佛山地區(qū)無償獻(xiàn)血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查及鑒定結(jié)果研究

卓創(chuàng)近 伍偉健 招淑文

不規(guī)則抗體是指在妊娠、輸血/血液制品、注射、無覺察免疫刺激等多種因素的影響下,促使機(jī)體產(chǎn)生抗-E、抗-M 等類型的紅細(xì)胞血型抗體［1］。一般情況下,若獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)的血液中含有一些不規(guī)則抗體,輸血前會(huì)對血型鑒定、交叉配血等結(jié)果造成較大的影響,導(dǎo)致其結(jié)果不準(zhǔn)確［2］。如果患者輸注的血液中或者血液制品中含有不規(guī)則抗體,當(dāng)血液進(jìn)入到患者機(jī)體以后,極易引發(fā)溶血性輸血反應(yīng)事件的發(fā)生,嚴(yán)重的還會(huì)導(dǎo)致患者死亡,對患者的生命安全造成了嚴(yán)重的威脅。所以,血站一定要針對獻(xiàn)血者的血液進(jìn)行不規(guī)則抗體的篩查,及時(shí)發(fā)現(xiàn)血液中存在的不規(guī)則抗體,能夠有效保證受血者的生命安全［3］。本次研究對近2 年在佛山地區(qū)血站進(jìn)行自愿獻(xiàn)血的90000 例獻(xiàn)血者,通過對其血液標(biāo)本進(jìn)行不規(guī)則抗體的篩查以及鑒定,詳細(xì)分析此項(xiàng)工作的重要性,具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2018 年1 月～2021 年1 月在本中心進(jìn)行無償獻(xiàn)血的人群中隨機(jī)選取90000 例作為研究對象,其中男42989 例,女47011 例；年齡最小18 歲,最大59 歲,平均年齡(39.76±5.12)歲；初次獻(xiàn)血者27839 例,獻(xiàn)血次數(shù)≥2 次獻(xiàn)血者62161 例；47011 例女性獻(xiàn)血者中有妊娠史24081 例,無妊娠史22930 例。本次研究經(jīng)過了本血站倫理委員會(huì)的批準(zhǔn),所有獻(xiàn)血者均自愿簽署了協(xié)議書。

1.2 方法 所有研究對象均進(jìn)行血型檢查、不規(guī)則抗體初步篩查,采用本血站PK7300 全自動(dòng)血型分析儀對所有獻(xiàn)血者進(jìn)行ABO 正反定血型檢查,采用反定型“O”細(xì)胞試劑對獻(xiàn)血者血液標(biāo)本中的不規(guī)則抗體進(jìn)行初步篩查,對于ABO 正反定型不一致的獻(xiàn)血者、初步篩查結(jié)果顯示為陽性的獻(xiàn)血者,再次采用抗人球蛋白卡對不規(guī)則抗體進(jìn)行檢測,檢測人員取微柱凝膠抗人球蛋白卡(長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司),在蛋白卡中分別加入50 μl 濃度為0.5%的Ⅰ～Ⅲ型篩查紅細(xì)胞,取獻(xiàn)血者血液標(biāo)本10 ml 進(jìn)行離心處理,取下層血漿,然后在各個(gè)孔內(nèi)加入獻(xiàn)血者50 μl 的血漿,放在本院FYQ 型恒溫孵育器中進(jìn)行孵育,將孵育器的溫度設(shè)置為37℃,孵育時(shí)間設(shè)置為15 min,取出后置于本院TD-3 型血型卡離心機(jī)上進(jìn)行離心處理,將離心機(jī)的轉(zhuǎn)速設(shè)置為900 r/min,離心時(shí)間為2 min,然后再將離心機(jī)的轉(zhuǎn)速設(shè)置為1500 r/min,離心時(shí)間為3 min,對檢測結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)的觀察。采用巰基試劑對抗體(IgG、IgM)的類別進(jìn)行鑒定。

1.3 觀察指標(biāo) 分析獻(xiàn)血者血液標(biāo)本不規(guī)則抗體陽性檢出情況；比較不同性別、有無妊娠史獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率,不同獻(xiàn)血次數(shù)、年齡獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 獻(xiàn)血者血液標(biāo)本不規(guī)則抗體陽性檢出情況90000 例獻(xiàn)血者中共篩查出不規(guī)則抗體陽性58 例(0.06%),其中特異性抗體48 例,抗體的主要類型為抗-E、抗-M,其余10 例為非特異性抗體,抗體的主要類型為冷自身抗體。

2.2 不同性別、有無妊娠史獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率比較 90000 例獻(xiàn)血者中女性不規(guī)則抗體陽性率為0.10%(45/47011),高于男性的0.03%(13/42989),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；且女性獻(xiàn)血者中有妊娠史獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率為0.15%(35/24081),高于無妊娠史獻(xiàn)血者的0.04%(10/22930),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同性別、有無妊娠史獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率比較(n)

2.3 不同獻(xiàn)血次數(shù)、年齡獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率比較 90000 例獻(xiàn)血者中初次獻(xiàn)血者的不規(guī)則抗體陽性率0.14%(37/27839)高于獻(xiàn)血次數(shù)≥2 次獻(xiàn)血者的0.04%(21/62161),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=29.335,P<0.05)；不同年齡獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),并且獻(xiàn)血者的年齡越大,不規(guī)則抗體陽性率越高,凝集強(qiáng)度≤++的獻(xiàn)血者高達(dá)52 例(89.66%)。見表2。

表2 不同年齡獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體陽性率比較［n(%)］

3 討論

人體內(nèi)紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體主要有IgG、IgM 和冷自身抗體等幾種,其中前兩種為特異性抗體,后一種為非特異性抗體,并且在特異性抗體中,比較常見的為IgG,比較少見的為IgM［4］。有研究發(fā)現(xiàn),患者在治療的過程中如果輸注了含有IgG 類型不規(guī)則抗體成分的血液或者血液制品,較輕的會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)寒顫、發(fā)熱等癥狀,較為嚴(yán)重的還會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng),對患者的生命安全造成較大的威脅［5］。對于妊娠期女性,如果其體內(nèi)輸注含有IgG 類型的不規(guī)則抗體成分后,此種不規(guī)則抗體成分會(huì)通過胎盤進(jìn)入到胎兒體內(nèi),從而導(dǎo)致新生兒發(fā)生溶血病,同時(shí)還會(huì)阻礙新生兒的智力發(fā)育以及各身體器官功能發(fā)育［6］。近些年來,隨著我國臨床醫(yī)療技術(shù)的不斷提升,臨床上所使用的ABO 血型檢測試劑質(zhì)量得到了保障,因此,有效避免了 ABO 血型鑒定錯(cuò)誤所引起的復(fù)發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)［7］。但是隨著臨床研究的逐步增多,依舊發(fā)生了一些血型鑒定困難、交叉配血困難、新生兒溶血病、遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)等不良事件,在對此進(jìn)行深入的分析后發(fā)現(xiàn),這些不良事件的發(fā)生與不規(guī)則抗體存在著密切的關(guān)系［8］。

本次研究中選取了佛山地區(qū)90000 例無償獻(xiàn)血者,通過對其血液標(biāo)本中不規(guī)則抗體陽性檢出率進(jìn)行篩查,共檢出58 例不規(guī)則抗體陽性,本地區(qū)不規(guī)則抗體陽性檢出率為0.06%。人類血型物質(zhì)表現(xiàn)出了遺傳多樣性特征,所屬地區(qū)不同,人群之間的血型表現(xiàn)也存在著明顯的差異性,導(dǎo)致各地區(qū)不規(guī)則抗體陽性檢出率也表現(xiàn)出了明顯的不同。除此之外,血站所使用的不規(guī)則抗體檢測方式也會(huì)在一定程度上對不規(guī)則抗體陽性檢出率造成影響［9］。

本次研究中共篩查出了58 例不規(guī)則抗體陽性,其中特異性抗體48 例,抗體的主要類型為抗-E、抗-M,目前我國大多數(shù)地區(qū)中心血站和醫(yī)療機(jī)構(gòu)在獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前只進(jìn)行ABO 血型、D 抗原、Rh 血型的檢測,對于Rh 血型系統(tǒng)中的E、e、C、c 等抗原一般不進(jìn)行檢查,因此,不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)血液中存在的Rh 血型系統(tǒng)中的E、e、C、c 等抗原,從而極易產(chǎn)生由抗-E、抗-c 等抗體所引起的溶血性輸血反應(yīng)事件［10］。本次研究中共檢出抗-M 獻(xiàn)血者15 例,其抗體性質(zhì)均為IgM,此類抗體在37℃時(shí)會(huì)發(fā)生凝聚反應(yīng),導(dǎo)致抗體成分減弱甚至消失,因此一般并不會(huì)引發(fā)輸血反應(yīng)。本次研究中其余10 例為非特異性抗體,抗體的主要類型為冷自身抗體,冷自生抗體在37℃時(shí)也不會(huì)引發(fā)輸血反應(yīng),但是在低溫環(huán)境、麻醉狀態(tài)下,其會(huì)迅速激活機(jī)體內(nèi)的補(bǔ)體,引發(fā)機(jī)體出現(xiàn)輸血反應(yīng)［11］。所以臨床醫(yī)務(wù)人員應(yīng)注意,給患者輸注含有冷自身抗體的血液制品時(shí),應(yīng)適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行加溫,滴注速度控制在較為緩慢的狀態(tài),在滴注的過程中密切觀察患者臨床癥狀的變化情況［12］。

對鑒定結(jié)果進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn),58 例不規(guī)則抗體陽性獻(xiàn)血者中,以不規(guī)則抗體陽性檢出率為評價(jià)指標(biāo),女性多于男性,且以往有妊娠史獻(xiàn)血者高于無妊娠史獻(xiàn)血者,初次獻(xiàn)血者高于獻(xiàn)血次數(shù)≥2 次的獻(xiàn)血者,高齡獻(xiàn)血者高于低齡獻(xiàn)血者,這是因?yàn)榕詷O易受到一些免疫因素的刺激,比如妊娠、流產(chǎn)、分娩等,因此產(chǎn)生不規(guī)則抗體的幾率更高［13］。為了保證用血的安全性,本血站采用了自動(dòng)篩查軟件,對已經(jīng)接受過獻(xiàn)血并且檢測出含有不規(guī)則抗體的人群進(jìn)行了自動(dòng)屏蔽,而一些第1 次獻(xiàn)血的獻(xiàn)血者缺乏相關(guān)信息,導(dǎo)致其出現(xiàn)不規(guī)則抗體的幾率更高［14］。隨著年齡的增長,女性出現(xiàn)妊娠、免疫刺激的幾率越高,因此出現(xiàn)不規(guī)則抗體的幾率也更高［15］。本次研究中所檢出的不規(guī)則抗體凝聚反應(yīng)強(qiáng)度≤++的高達(dá)52 例(89.66%)。

綜上所述,佛山地區(qū)無償獻(xiàn)血者血液中紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽性率比較低,不規(guī)則抗體的主要類型為抗-E、抗-M 和冷自身抗體,提示血站要加強(qiáng)對獻(xiàn)血者血液標(biāo)本中紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的篩查及鑒定,從而為臨床用血安全做好保障。