現(xiàn)不同批次濃縮液的差異。研究了濃縮液各性質(zhì)與密度的關(guān)系,用線性方程擬合獲得了濃縮液密度與溫度、固含量的定量關(guān)系。發(fā)現(xiàn)濃縮液固含量和密度間的線性關(guān)系很好。

    圖9 濃縮液黏度隨溫度變化

    表11 黏度隨溫度變化的擬合結(jié)果

    Table 11 Fitting results of viscosity and temperature

    濃縮液g0/(mPa?s)g1/℃?1R2濃縮液g0/(mPa?s)g1/℃?1R2 N1290.6±14.0?0.040 4±0.002 00.994 8N954.3±2.2?0.039 8±0.001 70.996 2 N2179.1±10.8?0.042 0±0.002 50.992 3N10166.5±7.8?0.041 6±0.001 90.995 3 N3131.0±7.2?0.039 5±0.002 20.993 0N11171.7±8.8?0.040 4±0.002 10.994 0 N4119.7±5.6?0.040 4±0.001 90.995 1N1278.9±3.1?0.036 0±0.001 60.995 8 N5295.0±13.4?0.040 9±0.001 80.995 6N13106.4±4.1?0.040 2±0.001 60.996 7 N6164.9±12.3?0.044 2±0.003 20.989 2N14197.3±8.3?0.034 2±0.001 60.994 9 N7226.4±11.4?0.040 8±0.002 10.994 4N15122.1±2.8?0.043 7±0.001 00.999 0 N8350.7±21.8?0.043 4±0.002 60.992 2

    改變濃縮液的固含量進(jìn)行膜分散醇沉實(shí)驗(yàn),將黨參炔苷保留率、WMR值、單位質(zhì)量濃縮液產(chǎn)生沉淀質(zhì)量作為工藝評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選確定濃縮液固含量及黏度為濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)。隨后建立了濃縮液固含量及黏度與工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的定量模型,模型2均大于0.90。基于所建模型,采用預(yù)測(cè)誤差傳播的方法建立了濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),符合不等式組的為合格濃縮液,可予以放行投入醇沉工藝;不符合不等式組的為不合格濃縮液。濃縮液質(zhì)量控制的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,模型有較好預(yù)測(cè)性能,所制定的濃縮液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較為可靠。濃縮液黏度隨著固含量的增加而增加,隨溫度的提高而降低,與本研究所檢測(cè)的其他濃縮液理化性質(zhì)相關(guān)性較小。目前工業(yè)生產(chǎn)中大多僅控制醇沉前濃縮液密度或體積,本研究建議增加黏度作為濃縮液品質(zhì)的控制指標(biāo),從而能在藥材批次變化時(shí)更好地表征出濃縮液質(zhì)量差異。

    本研究的不足之處包括:第一,在測(cè)定黨參濃縮液時(shí)并未檢測(cè)所有可能的指標(biāo),包括多糖含量和蛋白質(zhì)含量等。如果獲得更多指標(biāo)進(jìn)行分析,有可能使篩選得到的濃縮液關(guān)鍵性質(zhì)改變。第二,中藥種類多且成分復(fù)雜,不同中藥水煎濃縮液的性質(zhì)指標(biāo)可能差異較大,黏度能否用于完善其他中藥濃縮液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)仍有待進(jìn)一步考察。

    利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

    [1] 中國(guó)藥典 [S]. 一部. 2020: 3-1902.

    [2] Pramod K, Tahir M A, Charoo N A,. Pharmaceutical product development: A quality by design approach [J]., 2016, 6(3): 129-138.

    [3] Sun L Q, Wang S Y, Li Y J,. Impact of parameter fluctuations on the performance of ethanol precipitation in production of Re Du Ning Injections, based on HPLC fingerprints and principal component analysis [J]., 2016, 14(1): 73-80.

    [4] 念波, 石興云, 劉靜, 等. 應(yīng)用響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化黃精速溶茶加工工藝 [J]. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué), 2019, 34(2): 297-302.

    [5] 李星, 王雪慧, 蔣鵬娜, 等. 平喘顆粒提取工藝的研究[J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2017, 32(7): 3150-3153.

    [6] 蔣美林, 張學(xué)瑜, 邵峰, 等. 醇料比對(duì)雙黃連制劑醇沉效果及沉淀物形態(tài)影響 [J]. 中草藥, 2020, 51(19): 4954-4959.

    [7] Ku Y, Jansen O, Oles C J,. Precipitation of inulins and oligoglucoses by ethanol and other solvents [J]., 2003, 81(1): 125-132.

    [8] Boulet M, Britten M, Lamarche F. Dispersion of food proteins in water-alcohol mixed dispersants [J]., 2001, 74(1): 69-74.

    [9] Tai Y N, Shen J C, Luo Y,. Research progress on the ethanol precipitation process of traditional Chinese medicine [J]., 2020, 15: 84.

    [10] 丁鴻, 徐芳芳, 杜慧, 等. 基于決策樹(shù)算法的熱毒寧注射液金銀花青蒿醇沉過(guò)程質(zhì)量控制研究 [J]. 中草藥, 2021, 52(19): 5836-5844.

    [11] 劉苗, 于篩成, 張虹, 等. 中藥醇沉工藝及設(shè)備淺析 [J]. 中成藥, 2007, 29(8): 1202-1204.

    [12] Tai Y N, Pan J J, Qu H B,. An index for quantitative evaluation of the mixing in ethanol precipitation of traditional Chinese medicine [J]., 2021, 8(10): 181.

    [13] Pan J J, Shao J Y, Qu H B,. Ethanol precipitation ofconcentrate with a membrane dispersion micromixer [J]., 2020, 251: 119633.

    [14] 張寒, 閆安憶, 龔行楚, 等. 丹參注射液生產(chǎn)中一次醇沉上清液濃縮工藝質(zhì)控指標(biāo)研究 [J]. 中國(guó)中藥雜志, 2011, 36(11): 1436-1440.

    [15] 閆安憶, 龔行楚, 瞿海斌. 一種中藥醇沉前濃縮液關(guān)鍵質(zhì)量控制指標(biāo)的辨析方法 [J]. 中國(guó)中藥雜志, 2012, 37(11): 1558-1563.

    [16] 羅雨. 近紅外光譜法在參芪扶正注射液醇沉工藝質(zhì)控中的應(yīng)用研究 [D]. 杭州: 浙江大學(xué), 2017.

    [17] 許之麟. 基于QbD理念的黨參水提醇沉工藝研究 [D]. 杭州: 浙江大學(xué), 2016.

    [18] Shao J Y, Cao W, Qu H B,. A novel quality by design approach for developing an HPLC method to analyze herbal extracts: A case study of sugar content analysis [J]., 2018, 13(6): e0198515.

    [19] Chen Y J, Wang J, Wan D R. Determination of total flavonoids in threecrude drugs by UV-Vis spectrophotometry [J]., 2010, 6(24): 259-263.

    [20] 許之麟, 黃文華, 龔行楚, 等. 設(shè)計(jì)空間法優(yōu)化黨參一次醇沉工藝 [J]. 中國(guó)中藥雜志, 2015, 40(22): 4411-4416.

    [21] 黃慧敏, 張愛(ài)玲, 溫伍玖, 等. 基于近紅外光譜技術(shù)的復(fù)方大黃湯濃縮液同步快速檢測(cè) [J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2020, 26(4): 126-132.

    [22] Gong X C, Guo J L, Pan J J,. The development ofquality standard considering the effects of processing [J]., 2021, 29(1): 77-84.

    Improvement and establishment of concentrate quality standard of concentrate quality control index for ethanol precipitation process of traditional Chinese medicine: A case study of

    PAN Jing-jing1, 2, REN Dan-dan1, 2, QU Hai-bin1, 2, 3, GONG Xing-chu1, 2, 3

    1. Pharmaceutical Informatics Institute, College of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China 2. State Key Laboratory of Component-Based Chinese Medicine, Innovation Center in Zhejiang University, Hangzhou 310058, China 3. Jinhua Institute of Zhejiang University, Jinhua 321016, China

    To improve the quality control index of concentrate before ethanol precipitation of traditional Chinese medicine and establish the quality standard of concentrate.Multiple batches of Dangshen () concentrates were prepared to study the relationship between density and other properties of the concentrates. The lobetyolin recovery, mass percentage of concentrate fully mixed with ethanol solution and precipitate mass generated per gram concentrate were used as indicators of ethanol precipitation process. The membrane dispersion ethanol precipitation experiments were carried out to screen the critical properties of concentrates. The quantitative models between the above evaluation indicators and critical properties of concentrates were established. Based on the established models, the quality standard ofconcentrates was established by using a prediction error propagation method and verified by experiments.There was a good linear relationship between density and solid content of concentrate. Compared with density, viscosity of concentrate could more sensitively reflect the property differences of different batches of concentrates. The viscosity and solid content were selected as the critical properties of the concentrates.2values of the established second-order polynomial models were greater than 0.97. The verification experimental results showed that the prediction performance of the models was good, and the established quality standard ofconcentrates was reliable.It was recommended to increase the viscosity as a quality control index of concentrates. By establishing the quality standard of concentrates that comprehensively consider density and viscosity, batch-to-batch consistency of ethanol precipitation process is expected to be improved.

    ethanol precipitation of traditional Chinese medicine; concentrate quality control;; viscosity; lobetyolin; glucose; fructose; sucrose; total flavone

    R283.6

    A

    0253 - 2670(2022)19 - 6012 - 11

    10.7501/j.issn.0253-2670.2022.19.008

    2022-04-14

    國(guó)家中醫(yī)藥管理局創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)與人才支持計(jì)劃項(xiàng)目(ZYYCXTD-D-202002)

    潘晶晶,碩士研究生,研究方向?yàn)橹兴幹扑幑こ?。E-mail: 21819006@zju.edu.cn

    龔行楚,副教授,研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量控制。E-mail: gongxingchu@zju.edu.cn

    #共同第一作者:任丹丹,碩士研究生,研究方向?yàn)橹兴幹扑幑こ獭-mail: 22019007@zju.edu.cn

    [責(zé)任編輯 鄭禮勝]

    猜你喜歡
    濃縮液黨參性質(zhì)
    隨機(jī)變量的分布列性質(zhì)的應(yīng)用
    Anticancer Properties of Lobetyolin, an Essential Component of Radix Codonopsis (Dangshen)
    完全平方數(shù)的性質(zhì)及其應(yīng)用
    九點(diǎn)圓的性質(zhì)和應(yīng)用
    厲害了,我的性質(zhì)
    復(fù)方黨參口服液免疫增強(qiáng)作用的配伍相關(guān)性
    中成藥(2018年4期)2018-04-26 07:12:58
    黨參中二氧化硫殘留量的測(cè)定
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:31
    HPLC法同時(shí)測(cè)定黨參固本丸中7種成分
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:06
    造紙法煙草薄片濃縮液的醇化方法
    天津造紙(2016年1期)2017-01-15 14:03:30
    蒸發(fā)-固化法處理垃圾滲濾液反滲透濃縮液的研究
    国产激情偷乱视频一区二区| 99国产综合亚洲精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 俺也久久电影网| 国产亚洲精品久久久com| 欧美中文综合在线视频| 国产色婷婷99| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲国产欧美人成| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 男女视频在线观看网站免费| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜日韩欧美国产| 欧美不卡视频在线免费观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产精品免费一区二区三区在线| 日韩欧美精品免费久久 | 亚洲午夜理论影院| 欧美日韩国产亚洲二区| svipshipincom国产片| 人妻久久中文字幕网| 高清在线国产一区| 高清毛片免费观看视频网站| 操出白浆在线播放| 国产单亲对白刺激| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产精品野战在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美日本视频| 免费av不卡在线播放| 成人av一区二区三区在线看| 啦啦啦免费观看视频1| 国产成年人精品一区二区| 中文字幕熟女人妻在线| 国产精品女同一区二区软件 | 观看免费一级毛片| 欧美成人免费av一区二区三区| 久99久视频精品免费| 日韩高清综合在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久久色成人| 熟女人妻精品中文字幕| x7x7x7水蜜桃| 又爽又黄无遮挡网站| 欧美极品一区二区三区四区| 欧美极品一区二区三区四区| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 成人一区二区视频在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久久成人免费电影| 男女视频在线观看网站免费| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 少妇高潮的动态图| 久久久成人免费电影| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产 一区 欧美 日韩| 国产乱人伦免费视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 伊人久久精品亚洲午夜| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久伊人香网站| 婷婷精品国产亚洲av| 欧美bdsm另类| 日韩欧美精品免费久久 | 亚洲中文字幕日韩| 好男人电影高清在线观看| 国产精品三级大全| 久久久久性生活片| www日本在线高清视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 偷拍熟女少妇极品色| av女优亚洲男人天堂| a级一级毛片免费在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 深夜精品福利| 可以在线观看的亚洲视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲成人久久性| 天堂√8在线中文| 一本久久中文字幕| xxx96com| 嫩草影视91久久| 亚洲av电影在线进入| 一进一出抽搐动态| 日韩国内少妇激情av| 少妇人妻一区二区三区视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 人妻久久中文字幕网| 网址你懂的国产日韩在线| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 最近最新免费中文字幕在线| 脱女人内裤的视频| 91字幕亚洲| 色综合站精品国产| 欧美丝袜亚洲另类 | 成人一区二区视频在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 欧美日韩乱码在线| www.熟女人妻精品国产| ponron亚洲| 色综合站精品国产| 老司机福利观看| 精品福利观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久久色成人| 欧美乱色亚洲激情| 久久99热这里只有精品18| 久久久久国内视频| 国产色婷婷99| 少妇人妻一区二区三区视频| 成人无遮挡网站| 国产 一区 欧美 日韩| 身体一侧抽搐| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产久久久一区二区三区| 免费av不卡在线播放| 丰满人妻一区二区三区视频av | 亚洲中文字幕日韩| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美丝袜亚洲另类 | 成人精品一区二区免费| 午夜福利欧美成人| 国产亚洲精品久久久com| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 午夜免费成人在线视频| 欧美日韩乱码在线| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久久久亚洲av毛片大全| 香蕉丝袜av| 99久国产av精品| 99久久九九国产精品国产免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产主播在线观看一区二区| bbb黄色大片| 91在线观看av| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 午夜激情福利司机影院| 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产美女午夜福利| 国产乱人伦免费视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 久久久久久国产a免费观看| 美女高潮的动态| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品一及| 成年免费大片在线观看| 欧美三级亚洲精品| 我要搜黄色片| 制服人妻中文乱码| 一级a爱片免费观看的视频| 日本 欧美在线| xxx96com| 亚洲乱码一区二区免费版| 岛国在线免费视频观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 男人舔女人下体高潮全视频| 日韩有码中文字幕| 搞女人的毛片| 老汉色av国产亚洲站长工具| 婷婷丁香在线五月| ponron亚洲| 观看美女的网站| 级片在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产高清有码在线观看视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 精品久久久久久,| 亚洲精华国产精华精| 一级毛片女人18水好多| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久久久国内视频| 无限看片的www在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| av女优亚洲男人天堂| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产精品1区2区在线观看.| 深夜精品福利| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产三级中文精品| 男人的好看免费观看在线视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产成人系列免费观看| 在线观看免费午夜福利视频| 在线观看66精品国产| 亚洲内射少妇av| 老司机午夜福利在线观看视频| 在线a可以看的网站| 床上黄色一级片| 女人被狂操c到高潮| 午夜两性在线视频| 超碰av人人做人人爽久久 | 欧美av亚洲av综合av国产av| tocl精华| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 午夜福利免费观看在线| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产精品1区2区在线观看.| 精品国产三级普通话版| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 成年免费大片在线观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 男人舔女人下体高潮全视频| 乱人视频在线观看| 亚洲国产色片| 九色国产91popny在线| h日本视频在线播放| 91av网一区二区| 亚洲国产欧美人成| 99精品久久久久人妻精品| 中文在线观看免费www的网站| 欧美+日韩+精品| 亚洲精品一区av在线观看| 十八禁网站免费在线| 欧美乱妇无乱码| 99热这里只有是精品50| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲avbb在线观看| 国产高潮美女av| 最近最新免费中文字幕在线| 免费看光身美女| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 日本三级黄在线观看| 97碰自拍视频| 午夜福利在线观看吧| 久久精品国产综合久久久| 亚洲片人在线观看| 久久香蕉国产精品| 亚洲精品成人久久久久久| 国产不卡一卡二| 亚洲国产精品成人综合色| 日本在线视频免费播放| 久久国产精品影院| 少妇丰满av| 九色成人免费人妻av| 最后的刺客免费高清国语| 国产成人a区在线观看| 欧美三级亚洲精品| 国产午夜福利久久久久久| 久久中文看片网| 欧美色视频一区免费| 欧美乱色亚洲激情| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产三级黄色录像| svipshipincom国产片| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 欧美乱妇无乱码| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲人与动物交配视频| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲国产中文字幕在线视频| 在线视频色国产色| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久久久亚洲av毛片大全| 九九在线视频观看精品| 日本三级黄在线观看| 久久99热这里只有精品18| 国产一区二区三区视频了| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲成人久久爱视频| 欧美三级亚洲精品| 99热这里只有是精品50| 午夜精品久久久久久毛片777| 99在线人妻在线中文字幕| 色哟哟哟哟哟哟| 国产亚洲精品一区二区www| 内地一区二区视频在线| 久久性视频一级片| 听说在线观看完整版免费高清| 色吧在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲成人中文字幕在线播放| 一a级毛片在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产欧美日韩一区二区三| 变态另类丝袜制服| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲精华国产精华精| 欧美成人一区二区免费高清观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 真人一进一出gif抽搐免费| 欧美激情久久久久久爽电影| 深爱激情五月婷婷| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产精品一及| 欧美中文综合在线视频| 久久精品国产自在天天线| 欧美成人性av电影在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 国产高清激情床上av| 99热6这里只有精品| 欧美日韩综合久久久久久 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 脱女人内裤的视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 午夜久久久久精精品| 99精品久久久久人妻精品| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲美女黄片视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 老司机深夜福利视频在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲第一电影网av| 国产成人a区在线观看| 国产精品野战在线观看| netflix在线观看网站| 真人做人爱边吃奶动态| 无限看片的www在线观看| 国产黄片美女视频| 91久久精品电影网| 色哟哟哟哟哟哟| 国产精品 国内视频| 国产亚洲精品av在线| 亚洲精品色激情综合| 亚洲男人的天堂狠狠| 2021天堂中文幕一二区在线观| 毛片女人毛片| 国产精品亚洲一级av第二区| 在线观看午夜福利视频| 久久国产精品影院| 精品久久久久久久末码| 国语自产精品视频在线第100页| 听说在线观看完整版免费高清| 可以在线观看毛片的网站| 精品乱码久久久久久99久播| 观看免费一级毛片| 高清日韩中文字幕在线| www.熟女人妻精品国产| 久久这里只有精品中国| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产真实伦视频高清在线观看 | 90打野战视频偷拍视频| 国产av麻豆久久久久久久| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲第一电影网av| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 3wmmmm亚洲av在线观看| 婷婷丁香在线五月| 男女下面进入的视频免费午夜| 首页视频小说图片口味搜索| 日本与韩国留学比较| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 免费看光身美女| 国产伦人伦偷精品视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 18禁美女被吸乳视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 欧美黄色淫秽网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| 免费在线观看成人毛片| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日本黄色片子视频| 日韩欧美精品v在线| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 很黄的视频免费| 亚洲专区中文字幕在线| 美女黄网站色视频| 乱人视频在线观看| 日韩欧美精品v在线| 天天添夜夜摸| 99热6这里只有精品| 91九色精品人成在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| www.色视频.com| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美乱妇无乱码| 精品国内亚洲2022精品成人| ponron亚洲| 久久久精品欧美日韩精品| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 9191精品国产免费久久| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲天堂国产精品一区在线| 日韩欧美 国产精品| 亚洲av电影在线进入| 国产精品久久久久久久久免 | 日韩有码中文字幕| 免费人成在线观看视频色| 岛国在线观看网站| 亚洲人成网站高清观看| 日韩精品中文字幕看吧| 午夜福利高清视频| 亚洲七黄色美女视频| 成人一区二区视频在线观看| av欧美777| 免费在线观看成人毛片| 身体一侧抽搐| 69av精品久久久久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 久久亚洲精品不卡| 国产成人av教育| 久久香蕉精品热| 欧美3d第一页| 国产乱人视频| 最新在线观看一区二区三区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 校园春色视频在线观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产av一区在线观看免费| 88av欧美| 窝窝影院91人妻| 久久久久久国产a免费观看| 韩国av一区二区三区四区| 欧美一区二区亚洲| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 一本久久中文字幕| 久久久久久九九精品二区国产| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲美女视频黄频| 日本一本二区三区精品| 成年女人永久免费观看视频| 在线观看舔阴道视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 国语自产精品视频在线第100页| 午夜老司机福利剧场| 身体一侧抽搐| 老司机午夜十八禁免费视频| 啦啦啦免费观看视频1| 精品久久久久久久久久久久久| 一进一出好大好爽视频| 天堂网av新在线| 露出奶头的视频| 国产午夜精品论理片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产精品98久久久久久宅男小说| 桃红色精品国产亚洲av| 大型黄色视频在线免费观看| 婷婷丁香在线五月| 高清日韩中文字幕在线| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 一夜夜www| 欧美日韩综合久久久久久 | 午夜日韩欧美国产| 国产 一区 欧美 日韩| 2021天堂中文幕一二区在线观| 熟女人妻精品中文字幕| 小说图片视频综合网站| 最近最新免费中文字幕在线| 色老头精品视频在线观看| 亚洲国产欧美人成| svipshipincom国产片| 久久久久久九九精品二区国产| 精品久久久久久久末码| 内射极品少妇av片p| 亚洲国产欧美人成| 国产精品一区二区免费欧美| 国产高清激情床上av| www国产在线视频色| 久久久久亚洲av毛片大全| 成人av在线播放网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲五月天丁香| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 叶爱在线成人免费视频播放| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲国产精品久久男人天堂| 美女免费视频网站| xxxwww97欧美| 国产高清视频在线播放一区| 黄片大片在线免费观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 又黄又粗又硬又大视频| 嫩草影院入口| 一区二区三区高清视频在线| 狂野欧美激情性xxxx| 色综合亚洲欧美另类图片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 免费看美女性在线毛片视频| 在线观看66精品国产| 亚洲成人久久爱视频| 美女大奶头视频| 欧美大码av| 久久精品综合一区二区三区| 国产精品乱码一区二三区的特点| 美女cb高潮喷水在线观看| 日本五十路高清| 国产精品 欧美亚洲| 国产av不卡久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 99riav亚洲国产免费| 嫩草影视91久久| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 国产成人a区在线观看| 露出奶头的视频| 黄色日韩在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 五月玫瑰六月丁香| 欧美+日韩+精品| 午夜福利视频1000在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 高清在线国产一区| 成人特级av手机在线观看| 婷婷亚洲欧美| 国产精品美女特级片免费视频播放器| eeuss影院久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 18禁美女被吸乳视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 午夜a级毛片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 久久久久久久精品吃奶| 成人av一区二区三区在线看| 欧美极品一区二区三区四区| АⅤ资源中文在线天堂| 99国产精品一区二区三区| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 午夜a级毛片| 99精品在免费线老司机午夜| 成人午夜高清在线视频| 悠悠久久av| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产高清视频在线观看网站| 日韩国内少妇激情av| 久久午夜亚洲精品久久| 一级a爱片免费观看的视频| 免费观看精品视频网站| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品综合久久久久久久免费| 91麻豆av在线| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲国产精品合色在线| 99精品久久久久人妻精品| av欧美777| 国产精品野战在线观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 波多野结衣高清无吗| 99久久成人亚洲精品观看| 99国产综合亚洲精品| 欧美日韩综合久久久久久 | 日日干狠狠操夜夜爽| 三级国产精品欧美在线观看| 少妇的丰满在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 日本三级黄在线观看| 啦啦啦免费观看视频1| 99热只有精品国产| 真实男女啪啪啪动态图| 他把我摸到了高潮在线观看| svipshipincom国产片| 国产精品免费一区二区三区在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 最新美女视频免费是黄的| 国产高清视频在线观看网站| 99久久精品一区二区三区| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 精品一区二区三区视频在线观看免费| 久9热在线精品视频| 日本五十路高清| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲av免费在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 午夜亚洲福利在线播放| 精品福利观看| 一级作爱视频免费观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美一级毛片孕妇| 国产精品久久久久久精品电影| 成人欧美大片| 搡老妇女老女人老熟妇| 又紧又爽又黄一区二区| 国产美女午夜福利| 91av网一区二区| 99久久成人亚洲精品观看| 久久精品影院6| 欧美日韩乱码在线| 欧美高清成人免费视频www| 久久香蕉国产精品| 成人国产综合亚洲| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产99白浆流出| 成年免费大片在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 免费在线观看日本一区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 九九在线视频观看精品|