• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    氰氟蟲腙干擾斑馬魚(Danio rerio)魚鰾的發(fā)育

    2022-09-28 08:08:24陳鑫李文華
    生態(tài)毒理學(xué)報(bào) 2022年3期
    關(guān)鍵詞:魚鰾幼魚斑馬魚

    陳鑫,李文華

    分子藥物教育部工程研究中心,福建省分子醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廈門市海洋與基因工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院,廈門 361021

    氰氟蟲腙(metaflumizone,C24H16F6N4O2)是由德國(guó)巴斯夫公司開發(fā)的一種縮氨基脲類殺蟲劑[1],它通過阻斷昆蟲中的鈉離子通道,抑制昆蟲的神經(jīng)活動(dòng),從而使昆蟲出現(xiàn)麻痹、癱瘓等癥狀[2]。截至2017年1月底,8個(gè)氰氟蟲腙產(chǎn)品在我國(guó)獲得批準(zhǔn)登記,其中包含2個(gè)原藥,6個(gè)農(nóng)藥制劑,主要用于十字花科蔬菜和水稻等作物的病蟲害防治[3]。

    氰氟蟲腙對(duì)哺乳動(dòng)物的急性毒性較低(口服LD50>5 000 mg·kg-1·d-1)[4-5],在長(zhǎng)期慢性毒性研究中,氰氟蟲腙對(duì)哺乳動(dòng)物大鼠、小鼠和狗也都表現(xiàn)出較低的毒性,且沒有發(fā)現(xiàn)其對(duì)哺乳動(dòng)物具有致癌性[6]。此外,多代生殖毒性研究表明氰氟蟲腙對(duì)哺乳動(dòng)物的后代沒有毒性。然而,氰氟蟲腙對(duì)包括魚類和水生無脊椎動(dòng)物在內(nèi)的水生物種卻有一定的毒性影響[4-5]。氰氟蟲腙對(duì)虹鱒魚(Oncorhynchusmykiss)和鱸鯉(Cyprinodonvariegates)的96 h半致死濃度分別為>0.228 mg·L-1和>0.257 mg·L-1[4-5]。同時(shí),氰氟蟲腙對(duì)糠蝦(Americamysisbahia)和東部牡蠣(Crassostreavirginica)的96 h半數(shù)效應(yīng)濃度分別為>0.289 mg·L-1和>0.136 mg·L-1[4-5]。目前尚沒有其他較深入的關(guān)于氰氟蟲腙對(duì)水生生物毒性及致毒機(jī)理等的研究報(bào)道。有研究表明,同為縮氨基脲類殺蟲劑的茚蟲威暴露能夠引起斑馬魚出現(xiàn)心包水腫、心率下降及細(xì)胞凋亡等現(xiàn)象[7-8]。目前,對(duì)氰氟蟲腙的研究主要集中在藥效和藥物殘留等方面,而關(guān)于其對(duì)水生生物(例如魚類)的毒理學(xué)信息仍是有限的。

    與此同時(shí),氰氟蟲腙在土壤和水體沉積物系統(tǒng)等生態(tài)環(huán)境中具有較高環(huán)境持久性。歐洲食品安全局曾報(bào)道氰氟蟲腙在土壤中的半衰期為141 d,在水體沉積物系統(tǒng)中的半衰期為451 d[4-5]。農(nóng)藥施用后往往會(huì)導(dǎo)致其在土壤和農(nóng)作物中殘留,同時(shí)也會(huì)隨著雨水沖刷進(jìn)入水生態(tài)系統(tǒng)[9]。因此,氰氟蟲腙對(duì)水生態(tài)系統(tǒng)造成的危害不容忽視,而數(shù)量龐大的有鰾魚類是水生態(tài)系統(tǒng)中的重要生物。魚鰾作為重要的功能器官,其發(fā)育及充氣過程極易受到環(huán)境污染物的干擾[10]。

    斑馬魚作為一種常見的模式生物,目前已被廣泛用于殺蟲劑等農(nóng)藥的毒性評(píng)估[11-12]。在本研究中,將斑馬魚胚胎暴露于氰氟蟲腙(0.1、1和10 μmol·L-1)中,記錄并分析了不同發(fā)育時(shí)期胚胎的存活率、孵化率和畸形率,同時(shí)對(duì)斑馬魚幼魚的魚鰾組織進(jìn)行病理學(xué)分析,并對(duì)魚鰾發(fā)育相關(guān)的關(guān)鍵標(biāo)記基因的表達(dá)進(jìn)行深入研究??傮w而言,本研究結(jié)果將為氰氟蟲腙廣泛使用所帶來生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估提供更多的毒理學(xué)證據(jù)。

    1 材料與方法(Materials and methods)

    1.1 化學(xué)品和試劑

    氰氟蟲腙,分子式為C24H16F6N4O2,CAS No.139968-49-3,純度≥97%,購(gòu)自加拿大多倫多研究化學(xué)品公司;麻醉劑MS-222購(gòu)自中國(guó)上海拜德醫(yī)藥科技有限公司。多聚甲醛購(gòu)自Sigma公司;蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒購(gòu)自中國(guó)碧云天生物技術(shù)有限公司;地高辛RNA標(biāo)記試劑盒(SP6/T7)和抗-digoxigenin-AP Fab fragments購(gòu)自德國(guó)Roche公司;BCIP/NBT顯色試劑盒購(gòu)自中國(guó)碧云天生物技術(shù)有限公司;助溶劑二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)為分析純,購(gòu)自Biosharp公司。

    1.2 斑馬魚和氰氟蟲腙暴露

    野生型成體斑馬魚(AB品系)飼養(yǎng)于上海海圣公司生產(chǎn)的獨(dú)立養(yǎng)殖循環(huán)水系統(tǒng)中,水溫保持在(28±0.5) ℃,成魚飼喂新鮮孵化的豐年蝦,每天3次。將成年雌雄斑馬魚(1只雌性和4只雄性)分隔開放在同一產(chǎn)卵箱中過夜,并在第2天燈亮?xí)r將隔離板移開讓其追逐產(chǎn)卵。

    氰氟蟲腙粉末溶解于DMSO中配制成10 g·L-1的母液,然后避光存放。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,設(shè)置了3個(gè)濃度梯度,分別為0.1 μmol·L-1(低濃度暴露組)、1 μmol·L-1(中濃度暴露組)和10 μmol·L-1(高濃度暴露組)。按照OECD準(zhǔn)則[13],在體視顯微鏡(德國(guó)Leica公司,M205FA)下隨機(jī)挑選處在囊胚期(受精后3 h)的健康胚胎用于藥物暴露。在90 mm培養(yǎng)皿中,每組隨機(jī)放置70個(gè)胚胎。每個(gè)暴露濃度設(shè)置3個(gè)平行,空白對(duì)照組加入0.05%的DMSO。在整個(gè)暴露期間,每天更換一次暴露溶液。

    所有實(shí)驗(yàn)方案均得到華僑大學(xué)動(dòng)物保護(hù)委員會(huì)與福利委員會(huì)的批準(zhǔn)與支持。

    1.3 氰氟蟲腙實(shí)際濃度的測(cè)定

    利用高效液相色譜(德國(guó)Agilent公司,Agilent Technologies 1260 Infinity)對(duì)培養(yǎng)皿中氰氟蟲腙的暴露濃度進(jìn)行檢測(cè),每次進(jìn)樣體積為15 μL。在檢測(cè)過程中使用C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流動(dòng)相為甲醇和水(V∶V=75∶25),流速為1.0 mL·min-1,檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm。

    1.4 表型分析

    在受精后24、48、72和96 h分別記錄斑馬魚胚胎存活率、畸形率,在受精后48、72和96 h記錄胚胎孵化率。同時(shí),在受精后96 h,將斑馬魚幼魚用0.03% MS-222進(jìn)行麻醉和拍照,使用顯微鏡Leica Application Suite X軟件計(jì)算魚鰾的垂直長(zhǎng)度和體長(zhǎng)(德國(guó)Leica公司,LAS X)。

    1.5 組織病理學(xué)分析

    在幼魚麻醉后,取受精后96 h的幼魚(n=12)放置于4%的多聚甲醛溶液中進(jìn)行固定,然后包埋于石蠟中進(jìn)行切片。切片的厚度為3~5 μm。伊紅和蘇木素染色(hematoxylin and eosin staining,HE)按照試劑盒內(nèi)的操作手冊(cè)進(jìn)行。染色完成后使用倒置顯微鏡(德國(guó)Zeiss公司,Axio Observer)觀察并拍照。

    1.6 胚胎整體原位雜交

    設(shè)計(jì)基因pbx1a[14](GenBank:AJ245962.1)、anxa5b[15-16](GenBank:BC046873.1)、elovl1a[16](GenBank:NM_001005989.3)和hprt1l[17](GenBank:NM_001002056.1)含有T7啟動(dòng)子的探針引物,引物序列如表1所示。使用地高辛標(biāo)記的RNA標(biāo)記試劑盒合成上述基因的RNA探針,具體操作方法見說明書。胚胎整體原位雜交的操作過程按照Thisse和Thisse[18]建立的方法進(jìn)行。

    表1 探針引物序列Table 1 The primers used for probe amplification

    簡(jiǎn)而言之,將預(yù)雜交后的胚胎(每一個(gè)探針中的對(duì)照組與暴露組各包含10~15個(gè)胚胎)與上述反義RNA探針在60 ℃雜交過夜。第2天,使用預(yù)熱的梯度雜交緩沖液清洗胚胎并進(jìn)行封閉,然后,將胚胎孵育在抗體溶液中4 ℃孵育過夜。第3天,使用緩沖液進(jìn)行洗滌,然后用BCIP/NBT顯色試劑盒進(jìn)行避光染色。在顯色過程中,注意觀察顯色情況。當(dāng)顯色完成后使用甲醇進(jìn)行梯度脫色,脫色完成后將胚胎置于甘油中透化過夜。

    1.7 統(tǒng)計(jì)分析

    本實(shí)驗(yàn)使用Statistic Package for Social Science (SPSS)25.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SEM)。氰氟蟲腙處理組和對(duì)照組之間斑馬魚胚胎的存活率、孵化率、畸形率以及幼魚魚鰾大小和體長(zhǎng)采用單因素方差分析法(one-way analysis of variance,ANOVA)選擇最小顯著性差異法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P<0.05表示具有顯著性差異。

    2 結(jié)果(Results)

    2.1 暴露水體中氰氟蟲腙實(shí)際濃度測(cè)定

    采用高效液相色譜儀檢測(cè)了0.1、1和10 μmol·L-1受試組中氰氟蟲腙藥物的實(shí)際濃度。氰氟蟲腙0.1、1和10 μmol·L-1處理組對(duì)應(yīng)的水體中氰氟蟲腙藥物的實(shí)際濃度分別為(0.091±0.003)、(0.982±0.005)和(10.020±0.034) μmol·L-1。同時(shí),對(duì)照組中的氰氟蟲腙實(shí)際濃度低于檢測(cè)限。

    2.2 氰氟蟲腙影響斑馬魚早期發(fā)育

    為了評(píng)估氰氟蟲腙對(duì)斑馬魚早期胚胎發(fā)育的影響,首先將斑馬魚胚胎暴露于0.1、1和10 μmol·L-1氰氟蟲腙中,暴露周期為4 d。從受精后24 h至受精后96 h,與對(duì)照組相比,3個(gè)濃度的氰氟蟲腙處理(0.1、1和10 μmol·L-1)都不會(huì)影響斑馬魚胚胎的存活率(圖1(a))。然而,最高濃度的氰氟蟲腙(10 μmol·L-1)處理會(huì)顯著降低斑馬魚胚胎在受精后48 h和72 h的孵化率(P<0.01,圖1(b)),同時(shí)這種高濃度誘導(dǎo)的孵化延遲現(xiàn)象在受精后96 h恢復(fù)正常。此外,3個(gè)濃度的氰氟蟲腙處理(0.1、1和10 μmol·L-1)在受精后24、48和72 h,都沒有觀察到明顯的畸形現(xiàn)象(例如心包水腫、卵黃囊腫和脊柱彎曲)。然而,在受精后96 h高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙處理后,觀察到幼魚魚鰾充氣不全這一明顯的畸形現(xiàn)象(圖1(c)和圖2(a)~(d))。

    圖1 氰氟蟲腙對(duì)斑馬魚早期發(fā)育的毒性作用注:(a)存活率,(b)孵化率,(c)畸形率;Con代表二甲基亞砜(DMSO)處理的對(duì)照組,誤差線表示為至少3次重復(fù)的平均值(Mean±SEM)的平均標(biāo)準(zhǔn)誤差;與對(duì)照組相比,***P<0.001、**P<0.01。Fig.1 The toxic effects of metaflumizone on zebrafish embryosNote:(a) Survival rate,(b) Hatching rate,(c) Malformation rate;Con represents control,treated with dimethyl sulfoxide (DMSO) only;error bars represent mean standard error of the mean (Mean±SEM) of at least three replicates;compared with the control,***P<0.001,**P<0.01.

    圖2 氰氟蟲腙影響斑馬魚幼魚魚鰾發(fā)育注:(a)~(d) 對(duì)照組、0.1 μmol·L-1、1 μmol·L-1和10 μmol·L-1氰氟蟲腙處理組在受精后96 h幼魚的側(cè)面圖,(e) 受精后96 h幼魚魚鰾的垂直長(zhǎng)度,(f) 受精后96 h幼魚的體長(zhǎng),(g)~(j) 對(duì)照組、0.1 μmol·L-1、1 μmol·L-1、10 μmol·L-1氰氟蟲腙處理組在受精后96 h進(jìn)行HE染色的幼魚魚鰾矢狀切面;Con表示DMSO處理的對(duì)照組;黃圈指示魚鰾位置;(a)~(d) 比例尺=500 μm;(g)~(j) 比例尺=200 μm;與對(duì)照組相比,***P<0.001,**P<0.01。Fig.2 Effects of metaflumizone on the swim bladder development in zebrafish larvaeNote:(a)~(d) Lateral views of control,0.1 μmol·L-1,1 μmol·L-1,10 μmol·L-1 metaflumizone-treated larvae at 96 hpf,(e) Swim bladder vertical lengths of larvae at 96 hpf,(f) Body length of larvae at 96 hpf,(g)~(j) Sagittal section of the swim bladders in H&E stained control,0.1 μmol·L-1,1 μmol·L-1,10 μmol·L-1 metaflumizone-treated larvae at 96 hpf;Con represents DMSO treated groups;yellow circle indicates the position of swim bladder;(a)~(d) Scale bar=500 μm;(g)~(j) Scale bar=200 μm;compared with the control,***P<0.001,**P<0.01.

    2.3 氰氟蟲腙干擾斑馬魚胚胎的魚鰾發(fā)育

    利用Leica Application Suite X軟件測(cè)量了各組間魚鰾的大小和體長(zhǎng)。對(duì)照組、低濃度(0.1 μmol·L-1)、中濃度(1 μmol·L-1)和高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙處理組中幼魚的魚鰾平均垂直大小分別為(0.243±0.023) mm (n=31)、(0.243±0.026) mm (n=23)、(0.247±0.033) mm (n=27)和(0.175±0.039) mm (n=41)(圖2(e))。同時(shí),對(duì)照組、低濃度、中濃度和高濃度處理組幼魚的體長(zhǎng)分別為(4.436±0.086) mm (n=36)、(4.438±0.101) mm (n=28)、(4.418±0.108) mm (n=34)和(4.353±0.127) mm (n=41) (圖2(f))。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,檢測(cè)到無論是魚鰾大小還是體長(zhǎng),高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙處理組中都出現(xiàn)了顯著性減少的現(xiàn)象(圖2(e)和圖2(f))。然后,在組織病理學(xué)水平上對(duì)幼魚魚鰾的變化進(jìn)行深入探究,HE染色結(jié)果顯示高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙暴露改變了魚鰾的整體結(jié)構(gòu)(圖2(g)~(j))。在對(duì)照組和低中濃度氰氟蟲腙處理組(0.1 μmol·L-1和1 μmol·L-1)中,觀察到有明顯充氣的魚鰾結(jié)構(gòu)(圖2(g)~(i),黃圈),而在高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙處理的幼魚中,魚鰾未充氣且不規(guī)則的魚鰾內(nèi)部填充有大量細(xì)胞(圖2(j))。

    2.4 氰氟蟲腙影響魚鰾標(biāo)記基因的表達(dá)

    為了深入探究氰氟蟲腙對(duì)斑馬魚魚鰾發(fā)育和充氣的影響,合成了地高辛標(biāo)記的魚鰾標(biāo)記基因的探針,采用胚胎整體原位雜交實(shí)驗(yàn),檢測(cè)了氰氟蟲腙處理后魚鰾標(biāo)記基因的表達(dá)水平(圖3)。基因pbx1a在發(fā)育早期表達(dá)于魚鰾原基[14],與對(duì)照組相比,在受精后36 h中濃度、高濃度氰氟蟲腙處理組(1 μmol·L-1和10 μmol·L-1)的pbx1a表達(dá)的藍(lán)紫色信號(hào)強(qiáng)度明顯減弱(圖3(a)~(d))。

    圖3 氰氟蟲腙影響魚鰾發(fā)育標(biāo)記基因的表達(dá)圖式注:(a)~(d)基因pbx1a在受精后36 h的表達(dá)圖式,(e)~(h)基因anxa5b在受精后72 h的表達(dá)圖式,(i)~(l)基因elov1a在受精后72 h的表達(dá)圖式,(m)~(p)基因hprt1l在受精后72 h的表達(dá)圖式,(a)~(d)和(m)~(p)是側(cè)視圖,(e)~(h)和(i)~(l)是背視圖;Con代表DMSO處理的對(duì)照組;紅色箭頭指示信號(hào)減弱的位置。Fig.3 Metaflumizone impairs the expressions of swim bladder markersNote:(a)~(d) Expression of the pbx1a gene at 36 hpf,(e)~(h) Expression of the anxa5b gene at 72 hpf,(i)~(l) Expression of the elov1a gene at 72 hpf,(m)~(p) Expression of the hprt1l gene at 72 hpf,(a)~(d) and (m)~(p) were lateral views,(e)~(h) and (i)~(l) were dorsal views;Con represents DMSO treated groups;the red arrows indicate the positions where the signals decreased.

    基因anxa5b、elovl1a和hprt1l參與魚鰾的間皮層分化[17,19]。胚胎整體原位雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在對(duì)照組中基因anxa5b、elovl1a和hprt1l均表達(dá)于魚鰾位置(圖3(e)~(h)、圖3(i)~(l)和圖3(m)~(p))。在各個(gè)濃度氰氟蟲腙處理組中,anxa5b的表達(dá)圖式都沒有發(fā)生變化(圖3(e)~(h));對(duì)于基因elovl1a和hprt1l,高濃度(10 μmol·L-1)處理組中這2個(gè)基因的表達(dá)量顯著下調(diào)(圖3(i)~(l)和圖3(m)~(p))。

    3 討論(Discussion)

    殺蟲劑在使用過程中可能會(huì)通過地表徑流或淋洗進(jìn)入水體,對(duì)包括魚類在內(nèi)的水生生物構(gòu)成威脅[9,20]。氰氟蟲腙作為縮氨基脲類殺蟲劑,它通過阻斷神經(jīng)元鈉離子通道來抵御蟲害[1,21],近來氰氟蟲腙已在多個(gè)國(guó)家獲得批準(zhǔn)登記,并開始廣泛用于農(nóng)作物病蟲害的防治[22]。目前尚沒有關(guān)于氰氟蟲腙對(duì)水生生物毒性的相關(guān)研究報(bào)道。馮青等[7]和俞瑞鮮等[23]報(bào)道了與氰氟蟲腙作用機(jī)理相同的農(nóng)藥茚蟲威對(duì)模式生物斑馬魚的發(fā)育毒性研究,暗示該類藥物流入水環(huán)境勢(shì)必會(huì)對(duì)水生生物造成嚴(yán)重危害。在本研究中,以斑馬魚為研究對(duì)象,將斑馬魚胚胎暴露于氰氟蟲腙中,初步評(píng)估了氰氟蟲腙的發(fā)育毒性效應(yīng),該研究結(jié)果將為氰氟蟲腙對(duì)魚類的毒性評(píng)估提供重要依據(jù)。

    在本研究中,使用的氰氟蟲腙藥物濃度(0.1、1和10 μmol·L-1)不會(huì)引起斑馬魚胚胎或幼魚死亡,但會(huì)延遲孵化(圖1(a)和圖1(b)),在畸形方面除在受精后96 h觀察到魚鰾發(fā)育畸形之外,在整個(gè)暴露過程中均未觀察到常見的心包水腫、卵黃囊腫和脊椎彎曲等現(xiàn)象(圖1(c)和圖2(a)~(e))。魚鰾的發(fā)育是受到機(jī)體嚴(yán)格調(diào)控的一個(gè)復(fù)雜過程,作為有鰾魚類的重要器官,其主要功能是保持浮力、感知聲音和輔助呼吸等[24-25]。魚鰾的發(fā)育對(duì)化學(xué)污染物極其敏感,近年來,越來越多的研究報(bào)道稱環(huán)境污染物(如重金屬、磺胺嘧啶、雙酚AF和四溴雙酚A等)的暴露會(huì)影響魚鰾正常發(fā)育并最終引起魚鰾充氣異常等現(xiàn)象[26-30]。幼魚組織病理切片染色結(jié)果顯示高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙暴露后有大量細(xì)胞填充于未成形的魚鰾結(jié)構(gòu)中,這一現(xiàn)象與環(huán)境污染物如重金屬銅或殺蟲劑溴氰菊酯暴露所引起的魚鰾充氣異常現(xiàn)象類似[31-32]。因此,這些結(jié)果暗示氰氟蟲腙可能與銅或溴氰菊酯一樣,能特異性干擾斑馬魚魚鰾的發(fā)育過程,然而具體影響仍有待進(jìn)一步探究。

    斑馬魚的魚鰾發(fā)育過程主要包括3個(gè)階段,即出芽階段(受精后36~65 h)、伸長(zhǎng)階段(受精后65~96 h)和充氣階段(受精后96~120 h)[19]?;騪bx1a最早于受精后28 h表達(dá)于魚鰾原基,是魚鰾早期出芽階段發(fā)育調(diào)控的關(guān)鍵基因之一[14]。經(jīng)氰氟蟲腙暴露后,中濃度、高濃度氰氟蟲腙(1 μmol·L-1和10 μmol·L-1)暴露組在受精后36 h時(shí)pbx1a的表達(dá)量都明顯減少(圖3(a)~(d)),暗示氰氟蟲腙暴露后可能在發(fā)育早期(受精后36 h)就開始靶向干擾魚鰾發(fā)育。同時(shí),雖然中濃度(1 μmol·L-1)氰氟蟲腙暴露在受精后96 h未觀察魚鰾充氣異常,但中濃度(1 μmol·L-1)氰氟蟲腙暴露卻會(huì)在發(fā)育早期出芽階段影響pbx1a的表達(dá)(圖3(c))?;騛nxa5b、hprt1l和elovl1a是魚鰾組織間皮層發(fā)育過程中必不可少的基因[17,19]。原位雜交結(jié)果顯示這些基因在受精后72 h都表達(dá)于魚鰾上,并且經(jīng)高濃度(10 μmol·L-1)氰氟蟲腙處理后上述基因elovl1a和hprt1l的表達(dá)量均明顯減少(圖3(i)~(p))。綜上所述,這些結(jié)果暗示氰氟蟲腙對(duì)魚鰾的影響可能是起始于出芽階段,隨后影響到魚鰾的伸長(zhǎng)階段,最后影響魚鰾的充氣過程。根據(jù)已有研究報(bào)道,在發(fā)育過程中出現(xiàn)魚鰾發(fā)育受損或充氣不全現(xiàn)象將影響有鰾魚類的游泳性能和沉浮能力,乃至影響后期的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖等能力[25,33]。因此,氰氟蟲腙對(duì)非靶標(biāo)生物斑馬魚的影響不容忽視。

    此外,在本研究中還觀察到氰氟蟲腙暴露后體長(zhǎng)略有減少現(xiàn)象(圖2(f))。研究報(bào)道氧化鋅暴露同樣會(huì)引起斑馬魚魚鰾面積減少或者充氣功能受損,與此同時(shí)伴隨著一定程度的由于脊椎彎曲引起的斑馬魚幼魚體長(zhǎng)減少現(xiàn)象[34]。因此,推測(cè)氰氟蟲腙暴露在干擾斑馬魚魚鰾發(fā)育的同時(shí),可能也造成了不同程度的脊椎彎曲從而引起體長(zhǎng)改變,然而相關(guān)變化的具體原因仍有待進(jìn)一步分析。

    本研究揭示了氰氟蟲腙對(duì)斑馬魚魚鰾發(fā)育和魚鰾充氣的影響,為水生態(tài)環(huán)境中氰氟蟲腙的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供了相關(guān)的理論數(shù)據(jù)支撐。有關(guān)氰氟蟲腙暴露干擾斑馬魚魚鰾發(fā)育和魚鰾充氣的具體分子機(jī)制仍需要進(jìn)一步的研究。

    猜你喜歡
    魚鰾幼魚斑馬魚
    斑馬魚天生就能辨別數(shù)量
    小斑馬魚歷險(xiǎn)記
    鱘魚和草魚魚鰾酶溶性膠原蛋白的理化性質(zhì)比較
    鯊魚如何成為“海中霸王”
    瓜蔞不同部位對(duì)斑馬魚促血管生成及心臟保護(hù)作用
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:35
    魚鰾補(bǔ)腎丸改善男性精子DNA碎片指數(shù)的120例臨床觀察
    黃顙魚幼魚的賴氨酸需要量
    黃顙魚幼魚對(duì)飼料中維生素C的需要量
    不同溫度條件下褐菖鲉幼魚的耗氧率和排氨率
    幾種石油烴對(duì)斑馬魚的急性毒性效應(yīng)研究
    成人无遮挡网站| 日本黄色视频三级网站网址| 国产精品无大码| 精品午夜福利在线看| 嫩草影院新地址| 午夜精品在线福利| 国产在线精品亚洲第一网站| 免费av不卡在线播放| 国产三级在线视频| 国产精品三级大全| 国产成人aa在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 国产成人freesex在线 | 午夜爱爱视频在线播放| 中文字幕久久专区| 寂寞人妻少妇视频99o| 精华霜和精华液先用哪个| 哪里可以看免费的av片| 欧美色视频一区免费| 在线播放国产精品三级| 亚洲专区国产一区二区| 我的女老师完整版在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 午夜精品国产一区二区电影 | 伊人久久精品亚洲午夜| 美女免费视频网站| 超碰av人人做人人爽久久| 国产美女午夜福利| 成人一区二区视频在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 波多野结衣高清作品| 最后的刺客免费高清国语| 人妻久久中文字幕网| 午夜日韩欧美国产| 久久精品人妻少妇| 听说在线观看完整版免费高清| 人妻少妇偷人精品九色| 人人妻人人看人人澡| 国产成人精品久久久久久| 99久久精品热视频| 午夜老司机福利剧场| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 黄片wwwwww| 观看美女的网站| 国产亚洲欧美98| 中文资源天堂在线| 国产 一区精品| 俄罗斯特黄特色一大片| 性欧美人与动物交配| 免费av观看视频| 大型黄色视频在线免费观看| 激情 狠狠 欧美| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美日韩国产亚洲二区| 日本色播在线视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久久久国产网址| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久久久久久久久成人| 搡老岳熟女国产| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 久久久久性生活片| 日韩国内少妇激情av| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲最大成人av| 热99re8久久精品国产| 美女被艹到高潮喷水动态| av在线播放精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 性插视频无遮挡在线免费观看| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品久久电影中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美区成人在线视频| 99久久成人亚洲精品观看| 看片在线看免费视频| 网址你懂的国产日韩在线| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 少妇被粗大猛烈的视频| 九九热线精品视视频播放| 岛国在线免费视频观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 一个人观看的视频www高清免费观看| 午夜老司机福利剧场| 韩国av在线不卡| 晚上一个人看的免费电影| 欧美最黄视频在线播放免费| 又黄又爽又免费观看的视频| 永久网站在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| av免费在线看不卡| 九九热线精品视视频播放| 97热精品久久久久久| 成年免费大片在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 日日撸夜夜添| 成人性生交大片免费视频hd| 一本精品99久久精品77| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久久久久久久黄片| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲成人久久爱视频| 日韩欧美在线乱码| 色噜噜av男人的天堂激情| 一区二区三区免费毛片| 国产av麻豆久久久久久久| 又粗又爽又猛毛片免费看| 我要看日韩黄色一级片| 九九爱精品视频在线观看| 波野结衣二区三区在线| 国产成人福利小说| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日本成人三级电影网站| 色哟哟·www| a级毛色黄片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久久久久伊人网av| 亚洲欧美日韩高清专用| 国产午夜精品论理片| av国产免费在线观看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 色尼玛亚洲综合影院| 日本-黄色视频高清免费观看| 十八禁网站免费在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚州av有码| 国产片特级美女逼逼视频| 国产在线男女| 男女下面进入的视频免费午夜| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日韩欧美精品v在线| 欧美成人a在线观看| 老女人水多毛片| 亚洲成人久久性| 久久久精品94久久精品| 校园春色视频在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| 观看美女的网站| 亚洲第一电影网av| 亚洲av中文av极速乱| 一个人免费在线观看电影| 免费黄网站久久成人精品| 在线a可以看的网站| 国产高清视频在线观看网站| 久久99热6这里只有精品| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产精品一及| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久鲁丝午夜福利片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 少妇人妻精品综合一区二区 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲精品成人久久久久久| 毛片一级片免费看久久久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 色在线成人网| 国产欧美日韩一区二区精品| 日韩在线高清观看一区二区三区| 三级国产精品欧美在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 乱码一卡2卡4卡精品| 日韩在线高清观看一区二区三区| 精品熟女少妇av免费看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久久久久久大av| 国产黄色小视频在线观看| 1024手机看黄色片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 大香蕉久久网| 精华霜和精华液先用哪个| a级毛片a级免费在线| 久久韩国三级中文字幕| 欧美色欧美亚洲另类二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 丰满的人妻完整版| 床上黄色一级片| 性插视频无遮挡在线免费观看| 午夜激情欧美在线| 国内精品久久久久精免费| 亚洲成人av在线免费| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 最近手机中文字幕大全| 亚洲欧美精品综合久久99| 人人妻人人看人人澡| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲av.av天堂| 夜夜爽天天搞| 老司机午夜福利在线观看视频| 婷婷亚洲欧美| 国产黄a三级三级三级人| 少妇人妻精品综合一区二区 | 在线播放无遮挡| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 丰满乱子伦码专区| 国产在视频线在精品| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 精品久久久久久久久久久久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 免费搜索国产男女视频| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 精品一区二区三区av网在线观看| 日本色播在线视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产视频一区二区在线看| 成人特级av手机在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品野战在线观看| 国产成人91sexporn| 国产精品一区www在线观看| 中文资源天堂在线| 国产一区二区在线av高清观看| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久人人爽人人片av| 精品少妇黑人巨大在线播放 | av中文乱码字幕在线| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲,欧美,日韩| 高清日韩中文字幕在线| 如何舔出高潮| 高清日韩中文字幕在线| 午夜激情欧美在线| 小说图片视频综合网站| 一个人免费在线观看电影| 久久久精品大字幕| 亚洲美女视频黄频| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 午夜福利高清视频| 久久久久国内视频| 国产毛片a区久久久久| 亚洲自偷自拍三级| 国产亚洲精品久久久com| 久久草成人影院| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品一及| 99在线视频只有这里精品首页| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产午夜福利久久久久久| 欧美性猛交黑人性爽| 一级黄片播放器| 亚洲国产精品国产精品| 少妇高潮的动态图| 久久久精品欧美日韩精品| 99久久成人亚洲精品观看| 日本与韩国留学比较| 俺也久久电影网| 91狼人影院| 国产亚洲91精品色在线| 成年av动漫网址| 蜜臀久久99精品久久宅男| 日本欧美国产在线视频| 在线a可以看的网站| 免费看美女性在线毛片视频| av专区在线播放| 国产高清激情床上av| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲电影在线观看av| 岛国在线免费视频观看| 成人永久免费在线观看视频| 长腿黑丝高跟| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产精品久久久久久精品电影| 又爽又黄无遮挡网站| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲av成人av| 成人美女网站在线观看视频| 久久这里只有精品中国| 人妻久久中文字幕网| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲欧美清纯卡通| h日本视频在线播放| 嫩草影院精品99| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产高清激情床上av| 色视频www国产| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 伊人久久精品亚洲午夜| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲成av人片在线播放无| 美女黄网站色视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产中年淑女户外野战色| 日本黄大片高清| 欧美成人a在线观看| 国产午夜精品论理片| 久久精品综合一区二区三区| 成人综合一区亚洲| 亚洲综合色惰| 国产精品久久电影中文字幕| 男女下面进入的视频免费午夜| 99热这里只有是精品在线观看| 一区二区三区高清视频在线| 精品一区二区三区视频在线| 身体一侧抽搐| 国产精品嫩草影院av在线观看| 免费av不卡在线播放| а√天堂www在线а√下载| 97超碰精品成人国产| 99在线人妻在线中文字幕| 最近最新中文字幕大全电影3| 精品久久久久久久久亚洲| 热99re8久久精品国产| 精品一区二区三区人妻视频| 一本一本综合久久| 寂寞人妻少妇视频99o| 插阴视频在线观看视频| 国产精品1区2区在线观看.| 免费观看人在逋| 97超碰精品成人国产| 麻豆国产97在线/欧美| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 精品国产三级普通话版| 欧美极品一区二区三区四区| 一级a爱片免费观看的视频| 99热这里只有是精品在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 身体一侧抽搐| 99在线视频只有这里精品首页| 高清午夜精品一区二区三区 | 又爽又黄无遮挡网站| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久久国产成人免费| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久6这里有精品| 国产精品99久久久久久久久| 18禁在线播放成人免费| av在线亚洲专区| 亚洲精品国产成人久久av| 国产精品野战在线观看| 久久久精品94久久精品| 日韩欧美在线乱码| 欧美一区二区亚洲| 日韩成人伦理影院| 在线观看美女被高潮喷水网站| 91在线观看av| 欧美一区二区亚洲| 中文资源天堂在线| 午夜亚洲福利在线播放| 日本熟妇午夜| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 免费看光身美女| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲性久久影院| 露出奶头的视频| 亚洲丝袜综合中文字幕| www.色视频.com| 成人av在线播放网站| 国产免费一级a男人的天堂| 久久6这里有精品| 99热精品在线国产| 国产男人的电影天堂91| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲最大成人av| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美性感艳星| 欧美人与善性xxx| 免费观看人在逋| 内射极品少妇av片p| 欧美日韩乱码在线| 黄色一级大片看看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲电影在线观看av| 国产精华一区二区三区| 我的老师免费观看完整版| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产乱人视频| 韩国av在线不卡| 免费看a级黄色片| 国产亚洲欧美98| 少妇人妻一区二区三区视频| 午夜福利成人在线免费观看| 在线观看一区二区三区| 九九爱精品视频在线观看| 热99在线观看视频| 亚洲国产精品国产精品| 日韩三级伦理在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 看黄色毛片网站| 嫩草影院精品99| 中文资源天堂在线| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩精品中文字幕看吧| 成人无遮挡网站| 亚洲国产高清在线一区二区三| 禁无遮挡网站| 日韩欧美 国产精品| 亚洲国产色片| 99国产极品粉嫩在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 黄片wwwwww| 亚洲图色成人| 国产成年人精品一区二区| 亚洲在线自拍视频| 精品久久国产蜜桃| 色5月婷婷丁香| а√天堂www在线а√下载| 欧美不卡视频在线免费观看| 亚洲av免费在线观看| 国产探花在线观看一区二区| 久久久久久大精品| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 两个人视频免费观看高清| 亚洲av二区三区四区| 午夜福利在线观看吧| 在线天堂最新版资源| 男人的好看免费观看在线视频| 国内精品美女久久久久久| 乱系列少妇在线播放| 欧美又色又爽又黄视频| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 久久亚洲精品不卡| 在线播放国产精品三级| 波多野结衣高清作品| a级一级毛片免费在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲,欧美,日韩| 69av精品久久久久久| .国产精品久久| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产真实乱freesex| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久久草成人影院| 亚洲美女视频黄频| 亚洲av成人精品一区久久| 精品久久国产蜜桃| 波多野结衣巨乳人妻| 乱人视频在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 欧美中文日本在线观看视频| 最新中文字幕久久久久| 日本一本二区三区精品| 露出奶头的视频| 免费看光身美女| 久久午夜福利片| 日本黄色视频三级网站网址| 51国产日韩欧美| 日本色播在线视频| 精品久久久久久久久久久久久| 波多野结衣高清作品| 午夜日韩欧美国产| 免费人成视频x8x8入口观看| 永久网站在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 色噜噜av男人的天堂激情| 一本精品99久久精品77| 国产精品日韩av在线免费观看| 18+在线观看网站| 久久6这里有精品| 亚洲中文字幕日韩| 三级毛片av免费| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 精品久久国产蜜桃| 伊人久久精品亚洲午夜| 免费观看的影片在线观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久99热这里只有精品18| 亚洲在线自拍视频| 最近视频中文字幕2019在线8| 伊人久久精品亚洲午夜| 一本久久中文字幕| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 色av中文字幕| 波多野结衣高清作品| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| av.在线天堂| 国产中年淑女户外野战色| 午夜a级毛片| 亚洲在线观看片| 黄色视频,在线免费观看| 99久久九九国产精品国产免费| 国内精品宾馆在线| 午夜影院日韩av| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲欧美日韩东京热| 最近手机中文字幕大全| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 波多野结衣高清作品| 亚洲无线观看免费| 亚洲va在线va天堂va国产| 欧美+亚洲+日韩+国产| 成熟少妇高潮喷水视频| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久久久久久久成人| 俺也久久电影网| 欧美又色又爽又黄视频| 直男gayav资源| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久久久国产网址| 日韩亚洲欧美综合| 精华霜和精华液先用哪个| 国产精品一区二区免费欧美| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产熟女欧美一区二区| 少妇熟女欧美另类| 日韩制服骚丝袜av| 午夜视频国产福利| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 91精品国产九色| 亚州av有码| 久久av网站| 一级毛片我不卡| 最新的欧美精品一区二区| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国国产精品蜜臀av免费| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 在现免费观看毛片| 午夜av观看不卡| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产男女超爽视频在线观看| 日韩一区二区三区影片| 国产成人免费观看mmmm| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲综合精品二区| 日本与韩国留学比较| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 我要看日韩黄色一级片| 国产av码专区亚洲av| 99热这里只有是精品在线观看| av免费在线看不卡| 高清视频免费观看一区二区| 国产精品久久久久成人av| 国产真实伦视频高清在线观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| av天堂久久9| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品一二三区在线看| 色吧在线观看| 欧美人与善性xxx| 大香蕉97超碰在线| 哪个播放器可以免费观看大片| 男人添女人高潮全过程视频| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲av欧美aⅴ国产| 熟妇人妻不卡中文字幕| av一本久久久久| 大陆偷拍与自拍| 性色av一级| 亚洲自偷自拍三级| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 欧美精品亚洲一区二区| 国产一区二区在线观看av| 国产午夜精品一二区理论片| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲av中文av极速乱| 高清在线视频一区二区三区| 97在线视频观看| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产精品国产三级国产专区5o| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲欧美清纯卡通| 免费观看a级毛片全部| 精品一品国产午夜福利视频| av国产久精品久网站免费入址| 只有这里有精品99| 成人美女网站在线观看视频| 久久 成人 亚洲| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 精品人妻一区二区三区麻豆| 色视频在线一区二区三区| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美xxⅹ黑人| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 搡老乐熟女国产| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产91av在线免费观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美成人精品欧美一级黄| 免费av中文字幕在线| 插逼视频在线观看| 18禁动态无遮挡网站| 精品久久国产蜜桃| 国产av精品麻豆| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 高清av免费在线| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲av综合色区一区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 久久国产精品大桥未久av | 色婷婷av一区二区三区视频|