海參多肽抗衰老功效研究

隨著物質(zhì)文化生活水平的提高，人們?nèi)找骊P(guān)注自己的皮膚健康。皮膚老化是隨著年齡的增長不可避免會(huì)出現(xiàn)的現(xiàn)象，衰老是生物個(gè)體在生命周期中必然發(fā)生的、難以逆轉(zhuǎn)的退行性變化

，影響皮膚衰老的主要因素包括外源性因素（光老化）和內(nèi)源性理論，外源性衰老因素主要是光老化、環(huán)境污染等；內(nèi)源性衰老理論主要包括遺傳理論、自由基理論、端粒理論和線粒體理論等

。皮膚衰老外在表現(xiàn)為皮膚干燥、松弛、粗糙、彈性下降、出現(xiàn)細(xì)紋和深紋等

。

生物多肽具有安全穩(wěn)定、分子量小、易水溶、易吸收等優(yōu)點(diǎn)，也有抗氧化、清除過剩自由基、抗衰老等生物活性，不僅能夠促進(jìn)皮膚細(xì)胞的增殖，還可為皮膚提供營養(yǎng)，延緩皮膚老化，促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷修復(fù)

。近年來，多肽在抗衰老化妝品中的應(yīng)用越來越廣泛

。

海參為棘皮動(dòng)物門海參綱動(dòng)物，含有海參多糖、海參皂苷、脂肪酸、海參多肽等多種生物活性物質(zhì)

。研究表明，海參多肽能清除過剩的DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥自由基，對DNA、蛋白質(zhì)、脂肪等大分子物質(zhì)，對細(xì)胞或組織的氧化損傷有保護(hù)作用

。柴玉超等

研究了海參肽對人成纖維細(xì)胞的影響，并與常用的化妝品抗皺劑進(jìn)行了對比，發(fā)現(xiàn)海參肽能促進(jìn)人成纖維細(xì)胞NIH/3T3的生長，表明其可作為主要功效原料添加到延緩衰老護(hù)膚品中。付學(xué)軍等

研究發(fā)現(xiàn)，分子量不同的海參多肽表現(xiàn)出不同的抗氧化性。

本研究所用的海參多肽凍干粉由煙臺(tái)新生代生物科技有限公司提供，該多肽為木瓜蛋白酶水解新鮮海參，離心取上清液，超濾，純化、濃縮，凍干后得到小分子量海參多肽。多肽中含有酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、組氨酸等氨基酸，90%以上的分子質(zhì)量低于2000Da。擬通過無創(chuàng)性儀器測定法檢測受試者涂抹含海參多肽的化妝品前后眼部皺紋、紋理、粗糙度、角質(zhì)層含水量和皮膚彈性等指標(biāo)的變化，驗(yàn)證其延緩衰老和補(bǔ)水保濕等功效，以期為其在化妝品中的應(yīng)用提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐。

材料與方法

01 材料與儀器

皮膚屏障功能是衡量皮膚保水能力強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。皮膚衰老時(shí)，表皮角質(zhì)層變薄，皮膚中天然保濕因子含量減少，水合能力下降，細(xì)胞皺縮，出現(xiàn)組織學(xué)結(jié)構(gòu)和形態(tài)改變而使皮膚逐漸出現(xiàn)細(xì)小皺紋

。角質(zhì)層水分含量可以間接反映皮膚衰老程度以及抗衰老化妝品的功效，測量值越大，表明角質(zhì)層水分含量越高，皮膚屏障功能越強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖6所示，測試周期內(nèi)，皮膚角質(zhì)層含水量呈逐漸上升趨勢。與初始值相比，使用產(chǎn)品28天后，角質(zhì)層含水量數(shù)值由50.65升高至60.21，改善率為18.87%，顯著性差異明顯（0.01≤

＜0.05），詳見表2和表3。

VISIA面部影像分析系統(tǒng)（Canfeld公司，美國），皮膚水分測試儀Corneometer（CM825，德國CK公司），皮膚彈性測試探頭Cutometer （MPA580，德國CK公司），皮膚顯微鏡及活性皮膚表面分析系統(tǒng)VisioScan（VC20plus，德國CK公司）。

黑瞎子島地區(qū)土壤主要養(yǎng)分指標(biāo)的變異系數(shù)偏大，其中堿解氮的變異系數(shù)最大（54.46%），pH值的變異最?。?.62%），其余養(yǎng)分含量的變異系數(shù)在32.46%-52.17%之間（表1）?？傮w來說，黑瞎子島地區(qū)土壤養(yǎng)分含量比較分散，養(yǎng)分水平差異較大，這可能與植被類型和地形因素有關(guān)。

02 精華液配方組成與制備工藝

眼部皮膚紋理分值的變化趨勢如圖3所示，與第0天相比，使用海參多肽精華液后第14天與第28天紋理分值均呈現(xiàn)下降趨勢。與初始值0天相比，使用測試產(chǎn)品14天后，紋理分值由8.95下降為8.34，下降率為6.82%，有顯著性差異（

＜0.05）；使用測試產(chǎn)品28天后，紋理分值下降為8.46，下降率為5.04%，有顯著性差異（

＜0.05），詳見表2和表3。

03 方法

（2）受試者在第0天、第14天、第28天各隨訪1次，共3次，要求受試者每次隨訪為日間同一時(shí)間。每次測試前，受試者需用清水清洗面部，使用不含熒光劑的紙巾擦干面部水分，在恒溫恒濕環(huán)境（溫度為21.0 ± 1.0℃，相對濕度為50% ±10%RH）靜坐30min之后，由技術(shù)人員進(jìn)行皮膚指標(biāo)的測定。

選取健康女性受試者30名，年齡為30～50歲。受試者遴選標(biāo)準(zhǔn)符合《化妝品接觸性皮炎診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則》納入、排除標(biāo)準(zhǔn)。

（1）受試者每天早晚各使用一次，取0.5mL（2泵量），以指腹輕柔涂抹肌膚，輕輕按壓眼部皮膚直至精華完全吸收即可，連續(xù)使用28天。

受試者篩選工作參考2015版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》。根據(jù)《赫爾辛基宣言》，受試者的選擇遵循人體測試的醫(yī)學(xué)和倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，所有受試者的測試都必須出于受試者本人自愿，并在測試前簽署知情同意書。

（4）受試者主觀評(píng)估：30名受試者分別在第0天、第14天、第28天隨訪時(shí)完成自我評(píng)估問卷調(diào)查，根據(jù)個(gè)人主觀感受對測試精華液進(jìn)行功效評(píng)價(jià)。

（3）儀器測試方法和評(píng)價(jià)指標(biāo)：使用VISIA面部影像分析系統(tǒng)拍攝受試者左側(cè)面、正面、右側(cè)面圖像，記錄眼部皺紋分值和紋理分值；使用VisioScan VC20plus測量眼角紋理粗糙度，測量3次取平均值；使用CorneometerCM825測量受試者左右眼尾部位角質(zhì)層含水量，記錄角質(zhì)層水分含量值，測量3次取平均值；使用CutometerMPA580測量受試者左右眼尾部位的皮膚彈性，記錄皮膚總彈性R2值、回彈與拉伸的彈塑性總面積之比Q1值。

應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析。所有指標(biāo)數(shù)據(jù)，進(jìn)行配對T檢驗(yàn)，比較第0天、第14天、第28天時(shí)的值，分析使用產(chǎn)品前后皮膚參數(shù)是否具有顯著性差異，顯著性標(biāo)注方法：“n.s”表示無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，

＞0.05；“＊”表示有顯著性差異，0.01≤

＜0.05； “＊＊”表示顯著性差異明顯， 0.001≤

＜0.01，“＊＊＊”表示有極顯著差異，

＜0.001。

結(jié)果與討論

01 人體功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

皮膚紋理是皮膚表面微小的、呈多角形的皮丘皮溝，它使皮膚富有彈性并使皮脂腺、汗腺中的分泌物能沿其紋路擴(kuò)展到整個(gè)皮膚表面，隨年齡增加而逐漸加深。皺紋是衰老或過度暴露于陽光等外界因素作用下，后天形成的皮膚老化重要標(biāo)志之一

。皺紋和紋理度是反映肌膚年輕的重要指標(biāo)，其數(shù)值的變化趨勢能反映一款延緩衰老產(chǎn)品的實(shí)際功效和性能，皺紋分值和紋理分值越小，皺紋和紋理改善效果越好。

測試結(jié)果如圖1所示，從圖中可以看出，使用海參多肽精華液后，眼部皮膚皺紋分值呈現(xiàn)下降趨勢。與初始值相比，使用測試精華液28天后，皺紋分值由11.79下降為9.69，下降率為17.77%，有顯著性差異（

＜0.05）。圖2為一名受試者使用前后對比圖，從中可以看出，受試者在使用含有海參多肽的精華液28天后，眼部皺紋具有明顯的減少或淡化的效果。詳見表2和表3。

大戰(zhàn)在即，豆腐坊的生意卻比往日更繁忙。假如不是四周槍炮林立，不是當(dāng)街口一堆堆疊得小山似的沙包，還有沙包后伸出來的輕重機(jī)槍，光看豆腐坊的生意還真和平日里沒啥兩樣：幾大口鐵鍋一溜排開，火頭正旺，入了鍋的豆腐水滋滋冒著泡；幾個(gè)伙計(jì)光著膀子，系著圍裙，正抬著一大桶豆腐水往木格子里倒，只消一會(huì)，點(diǎn)了鹵的豆腐就結(jié)得硬硬邦邦。

該精華液制備方法：將 A相中卡波姆在水中預(yù)分散，分散溶脹均勻后再加入A相中其他原料，將燒杯放置在75 ～ 80 ℃的水浴鍋中，用電動(dòng)攪拌器勻速攪拌 30 min左右，直至A相組分全部溶解；將燒杯從水浴鍋中取出，冷卻至65℃時(shí)加入B相組分對羥基苯乙酮，攪拌均勻，冷卻至40～45℃時(shí)加入CH10（辛酰羥肟酸、1,2-己二醇、1,3-丁二醇），攪拌均勻；待溫度降至35℃，依次加入C相原料，慢速攪拌均勻，得到精華液。

1.2.1 對照組 給予常規(guī)孕期保健，詢問既往病史，對血糖水平進(jìn)行定期監(jiān)測，定期進(jìn)行產(chǎn)前常規(guī)檢查，建立健康檔案，評(píng)估胎兒生長發(fā)育情況，指導(dǎo)孕婦進(jìn)行胎動(dòng)計(jì)數(shù)的自我檢測，進(jìn)行運(yùn)動(dòng)、飲食方面的指導(dǎo)。

玉米是喜溫、喜光、C4高產(chǎn)作物。它植株高大，根系發(fā)達(dá)，莖葉繁茂，產(chǎn)量高，需肥量大，同時(shí)對肥料反應(yīng)敏感，在確定玉米施肥量時(shí)，應(yīng)需綜合考慮。

眼部皮膚粗糙度指標(biāo)是評(píng)價(jià)延緩皮膚衰老產(chǎn)品功效的一個(gè)重要參數(shù)，測量值越小則皮膚越平滑。測試周期內(nèi)，眼部皮膚粗糙度呈現(xiàn)下降趨勢，如圖2所示。使用測試產(chǎn)品14天后，粗糙度分值由8.27下降為6.30，下降率為23.82%，有顯著性差異（

＜0.05）；使用測試產(chǎn)品28天后，粗糙度分值下降為5.60，下降率為32.30%，有極顯著差異（

＜0.001）。圖5為一名受試者使用海參多肽精華液28天后的對比圖，從圖5中可以看出，28天后皮膚變得平滑，表面粗糙度得到明顯改善，詳見表2和表3。

傾斜圓盤式大蒜排種裝置主要由電磁調(diào)速電動(dòng)機(jī)、種箱、排種盤、萬向節(jié)聯(lián)軸器和鏈傳動(dòng)等部分組成。其中，電磁調(diào)速電動(dòng)機(jī)和鏈輪組成是動(dòng)力輸出裝置部分，通過二級(jí)減速實(shí)現(xiàn)排種裝置所需要的轉(zhuǎn)速；種箱內(nèi)的兩個(gè)傾斜放置的取種盤來實(shí)現(xiàn)蒜瓣的取種；兩個(gè)萬向節(jié)聯(lián)軸器可以實(shí)現(xiàn)不在同一條直線上的傳動(dòng)。其結(jié)構(gòu)如圖1所示。

本文的仿真實(shí)例基于MATLAB R2013b仿真軟件編程實(shí)現(xiàn)，采用艾默生公司研發(fā)的型號(hào)為A3030過程控制實(shí)驗(yàn)平臺(tái)中雙容水箱為被控對象，雙容水箱裝置流程圖如圖2所示：

測試產(chǎn)品為含有海參多肽的精華液，實(shí)驗(yàn)室自制，詳見表1。

音樂劇中角色的臺(tái)詞、歌詞是交代劇情最直接的方式。生活中的語言是自己說的話，舞臺(tái)上的語言是角色說的話。生活中的語言具有隨意性，舞臺(tái)上的語言具有約束性。生活中是自然形態(tài)的語言，舞臺(tái)上是藝術(shù)加工的語言。

隨著年齡的增加，皮膚中可溶性膠原纖維減少，不溶性膠原纖維增加，皮膚的伸展度隨之減少，彈性呈現(xiàn)下降趨勢

，導(dǎo)致皮膚松弛和皺紋的產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖7所示，測試期間，皮膚彈性R2值和Q1值呈現(xiàn)上升的趨勢，皮膚彈性R2值與初始值相比，使用產(chǎn)品28天后改善率為13.08%，有極顯著差異（

＜0.001）。皮膚彈性Q1值與初始值相比，使用產(chǎn)品28天后改善率為10.64%，顯著性差異明顯（0.01≤

＜0.05），詳見表2和表3。

02 受試者主觀評(píng)價(jià)

受試者自我評(píng)估是讓30名受試者在第14天和第28天隨訪時(shí)完成自我評(píng)價(jià)問卷，根據(jù)其個(gè)人主觀感受對測試產(chǎn)品進(jìn)行功效評(píng)價(jià)。如表4所示，使用測試樣品28天后，受試者對肌膚彈性的改善程度認(rèn)為有效的占比100%；對肌膚緊致的改善程度、光滑感的改善程度認(rèn)為有效的占比97%；對肌膚細(xì)紋改善程度、水潤改善程度、面部氣色改善程度認(rèn)為有效的占比93%；對肌膚光澤感改善程度認(rèn)為有效的占比90%；受試者對皮膚整體滿意程度及產(chǎn)品整體滿意程度分別占比93%和100%。由此可見，該款含有海參多肽的測試精華液在多方面皮膚改善程度上能夠達(dá)到所有受試者的認(rèn)可。

結(jié)論

經(jīng)過人體功效評(píng)價(jià)研究，使用含海參多肽精華液后，受試者眼部皮膚皺紋、紋理度、皮膚粗糙度、角質(zhì)層含水量和皮膚彈性等方面均有不同程度的改善效果，測試數(shù)據(jù)與可視化圖像及受試者對產(chǎn)品功效的主觀評(píng)價(jià)結(jié)果一致，這表明海參多肽具有良好的緊致肌膚、淡化皺紋、保濕等美容功效。

線蟲裂解液：10%的次氯酸鈉和1 mol/L的氫氧化鈉按照1：1的比例混合，搖勻得到裂解液。M9緩沖液：稱取KH2PO4粉末3 g、Na2HPO4粉末6 g、NaCl粉末5 g于錐形瓶內(nèi)，量取1 mL的1 mol/L硫酸鎂溶液加入，然后在磁力攪拌器上加水至1 L，高壓滅菌后分裝使用。油紅O染液：油紅O儲(chǔ)備液與蒸餾水3：2混合，現(xiàn)配現(xiàn)用。上述配制的溶液均需過濾除菌。

安徽師范大學(xué)的吳微教授提交的《外交實(shí)錄與古文新變——以薛福成出使日記為中心》、河南安陽師范學(xué)院文學(xué)院的張秋娥教授的《挈作者文章之閫奧，示學(xué)者行文之法程——南宋呂祖謙<古文關(guān)鍵> 中的文章學(xué)思想分析》、江蘇常熟理工學(xué)院人文學(xué)院的孟偉和黃斐的論文《 <唐宋八家文讀本> 與沈德潛的古文理論——兼及沈德潛古文理論與詩歌理論的互通與互補(bǔ)》和南京師范大學(xué)曹辛華教授的研究生提交的論文：鄭華萍的《論 <開明國文講義·文話> 的文章學(xué)觀及其意義》、張響的《論錢基博的文章學(xué)觀及其意義》、涂靜文的《論劉大白 <白屋文話> 中的文章學(xué)觀》。

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經(jīng)查詢，海參多肽尚未納入我國《已使用化妝品原料目錄》（2021版）中，未來可作為化妝品新原料進(jìn)行備案。待備案通過后，作為一種延緩衰老活性成分，在化妝品行業(yè)應(yīng)用前景廣闊。

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