云南漢、彝、白族育齡期女性血清抗苗勒管激素的差異性研究

閆瑾，王華偉，莫暉，徐玉庭，劉瀏，唐莉

(昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖遺傳科，昆明 650032)

抗苗勒管激素(AMH)，是一種二聚體糖蛋白，屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)家族的一員，可在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮調(diào)節(jié)生長(zhǎng)及分化的作用[1]。AMH由生長(zhǎng)中的竇前卵泡和小竇卵泡表面的顆粒細(xì)胞合成，隨后分泌到卵泡液及外周血中。血清AMH可以反映女性的生殖潛能、卵巢反應(yīng)性，并可以預(yù)測(cè)絕經(jīng)年齡，是反映卵巢儲(chǔ)備功能的重要標(biāo)志物。AMH的合成不受促性腺激素的調(diào)節(jié)，血清AMH水平在同一個(gè)月經(jīng)周期內(nèi)十分穩(wěn)定[2]。相比于基礎(chǔ)卵泡激素以及雌二醇、抑制素B等，血清AMH對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能下降更為敏感，能更早地反映卵巢儲(chǔ)備功能下降[3]，加之血清檢測(cè)方便、客觀，避免了人為主觀因素的影響，因此血清AMH是目前卵巢儲(chǔ)備評(píng)估的理想指標(biāo)[4]，在婦產(chǎn)科及生殖領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

AMH水平受年齡、遺傳、卵巢手術(shù)史、毒物接觸史、吸煙、肥胖等多種因素影響[5]，近年來國(guó)外越來越多研究發(fā)現(xiàn)不同民族或種族的人群血清AMH水平存在明顯差異[6-7]。有研究發(fā)現(xiàn)排除其他因素的作用后，種族或民族可能是血清AMH水平的獨(dú)立影響因素[8]，在各年齡階段新疆維吾爾族與漢族、回族不孕女性血清AMH水平均有顯著差異[9-10]。云南省位于中國(guó)西南邊陲，是多民族聚居區(qū)域，其中云南特有少數(shù)民族有25個(gè)，彝族、白族人口均超過100萬。本文擬對(duì)云南漢族、彝族、白族育齡期女性血清AMH水平進(jìn)行分析，以期對(duì)云南不同民族育齡期女性卵巢儲(chǔ)備情況有更深的認(rèn)識(shí)，從而對(duì)不同民族患者進(jìn)行更科學(xué)、個(gè)體化的生育指導(dǎo)。

資料與方法

一、研究對(duì)象及分組

選取2017年1月至2021年6月在我科行外周血AMH檢測(cè)的云南漢族、彝族、白族育齡期女性為研究對(duì)象。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)育齡期女性，年齡20～45歲；(2)在我科行外周血AMH水平檢測(cè)(酶聯(lián)免疫法)；(3)籍貫云南省，民族為漢族、彝族或白族。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)確診高泌乳素血癥、多囊卵巢綜合征、子宮內(nèi)膜異位癥者；(2)既往有卵巢手術(shù)史、化療史或盆腔放療史；(3)患有嚴(yán)重自身免疫性疾病或全身嚴(yán)重疾病者；(4)有酗酒或吸煙史；(5)檢測(cè)前3個(gè)月有使用避孕藥等激素類藥物史。

研究共納入5 858例育齡期女性，其中漢族4 920例，彝族711例，白族227例。將研究對(duì)象按不同民族分為漢族(H)、彝族(Y)和白族(B)3組，首先分析比較3組間的年齡、BMI及外周血AMH水平。進(jìn)一步按年齡將各民族研究對(duì)象分別再分為5個(gè)亞組：20～<26歲組(漢族308例，彝族54例，白族10例)、26～<31歲組(漢族1 242例，彝族222例，白族56例)、31～<36歲組(漢族1 616例，彝族228例，白族94例)、36～<41歲組(漢族1 079例，彝族140例，白族53例)和41～<46歲組(漢族675例，彝族67例，白族14例)，比較各年齡段中不同民族女性外周血AMH水平。

二、研究方法

1.血清AMH檢測(cè)方法：采集患者外周靜脈血約5 ml，室溫500g條件下離心5 min后取上層血清檢測(cè)，使用AMH定量檢測(cè)試劑盒(廣州康潤(rùn))。每次檢測(cè)均設(shè)置5個(gè)不同濃度的校準(zhǔn)品用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(確保相關(guān)系數(shù)r≥0.990 0)，并設(shè)置高、低濃度質(zhì)控品各1個(gè)，所有校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及待測(cè)樣品均設(shè)置2個(gè)平行復(fù)孔，結(jié)果以平均值計(jì)算。本試劑盒敏感度(最小檢測(cè)濃度)為0.06 ng/ml，批內(nèi)變異系數(shù)≤10%，批間變異系數(shù)≤15%。使用酶標(biāo)儀用450 nm波長(zhǎng)讀取吸光度，待測(cè)樣本的AMH濃度根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算。

2.觀察指標(biāo)：收集納入研究對(duì)象的民族、年齡、身高、體重、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、既往史、血清AMH水平等數(shù)據(jù)，整理后行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、漢族、彝族、白族育齡期女性AMH整體分析

統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，3組育齡期女性的年齡和BMI無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；漢族育齡期女性血清AMH水平低于彝族和白族育齡期女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

表1 漢族、彝族、白族育齡期女性血清AMH水平比較

二、漢族、彝族、白族育齡期女性血清AMH隨年齡變化趨勢(shì)

使用Empowerstata軟件對(duì)漢族、彝族、白族育齡期女性血清AMH與年齡進(jìn)行曲線擬合。結(jié)果顯示，漢族、彝族、白族育齡期女性整體上隨著年齡增加，AMH均呈下降趨勢(shì)，30歲后下降明顯；漢族和彝族女性在20歲時(shí)AMH水平達(dá)到峰值，此后逐漸下降；白族女性AMH在25歲前低于彝族和漢族，此后AMH仍逐漸上升，約28歲時(shí)達(dá)峰值，此后隨年齡增加下降，峰值出現(xiàn)年齡較彝族和漢族女性晚(圖1)。

圖1 不同民族育齡期女性外周血AMH隨年齡變化擬合曲線

三、不同年齡組漢族、彝族、白族育齡期女性年齡、BMI及血清AMH差異分析

各年齡組內(nèi)漢族、彝族、白族女性的年齡和BMI均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(表2，表3)。36～<41歲組中，漢族、彝族、白族血清AMH水平存在差異(P=0.042)，LSD法兩兩比較提示，漢族育齡期女性AMH水平顯著低于彝族和白族(P<0.05)；其他年齡組內(nèi)，不同民族育齡期女性的血清AMH水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(表4)。

表2 不同年齡組漢、彝、白族女性年齡比較

表3 不同年齡組漢、彝、白族女性BMI比較

表4 不同年齡組漢、彝、白族育齡女性AMH水平(ng/ml)比較

討 論

血清AMH作為卵巢儲(chǔ)備功能評(píng)估的標(biāo)志物，廣泛應(yīng)用于婦產(chǎn)科及生殖內(nèi)分泌領(lǐng)域。AMH在女性體內(nèi)有雙重作用：首先，通過改變體內(nèi)相關(guān)刺激因子抑制卵泡的起始募集，避免過多原始卵泡進(jìn)入生長(zhǎng)周期從而導(dǎo)致原始卵泡池的過早耗竭[11]；其次，AMH可以抑制卵泡的周期募集，降低已募集進(jìn)入生長(zhǎng)周期的卵泡對(duì)FSH的敏感性，避免多個(gè)卵泡優(yōu)勢(shì)化[12]。目前無任何指標(biāo)可以直接反映原始卵泡池儲(chǔ)備，外周血AMH因其可以反映生長(zhǎng)卵泡的數(shù)量，在一個(gè)月經(jīng)周期內(nèi)保持穩(wěn)定，且檢測(cè)方便、結(jié)果客觀，是目前評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能的理想指標(biāo)。

本研究發(fā)現(xiàn)在36～<41歲年齡組，不同民族女性間年齡和BMI均無顯著差異，但漢族女性血清AMH水平顯著低于彝族和白族女性。而在其他年齡段，不同民族間血清AMH水平無顯著差異。這一發(fā)現(xiàn)提示漢族女性相比于彝族和白族女性，35歲以后卵巢儲(chǔ)備功能下降趨勢(shì)更明顯。這種基于民族或種族而出現(xiàn)的卵巢儲(chǔ)備差異，在其他種族或民族的相關(guān)研究中也有報(bào)道。Seifer等[13]發(fā)現(xiàn)，37.5～43.3歲年齡段的黑人女性AMH水平較白人AMH水平低25.2%，西班牙女性AMH水平在所有年齡段均低于白人女性。Gleicher等[14]報(bào)道，隨著年齡增大，黑人女性較白種人血清AMH水平下降更快。國(guó)內(nèi)肖雪晴[9]、韓寧寧[10]等也發(fā)現(xiàn)不同民族間血清AMH存在差異，但與本研究不同的是，他們的研究發(fā)現(xiàn)維吾爾族與漢族間血清AMH差異存在于所有年齡段內(nèi)。本研究還發(fā)現(xiàn)，云南白族女性在25歲前血清AMH平均水平低于漢族和彝族女性，此后2～3年時(shí)間內(nèi)AMH水平仍在緩慢上升，約在28歲左右達(dá)峰值。這與多數(shù)研究報(bào)道的外周血AMH達(dá)峰值年齡在25歲的結(jié)論不一致。既往研究認(rèn)為，女性從出生開始，原始卵泡池的卵泡被募集形成竇前卵泡及小竇卵泡，AMH水平逐漸升高，與年齡呈正相關(guān)，25歲以后原始卵泡池卵泡數(shù)目減少，卵泡原始募集相應(yīng)減少，AMH隨年齡增大逐漸下降，與年齡呈負(fù)相關(guān)[15-16]。Bleil等[8]的研究也發(fā)現(xiàn)AMH峰值年齡也存在種族差異，美國(guó)黑人女性外周血AMH達(dá)到峰值時(shí)間較白人明顯偏晚，達(dá)高峰年齡在28歲左右，本研究發(fā)現(xiàn)的云南白族女性AMH隨年齡變化特征與其基本一致。

本研究存在以下局限性，首先納入研究的白族育齡期女性樣本量相對(duì)較小，不能排除樣本量較小對(duì)結(jié)果的影響；其次因本研究為回顧性研究，不能排除研究對(duì)象因不同民族間結(jié)婚而引起的民族背景不純粹以及因社會(huì)等其他因素人為更改民族的情況，對(duì)結(jié)論的準(zhǔn)確性可能有影響；另外居住在偏遠(yuǎn)山區(qū)的少數(shù)民族女性可能由于經(jīng)濟(jì)條件限制，不會(huì)選擇生育咨詢及試管嬰兒助孕，不排除選擇偏倚對(duì)結(jié)論的影響。

血清AMH水平受年齡、遺傳、卵巢手術(shù)史、毒物接觸史等多種因素影響[5]，也有研究提示吸煙、BMI增大、維生素D缺乏等因素也可導(dǎo)致卵巢儲(chǔ)備功能下降[17]。然而不同種族或民族女性群體間出現(xiàn)AMH水平差異的機(jī)制目前并不完全明確，對(duì)其機(jī)制的進(jìn)一步研究將有助于加深對(duì)卵巢儲(chǔ)備影響因素的認(rèn)識(shí)。后期我也將針對(duì)AMH水平差異的機(jī)制方面開展研究。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)云南漢族、彝族、白族育齡期女性在36～<41歲范圍內(nèi)血清AMH水平存在顯著差異，漢族女性AMH水平低于彝族和白族女性。云南省為多個(gè)少數(shù)民族聚居地區(qū)，本文結(jié)果提示云南地區(qū)不同民族育齡女性間AMH水平存在差異，為國(guó)內(nèi)不同民族育齡期女性AMH及卵巢儲(chǔ)備的研究奠定了一定基礎(chǔ)。分析不同民族育齡期女性血清AMH特點(diǎn)并制定相應(yīng)的參考范圍，也有助于為不同民族患者提供更科學(xué)、個(gè)性化的生育指導(dǎo)。