通腑茯苓飲聯(lián)合電針治療大鼠骶上脊髓損傷后神經(jīng)源性膀胱的作用機(jī)制研究*

張昱，孔繁林，吳磊

[1.山西白求恩醫(yī)院（山西醫(yī)學(xué)科學(xué)院），山西太原 030032；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山西晉中 030801]

神經(jīng)源性膀胱（neurogenic bladder, NB）是由于中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷導(dǎo)致的膀胱尿道功能障礙，主要表現(xiàn)為尿不暢或潴留，嚴(yán)重時(shí)引發(fā)尿路感染或腎衰竭，造成死亡[1]。脊柱損傷是造成NB 的主要原因，其中以骶上脊髓損傷（suprasacral spinal cord injury,SSCI）最常見[2]。中醫(yī)將其歸為“癃閉”“遺溺”等范疇[3]。目前NB 主要采用手術(shù)和保守治療，但手術(shù)效果有限且創(chuàng)傷較大，中醫(yī)以湯藥與針灸治療最常見。目前針對SSCI 后NB 采用針刺較多，而湯藥與針灸聯(lián)合治療的研究較少，且尚無確切的作用機(jī)制[4]。為提高療效，本研究選用中藥與電針聯(lián)合治療。湯藥選用通腑茯苓飲進(jìn)行調(diào)理，該藥方是根據(jù)《金匱要略》中葵子茯苓散加減而來，具有通調(diào)水道、行氣利水的功效[5]。針刺則選用長強(qiáng)穴和維胞穴進(jìn)行電針治療。長強(qiáng)穴屬督脈，位于脊柱骨的尾端，督陽初始之處，能夠增強(qiáng)督脈陽氣，調(diào)暢通淋，治療大小便難解；維胞穴則位于下腹部，主治遺尿，尿潴留等，具有調(diào)理沖任，行氣止痛的功效[6]。為探究其聯(lián)合治療的效果及作用機(jī)制，本研究復(fù)制SSCI后NB 大鼠模型，探究通腑茯苓飲聯(lián)合電針治療大鼠SSCI 后NB 的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

45 只SPF 級(jí)、SD 雌性大鼠，體重190～220 g，平均（205±15）g，購自斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0002，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（京）2019-0030。

1.2 主要試劑與儀器

1.2.1 主要試劑通腑茯苓飲所用藥材（山西國藥醫(yī)藥集團(tuán)有限公司），戊巴比妥鈉（CAS 號(hào)：57-33-0，上海譜析生物科技有限公司，貨號(hào)：XY-TP276000），中性甲醛（CAS 號(hào)：50-00-0，上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司，貨號(hào)：YR0267），TRIzol 試劑盒（武漢純度生物科技有限公司，貨號(hào)：CD-13433-ML），實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR）試劑盒（廣州市銳博生物科技有限公司，貨號(hào)：MQPS），神經(jīng)生長因子（nerve growth factor, NGF）、神經(jīng)生長因子受體（nerve growth factor receptor, TrkA）單克隆抗體（北京安諾倫生物科技有限公司，NGF 抗體貨號(hào)：LM12882；TrkA 抗體貨號(hào)：LM21146）。

1.2.2 主要儀器咬骨鉗（蘇州威邦醫(yī)療器械有限公司），一次性針灸針（型號(hào)：25mm，北京漢醫(yī)醫(yī)療器械中心），SDZ-Ⅱ型華佗牌電針治療儀（蘇州醫(yī)療用品廠有限公司），基礎(chǔ)電泳儀（型號(hào)：Mini-protean tetra mini，美國Bio-Rad 公司），真空干燥箱（型號(hào)：FD8-3T，美國GOLD-SIM 公司），紫外分光光度計(jì)（型號(hào)：BioSpectrometerD30，德國Eppendorf 公司）。

1.3 方法

1.3.1 SSCI 模型的復(fù)制及分組所有大鼠飼養(yǎng)于SPF 區(qū)域，溫度保持在20℃左右，濕度為55%～60%，大鼠食量一般為100 g/（kg·d），每日給予充足的飼料和水。根據(jù)Hassan Shakerl 脊髓橫斷法[7]，復(fù)制大鼠SSCI 模型。采用隨機(jī)數(shù)字表法將45 只雌性大鼠分為對照組（8 只）和實(shí)驗(yàn)組（37 只）。實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射1%戊巴比妥鈉（40 mg/kg）麻醉后復(fù)制SSCI 模型。將大鼠俯臥固定，脊柱胸椎下段消毒、備皮，找到T10椎體，從此處切開皮膚，分離皮下組織，暴露T10、T11棘突及椎板，用咬骨鉗咬除T10椎板及兩側(cè)關(guān)節(jié)突，暴露出脊髓并將其切斷（可反復(fù)切割，確保脊髓完全切斷，無神經(jīng)纖維殘留），觀察大鼠生命體征后縫合。大鼠清醒后，采用病理評分評估大鼠脊髓橫斷情況[7]：0 分（后肢癱瘓，無任何運(yùn)動(dòng)）表明脊髓橫斷成功。術(shù)后抗感染治療7 d，每日手法排尿，并記錄尿量。2 周后膀胱出現(xiàn)尿潴留，表明大鼠SSCI 后NB 模型復(fù)制成功。實(shí)驗(yàn)組5 只大鼠模型復(fù)制失敗（3 只死亡，2 只未出現(xiàn)尿潴留），其余大鼠隨機(jī)分為模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組，每組8 只。

1.3.2 藥物處理通腑茯苓飲組方：茯苓10 g、車前子15 g、烏藥6 g、琥珀3 g、黃芪30 g、白術(shù)20 g、澤瀉10 g、冬葵子10 g、通草6 g、滑石10 g、牛膝15 g，制成生藥含量為1 g/mL 的通腑茯苓飲，備用。模型復(fù)制成功后，根據(jù)人與大鼠的體重及給藥劑量換算公式[9]，通腑茯苓飲組給予通腑茯苓飲6.25 g/（kg·d），連續(xù)服用14 d；電針組采用0.3 mm×25.0 mm 的電針，對長強(qiáng)穴和維胞穴進(jìn)行針刺，電針儀參數(shù)設(shè)定為10/50 Hz（疏波10 Hz/5 s，密波50 Hz/9 s），留針20 min，1 次/d，連續(xù)14 d。

1.3.3 標(biāo)本采集及處理最后一次治療后對大鼠進(jìn)行尿流動(dòng)力學(xué)檢測。檢測后所有大鼠腹腔注射1%戊巴比妥鈉（40 mg/kg）麻醉，采用手法輔助大鼠排尿，記錄其殘余尿量。在麻醉狀態(tài)下剝離大鼠背部皮膚、肌肉及組織，分離暴露胸椎段T8～T12脊髓，切除T9～T10脊髓后用生理鹽水沖洗，每組4 只大鼠的脊髓于4%中性甲醛中固定，用于蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin, HE）染色；另4 只大鼠的脊髓置于-80℃冷凍保存，用于檢測mRNA 和蛋白的表達(dá)。

1.3.4 大鼠尿流動(dòng)力學(xué)檢測排空膀胱后，大鼠仰臥位固定，將三通導(dǎo)管中的空氣排空，一端由尿道插入膀胱并固定，一端連接測壓通道，另一側(cè)連接微量灌注泵，記錄膀胱基礎(chǔ)壓力后，向膀胱中勻速注入溫生理鹽水（0.2 mL/min），密切觀察膀胱壓力變化，當(dāng)尿道口有液體流出時(shí)，記錄此時(shí)壓力值，為膀胱漏尿點(diǎn)壓力，此時(shí)注入的生理鹽水容量為膀胱最大容量。液體流出后繼續(xù)注入溫生理鹽水，至逼尿肌壓力穩(wěn)定，根據(jù)公式計(jì)算得出膀胱順應(yīng)性。膀胱順應(yīng)性=膀胱容量的變化/壓力變化。

1.3.5 大鼠脊髓組織HE 染色及病理學(xué)評分取固定好的脊髓組織標(biāo)本，70%乙醇脫水，透明，石蠟包埋，切片厚約4 μm，HE 染色，封片后置于光鏡下觀察脊髓組織病理變化，并進(jìn)行病理學(xué)評分。0 分：無炎癥細(xì)胞浸潤，1 分：炎癥細(xì)胞僅出現(xiàn)在血管周圍；2～4 分：脊髓周圍出現(xiàn)輕、中、重度炎癥細(xì)胞浸潤[10]。

1.3.6 qRT-PCR 檢測大鼠脊髓組織NGF、TrkA mRNA 的表達(dá)取部分冷凍保存的脊髓組織，根據(jù)TRIzol 試劑盒說明書提取脊髓組織總RNA，采用紫外吸收法檢測純度及濃度，以總RNA 為模板，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，qPCR 反應(yīng)體系：SYBR 4 μL，正反向引物各1 μL，cDNA 模板4 μL，H2O 加至20 μL；擴(kuò)增條件：95℃預(yù)變性2 min；95℃變性10 s，58℃退火15 s，72℃延伸10 s，共40 個(gè)循環(huán)。β-actin 為內(nèi)參基因，采用2-ΔΔCT法計(jì)算脊髓組織NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量，NGF、TrkA 及內(nèi)參引物序列見表1。

表1 qRT-PCR引物序列

1.3.7 Western blotting 檢測大鼠脊髓組織NGF、TrkA 蛋白的表達(dá)取冷凍保存的脊髓組織研磨勻漿，加入裂解液對組織進(jìn)行裂解，測定蛋白濃度，電泳分離目的蛋白，采用PVDF 膜進(jìn)行轉(zhuǎn)膜，用Western洗滌液洗去轉(zhuǎn)膜液，封閉1 h，按一抗說明書進(jìn)行稀釋，加入一抗NGF、TrkA 及內(nèi)參后在4℃條件下，搖床孵育過夜，再加入山羊抗兔二抗，孵育2 h，最后顯影得到結(jié)果[11]。蛋白相對表達(dá)量=目的蛋白積分光密度值（IOD）/β-Actin IOD。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠膀胱重量、殘余尿量比較

對照組、模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組大鼠膀胱重量、殘余尿量比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=90.861 和27.951，均P=0.000）。進(jìn)一步兩兩比較結(jié)果：與對照組比較，模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組的膀胱重量、殘余尿量增加（P＜0.05）；與模型組比較，通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組的膀胱重量、殘余尿量減少（P＜0.05）；與通腑茯苓飲組比較，電針組及聯(lián)合組的膀胱重量、殘余尿量減少（P＜0.05），與電針組比較，聯(lián)合組的膀胱重量、殘余尿量減少（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠膀胱重量、殘余尿量比較 （n=8，±s）

表2 各組大鼠膀胱重量、殘余尿量比較 （n=8，±s）

注：①與對照組比較，P ＜0.05；②與模型組比較，P ＜0.05；③與通腑茯苓飲組比較，P ＜0.05；④與電針組比較，P ＜0.05。

組別對照組模型組通腑茯苓飲組電針組聯(lián)合組F 值P 值膀胱重量/g 0.18±0.04 0.86±0.08①0.79±0.03①②0.68±0.07①②③0.56±0.13①②③④90.861 0.000殘余尿量/mL 0.16±0.04 3.25±1.08①2.26±0.62①②1.65±0.47①②③1.16±0.39①②③④27.951 0.000

2.2 各組大鼠尿流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)比較

對照組、模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組大鼠膀胱漏尿點(diǎn)壓力、膀胱順應(yīng)性及膀胱最大容量比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=25.988、23.317 和63.828，均P=0.000）。進(jìn)一步兩兩比較結(jié)果：與對照組比較，模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組的膀胱漏尿點(diǎn)壓力升高，膀胱順應(yīng)性降低、膀胱最大容量減少（P＜0.05）；與模型組比較，通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組的膀胱漏尿點(diǎn)壓力降低，膀胱順應(yīng)性升高、膀胱最大容量增加（P＜0.05）；與通腑茯苓飲組比較，電針組及聯(lián)合組的膀胱漏尿點(diǎn)壓力降低，膀胱順應(yīng)性升高、膀胱最大容量增加（P＜0.05），與電針組比較，聯(lián)合組的膀胱漏尿點(diǎn)壓力降低，膀胱順應(yīng)性升高、膀胱最大容量增加（P＜0.05）。見表3。

表3 各組大鼠尿流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)比較 （n=8，±s）

表3 各組大鼠尿流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)比較 （n=8，±s）

注：①與對照組比較，P ＜0.05；②與模型組比較，P ＜0.05；③與通腑茯苓飲組比較，P ＜0.05；④與電針組比較，P ＜0.05。

膀胱最大容量/mL 4.58±1.04 0.66±0.15①1.12±0.17①②1.85±0.21①②③2.56±0.55①②③④63.828 0.000組別對照組模型組通腑茯苓飲組電針組聯(lián)合組F 值P 值膀胱漏尿點(diǎn)壓力/cmH2O 36.18±2.34 53.46±5.71①46.68±3.63①②42.64±3.56①②③38.97±2.63①②③④25.988 0.000膀胱順應(yīng)性/（mL/cmH2O）0.31±0.11 0.03±0.01①0.08±0.03①②0.13±0.05①②③0.20±0.07①②③④23.317 0.000

2.3 各組大鼠脊髓組織病理變化及評分比較

HE 染色結(jié)果顯示，對照組脊髓結(jié)構(gòu)完整，神經(jīng)細(xì)胞核膜清晰，分布均勻，無明顯炎癥細(xì)胞浸潤；模型組可見炎癥細(xì)胞浸潤，血管周圍可見“管套狀”結(jié)構(gòu)；與模型組比較，通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組炎癥細(xì)胞浸潤減少，局部可見“管套狀結(jié)構(gòu)”。見圖1。

圖1 各組大鼠脊髓組織病理切片 （HE染色×200）

對照組、模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組大鼠脊髓組織病理評分分別為（0.00+0.00）分、（3.61±0.38）分、（2.68±0.28）分、（1.91±0.20）分和（1.02±0.11）分，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=143.713，P=0.000）。進(jìn)一步兩兩比較結(jié)果：與對照組比較，模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組病理評分升高（P＜0.05）；與模型組比較，通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組病理評分降低（P＜0.05）；與通腑茯苓飲組比較，電針組及聯(lián)合組病理評分降低（P＜0.05），與電針組比較，聯(lián)合組病理評分降低（P＜0.05）。

2.4 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量比較

對照組、模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組大鼠脊髓組織NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=63.286 和141.237 均P=0.000）。進(jìn)一步兩兩比較結(jié)果：與對照組比較，模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量降低（P＜0.05）；與模型組比較，通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量升高（P＜0.05）；與通腑茯苓飲組比較，電針組及聯(lián)合組NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量升高（P＜0.05），與電針組比較，聯(lián)合組NGF、TrkA mRNA 相對表達(dá)量升高（P＜0.05）。見表4。

表4 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA mRNA相對表達(dá)量比較 （n=4，±s）

表4 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA mRNA相對表達(dá)量比較 （n=4，±s）

注：①與對照組比較，P ＜0.05；②與模型組比較，P ＜0.05；③與通腑茯苓飲組比較，P ＜0.05；④與電針組比較，P ＜0.05。

TrkA mRNA 1.37±0.06 0.66±0.04①0.83±0.04①②1.10±0.09①②③1.22±0.05①②③④141.237 0.000組別對照組模型組通腑茯苓飲組電針組聯(lián)合組F 值P 值NGF mRNA 0.94±0.04 0.56±0.02①0.71±0.03①②0.82±0.05①②③0.87±0.04①②③④63.286 0.000

2.5 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA 蛋白相對表達(dá)量比較

對照組、模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組大鼠脊髓組織NGF、TrkA 蛋白相對表達(dá)量比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=239.253 和72.746 均P=0.000）。進(jìn)一步兩兩比較結(jié)果：與對照組比較，模型組、通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組NGF、TrkA 蛋白相對表達(dá)量降低（P＜0.05）；與模型組比較，通腑茯苓飲組、電針組及聯(lián)合組NGF、TrkA蛋白相對表達(dá)量升高（P＜0.05）；與通腑茯苓飲組比較，電針組及聯(lián)合組NGF、TrkA 蛋白相對表達(dá)量升高（P＜0.05），與電針組比較，聯(lián)合組NGF、TrkA 蛋白相對表達(dá)量升高（P＜0.05）。見表5 和圖2。

表5 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA蛋白相對表達(dá)量比較（n=4，±s）

表5 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA蛋白相對表達(dá)量比較（n=4，±s）

注：①與對照組比較，P ＜0.05；②與模型組比較，P ＜0.05；③與通腑茯苓飲組比較，P ＜0.05；④與電針組比較，P ＜0.05。

TrkA蛋白2.04±0.25 0.47±0.05①0.72±0.09①②0.84±0.08①②③1.30±0.16①②③④72.746 0.000組別對照組模型組通腑茯苓飲組電針組聯(lián)合組F 值P 值NGF蛋白1.43±0.04 0.71±0.05①0.89±0.04①②0.97±0.03①②③1.31±0.03①②③④239.253 0.000

圖2 各組大鼠脊髓組織NGF、TrkA蛋白的表達(dá)

3 討論

SSCI 后NB 是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損導(dǎo)致，中醫(yī)認(rèn)為SSCI 后NB 的病機(jī)為淤血凝滯、督脈不同。電針能夠促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化，有利于神經(jīng)細(xì)胞的恢復(fù)。中醫(yī)常用電針治療NB，其在穴位功效的基礎(chǔ)上，采用電刺激，在穴位之間形成電流，更深度刺激穴位發(fā)揮功效。廖福金等[12]研究結(jié)果顯示，針刺長強(qiáng)穴能夠改善SSCI 后NB 大鼠的排尿能力，改善膀胱功能。因此，本研究選用長強(qiáng)穴和維胞穴進(jìn)行電針刺激，2 個(gè)穴位能夠在體內(nèi)形成一條電流，起到通督補(bǔ)腎、恢復(fù)膀胱氣化的作用[13]。加之通腑茯苓飲的利水、理氣加速代謝的作用，通過多方面對SSCI 后NB 進(jìn)行調(diào)理，但其作用機(jī)制尚不確切。NGF、TrkA 對中樞神經(jīng)元的發(fā)育、再生及功能特性的表達(dá)均有一定的調(diào)控作用。有研究證實(shí)，NGF、TrkA 能夠加速神經(jīng)元的修復(fù)[14]，因此推測NGF-TrkA 信號(hào)通路在NB 中發(fā)揮一定作用。

本研究通過Hassan Shakerl 脊髓橫斷法復(fù)制SSCI 模型，該方法能夠完全橫斷脊髓并準(zhǔn)確定位脊髓損傷部位，有利于后續(xù)切片觀察，且較為簡便。采用通腑茯苓飲、電針及兩者聯(lián)合對SSCI 后NB 的作用進(jìn)行比較，結(jié)果表明通腑茯苓飲、電針治療SSCI 后NB 均有一定療效，其中聯(lián)合治療對于膀胱功能及尿流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的改善效果更明顯。本研究中大鼠脊髓組織病理變化及病理評分結(jié)果同樣證實(shí)聯(lián)合治療對大鼠脊髓組織的修復(fù)作用更明顯，能減少炎癥細(xì)胞浸潤。分析其原因?yàn)橥ǜ蜍唢嬘绍蜍摺④嚽白印跛?、琥珀、黃芪、白術(shù)、澤瀉、冬葵子、通草、滑石、牛膝組成；其中茯苓健脾利水；車前子利水通淋；烏藥溫腎行氣，腎氣化生，致膀胱氣化，尿液排出；琥珀宣竅；重用黃芪補(bǔ)氣升陽，健脾益肺，利水消腫、活血化瘀，于補(bǔ)益中兼具通瀉之功；白術(shù)、澤瀉健脾利水，佐以冬葵子、滑石、通草，增強(qiáng)滑竅利水通淋之功；牛膝通經(jīng)活血、利水通淋、祛除邪結(jié)[15]。通腑茯苓飲聯(lián)合電針刺激長強(qiáng)穴及維胞穴，能夠發(fā)揮通調(diào)水道、行氣利水的功效，同時(shí)強(qiáng)督脈陽氣，調(diào)暢通淋，多種作用途徑增強(qiáng)膀胱功能，使其效果顯著優(yōu)于通腑茯苓飲及電針單獨(dú)治療。

NGF 是神經(jīng)營養(yǎng)因子中的一種，對神經(jīng)的生長、損傷過程均有一定影響。此外，NGF 還可以保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷，TrkA 是NGF 受體，能夠促進(jìn)神經(jīng)元出芽，修復(fù)受損的神經(jīng)回路[16]。當(dāng)脊髓受損時(shí)，NGF 能促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。本研究結(jié)果表明，SSCI 后NB 大鼠脊髓組織NGF、TrkA mRNA 和蛋白相對表達(dá)量降低，可能是檢測時(shí)NGF、TrkA 已處于高峰后的下降時(shí)期。經(jīng)電針或通腑茯苓飲治療后，NGF、TrkA mRNA 和蛋白相對表達(dá)量升高，而兩者聯(lián)合治療后NGF、TrkA mRNA 和蛋白相對表達(dá)量接近正常水平。分析期原因?yàn)镹GF 與受體TrkA 特異性結(jié)合后激活NGF，能夠維持神經(jīng)元活性，加速突觸成熟，使軸突延長，促進(jìn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和修復(fù)[17]。通腑茯苓飲可能通過激活P13K/Akt 信號(hào)通路，抑制脊髓損傷神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)神經(jīng)元的出芽及神經(jīng)回路的重建，加速神經(jīng)再生，從而減輕脊髓損傷[18]。本研究結(jié)果提示通腑茯苓飲聯(lián)合電針能夠有效激活NGF-TrkA 信號(hào)通路，減輕SSCI 后NB 對大鼠膀胱及脊髓的損傷。

綜上所述，通腑茯苓飲聯(lián)合電針能夠改善SSCI后NB 大鼠膀胱功能，其作用機(jī)制可能與NGF-TrkA信號(hào)通路有關(guān)。未來可對NGF、TrkA 上下游蛋白進(jìn)行深入研究，進(jìn)一步驗(yàn)證通腑茯苓飲聯(lián)合電針對NGF-TrkA 信號(hào)通路的調(diào)控作用，為治療SSCI 后NB提供科學(xué)依據(jù)。