邵陽市2019年—2021年豬瘟春防免疫抗體監(jiān)測統(tǒng)計分析

劉桂喜，文銀容，胡輝燦，方 瓊，鄧 輝，唐杰華，張金梁，孫 瑜※

（1.邵陽縣動物疾病預(yù)防控制中心，湖南 邵陽 422000；2.邵陽市動物疾病預(yù)防控制中心，湖南 邵陽 422000）

豬瘟（CSF）作為家豬和野豬最重要的病毒性疾病之一，危害嚴(yán)重，影響動物健康和養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。盡管疫苗能夠有效預(yù)防和控制，但是在生豬生產(chǎn)中，世界大部分地區(qū)CSF依然偶爾出現(xiàn)。豬瘟目前已被列為必須向世界衛(wèi)生組織報告的動物疫病之一[1]，我國也將其列為一類動物傳染性疾病。

豬瘟是由豬瘟病毒引起，以高燒、呼吸道癥狀、皮膚出血、便秘或腹瀉以及神經(jīng)癥狀為主要特征的高度傳染性疾病。感染豬具有明顯的免疫抑制，包括B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的減少或衰竭；該病和非洲豬瘟的發(fā)病癥狀比較相似，需要謹(jǐn)慎區(qū)分。本病在自然條件下只感染豬，無明顯的季節(jié)性。該病主要通過豬于豬之間的直接接觸或者通過受污染的飼料（如泔水）媒介傳播；此外人和其他動物也能機(jī)械傳播病毒；也可因受感染的公豬精液用于人工授精而傳染豬瘟。目前豬瘟沒有特效藥治療，主要以免疫預(yù)防為主，因此及時開展免疫效果監(jiān)測，評估免疫效果，對于其有效防控和風(fēng)險評估尤為重要[2]。本文對2019年至2021年湖南省邵陽市各縣市區(qū)的豬瘟免疫保護(hù)情況進(jìn)行抽查，期待為本市豬瘟疾病的控制和凈化起到一定的幫助作用。

1 材料與方法

1.1 材料選取

在邵陽市的12個縣市區(qū)隨機(jī)抽取32個規(guī)?；B(yǎng)豬場（2019年、2021年各10個規(guī)模豬場、2020年12個規(guī)模豬場）和32個散養(yǎng)戶豬場（2019年、2021年各10個散養(yǎng)豬場、2020年12個散養(yǎng)豬場），每個場（戶）各采集了10份生豬的新鮮血液，被采集的豬都接種了豬瘟疫苗，疫苗類型為細(xì)胞源豬瘟活疫苗。本次實驗使用美國愛德士生物科技公司生產(chǎn)的抗體檢測試劑盒（生產(chǎn)批號：AA601）進(jìn)行了檢測。

1.2 方法

1.2.1 實驗器材準(zhǔn)備。準(zhǔn)備50μL、100μL單道和多道微量移液器、一次性微量移液器使用的吸頭、去離子水、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、微量反應(yīng)板用的封條、酶標(biāo)儀等。

1.2.2 試劑準(zhǔn)備。實驗前將血清學(xué)實驗室室內(nèi)溫度調(diào)到26℃，再將試劑盒從冰箱取出進(jìn)行回溫，直至室溫，洗滌液（10倍濃縮的洗滌液）在使用前必須用去離子水進(jìn)行10倍稀釋。

1.2.3 樣品準(zhǔn)備。每次采集好的豬全血使用離心機(jī)進(jìn)行離心，將轉(zhuǎn)速調(diào)至3000r/min,時間設(shè)置為3min,提取出符合實驗要求的豬血清。

1.2.4 操作步驟。所有操作嚴(yán)格按照抗體檢測試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.5 判定標(biāo)準(zhǔn)。通過試劑盒檢測到樣本和對照的吸光度值按照說明書指定的計算方法換算出每個樣本的阻斷率，阻斷率大于或等于40%，樣本被判定為陽性（有CSFV抗體存在）；阻斷率小于或等于30%，被檢樣本被判為陰性（無抗CSFV抗體存在）；而介于30%～40%之間，判定為可疑，應(yīng)再次進(jìn)行實驗，如再為可疑應(yīng)判陽性。

2 結(jié)果

2.1 邵陽市CSF春防總體免疫效果

2019年—2021年，檢測的64個養(yǎng)殖場（戶）640份豬血清樣品中，豬瘟抗體的總合格率為（605/640）94.5%。2019年豬瘟抗體合格率為（189/200）94.5%、2020年豬瘟抗體合格率為（233/240）97.08%、2021年豬瘟抗體合格率為（183/200）91.5%，抗體合格率總體呈先低后高再低趨勢（圖1），但是均達(dá)到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%以上的標(biāo)準(zhǔn)。

圖1 不同年份豬瘟抗體合格率檢測結(jié)果

2.2 規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶CSF免疫抗體結(jié)果

由表1可知，規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶CSF抗體水平均達(dá)到80%以上。2019年至2021年規(guī)模豬場免疫抗體分別為100%、96.7%、89%；散養(yǎng)戶分別為91%、97.5%、94%。從三年總體來看，除2020年規(guī)模豬場免疫抗體水平略低于散養(yǎng)戶外，其它兩年規(guī)模豬場均高于散養(yǎng)戶。

表1 2019年—2021年規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶春防免疫抗體檢測結(jié)果

3 分析與討論

本實驗應(yīng)用美國IDEXX公司生產(chǎn)的豬瘟疫苗抗體檢測試劑盒已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于檢測豬瘟抗體，其檢測結(jié)果穩(wěn)定，且能夠用于評估豬場豬瘟疫苗的免疫狀況[3]。

本次檢測結(jié)果表明，2019年—2021年，邵陽市豬瘟免疫抗體水平均高于70%(國家標(biāo)準(zhǔn))，且均高于國家標(biāo)準(zhǔn)10%以上，每年抽檢的規(guī)模豬場、散養(yǎng)戶豬瘟免疫抗體陽性率均達(dá)到80%以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國家標(biāo)準(zhǔn)70%?？傮w上來看，邵陽市豬瘟抗體水平較高，免疫效果較好。但是2020年的檢測水平要高于2019年和2021年，證明免疫水平還是有波動，后期還是需要引起重視；因為在豬場疫病的防控中，疫苗免疫程序的建立和實施始終是預(yù)防疫情發(fā)生的一種最有效的手段，所以疫苗免疫水平的檢測在完善各豬場防控建設(shè)中起到了關(guān)鍵作用。根據(jù)抗體水平的波動情況能夠方便對免疫接種方案進(jìn)行檢驗，為提高疫苗免疫效果采取有效的措施，能夠及時做好疫苗補(bǔ)免與淘汰工作，做到防微杜漸，以確保邵陽生豬養(yǎng)殖事業(yè)能夠長久穩(wěn)定地發(fā)展。