IgG 亞型、PLA2R 及血清抗體檢測在特發(fā)性膜性腎病診斷中的意義

朱濤，齊長友

（1.商丘醫(yī)專附屬柘城縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科；2.商丘醫(yī)專附屬柘城縣人民醫(yī)院腎內(nèi)科，河南 商丘 476000）

特發(fā)性膜性腎病（IMN）是原發(fā)性腎小球疾病的一種，在我國的發(fā)病率越來越高，最近一個通過對多中心腎穿刺病例回顧性的研究顯示， 特發(fā)性膜性腎病在全部腎病的比率為23.4%[1]。 目前膜性腎病主要的診斷方式是靠腎病理穿刺活檢。 腎小球基底膜彌漫性增厚， 免疫熒光染色下腎小球基底膜免疫復(fù)合物沉積， 電鏡可見上皮下釘突形成，伴足細(xì)胞足突增生融合[2]，是IMN 的主要病理特點(diǎn)。 自2009 年Beck 通過免疫印跡法第一次成功在在特發(fā)性膜性腎病患者血清檢測到抗PLA2R受體抗體且證實(shí)其在IMN 患者血清中有較高的陽性率[3]，越來越多的的研究驗(yàn)證了其在診斷IMN 中有較高的敏感性和特異性[4-6]。 為了研究本地區(qū)特發(fā)性膜性腎病腎組織IgG 亞型、 腎組織PLA2R 及其血清抗體含量的表達(dá)， 我們選取IMN 及其他腎病為研究對象， 并評價他們對IMN 的鑒別診斷價值。

1 對象與方法

1.1 收集2016 年9 月至2018 年5 月經(jīng)病理證實(shí)的特發(fā)性膜性腎病患者65 例[女25 例，男40 例，平均年齡（46.5±14.2）]，繼發(fā)性膜性腎病患者28例[男20 例，女8 例，平均年齡（44.4±12.3 歲）]；其他腎病患者25 例[男16 例， 女9 例， 平均年齡（40.4±10.1 歲）]。 特發(fā)性膜性腎病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）首先排除繼發(fā)性膜性腎病，（2）病理診斷符合腎小球基底層大量免疫復(fù)合物沉積伴足細(xì)胞足突增生融合。 排除標(biāo)準(zhǔn)：患者有自身免疫病史；有乙型、丙型肝炎；有免疫抑制劑應(yīng)用史等。 所有研究對象均對此知情同意。

1.2 腎組織中PLA2R 抗原檢測采用間接熒光法；腎組織IgG 亞型采用直接免疫熒光法檢測；ELISA法檢測血清抗PLA2R 抗體，本研究參考范圍為0~14 RU/mL。

1.3 使用SPSS 17.0 分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示； 組間比較采用K-W非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，關(guān)聯(lián)性分析采用Sperman 秩相關(guān)分析，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IMN 組、SMN 組及其他腎病組腎組織PLA2R表達(dá)陽性率結(jié)果，見表1。 IMN 組表達(dá)陽性率高于SMN 組及其他腎病組， 組間對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

表1 腎組織PLA2R 陽性率在各組所占比例

2.2 IMN 組、SMN 組、 其他腎病組血清抗PLA2R抗體陽性比例 經(jīng)χ2檢驗(yàn)結(jié)果顯示IMN 組血清PLA2R 抗體陽性比例明顯高于SMN 組及其他腎病組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

表2 血清抗PLA2R 抗體陽性率在各組所占比例

2.3 IMN 組與SMN 組、其他腎病組等各相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) 見表3。

表3 IMN 組與其他腎病組各項(xiàng)腎功能相關(guān)指標(biāo)的比較

2.4 IMN 患者腎組織IgG4 表達(dá) 陽性率在最高為93.1%。 且腎組織IgG4 表達(dá)與特發(fā)性膜性腎病患者腎功能存在一定聯(lián)系， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P<0.05）。 見表4。

2.5 對IMN 組血清抗磷脂酶A2 抗體與尿蛋白及血清白蛋白做Sperman 分析 血清抗磷脂酶A2 抗體與白蛋白成負(fù)相關(guān)（r=-0.500）、與24 h 尿蛋白成正相關(guān)（r=0.617）。 見圖1。

3 討論

特發(fā)性膜性腎病是原發(fā)性腎小球腎炎的主要病理類型之一，以腎病綜合征為主要臨床表現(xiàn)，并可合并多種并發(fā)癥，以血栓、栓塞事件最為常見[7]，因此不同患者預(yù)后差異很大。 IMN 的診斷方式為腎臟病理活檢， 病理以腎小球基底膜彌漫性增厚為特點(diǎn)，但其細(xì)胞不增殖[8]。 研究顯示免疫球蛋白IgG4 參與IMN 腎小球基底膜的免疫反應(yīng)，IgG4與PLA2R 抗原可形成IgG4-PLA2R 復(fù)合物沉積于腎小球毛細(xì)血管襻周圍造成腎小球基底膜的破壞， 同時其沉積量的多少與機(jī)體的腎功能的受損程度有一定的關(guān)聯(lián)趨勢[9-10]。

本結(jié)果顯示IMN 患者腎組織IgG4 表達(dá)陽性率最高；腎組織PLA2R 及血清抗PLA2R 診斷特發(fā)性膜性腎病的敏感性為76.92%、70.7%， 特異性為92.5%、94.3%。同時我們還可以看出IMN 患者腎功能同血清抗PLA2R 抗體含量存在一定的關(guān)聯(lián)，血清抗PLA2R 抗體濃度的升高，使患者24 h 尿蛋白排出量增多，提示PLA2R 可能是參與特發(fā)性膜性腎病的發(fā)病， 與其他研究顯示尿蛋白含量較以前降低的患者其血清PLA2R 抗體滴度隨之減低[11]具有一致性。

針對有的IMN 患者腎組織及血清不表達(dá)PLA2R 及其抗體的現(xiàn)象， 大家一致的意見認(rèn)為可能是（1）研究對象病情處于穩(wěn)定期（2）在IMN 患者腎組織中還有其他未發(fā)現(xiàn)的自身抗原[12]。 關(guān)于抗PLA2R 抗體陰性的IMN 患者新的自身抗原的研究，Tomos 發(fā)現(xiàn)另一種針對其腎小球基底膜的自身抗體，他們認(rèn)為這可能是IMN 第二致病抗原，且在PLA2R 抗體陽性的IMN、SMN 等患者的血清未發(fā)現(xiàn)這一抗原， 該抗原通過研究證實(shí)為1 型血小板反應(yīng)蛋白7A 域(THSD7A）[13]。 雖然THSD7A 與PLA2R 結(jié)構(gòu)有所不同， 但也有一些類似的性質(zhì)，如：腎組織IgG4 亞型抗體均可與兩者反應(yīng)；均可表達(dá)于足細(xì)胞膜上，致足細(xì)胞足突彌漫融合。 既往認(rèn)為THSD7A 與PLA2R 是兩個相對獨(dú)立致病抗原，THSD7A 僅存在于PLA2R 陰性的IMN 患者，目前也有最新的研究顯示個別IMN 患者腎組織存在THSD7A、PLA2R 共同存在，且他們之間無交叉反應(yīng)，兩者共同參與了免疫復(fù)合物的形成。 但這類患者的臨床特征及發(fā)病機(jī)制并不清楚，需要進(jìn)一步研究[14]。

綜上所述，腎組織PLA2R、血清抗PLA2R 抗體及THSD7A 的發(fā)現(xiàn)， 讓我們對IMN 的發(fā)病機(jī)制有了進(jìn)一步的了解，IMN 患者血清抗PLA2R 抗體含量升高及在血清抗PLA2R 抗體陰性的IMN 患者血清中檢測到THSD7A，為特發(fā)性膜性腎病的診斷提供了一個新方法； 血清抗PLA2R 抗體及THSD7A 可能作為一個標(biāo)志物用于IMN 的診斷并評估患者的預(yù)后，但這需多中心的研究予以證實(shí)。