低溫脅迫對4 個三角梅品種葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

伍成厚，余銘杰，溫 志，傅小霞，鄭育芬，吳佳慶，陳秋香，唐湘楠

（廣州市林業(yè)和園林科學(xué)研究院，廣東 廣州 510405）

三角梅（Bougainvilleaspp.）為紫茉莉科三角梅屬植物，在廣州地區(qū)俗稱簕杜鵑，是海南省的省花、深圳和廈門等城市的市花，也是我國南方廣為應(yīng)用的一種木本花卉。因其適應(yīng)性強、花期持久，在廣州、深圳等地是城市橋梁綠化的首選植物。三角梅原產(chǎn)南美巴西，喜溫暖濕潤的氣候，怕冷不耐寒，大多數(shù)品種對4℃以下的低溫敏感[1]，半致死溫度為-3℃[2]，但也有半致死溫度低至-4.91℃～-9.22℃的品種[3]。冬季低溫是北方地區(qū)引種三角梅的主要障礙[4]。在廣州地區(qū)，冬季低溫也會對天橋綠化的三角梅枝葉造成不同程度的損傷，影響橋梁綠化的景觀效果[5]。

有研究表明，低溫脅迫會導(dǎo)致三角梅葉片電解質(zhì)外滲率升高，不同品種間的耐寒性差異與葉片丙二醛、游離脯氨酸、可溶性蛋白質(zhì)和葉綠素含量以及保護(hù)酶活性等生理指標(biāo)相關(guān)[3,6]，通過嫁接[7]、施用防凍抗寒劑可以提高三角梅的抗寒性[7-10]。丁印龍等[11]研究了干旱脅迫對三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響，但沒有低溫脅迫下三角梅葉綠素?zé)晒馓匦缘难芯繄蟮?。采用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)可快速、靈敏、無損傷地探測植物對低溫脅迫的響應(yīng)，該技術(shù)目前已應(yīng)用于秋茄（Kandelia obovata）[12]、 諾 麗（Morinda citrifolia）[13]等 熱 帶、亞熱帶植物的低溫脅迫鑒定。低溫會導(dǎo)致光系統(tǒng)Ⅱ（PS Ⅱ）最大光化學(xué)效率（Fv/Fm值）顯著下降，且抗寒性弱的品種降幅顯著大于抗性強的品種[12-15]，因此葉綠素?zé)晒鈪?shù)可作為篩選耐寒品種的重要指標(biāo)。為了探討三角梅的耐寒性機理，筆者以4 個三角梅品種的葉片為材料，研究了低溫脅迫下三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化規(guī)律，以期為三角梅耐寒品種的篩選提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試三角梅有小葉紫、水紅、玫紅和櫻花共4 個品種，均為三年生的盆栽苗，采用露天常規(guī)水肥管理，植株生長健壯。

1.2 試驗方法

試驗于2021 年9 月進(jìn)行。分別選取4 個三角梅品種樹冠上層外圍枝條上倒數(shù)第5～8 片葉，在晴天9點前采樣，置于自封袋中迅速帶回實驗室，在不對葉片造成機械損傷的前提下，擠出袋內(nèi)空氣。將自封袋在黑暗條件下放入3℃冰水混合液中水浴進(jìn)行低溫脅迫，低溫脅迫時間設(shè)1、2、3 和4 d 共4 個處理，以不進(jìn)行低溫脅迫為對照（CK）。然后將不同處理材料（葉片）從自封袋中取出，用濾紙或紗布擦干水珠后利用德國WALZ-便攜式調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨xPAM2500測定離體葉片的F0、Fm、Fv/Fm和Y（NO）等葉綠素?zé)晒鈩恿W(xué)參數(shù)值。每個處理設(shè)3 個重復(fù)，每個重復(fù)測定3 次取平均值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用Excel 2007 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行計算和制圖，用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 低溫脅迫對三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)F0、Fm 值的影響

F0為固定熒光或初始熒光，也稱基礎(chǔ)熒光、0 水平熒光。從表1 可知，小葉紫和櫻花2 個三角梅品種不同低溫脅迫時間處理間的葉綠素?zé)晒鈪?shù)F0值差異不顯著；而玫紅和水紅2 個三角梅品種不同低溫脅迫時間處理間的葉綠素?zé)晒鈪?shù)F0值存在極顯著性差異，在低溫脅迫處理1 d 時玫紅品種的F0值略有上升而水紅品種的F0值急劇下降，但在低溫脅迫處理1～4 d 時玫紅和水紅2 個三角梅品種的F0值均呈先升后降的變化趨勢。

表1 不同低溫脅迫時間處理對三角梅品種葉綠素?zé)晒鈪?shù)F0 值的影響

Fm為最大熒光，是PS Ⅱ反應(yīng)中心處于完全關(guān)閉時的熒光產(chǎn)量。低溫脅迫對4 個三角梅品種的葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fm值均產(chǎn)生極顯著影響（表2），隨低溫脅迫時間的延長均呈現(xiàn)下降的趨勢，玫紅、水紅和櫻花3 個三角梅品種均在低溫脅迫1 d 后Fm值極顯著下降，而小葉紫品種則在低溫脅迫3 d 后才極顯著下降；當(dāng)?shù)蜏孛{迫4 d 時，玫紅、水紅、小葉紫和櫻花4 個三角梅品種的Fm值分別比CK 下降40.3%、25.6%、17.4%和30.8%。

表2 不同低溫脅迫時間處理對三角梅品種葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fm 值的影響

2.2 低溫脅迫對三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv /Fm值的影響

葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm反映PS Ⅱ反應(yīng)中心內(nèi)稟光能轉(zhuǎn)換效率或稱最大PS Ⅱ的光能轉(zhuǎn)換效率。低溫脅迫后4 個三角梅品種的Fv/Fm值均呈極顯著下降的趨勢（玫紅的F=33.500，P=0.000＜0.01；水紅的F=6.426，P=0.000＜0.01；小葉紫的F=17.349，P=0.000＜0.01；櫻花的F=31.690，P=0.000＜0.01）。從圖1 可知，玫紅品種在低溫脅迫1 d 時Fv/Fm有極顯著下降，然后下降趨緩，在低溫脅迫3 d 后再次極顯著下降；而水紅、小葉紫和櫻花3 個品種在低溫脅迫3 d 后才開始明顯下降，其中小葉紫在低溫脅迫3 d 后下降速度明顯減緩，而水紅在低溫脅迫4 d 時有上升的趨勢；當(dāng)?shù)蜏孛{迫處理4 d 時，玫紅、小葉紫、櫻花和水紅4 個三角梅品種的Fv/Fm值比CK 分別下降19.5%、10.8%、10.2%和5.2%。

圖1 低溫脅迫對三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv /Fm 值的影響

2.3 低溫脅迫對三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)Y（NO）的影響

Y（NO）為PS Ⅱ非調(diào)節(jié)性能量耗散。不同低溫脅迫時間處理對4 個三角梅品種葉綠素?zé)晒鈪?shù)Y（NO）值的影響均達(dá)到極顯著水平（玫紅的F=8.291，P=0.000＜0.01；水 紅 的F=5.031，P=0.000＜0.01；小葉紫的F=16.817，P=0.000＜0.01；櫻花的F=23.010，P=0.000＜0.01）。低溫脅迫處理使三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)Y（NO）逐步升高，櫻花在低溫脅迫2 d 時極顯著升高，水紅和小葉紫均在低溫脅迫3 d 時極顯著升高，玫紅在低溫脅迫2 d 時顯著升高，4 d 時極顯著升高；當(dāng)?shù)蜏孛{迫處理4 d 時，櫻花、玫紅、小葉紫和水紅的Y（NO）值比CK 分別升高35.0%、24.5%、22.0%和17.5%（圖2）。

圖2 低溫脅迫對三角梅葉綠素?zé)晒鈪?shù)Y（NO）值的影響

3 討 論

初始熒光F0由PS Ⅱ捕光葉綠素蛋白復(fù)合物發(fā)出，代表不參與PS Ⅱ光化學(xué)反應(yīng)的光能輻射部分，是PS Ⅱ光化學(xué)反應(yīng)中心處于完全開放時的熒光產(chǎn)量，它與葉綠素濃度有關(guān)。一般情況下其數(shù)值保持穩(wěn)定，當(dāng)光合結(jié)構(gòu)受到損壞時則會升高。F0的增加可能是植物葉片PS Ⅱ反應(yīng)中心出現(xiàn)可逆的失活或出現(xiàn)不易逆轉(zhuǎn)的破壞，也可能是植物葉片類囊體膜受到損傷，而且F0增加量越多類囊體膜受損程度就越嚴(yán)重[16]。蝴蝶蘭（Phalaenopsis aphrodite）在6℃低溫脅迫下6 個品種的F0值均有不同程度的升高[14]。茄子（Solanum melongena）在10℃和15℃低溫脅迫下其F0值均顯著高于對照[15]，但秋茄在5 和12℃低溫脅迫1～5 d后，其F0的變化率與對照的差異不顯著[12]?；ㄒ耍˙rassica oleracea）的F0值在經(jīng)受寒潮低溫脅迫2 d后顯著升高，但僅在不同熟性的品種間具有顯著差異，在相同熟性的品種間差異不顯著[17]。筆者的試驗結(jié)果表明，經(jīng)3℃低溫脅迫后，小葉紫和櫻花2 個三角梅品種的葉綠素?zé)晒鈪?shù)F0值沒有顯著性差異，而玫紅和水紅2 個三角梅品種的F0值在低溫脅迫處理1～4 d 時均呈先升后降的變化趨勢，差異達(dá)到極顯著水平，可能是由于玫紅和水紅2 個品種的光系統(tǒng)在3℃低溫脅迫下較容易受損，而小葉紫和櫻花2 個品種因耐寒性較強而使光系統(tǒng)得到較好保護(hù)。

最大熒光Fm是PS Ⅱ反應(yīng)中心處于完全關(guān)閉時的熒光產(chǎn)量，F(xiàn)m值下降與PS Ⅱ關(guān)閉程度有一定關(guān)系[14]。在低溫脅迫下茄子的Fm值顯著低于對照[15]。隨著低溫脅迫時間的延長，葛藤（Pueraria lobata）、假連翹（Duranta repens）、老鴨嘴（Thunbergia erecta）和臺灣相思（Acacia confuse）幼苗的Fm值也呈逐漸下降趨勢[18]。筆者的試驗結(jié)果表明，經(jīng)低溫脅迫處理后，玫紅、水紅、小葉紫和櫻花4 個三角梅品種的Fm值均呈下降趨勢，分別比CK 下降40.3%、25.6%、17.4%和30.8%，以玫紅下降最多、小葉紫下降最少，說明4 個品種中小葉紫的耐寒性最強、玫紅的耐寒性最弱。

PS Ⅱ最大光化學(xué)效率Fv/Fm在正常條件下變化極少，不受物種和生長條件的影響，但該參數(shù)在逆境下明顯下降，常被用于植物的抗逆性研究[16]。在低溫脅迫下，秋茄、諾麗、蝴蝶蘭、茄子等植物的Fv/Fm值均呈下降趨勢，且其變化幅度越大則植物的耐低溫能力越弱[12-15]，筆者的試驗結(jié)果與之相似。當(dāng)?shù)蜏孛{迫處理4 d 時，玫紅、小葉紫、櫻花和水紅4 個三角梅品種的Fv/Fm值分別比CK 下降19.5%、10.8%、10.2%和5.2%，以玫紅的降幅最大，這也說明4 個品種中玫紅的耐寒性最弱。

非調(diào)節(jié)性能量耗散Y（NO）表示的是光鈍化所引起的非調(diào)節(jié)性電子產(chǎn)量，是光損傷的重要標(biāo)志。盧廣超等[18]的研究表明，低溫脅迫后4 種幼苗的Y（NO）均有上升，且當(dāng)?shù)蜏孛{迫36 h 時Y（NO）均顯著大于對照，其中臺灣相思幼苗的Y（NO）與24 h 相比升幅最少，表明其光損傷的程度最低，抗寒性較好。何勇等[19]的研究認(rèn)為，經(jīng)6℃低溫脅迫后辣椒的Y（NO）均明顯升高，其中杭椒6 號的升幅較大，表明其光化學(xué)的能量轉(zhuǎn)換（用于光合電子傳遞）和光保護(hù)機制（調(diào)節(jié)性熱量耗散）不足，由于PS Ⅱ的過剩電子可能會引起光抑制，而杭椒1 號的Y（NO）變化較為平穩(wěn)，說明其光合電子傳遞及光保護(hù)機制運轉(zhuǎn)正常。筆者的試驗結(jié)果表明，櫻花、玫紅、小葉紫和水紅4個三角梅品種的Y（NO）值分別比CK 升高35.0%、24.5%、22.0%和17.5%，以櫻花和玫紅2 個品種的Y（NO）值升高較多、小葉紫和水紅升高較少，表明玫紅和櫻花的耐寒性較小葉紫和水紅差。

4 結(jié) 論

經(jīng)低溫脅迫處理后，4 個三角梅品種的Fm、Fv/Fm值均呈下降趨勢，Y（NO）值則呈上升趨勢，說明低溫脅迫對三角梅葉片的PS Ⅱ反應(yīng)中心造成一定損傷，從而降低PS Ⅱ原初光能轉(zhuǎn)化效率，抑制PS Ⅱ反應(yīng)中心的光化學(xué)活性，使得PS Ⅱ反應(yīng)中心潛在活性受損，進(jìn)而破壞三角梅葉片光合作用的原初反應(yīng)過程。以玫紅的Fm和Fv/Fm值下降最多，櫻花的Y（NO）值升高最多，表明小葉紫和水紅的耐寒性較玫紅和櫻花的強。