采集時(shí)間延長對(duì)全血制備懸浮紅細(xì)胞質(zhì)量的影響

杜明儀 盧少芬 陳雪英 黃志瓊 黎淑怡

近幾年,采集血液的形式由有償賣血逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o償獻(xiàn)血,同時(shí)臨床用血也由輸全血的形式轉(zhuǎn)變?yōu)槌煞州斞?］,即通過物理或化學(xué)等手段將全血的各個(gè)成分分離開,主要包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、血漿,成分輸血具有純度高、容量小、療效好等優(yōu)點(diǎn),可以根據(jù)患者的具體病情和具體需要,有針對(duì)性的進(jìn)行成分輸血［2,3］。但是在血液采集的過程中,由于獻(xiàn)血對(duì)象的性別和年齡、采血室內(nèi)的環(huán)境、采血方式以及采血醫(yī)護(hù)人員的采血技術(shù)等因素的影響,會(huì)導(dǎo)致血液采集的時(shí)間有所延長,從而影響血液樣本的質(zhì)量［4-6］。本研究選取不同采集時(shí)間的100 袋全血,收集血液樣本,探究采集時(shí)間延長對(duì)全血制備懸浮紅細(xì)胞質(zhì)量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年6 月～2021 年1 月采集時(shí)間>13 min(采集時(shí)間延長)的400 ml 附有《采血環(huán)節(jié)待判定血液評(píng)價(jià)和處置記錄表》的全血50 袋作為研究組,另選取采集時(shí)間<10 min(采集時(shí)間正常)的400 ml 全血50 袋作為對(duì)照組。

1.2 儀器與試劑 大容量低溫離心機(jī)(德國賀利氏)；Sepamatic-SL(Ⅲ)全自動(dòng)血液成分分離機(jī)(德國LMB)；游離Hb 試劑盒、游離總蛋白試劑盒；722 型光柵分光光度計(jì)；血細(xì)胞分析用溶血?jiǎng)㎝-3 cFL LYSE、MEK-3D 血細(xì)胞分析儀用稀釋液和血細(xì)胞分析儀用沖洗液；全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀BC-3000Plus；恒溫水浴箱。

1.3 方法 全血采集標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程：200 ml 全血要求在5 min 內(nèi)采完；300 ml 全血要求在8 min 內(nèi)采完；400 ml 全血要求在10 min 內(nèi)采完。如不能在規(guī)定時(shí)間內(nèi)采集完畢,需在全血袋上做好標(biāo)識(shí)并隔離,填寫《采血環(huán)節(jié)待判定血液評(píng)價(jià)和處置記錄表》,與成分制備人員做好交接,注意觀察該袋血液有無凝塊。兩組按照制備懸浮紅細(xì)胞或去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞和血漿標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程制備,在接收、離心、分離、熱合及交付的各個(gè)環(huán)節(jié)應(yīng)對(duì)每袋血液進(jìn)行目視檢查,對(duì)采集時(shí)間過長的全血進(jìn)行標(biāo)識(shí),核對(duì)血液的流水號(hào)、規(guī)格、容量是否與附表信息一致,經(jīng)過離心后,用全自動(dòng)血液成分分離機(jī)制備,待紅細(xì)胞保養(yǎng)液添加到母袋后,熱合斷開血漿袋,取下前在母袋近血端約3 cm 處用有色止血夾夾緊,阻斷紅細(xì)胞返流回子袋。將母袋血平放,讓紅細(xì)胞緩慢流向子袋,方便檢查是否有凝塊,若無凝塊返流回母袋則熱合去掉子袋,如子袋有血液凝塊保留則熱合去掉母袋并核對(duì)血液流水號(hào),填寫《采血環(huán)節(jié)待判定血液評(píng)價(jià)和處置記錄表》。兩組均留取樣本。

1.4 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 比較兩組全血制備懸浮紅細(xì)胞的樣本質(zhì)量,主要包括：①紅細(xì)胞外觀形態(tài)：紅細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)雙凹圓盤狀,且紅細(xì)胞大小均一,直徑6～9 μm,平均直徑7.5 μm,為正常紅細(xì)胞形態(tài)；②HCT達(dá)標(biāo)情況：HCT 在0.40～0.60 范圍內(nèi)的樣本為達(dá)標(biāo)樣本；③Hb 達(dá)標(biāo)情況：根據(jù)采血量的體積進(jìn)行計(jì)算,400 ml全血所制備的懸浮紅細(xì)胞中Hb 含量≥36 g 的樣本為達(dá)標(biāo)樣本；④儲(chǔ)存期末溶血率：計(jì)算兩組全血制備懸浮紅細(xì)胞的儲(chǔ)存期末溶血率,計(jì)算公式為：儲(chǔ)存期末溶血率=［(1-HCT)×血漿或上清液游離Hb 濃度］/總Hb 濃度×100%,儲(chǔ)存期末溶血率<0.8%的樣本為達(dá)標(biāo)樣本。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組紅細(xì)胞外觀形態(tài)正常率、HCT 達(dá)標(biāo)率、Hb達(dá)標(biāo)率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。研究組儲(chǔ)存期末溶血率達(dá)標(biāo)率明顯低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組全血制備懸浮紅細(xì)胞質(zhì)量比較［n(%)］

3 討論

有研究顯示,采血方式、采血量、性別、年齡段、采血環(huán)境、采血護(hù)士技術(shù)水平均為全血采集時(shí)間延長的影響因素,而全血采集時(shí)間延長易形成血液凝塊,降低相應(yīng)血液成分的質(zhì)量。本研究結(jié)果顯示,兩組紅細(xì)胞外觀形態(tài)正常率、HCT 達(dá)標(biāo)率、Hb 達(dá)標(biāo)率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。說明采血時(shí)間延長對(duì)于全血制備的懸浮紅細(xì)胞的紅細(xì)胞形態(tài)、HCT 達(dá)標(biāo)率及Hb 達(dá)標(biāo)率幾乎沒有影響。研究組儲(chǔ)存期末溶血率達(dá)標(biāo)率明顯低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說明采集時(shí)間延長會(huì)加重懸浮紅細(xì)胞樣本的儲(chǔ)存期末溶血情況,降低懸浮紅細(xì)胞樣本的質(zhì)量。溶血的發(fā)生是由于紅細(xì)胞膜破裂,從而導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)的Hb釋放出來［7］。全血的采集時(shí)間延長可能會(huì)在采集過程中出現(xiàn)血液凝集,對(duì)血液的質(zhì)量有一定的影響［8-10］,導(dǎo)致其制備而成的懸浮紅細(xì)胞儲(chǔ)存期末溶血率有所升高。

根據(jù)相關(guān)研究結(jié)果表明,采集后的全血在放置一段時(shí)間后再進(jìn)行離心制備成懸浮紅細(xì)胞,也會(huì)增高其儲(chǔ)存期末溶血率［11-13］。在我國,多數(shù)血庫懸浮紅細(xì)胞的儲(chǔ)存時(shí)間≤35 d［11］,且儲(chǔ)存期末的懸浮紅細(xì)胞應(yīng)用于臨床后,產(chǎn)生輸血反應(yīng)的發(fā)生率較高。因?yàn)榧t細(xì)胞在離開身體后,會(huì)隨著其放置時(shí)間的延長而增高紅細(xì)胞膜的滲透脆性,樣本在經(jīng)過離心等操作后,紅細(xì)胞膜破裂的幾率會(huì)增高,進(jìn)而溶血率提高,從而影響懸浮紅細(xì)胞的質(zhì)量［14-16］。因此為了減少血液資源的浪費(fèi)和輸血不良反應(yīng)的發(fā)生,對(duì)采血時(shí)間過長的全血制備成的懸浮紅細(xì)胞應(yīng)根據(jù)血液質(zhì)量降低儲(chǔ)存期限,盡早應(yīng)用于臨床輸血。

綜上所述,采集時(shí)間延長的全血樣本制備的懸浮紅細(xì)胞,其紅細(xì)胞形態(tài)、HCT 達(dá)標(biāo)率及Hb 達(dá)標(biāo)率沒有影響,但是會(huì)加重儲(chǔ)存期末溶血情況,影響懸浮紅細(xì)胞的質(zhì)量,因此全血采集的時(shí)間應(yīng)該盡量控制在標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間內(nèi)。