武漢地區(qū)24 806例疑似EB病毒感染患兒外周血EBV-DNA檢測結(jié)果分析

李 革 余怡如 陳 放 黃永建

EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)為皰疹病毒Ⅳ型，是一種嗜人類淋巴細(xì)胞的皰疹病毒[1]，易侵犯人類口咽部B淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞。EBV主要通過唾液傳播，也可經(jīng)輸血途徑傳播，在全球范圍內(nèi)流行[2]。EBV感染相關(guān)疾病是兒童感染性疾病中的常見病之一[3]，兒童EBV原發(fā)感染多數(shù)表現(xiàn)為非特異性上呼吸道感染，主要引起自限性傳染性單核細(xì)胞增多癥(Infectious Mononucleosis，IM)[4]。而EBV持續(xù)或再激活感染，會引起慢性活動性EBV感染(Chronic Active EBV Infection, CAEBV)和EBV相關(guān)噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥(EBV-associated Haemophagocytic Lymphohistiocytosis, EBV-HLH)等危重致死性疾病，嚴(yán)重危害兒童健康[5]。外周血EBV-DNA載量測定已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于EBV相關(guān)疾病的診斷、病情監(jiān)測、治療效果評估和預(yù)后判斷等。本研究通過回顧性分析本院近五年來兒童患者EBV-DNA檢測情況，以了解武漢市兒童EBV感染情況和流行特點(diǎn)，為臨床診斷與治療EBV感染提供理論支持。

1 對象與方法

1.1 研究對象

收集2017-01-2021-12疑似EBV感染且在本院進(jìn)行EBV-DNA載量檢測的患兒24 806例，其中男患兒14 556例(58.7%)，女患兒10 250例(41.3%)。納入研究的兒童年齡范圍為6天-12歲，平均(5.37±2.94)歲。

1.2 檢測方法

采集患兒靜脈血標(biāo)本(EDTA抗凝)，分離血漿2-3ml，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩２捎脽晒舛縋CR法檢測EBV-DNA載量。EBV-DNA檢測試劑盒為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)，PCR儀為美國ABI公司7500實(shí)時熒光PCR儀。根據(jù)定量擴(kuò)增曲線計算EBV-DNA載量(基因拷貝/ml)，EBV-DNA載量高于102.5拷貝/μg DNA計為陽性[1]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料采用例數(shù)、百分比(n，%)表示，兩組或多組比較采用χ2檢驗，P<0.05代表差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同性別患兒EBV-DNA檢測結(jié)果

24 806例疑似EBV感染患兒中，EBV-DNA陽性2 825例，陽性檢出率為11.39%；其中男性患兒陽性檢出率為11.12% (1 627/14 556)；女性患兒陽性檢出率為11.69%(1 198/10 250)，男性患兒與女性患兒陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.23，P=0.267)。

2.2 不同年齡患兒EBV-DNA檢測結(jié)果

年齡分組：嬰兒組(≤1歲)7 006例，幼兒組(1-3歲)7 475例，學(xué)齡前(3-6歲)7 074例，學(xué)齡組(6-12歲)3 251例。不同年齡組的陽性檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=67.38，P<0.01)，嬰兒組的陽性率為6.24%(437/7 006)，檢出率最低(χ2均>87.62，P<0.01)；幼兒組的陽性率為14.19%(1 061/7 475)，檢出率最高(與學(xué)齡前組差異不明顯，與其它組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，χ2均>5.99，P<0.05)，見表1。

表1 不同年齡段患兒EBV-DNA檢測情況

2.3 不同季節(jié)患兒EBV-DNA檢測結(jié)果

根據(jù)武漢地區(qū)氣候特征，將1年劃分為4個季節(jié)(春季：3月-5月，夏季：6月-8月，秋季：9月-11月，冬季：12月-次年2月)，不同季節(jié)患兒EBV-DNA陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.73，P<0.01)，其中秋季檢出率最高(與夏季組差異不明顯，與其它組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，χ2均>4.65，P<0.05)，春季檢出率最低(與秋季組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，χ2=9.81，P<0.01)，見表2。

表2 不同季節(jié)患兒EBV-DNA檢測結(jié)果

2.4 不同年份患兒EBV-DNA檢測結(jié)果

對不同年份患兒EBV-DNA檢測結(jié)果進(jìn)行分析，其中2017年檢出率最高(與2020差異不明顯，與其它年份差異有統(tǒng)計學(xué)意義，χ2均>12.01，P<0.01)，2021年最低(χ2均>4.65，P<0.05)，見表3。

表3 不同年份患兒EBV-DNA檢測結(jié)果

2.5 EBV-DNA陽性患兒的相關(guān)疾病譜分析

EBV-DNA陽性患兒的臨床診斷以IM最為常見，其次為肺炎，其它依次為急性化膿性扁桃體炎，淋巴結(jié)炎，上呼吸道感染，膿毒血癥等。具體情況見表4。

表4 EB-NDA陽性患兒感染疾病類型構(gòu)成比

3 討 論

EBV是一種特異性嗜淋巴細(xì)胞性皰疹病毒，除會引起IM外，也與兒童Burkitt淋巴瘤和鼻咽癌關(guān)系密切，還可引起如噬血細(xì)胞綜合征、重癥肺炎、慢性活動性EBV感染、川崎病、壞死性淋巴結(jié)炎等疾病，該類疾病病情復(fù)雜、進(jìn)展快、病情重，延誤診治病死率高[6,7]。EBV在人群中具有廣泛的感染率，近50%原發(fā)感染發(fā)生在6歲以下[4]，且兒童EBV感染的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，多數(shù)兒童感染EBV后臨床表現(xiàn)不典型，缺乏特異性，易漏診或誤診[8]，因此，實(shí)驗室檢測對診斷EBV感染尤為重要。

目前，EBV感染的實(shí)驗室輔助診斷檢測方法有多種，而病毒核酸仍是最主要方法之一。實(shí)時熒光定量PCR方法可檢測病毒核酸，能更準(zhǔn)確地反映EBV感染和病毒復(fù)制情況，是直接、客觀反映EBV是否為活動性感染的指標(biāo)。本研究采用實(shí)時熒光定量PCR在24 806例就診的患兒中共檢出EBV-DNA陽性2 825例(11.39%)，略高于閆江泓等[9]報道河北EBV的感染率，這可能與地域差別有一定關(guān)系。一般認(rèn)為EBV的感染無性別差異[10]，與本文分析結(jié)果相一致。不同年齡患兒中，幼兒組的陽性率最高，其次為學(xué)齡前組，這可能是幼兒組免疫功能不完善，且沒有母體抗體的保護(hù)，屬于易感人群，學(xué)齡前組兒童進(jìn)入幼兒園學(xué)習(xí)后，活動范圍變大且接觸人群變多，明顯增加交叉感染風(fēng)險。EBV感染呈現(xiàn)一定季節(jié)性，秋季檢出率最高(12.58%)，與劉立飛等[11]報道一致，這可能與本地秋季的晝夜溫差大，兒童適應(yīng)溫度變化能力差有一定關(guān)系。EBV感染后可累及全身多系統(tǒng)，臨床癥狀輕重不一，表現(xiàn)各異，累及全身多個器官，以呼吸系統(tǒng)疾病為主[12]。本研究對EBV-DNA陽性患兒的相關(guān)疾病譜進(jìn)行了分析，EBV感染后主要表現(xiàn)為IM(疾病的構(gòu)成比20.85%)，其次表現(xiàn)為肺炎(15.65%)、急性化膿性扁桃體炎(14.23%)、淋巴結(jié)炎(12.67%)、上呼吸道感染(10.55%)等，可能與EBV以口腔分泌物和唾液方式傳播相關(guān)，使原發(fā)性感染首先在咽部的B淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞，EBV經(jīng)復(fù)制后累及上呼吸道進(jìn)而擴(kuò)散到其它部位[13]。

綜上所述，EBV是兒童感染性疾病的重要病原體，在本地區(qū)現(xiàn)感染率高達(dá)11.39%，1-3歲兒童為易感人群。兒童EBV感染癥狀多樣，可累及全身多系統(tǒng)，因此在兒科臨床實(shí)際工作中，需提高對本病的認(rèn)識，綜合分析，碰到疑似病例應(yīng)及時檢測EBV-NDA以期早診斷早治療，避免嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生。

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本文第一作者簡介：

李 革(1967-)，男，漢族，主管技師，研究方向：病毒感染及免疫