血清IL-8、TIMP-1、單核細(xì)胞趨化因子-1 在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)及與疾病分期的關(guān)系

宋宏，尚小巧，田宏

（南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院婦科二病區(qū)，河南 南陽(yáng) 473000）

子宮內(nèi)膜異位癥是臨床常見(jiàn)慢性婦科疾病，可引發(fā)月經(jīng)異常、痛經(jīng)、慢性盆腔炎等癥狀，甚至造成不孕，且相關(guān)資料統(tǒng)計(jì)顯示，在育齡婦女中發(fā)病率高達(dá)10%～15%左右， 嚴(yán)重影響女性生育健康[1-2]。 同時(shí)，有文獻(xiàn)指出，子宮內(nèi)膜異位癥存在惡性疾病組織侵襲與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的生物學(xué)行為， 需及早確診、及時(shí)治療，降低惡變風(fēng)險(xiǎn)[3]。 白細(xì)胞介素-8（Interleukin-8，IL-8）是一種常見(jiàn)炎癥細(xì)胞因子，參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病過(guò)程[4]。 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制 劑-1 （Tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）屬于金屬蛋白酶天然特異性抑制劑，可在細(xì)胞增生與癌變時(shí)出現(xiàn)上調(diào)表達(dá)現(xiàn)象[5]。 單核細(xì)胞趨化因子-1（Monocyte chemokine-1，MCP-1）可特異性激活單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，加快局部免疫炎癥發(fā)生、發(fā)展[6]。 但鮮有三者聯(lián)合檢測(cè)在子宮內(nèi)膜異位癥中的報(bào)道。基于此，本研究嘗試分析血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)及與疾病分期的關(guān)系，旨在為臨床診治提供更多途徑?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2017 年1 月至2019 年8月收治的子宮內(nèi)膜異位癥患者117 例作為觀察組，另選取同期健康體檢女性115 例作為對(duì)照組。兩組年齡、體質(zhì)量指數(shù)（Body mass index，BMI）、孕次、產(chǎn)次、月經(jīng)周期、經(jīng)期時(shí)間等一般資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性，見(jiàn)表1。 本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

表1 兩組一般資料

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 觀察組均經(jīng)腹腔鏡病理活檢證實(shí)為子宮內(nèi)膜異位癥，且符合《子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南》相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，參與本研究前未接受過(guò)相關(guān)治療；對(duì)照組體檢各項(xiàng)指標(biāo)均顯示正常；兩組均知情本研究，自愿簽訂知情承諾書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 伴有心血管疾病、 造血系統(tǒng)異常者；合并心肝腎等重要臟器嚴(yán)重功能障礙者；參與本研究前3 個(gè)月內(nèi)服用激素治療者； 合并自身免疫性疾病、過(guò)敏性疾病者；存在惡性腫瘤疾病者；伴有糖尿病等嚴(yán)重內(nèi)科疾病者；妊娠期、哺乳期女性；伴有子宮腺肌癥等其他子宮疾病者；臨床資料缺失者。

1.3 方法 采集所有受試者5 mL 清晨空腹靜脈血，采用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，離心速率為2 500 r/min，離心半徑為13.5 cm，離心時(shí)間為15 min，取上清液，保存于-80 ℃條件下，待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Assay Designs 公司， 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作。

1.4 觀察指標(biāo) （1）兩組血清IL-8、TIMP-1、MCP-1水平。 （2） 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 診斷價(jià)值。（3） 觀察組不同疾病分期患者血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平， 其中疾病分期按照美國(guó)生育協(xié)會(huì)（American fertility society，AFS） 制訂的評(píng)分法，即AFS 分期分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期。（4）血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 與疾病分期的關(guān)系。 （5）觀察組手術(shù)前后血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平變化趨勢(shì)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)處理使用SPSS 22.0 軟件包，計(jì)量資料以(±s)表示，兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)比較采用單因素重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)方差分析，以受試者工作特征（Receiver operating characteristic，ROC） 曲線分析血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的診斷價(jià)值，Spearman 相關(guān)性分析血清各指標(biāo)水平與疾病分期的關(guān)系，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平 觀察組血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平高于對(duì)照組 （P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平比較（±s）

表2 兩組血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平比較（±s）

組別 n觀察組對(duì)照組t 值P 值117 115 IL-8（pg/mL） TIMP-1（μg/L）27.14±4.08 17.52±4.16 17.783＜0.001 340.55±81.19 185.23±60.04 16.545＜0.001 MCP-1（pg/mL）36.05±5.12 20.87±3.79 25.632＜0.001

2.2 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 的診斷價(jià)值 繪制血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 診斷子宮內(nèi)膜異位癥的ROC 曲線，結(jié)果顯示，血清IL-8 AUC 為0.685，95%CI：0.621～0.744，P＜0.001，當(dāng)截?cái)嘀担?2.75 pg/mL 時(shí)，敏感度為69.23%，特異度為60.87%；血清TIMP-1 AUC 為0.809，95%CI：0.753～0.858，P＜0.001，當(dāng)截?cái)嘀担?65.14 μg/L 時(shí)，敏感度為64.96%，特異度為84.36%； 血清MCP-1 AUC 為0.765，95%CI：0.705～0.818，P＜0.001， 當(dāng)截?cái)嘀担?1.32 pg/mL 時(shí)，敏感度為59.83%，特異度為80.00%。 見(jiàn)圖1。

2.3 聯(lián)合診斷 ROC 曲線顯示，血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 聯(lián)合AUC 為0.860，95%CI：0.809～0.902，P＜0.001，診斷敏感度為76.07%，特異度為87.83%。

2.4 觀察組不同疾病分期患者血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平隨疾病分期增加呈逐漸升高趨勢(shì)（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 觀察組不同疾病分期患者血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平比較（±s）

表3 觀察組不同疾病分期患者血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平比較（±s）

疾病分期 nⅠ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期F 值P 值27 30 34 26 IL-8（pg/mL） TIMP-1（μg/L）22.01±3.37 25.23±3.62 28.19±4.11 33.30±4.80 38.402＜0.001 276.17±40.22 330.26±44.13 351.19±50.06 405.37±72.14 27.599＜0.001 MCP-1（pg/mL）26.03±4.12 32.77±5.08 38.29±6.11 47.31±6.59 69.812＜0.001

2.5 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 與疾病分期的關(guān)系 Spearman 相關(guān)性分析， 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 與疾病分期呈正相關(guān)（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 與疾病分期的關(guān)系

2.6 觀察組手術(shù)前后血清IL-8、TIMP-1、MCP-1變化趨勢(shì) 觀察組術(shù)后3 d、5 d、7 d 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平較術(shù)前降低， 且呈持續(xù)降低趨勢(shì)（P＜0.05），見(jiàn)表5。

表5 觀察組手術(shù)前后血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 變化趨勢(shì)（±s）

表5 觀察組手術(shù)前后血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 變化趨勢(shì)（±s）

組別 n術(shù)前術(shù)后3 d術(shù)后5 d術(shù)后7 d F 值P 值117 117 117 117 IL-8（pg/mL） TIMP-1（μg/L）27.14±4.08 23.46±3.12 20.25±3.06 18.11±2.44 174.023＜0.001 340.55±81.19 282.17±60.53 236.42±47.20 200.59±35.94 124.210＜0.001 MCP-1（pg/mL）36.05±5.12 32.22±4.10 26.38±3.54 23.10±3.25 238.252＜0.001

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥在形態(tài)表現(xiàn)方面呈良性，但病變部位長(zhǎng)時(shí)間分泌、 吸收， 可導(dǎo)致周圍組織粘連，改變組織間解剖關(guān)系，加之其具有反復(fù)發(fā)作、侵襲性生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，極易干擾受孕器官功能[8-9]。且有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表明，60%～80%子宮內(nèi)膜異位癥患者可能發(fā)展為盆腔炎或不孕， 對(duì)女性生育能力造成嚴(yán)重不利影響，防治形勢(shì)極為嚴(yán)峻[10]。目前，臨床尚未完全明確子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制，多認(rèn)為與機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)密切相關(guān)[11-12]。 故積極探索相關(guān)因子改變?cè)诩膊“l(fā)生、 發(fā)展中的作用及影響，對(duì)臨床制定針對(duì)性診治措施具有重要意義。

IL-8 是一種由巨噬細(xì)胞、 內(nèi)膜細(xì)胞等分泌的炎癥細(xì)胞因子，可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)發(fā)生，加快內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，促進(jìn)新生血管形成[13]。 魏順英等[14]報(bào)道中顯示， 與健康體檢者[（14.26±7.92）pg/mL]相比， 血清IL-8 在子宮內(nèi)膜異位癥中異常升高表達(dá)[（41.23±7.65）pg/mL]。 本研究發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜異位癥患者血清IL-8 水平顯著高于健康體檢女性，與上述報(bào)道結(jié)果基本一致， 提示IL-8 在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生中發(fā)揮重要作用。 推測(cè)原因，腹腔內(nèi)聚集大量炎癥細(xì)胞，促使巨噬細(xì)胞加快合成、釋放IL-8，不僅加重炎癥反應(yīng)， 還增加子宮異位內(nèi)膜基底部毛細(xì)血管形成， 進(jìn)而不斷促進(jìn)異位內(nèi)膜生長(zhǎng)、增殖、浸潤(rùn)[15]。 但ROC 曲線分析，血清IL-8 單獨(dú)檢測(cè)在子宮內(nèi)膜異位癥中的診斷價(jià)值欠佳， 可能與選取患者生理病理改變、病情程度不同等因素有關(guān)。Spearman 相關(guān)性證實(shí)，血清IL-8 與疾病分期具有正相關(guān)關(guān)系， 主要是由于子宮異位內(nèi)膜病情進(jìn)展過(guò)程中，異位內(nèi)膜組織處于不斷增殖狀態(tài)，造成腹腔、血液內(nèi)IL-8 水平持續(xù)處于高水平狀態(tài)，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)環(huán)境炎癥反應(yīng)加劇， 為疾病發(fā)展創(chuàng)造有利條件。因此，血清IL-8 可作為臨床評(píng)估子宮內(nèi)膜異位癥病情的重要輔助指標(biāo)。

TIMP-1 是內(nèi)源性低分子量蛋白質(zhì)，廣泛分布于全身各種體液與組織內(nèi)， 多種細(xì)胞因子可誘導(dǎo)其表達(dá)[16]。 臨床實(shí)踐證實(shí)，子宮內(nèi)膜異位癥與TIMP-1 表達(dá)異常有關(guān)[17]。 且韓玉雙等[18]觀點(diǎn)認(rèn)為，血清TIMP-1 與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病具有明顯相關(guān)性。在此基礎(chǔ)上，本研究發(fā)現(xiàn)，血清TIMP-1 水平不僅在子宮內(nèi)膜異位癥患者中顯著升高， 且具有較好診斷價(jià)值。 TIMPs 具有抑制膠原酶活性作用，在細(xì)胞增生及癌變發(fā)生時(shí)， 基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）、TIMPs 均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，一旦TIMPs 升高程度無(wú)法抑制MMPs 活性，則打破兩者之間平衡，促使細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)多降解， 從而加快新生血管形成、增強(qiáng)細(xì)胞黏附作用[19]。 故TIMP-1 在子宮異位內(nèi)膜細(xì)胞黏附、生長(zhǎng)、種植過(guò)程中發(fā)揮促進(jìn)作用。同時(shí)，本研究數(shù)據(jù)證實(shí)，血清TIMP-1 與子宮內(nèi)膜異位癥患者疾病分期密切相關(guān)， 主要與其加快子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過(guò)程有關(guān)。 提示臨床可通過(guò)檢測(cè)血清TIMP-1 水平診斷子宮內(nèi)膜異位癥，判斷病情程度，為制定針對(duì)性治療措施提供有效信息。

MCP-1 屬于單核細(xì)胞浸潤(rùn)到組織與腫瘤中的有效介質(zhì)，能結(jié)合單核-巨噬細(xì)胞表面受體，增強(qiáng)無(wú)增殖能力巨噬細(xì)胞活性及數(shù)量， 促進(jìn)疾病發(fā)生發(fā)展[20]。本研究結(jié)果顯示，與健康體檢女性相比，子宮內(nèi)膜異位癥患者血清MCP-1 水平較高，這與李萍等[21]學(xué)者研究中子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、腹腔液中MCP-1 水平分別達(dá)（37±8）pg/mL、（84±25）pg/mL 的研究結(jié)果一致。 可見(jiàn)MCP-1 參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程。 有資料發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病初期，子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)的黏附作用可誘導(dǎo)整合素，加快其生成MCP-1，而MCP-1能提高整合素依賴性細(xì)胞黏附能力， 從而促進(jìn)疾病發(fā)生、病情進(jìn)展[22]。 同時(shí)，本研究通過(guò)Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，血清MCP-1 與疾病分期呈正相關(guān)， 可能是由于子宮內(nèi)膜異位癥患者分泌相關(guān)細(xì)胞因子刺激腹膜間皮細(xì)胞合成MCP-1，MCP-1 對(duì)異位內(nèi)膜產(chǎn)生誘導(dǎo)、活化作用，形成正反饋級(jí)循環(huán)放大效應(yīng)，從而加快病情進(jìn)展。

本研究在上述研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的診斷價(jià)值進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示，單獨(dú)檢測(cè)時(shí)TIMP-1、MCP-1 的診斷效能較高，AUC 值分別為0.809 和0.765，均＞0.7，特異度分別達(dá)到84.36%和80.00%，但三者的敏感度均較低（＜70%）；三者聯(lián)合檢測(cè)的AUC 值達(dá)0.860，敏感度為76.07%，特異度為87.83%，均較單獨(dú)檢測(cè)時(shí)有不同程度升高，提示聯(lián)合檢測(cè)血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 水平對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥具有較高的診斷價(jià)值。 此外，本研究還分析了手術(shù)前后血清變化趨勢(shì)，發(fā)現(xiàn)術(shù)后3 d、5 d、7 d 血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 呈持續(xù)降低趨勢(shì)， 說(shuō)明三者與子宮內(nèi)膜異位癥患者病情改善密切相關(guān)。 但本研究選取樣本量較少，可能造成數(shù)據(jù)偏移， 加之未考慮血清檢測(cè)方法對(duì)其水平表達(dá)的影響，可能導(dǎo)致與其他研究結(jié)果存在一定差異，需作進(jìn)一步分析與探究。

綜上可知，血清IL-8、TIMP-1、MCP-1 在子宮內(nèi)膜異位癥中呈異常升高表達(dá)， 聯(lián)合檢測(cè)具有良好診斷價(jià)值，且與疾病分期密切相關(guān)，還有助于為判斷術(shù)后病情改善提供參考依據(jù)。