電導(dǎo)入水光技術(shù)促進(jìn)小鼠皮膚透明質(zhì)酸透皮吸收的實(shí)驗(yàn)研究

皮膚是人體最大和最重要的器官，也是人體的第一道屏障，但皮膚并不是絕對(duì)嚴(yán)密的組織，某些物質(zhì)可以選擇性的通過表皮而被真皮吸收。作為三大給藥方式（經(jīng)皮、注射、口服）之一，經(jīng)皮給藥系統(tǒng)是藥物通過皮膚吸收的一種給藥方法。藥物應(yīng)用于皮膚后，穿過皮膚的表皮和真皮層，然后由毛細(xì)血管吸收進(jìn)入體循環(huán)。但是，經(jīng)皮給藥的難題是大分子藥物難以經(jīng)皮傳遞、治療時(shí)間太長(zhǎng)和不良反應(yīng)

。電導(dǎo)入水光技術(shù)是一種新的經(jīng)皮給藥技術(shù)，是采用瞬時(shí)高電壓脈沖電場(chǎng)在細(xì)胞膜等脂質(zhì)雙分子層中形成可逆的親水性孔道而增加細(xì)胞及組織膜的滲透性的過程。臨床廣泛適用于皮膚和毛發(fā)護(hù)理、再生、修復(fù)、整形等多類皮膚系統(tǒng)問題。電導(dǎo)入水光技術(shù)具備輸出波形為規(guī)則方波，導(dǎo)入效果較強(qiáng)，且離子、分子都能導(dǎo)入，皮膚吸收更好等特點(diǎn)。既往研究只是提供電導(dǎo)入水光技術(shù)與德瑪莎水光技術(shù)的透明質(zhì)酸透皮吸收作用前后對(duì)比，無法提供藥物如何進(jìn)入皮下的臨床活檢或組織學(xué)報(bào)告

。本研究通過對(duì)試驗(yàn)室動(dòng)物的皮膚進(jìn)行組織學(xué)研究，對(duì)比了電導(dǎo)入水光技術(shù)與德瑪莎水光技術(shù)的透明質(zhì)酸透皮吸收作用。

眼下衢州城滿是殺氣，城墻、街頭堆滿了沙袋掩體。半個(gè)月前，衢州就成了一座空城，但說空城也不對(duì)，城里人倒是不少，盡是些來來去去的官兵，來來去去的車炮。整天都是軍號(hào)聲，起床號(hào)、吃飯?zhí)?、睡覺號(hào)，就是沒有公雞司鳴，走狗吠叫，行販叫賣。

1 資料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：本組共36只小鼠，分為兩組，每組18只。

（3）選定敏捷主管。既可以由團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)人兼任，也可以由專業(yè)人士擔(dān)任。負(fù)責(zé)培訓(xùn)敏捷方式，確保敏捷方式得到正確運(yùn)用，幫助團(tuán)隊(duì)消除一切障礙。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法：對(duì)照組使用德瑪莎水光機(jī)滲透熒光標(biāo)記透明質(zhì)酸0.1 ml，深度1.5 mm；研究組使用臺(tái)式電導(dǎo)入（雅光醫(yī)療版Med Smartdep臺(tái)式電導(dǎo)入儀）滲透熒光標(biāo)記透明質(zhì)酸0.5 ml，持續(xù)5 min。每次每組6只，兩組共12只，依次于第1天，第3天和第9天處死，觀察小鼠皮膚導(dǎo)入透明質(zhì)酸后狀態(tài)，于皮膚切片冠狀面評(píng)估透明質(zhì)酸導(dǎo)入深度，皮膚切片矢狀面評(píng)估透明質(zhì)酸顆粒面積。

如圖1～4所示，兩組小鼠皮膚表面均勻覆蓋熒光層；從真皮最外層到最內(nèi)層均可以觀察到多處熒光膠原分子（分子量800 Dal的透明質(zhì)酸）。如表1所示，第1天研究組深度顯著少于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

＜0.05）；兩組間面積比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

＞0.05）。第3天研究組深度和面積均顯著多于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

＜0.05）。第9天兩組間深度和面積比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

＞0.05）。

人體皮膚表面有大量的毛孔、皮膚腺和汗腺導(dǎo)管的開口。藥物離子進(jìn)入體內(nèi)的主要通道是皮膚汗腺導(dǎo)管的排泄孔。一部分藥物離子經(jīng)汗腺管口進(jìn)入皮膚后，較長(zhǎng)時(shí)間存留于皮膚表層，形成所謂“皮膚離子堆”，然后逐漸進(jìn)入血流。不同種類的藥物離子在皮膚內(nèi)存留的時(shí)間不同，短至數(shù)小時(shí)，長(zhǎng)達(dá)數(shù)十天

。導(dǎo)入體內(nèi)的藥物量與藥液濃度、電流強(qiáng)度、通電時(shí)間、導(dǎo)入離子等多種因素有關(guān)。一些常用的溶液濃度在5%以下時(shí)，導(dǎo)入量隨著濃度的升高而增加；而當(dāng)濃度大于5%時(shí)，藥物導(dǎo)入量幾乎不再增加

。導(dǎo)入體內(nèi)的藥物量在一定范圍內(nèi)與電流強(qiáng)度和通電時(shí)間成正比。但是當(dāng)電流強(qiáng)度增至一定值，通電時(shí)間超過30 min以上時(shí)，導(dǎo)入量不再隨之增加。早期的離子導(dǎo)入設(shè)備為連續(xù)輸出，直流電壓較為微弱，需要長(zhǎng)時(shí)間敷在治療區(qū)域，沒有溫度傳感器，經(jīng)常出現(xiàn)灼傷現(xiàn)象，需要嚴(yán)格隨時(shí)溝通熱感和把控時(shí)間。此后改進(jìn)為峰值40 V直流脈沖電壓，中頻

2 結(jié)果

3 討論

人全身都覆蓋著皮膚。隨著年齡的增長(zhǎng)，不良的生活方式致使角質(zhì)層水分逐漸流失，皮膚暗淡、細(xì)紋、松弛、粗糙和毛發(fā)無華、蒼白、脫落、稀疏等問題接踵而來。有針?biāo)饪舍槍?duì)性解決皮膚深層補(bǔ)水問題，但因?yàn)橛袆?chuàng)有恢復(fù)期無法多頻次治療，臨床對(duì)于無創(chuàng)的經(jīng)皮給藥有很大需求。經(jīng)皮給藥途徑和藥物導(dǎo)入通道主要是毛發(fā)、汗腺、皮脂腺等皮膚附屬器及角質(zhì)層細(xì)胞間隙，對(duì)親水性藥物更有效。在藥物的經(jīng)皮滲透過程中，最大的阻力來自皮膚的角質(zhì)層。角質(zhì)細(xì)胞間隙是類脂分子形成的多層脂質(zhì)雙分子層。通常情況下，由于角質(zhì)細(xì)胞阻力大，藥物分子主要由角質(zhì)細(xì)胞間隙擴(kuò)散通過角質(zhì)層。經(jīng)皮給藥的主要物理方法包括如下3種：高壓噴射主要是采用高壓噴射技術(shù)，以450 m/s的速度進(jìn)行噴射，對(duì)皮膚逐層釋放藥物；超聲波導(dǎo)入主要是通過低頻脈沖超聲波的空化效應(yīng)，引起細(xì)胞內(nèi)氣體分子、氣泡的振動(dòng)，以及氣泡隨后發(fā)生破壞形成空隙或空囊；離子導(dǎo)入是通過低電壓直流電在皮膚表面形成電位差，通過電極同性相斥的原理將離子或帶電化學(xué)藥物通過角質(zhì)層到達(dá)皮膚深層。但是，這些技術(shù)在嘗試經(jīng)皮傳遞大分子藥物以及臨床應(yīng)用中都有弊端，主要是許多藥物的經(jīng)皮傳遞能力較低，以至于限制了最后的功效

。電導(dǎo)入水光技術(shù)是一種新的經(jīng)皮給藥技術(shù)，通過在皮膚上施加高壓脈沖，使角質(zhì)層結(jié)構(gòu)瞬間紊亂，產(chǎn)生可逆的親水性“電孔道”，以增加大分子藥物的經(jīng)皮滲透率；同時(shí)將電場(chǎng)施加到細(xì)胞上以增加細(xì)胞膜的滲透性，允許將化學(xué)藥物引入細(xì)胞中。電導(dǎo)入水光技術(shù)臨床適用范圍：①皮膚再生、修復(fù)、整形和年輕化治療（補(bǔ)水、嫩膚、美白、修復(fù)、抗衰、抗皺），頭皮護(hù)理，光化性角化病，痤瘡及多汗癥（肉毒毒素給藥）治療等；②減少脂肪堆積，預(yù)激光治療（利多卡因-表面麻醉），激素替代治療（類固醇），減少上臂內(nèi)側(cè)松弛，妊娠紋及橘皮組織修復(fù)等；③改善局部血液循環(huán)和運(yùn)動(dòng)不適，緩解疼痛，消散炎癥，治療頸椎病、肩周炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等風(fēng)濕病和風(fēng)濕后病變。

急性乳腺炎主要是指乳房部最為多見的急性化膿感染性疾病。因產(chǎn)后婦女的抵抗力嚴(yán)重下降,在出現(xiàn)乳汁淤積、乳頭破損、乳管浸入乳房等情況后均會(huì)導(dǎo)致乳腺出現(xiàn)繼發(fā)感染,并因此導(dǎo)致該病發(fā)生,多出現(xiàn)在哺乳期早期階段[1]。中醫(yī)認(rèn)為哺乳期早期乳腺炎應(yīng)歸屬于“郁滯期乳癰”的范疇,多以推拿療法、外治法、針刺療法等為主要治療手段,而推拿療法是哺乳期早期乳腺炎最常見的一種特色治療方法?，F(xiàn)結(jié)合我院接診的哺乳期早期乳腺炎患者,對(duì)揉散法聯(lián)合理療治療的方法及效果,做如下總結(jié)。

2.5 kHz均衡脈沖電流，單向波形電流范圍0.5～5 mA，單個(gè)子脈沖工作5 ms，散熱間隔時(shí)間15 ms，散熱時(shí)間較長(zhǎng)，不會(huì)產(chǎn)生熱積累，杜絕灼傷現(xiàn)象。需要離子性、帶電荷的化學(xué)藥物，根據(jù)直流電場(chǎng)內(nèi)同性電荷相斥，異性電荷相吸的原理，使藥物離子通過完整的皮膚或黏膜導(dǎo)入人體。電導(dǎo)入水光技術(shù)雖然在形狀上和電穿孔的脈沖波相似，但是在脈沖數(shù)值、脈沖時(shí)間、電學(xué)特征等方面是完全不同的。這種脈沖波可以增加皮膚的通透性，可以傳遞傳統(tǒng)離子電泳方式下無法傳遞的藥物，即使是患者皮膚上的平均電流值為零。德瑪莎水光機(jī)則是利用負(fù)壓技術(shù)將皮膚提起，然后多針頭將藥物等注射到皮下，離子、分子都能導(dǎo)入，導(dǎo)入效果和皮膚吸收較好，但治療舒適性稍欠，需要表面麻醉，并有一定的恢復(fù)期

。本研究分析地電導(dǎo)入水光技術(shù)進(jìn)一步改進(jìn)，輸出波形為均衡交流電壓波形，單向電流。單個(gè)子脈沖工作5 ms，散熱間隔時(shí)間15 ms。它允許大分子物質(zhì)-大于20 000 Dal的，如透明質(zhì)酸、膠原蛋白、彈性蛋白、維生素、氨基酸、肝素、抗炎藥等，成功地傳遞進(jìn)入到真皮層，無需使用攜帶凝膠或預(yù)充化合物（化學(xué)促滲劑），可以滿足患者個(gè)性化用藥的需求

。

電導(dǎo)入水光技術(shù)可以提供多元化的治療方案，傳遞藥物不同有多種治療效果，其技術(shù)優(yōu)勢(shì)如下：①既不會(huì)改變離子藥物溶液的pH值，也無離子藥物溶液本身的電解作用，正（+）離子、負(fù)（-）離子、微分子以及大分子物質(zhì)都可精準(zhǔn)控制和持續(xù)均勻地傳遞至皮膚；②和傳統(tǒng)的離子電泳相比，輸遞相同數(shù)量的離子藥物溶液，其更快速，且不需要任何皮膚pH平衡貼片，不會(huì)對(duì)皮膚造成任何刺激；③一個(gè)區(qū)域傳遞藥物，不像單針注射在一個(gè)點(diǎn)上傳遞藥物，可在更短地時(shí)間內(nèi)將藥物傳遞到整個(gè)區(qū)域使藥效發(fā)揮最大；④非侵入、無創(chuàng)、無痛、舒適、無恢復(fù)期、安全有效、可以無限頻次疊加和替代注射治療，尤其適用于對(duì)表面麻醉過敏和拒絕有創(chuàng)治療的人群。既往研究證實(shí)了電導(dǎo)入水光技術(shù)在透明質(zhì)酸和膠原蛋白等大分子在經(jīng)皮傳遞上具有很高的功效性，有效安全地改善了患者的面部皺紋

。此外，電導(dǎo)入水光技術(shù)也可以提高其他生物制劑和藥物的有效性，如麻醉藥、消炎藥、抗感染藥和光敏劑，并有研究為使用電導(dǎo)入水光技術(shù)優(yōu)化疼痛管理、面部嫩膚除皺、治療腋下多汗和減脂等方面的治療效果提供了分析數(shù)據(jù)。

綜上可見，電導(dǎo)入水光技術(shù)具有與德瑪莎水光技術(shù)相似的、甚至更優(yōu)的、促進(jìn)透明質(zhì)酸透皮吸收效果，有望獲得可靠和滿意的臨床療效。

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