郭 峰,宗志權(quán)
1 汝南縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,河南駐馬店 463300
2 定邊縣林草病蟲(chóng)害防治防火工作站,陜西榆林 718699
奶牛附紅細(xì)胞體?。‥perythrozoonosis of Dairy Cows,EDC)是一種由寄生于奶牛紅細(xì)胞、血漿內(nèi)的牛附紅細(xì)胞體引起的,臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、貧血和黃疸等為主要癥狀的傳染病[1],是奶牛養(yǎng)殖業(yè)中的常見(jiàn)病。該病多發(fā)于春夏季節(jié),既可通過(guò)血液接觸(吸血昆蟲(chóng)等)水平傳播,也可以垂直傳播[2]。該病通常表現(xiàn)隱性感染[3],不容易發(fā)現(xiàn)病情,但是隨著病情發(fā)展,也會(huì)表現(xiàn)明顯的臨床癥狀,并繼發(fā)其他疫病,導(dǎo)致奶牛泌乳量和乳品質(zhì)下降,嚴(yán)重影響其繁殖性能和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
河南省汝南縣地處豫南,多年來(lái)大力發(fā)展奶牛養(yǎng)殖業(yè),以規(guī)?;曫B(yǎng)方式為主,成為拉動(dòng)畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的新熱點(diǎn)。但是隨著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,該病在汝南縣每年也有7%~10%的發(fā)病率,且大多是混合感染,增加了診治難度和飼養(yǎng)成本,給養(yǎng)牛場(chǎng)(戶(hù))帶來(lái)了經(jīng)濟(jì)損失。為摸清汝南縣奶牛附紅細(xì)胞體病的流行情況,降低該病發(fā)病率,減少奶牛養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失,
本研究于2020年3月到2021年2月通過(guò)實(shí)地調(diào)查疫病診療檔案、詢(xún)問(wèn)有關(guān)發(fā)病信息,并通過(guò)實(shí)驗(yàn)室診斷等方法對(duì)全縣規(guī)模化奶牛場(chǎng)和散養(yǎng)奶牛戶(hù)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查,為有效開(kāi)展防控工作提供參考。
2020年3月到2021年2月,選取全縣規(guī)模奶牛場(chǎng)、奶牛散養(yǎng)戶(hù)共748 頭奶牛,包括犢牛、青年牛和泌乳牛。
采取實(shí)地調(diào)查,查看奶牛疾病防控檔案、診療記錄,詢(xún)問(wèn)每年該病流行情況;觀察臨床癥狀,剖檢部分病死牛,統(tǒng)計(jì)有關(guān)數(shù)據(jù)和信息;現(xiàn)場(chǎng)采集血樣,做好采集時(shí)間、場(chǎng)點(diǎn)等記錄,進(jìn)行血液鏡檢、吉姆薩染色等實(shí)驗(yàn)室診斷。
1.3.1 血液壓片鏡檢
耳靜脈采集血液1 滴,置于載玻片上,再滴1 滴生理鹽水混合均勻后,蓋上蓋玻片,100×1 000 倍油鏡鏡檢。
1.3.2 染色鏡檢
采集耳靜脈血液制作成抗凝血片,吉姆薩染色,100×1 000 倍油鏡下鏡檢。
1.3.3 紅細(xì)胞溶解后鏡檢
在壓片鏡檢和染色鏡檢為陽(yáng)性的血液樣品中加入0.1%稀鹽酸,1~2 min后鏡檢。
1.3.4 碘制動(dòng)試驗(yàn)
取陽(yáng)性血液1 滴制作血片,先加入1 滴生理鹽水鏡檢,觀察蟲(chóng)體運(yùn)動(dòng)情況,然后滴入0.1%碘液,鏡檢再觀察蟲(chóng)體運(yùn)動(dòng)情況是否發(fā)生變化。
每份血液樣品觀察200 個(gè)視野,有1 個(gè)蟲(chóng)體者即判定陽(yáng)性,否則判定為陰性。根據(jù)紅細(xì)胞感染率(Erythrocyte infection rate,EIR)進(jìn)行感染強(qiáng)度判斷[4],見(jiàn)表1。紅細(xì)胞感染率(%)=(陽(yáng)性視野個(gè)數(shù)/200)×100%。
表1 感染強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)
在血液壓片鏡檢下觀察,可見(jiàn)陽(yáng)性血液中紅細(xì)胞在整個(gè)視野均勻分布,折射光能力比正常紅細(xì)胞較強(qiáng),表面附著數(shù)量不等的蟲(chóng)體,尤其以邊緣居多,形態(tài)多變,多呈圓形、月牙形和桿狀等。血漿中的蟲(chóng)體多數(shù)為白色亮光點(diǎn)狀,偶見(jiàn)黑色,且運(yùn)動(dòng)自如,上下翻轉(zhuǎn),游動(dòng)靈活。
在吉姆薩染色鏡檢下觀察,可見(jiàn)蟲(chóng)體染色后呈藍(lán)紫色,紅細(xì)胞凹陷成空泡。附著蟲(chóng)體的紅細(xì)胞邊緣不規(guī)則,呈鋸齒狀,整體形態(tài)與血液壓片下觀察到的情況相似。部分陽(yáng)性血片也可見(jiàn)大單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。
在溶解紅細(xì)胞后鏡檢觀察,可見(jiàn)視野內(nèi)游離分散的蟲(chóng)體明顯多于上述觀察結(jié)果,且運(yùn)動(dòng)性增強(qiáng)。
在加入碘液后鏡檢觀察,可見(jiàn)在所有觀察的視野中,血漿中原來(lái)運(yùn)動(dòng)靈活的蟲(chóng)體呈現(xiàn)靜止?fàn)顟B(tài)。
表2 奶牛附紅細(xì)胞體流行情況
汝南縣被檢測(cè)的748 頭奶牛的附紅細(xì)胞病總陽(yáng)性率為10.03%,泌乳牛陽(yáng)性率最高,為13.02%,分別比青年牛陽(yáng)性率和犢牛陽(yáng)性率高2.82 個(gè)百分點(diǎn)和7.11個(gè)百分點(diǎn),高于平均陽(yáng)性率2.99 個(gè)百分點(diǎn)。
從全年不同月份的奶牛附紅細(xì)胞體病發(fā)病率分布看,1月最低,為6.67%,隨著月份增大,感染率也隨之升高,7月達(dá)到最高值,為14.55%,8月與7月持平,隨后呈下降趨勢(shì),到12月為7.35%。
圖1 不同月份奶牛附紅細(xì)胞體病感染率
汝南縣奶牛附紅細(xì)胞體病的感染率為10.03%,遠(yuǎn)低于黃占欣等[5]對(duì)邯鄲地區(qū)報(bào)道的54.50%和李子平等[6]報(bào)道的冬季73.9%和夏季84.9%。泌乳牛感染率高于后備牛,感染率與奶牛年齡存在一定關(guān)系。全年感染率以7、8月為最高,以1、12月為最低,說(shuō)明該病有明顯的季節(jié)性,夏季蚊、蠅、螨、蜱等活躍,奶牛感染機(jī)會(huì)增加,冬季蚊蠅和媒介昆蟲(chóng)消失,感染率下降。關(guān)于附紅細(xì)胞體病的傳播途徑,已經(jīng)有試驗(yàn)證實(shí)有接觸性傳播、血源性傳播、昆蟲(chóng)媒介傳播和垂直傳播。由此表明,附紅細(xì)胞體病的感染率與體外寄生蟲(chóng)密切相關(guān),此結(jié)果與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[7,8]一致。
根據(jù)附紅細(xì)胞體病的季節(jié)性發(fā)病規(guī)律,建議在每年3月,給奶牛預(yù)防性用藥1 次,在5、6月感染高峰以前再用藥1 次。除此之外,也應(yīng)加強(qiáng)日常圈舍的衛(wèi)生清理及消毒工作,合理調(diào)配飼料營(yíng)養(yǎng),增強(qiáng)奶牛免疫力;夏季及時(shí)清除圈舍及周?chē)募S尿和積水,防止蚊蠅及其他吸血昆蟲(chóng)滋生;加強(qiáng)奶牛附紅細(xì)胞體病的監(jiān)控,發(fā)現(xiàn)帶蟲(chóng)率普遍較高時(shí),及時(shí)全群用藥治療,建議使用尼克蘇、血蟲(chóng)凈、土霉素等藥物按預(yù)防劑量全群用藥1 次,間隔15天再用藥1 次。
此次調(diào)查初步了解了汝南縣奶牛附紅細(xì)胞體病流行特點(diǎn),該病平均陽(yáng)性率為10.03%,從全年不同月份發(fā)病率來(lái)看,1月發(fā)病率最低,7、8月最高。盡管發(fā)病率不高,但是應(yīng)全面引起對(duì)該病的認(rèn)識(shí),提高奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)(戶(hù))的防控意識(shí),加強(qiáng)有效的綜合防控措施,減少奶牛養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失。