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    circ_0000527和miR-1253在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其對(duì)直腸癌SW620細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響

    2022-08-18 08:11:24吳微華
    世界華人消化雜志 2022年14期
    關(guān)鍵詞:劃痕發(fā)芽率克隆

    0 引言

    結(jié)直腸癌是我國(guó)常見(jiàn)的一種惡性腫瘤,雖然結(jié)直腸癌診斷與治療技術(shù)有所提高,但中晚期結(jié)直腸癌患者預(yù)后較差,因而仍需探究結(jié)直腸癌發(fā)生及發(fā)展的分子機(jī)制

    .環(huán)狀RNA(circular RNA,circRNA)在結(jié)直腸癌中表達(dá)異常,并可發(fā)揮重要調(diào)控作用

    .circ_0000527在骨肉瘤組織中高表達(dá),上調(diào)其表達(dá)可促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的增殖

    .Circular RNA Interactome預(yù)測(cè)顯示circ_0000527與miR-1253存在互補(bǔ)序列.研究表明

    ,miR-1253在結(jié)直腸癌組織和細(xì)胞中表達(dá)下調(diào),抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲.因此,本研究主要探討circ_0000527是否通過(guò)靶向調(diào)控miR-1253表達(dá)影響結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲.

    綜合考慮后,湯國(guó)安等[11]設(shè)計(jì)了一種借助ArcGIS軟件,利用歐氏區(qū)域分配提取面狀河流中軸線(xiàn)的方法,該方法所提取的中軸線(xiàn)連續(xù)、光滑,且與相鄰的線(xiàn)狀支流保持有拓?fù)潢P(guān)系。但該方法在實(shí)際應(yīng)用中存在一些局限性,對(duì)于較大的水系其面狀河流的長(zhǎng)寬比往往很大,河流最窄處的寬度相對(duì)于河流的長(zhǎng)度非常小,因而在歐氏距離變換前選取變換分辨率時(shí)很難同時(shí)兼顧。實(shí)際提取運(yùn)算中會(huì)出現(xiàn)無(wú)法有效柵格化面狀河流邊界線(xiàn)的情況最終導(dǎo)致方法失效的問(wèn)題,在實(shí)際運(yùn)用受到了較大限制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 收集2020-03/2020-08本院收治的經(jīng)病理學(xué)診斷確診為41例結(jié)直腸癌患者,癌組織及其癌旁組織標(biāo)本,置于-80 ℃超低溫冰箱內(nèi)保存.女20例,男21例,年齡(50-68)歲,平均年齡(56.32±4.19)歲.

    人結(jié)直腸癌細(xì)胞SW620(美國(guó)ATCC);Trizol試劑、Lipofectamine? 3000轉(zhuǎn)染試劑(美國(guó)Invitrogen);反轉(zhuǎn)錄與熒光定量PCR試劑盒(北京天根生化);si-NC、sicirc_0000527、miR-NC、miR-1253 mimics、pcDNA、pcDNA-circ_0000527、anti-miR-NC、anti-miR-1253(上海吉瑪);CCK-8試劑盒(北京索萊寶); Matrigel基質(zhì)膠(美國(guó)BD);Transwell小室(美國(guó)Corning);兔抗人E-cadherin、N-cadherin抗體、GAPDH(美國(guó)Abcam);二抗(北京中杉金橋生物).

    1.2 方法

    1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組:將miR-NC、miR-1253 mimics、si-NC、si-circ_0000527分別轉(zhuǎn)染至SW620細(xì)胞,分別記為miRNC組、miR-1253組、si-NC組、si-circ_0000527組.采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將si-circ_0000527和anti-miR-NC、si-circ_0000527和anti-miR-1253分別共轉(zhuǎn)染至SW620細(xì)胞,分別記為si-circ_0000527+anti-miR-NC組、sicirc_0000527+anti-miR-1253組.

    1.2.2 qRT-PCR檢測(cè)circ_0000527、miR-1253的表達(dá)水平:采用Trizol試劑分別提取癌旁組織、結(jié)直腸癌組織與SW620細(xì)胞總RNA.應(yīng)用紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA濃度.反轉(zhuǎn)錄合成cDNA.qRT-PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系:cDNA 2 μL,Real-Time Master Mix 10 μL,正反向引物各1 μL,RNase-Free ddH

    O補(bǔ)足體系至20 μL;反應(yīng)條件:95 ℃ 2 min,95 ℃ 15 s,60 ℃ 1 min,72 ℃ 30 s(循環(huán)40次).應(yīng)用ABI StepOnePlus熒光定量PCR儀檢測(cè)circ_0000527、miR-1253相對(duì)表達(dá)量.

    液體冷卻介質(zhì)對(duì)不同溫度下玉米種子發(fā)芽率有較大影響。在6種溫度下,利用液體冷卻介質(zhì)處理玉米種子3 d,X1,F(xiàn)6,S10和H4的4 d平均發(fā)芽率較未處理的對(duì)照組發(fā)芽率分別有所下降,H1和K17的4d平均發(fā)芽率均高于對(duì)照組,除-25℃處理外,其余溫度處理的S10發(fā)芽率均低于對(duì)照組發(fā)芽率(見(jiàn)圖1)。S23,H1及K16經(jīng)6種溫度液體冷卻介質(zhì)處理后的7 d平均發(fā)芽率均明顯高于對(duì)照組,F(xiàn)6號(hào)和S23在-10℃液體冷卻介質(zhì)處理后發(fā)芽率最高,其余則是在-20~-30℃經(jīng)液體冷卻介質(zhì)處理后達(dá)到最高(見(jiàn)圖2)。

    1.2.3 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖:各組SW620細(xì)胞接種于96孔板,每孔加CCK-8 10 μL,培養(yǎng)2 h,應(yīng)用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔在450 nm處的光密度值(OD).

    1.2.4 平板克隆形成實(shí)驗(yàn):取各組SW620細(xì)胞接種于6孔板(500個(gè)/孔),于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)直至出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞克隆團(tuán),每隔2 d更換一次培養(yǎng)基,棄培養(yǎng)基,預(yù)冷PBS洗滌,加入500 μL甲醇固定20 min,加入400 μL 1%結(jié)晶紫染色液染色15 min,蒸餾水洗滌后晾干,拍照并觀察細(xì)胞克隆形成數(shù).

    1.2.5 劃痕實(shí)驗(yàn):收集各組SW620細(xì)胞接種于6孔板(2×10

    個(gè)/孔),于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)直至細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn),用200 μL移液槍槍頭在細(xì)胞單層劃一道痕,于顯微鏡下拍照并記錄(0 h),于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h后取出6孔板后再次于顯微鏡下拍照,應(yīng)用ImageJ軟件檢測(cè)各組細(xì)胞遷移距離并計(jì)算細(xì)胞劃痕愈合率[0 h劃痕寬度-24 h劃痕寬度/0 h劃痕寬度×100%].

    1.2.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲:取Matrigel基質(zhì)膠稀釋液加入小室的上室(40 μL/孔),于培養(yǎng)箱內(nèi)固定5 h,收集各組SW620細(xì)胞接種于上室(1×10

    個(gè)/孔),下室加入600 μL含有10%胎牛血清的培養(yǎng)液,于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48 h,棄培養(yǎng)液,PBS洗滌,加入500 μL 4%多聚甲醛固定20 min,1%結(jié)晶紫染色液染色10 min,PBS洗滌后晾干,于顯微鏡下統(tǒng)計(jì)侵襲細(xì)胞數(shù).

    1.2.7 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ_0000527與miR-1253的靶向關(guān)系:美國(guó)Promega公司構(gòu)建野生型載體WT-circ_0000527和缺失miR-1253結(jié)合區(qū)域的突變型載體MUT-circ_0000527,采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將miR-NC/WT-circ_0000527、miR-NC/MUT-circ_0000527、miR-1253 mimics/WT-circ_0000527、miR-1253 mimics/MUTcirc_0000527共轉(zhuǎn)染至SW620細(xì)胞,培養(yǎng)24 h后收集細(xì)胞并檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)熒光素酶活性.采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pcDNA、pcDNA-circ_0000527、si-NC、si-circ_0000527分別轉(zhuǎn)染至SW620細(xì)胞,培養(yǎng)48 h后收集細(xì)胞,用qRTPCR法檢測(cè)miR-1253的表達(dá)量.

    1.2.8 Western blot檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin蛋白表達(dá)量:PBS洗滌各組SW620細(xì)胞后加入400 μL RIPA裂解液提取細(xì)胞總蛋白,采用BCA法檢測(cè)蛋白濃度.每孔道加入40 μg蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,將分離的蛋白凝膠轉(zhuǎn)移至PVDF膜,用5%脫脂牛奶室溫封閉PVDF膜2 h,分別加入E-cadherin(1:1000)、N-cadherin(1:1000)一抗與內(nèi)參GAPDH抗體(1:2000)稀釋液,4 ℃孵育24 h,TBST洗滌,加入1:3000稀釋的二抗后,37 ℃孵育2 h,滴加ECL,暗室內(nèi)曝光顯影,應(yīng)用Quantity One軟件對(duì)蛋白條帶進(jìn)行定量.

    采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)量資料以(mean±SD)表示,兩組間比較采用獨(dú)立樣本

    檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析,多組間兩兩比較可用LSD檢驗(yàn),以

    <0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

    段文瀚解釋說(shuō),第一個(gè)“綠色”之所以叫“綠色礦山”,是因?yàn)樵铺旎捎米钕冗M(jìn)、效率最高的開(kāi)采技術(shù),極大提高了對(duì)磷礦石的利用率,做到了對(duì)資源的充分利用和循環(huán)利用。除此之外,云南的磷礦大都是膠磷礦,雜質(zhì)含量較多,這就需要采用先進(jìn)的浮選技術(shù)對(duì)膠磷礦進(jìn)行加工,使其更干凈、有害因子更少。同時(shí),礦產(chǎn)開(kāi)采完之后,云天化還會(huì)對(duì)土壤進(jìn)行回填,利用先進(jìn)技術(shù)進(jìn)行浮土植被的種植。浮土植被的種植聽(tīng)起來(lái)簡(jiǎn)單,實(shí)際上對(duì)技術(shù)有很高的要求,前期投入巨大。據(jù)段文瀚介紹,上個(gè)世紀(jì)80年代至今,云天化單是復(fù)墾植被,恢復(fù)綠色的投入就將近10億元,目的就是希望從源頭支撐整個(gè)綠色發(fā)展理念的運(yùn)行。

    2 結(jié)果

    2.1 circ_0000527和miR-1253在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)結(jié)直腸癌組織中circ_0000527的表達(dá)量高于癌旁組織(

    <0.05),miR-1253的表達(dá)量低于癌旁組織(

    <0.05),表1.

    2.3 干擾circ_0000527表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌SW620細(xì)胞遷移、侵襲的影響 轉(zhuǎn)染si-circ_0000527可降低劃痕愈合率、侵襲細(xì)胞數(shù),促進(jìn)E-cadherin表達(dá),抑制N-cadherin表達(dá)(

    <0.05),見(jiàn)圖2、表3.

    2.4 circ_0000527靶向調(diào)控miR-1253的表達(dá) circ_0000527序列中與miR-1253存在互補(bǔ)核苷酸序列,圖3.與miR-NC組相比,miR-1253降低WT-circ_0000527熒光素酶活性(

    <0.05),表4.circ_0000527可負(fù)向調(diào)節(jié)miR-1253表達(dá)(

    <0.05),表5.

    綜上所述,國(guó)內(nèi)尿素走勢(shì)并不如意,開(kāi)工率下滑利好不斷被業(yè)內(nèi)炒作,或已透支;所謂的印度招標(biāo)利好也不及預(yù)期。不可否認(rèn),當(dāng)前行業(yè)低開(kāi)工局面確實(shí)給低庫(kù)存或零庫(kù)存的尿素企業(yè)提供了挺價(jià)籌碼,但內(nèi)需疲軟,暫時(shí)不允許工廠去考慮“貨緊價(jià)揚(yáng)”。換而言之,或許淡儲(chǔ)期間的供應(yīng)量不及往年水平,下游經(jīng)銷(xiāo)商庫(kù)存量偏低,但并不能改變此時(shí)下游對(duì)高價(jià)尿素的不認(rèn)可。當(dāng)然,不排除眾多經(jīng)銷(xiāo)商在本輪尿素跌價(jià)期間等待新的抄底機(jī)會(huì),但相應(yīng)心理價(jià)位仍需進(jìn)一步博弈。預(yù)計(jì)11月底,國(guó)內(nèi)尿素主產(chǎn)區(qū)報(bào)價(jià)2000元/噸左右。

    1.2 Stroop色詞測(cè)試 其由Stroop[8]編制,是廣泛運(yùn)用的視覺(jué)任務(wù)研究執(zhí)行功能的典范之一。測(cè)試包括卡片A、B、C,卡片A寫(xiě)上黑色的隨機(jī)排列的紅、綠、黃、藍(lán);卡片B采用4種不同于字的顏色寫(xiě)上紅、綠、黃、藍(lán);卡片C采用紅、綠、黃、藍(lán)色圓點(diǎn)。進(jìn)行不同的測(cè)查完成所需的時(shí)間進(jìn)行評(píng)分。該測(cè)驗(yàn)反映認(rèn)知控制、目標(biāo)保持以及在不熟悉刺激中習(xí)慣性應(yīng)答的抑制能力。

    2.5 miR-1253過(guò)表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌SW620細(xì)胞增殖、遷移、侵襲的影響 轉(zhuǎn)染miR-1253 mimics可減弱SW620細(xì)胞OD值、克隆形成、劃痕愈合率、侵襲細(xì)胞數(shù),并可促進(jìn)E-cadherin表達(dá),抑制N-cadherin表達(dá)(

    <0.05),圖4、表6.

    3 討論

    circRNA是通過(guò)反向剪接形成的一種閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu),其不易被核酸外切酶降解,circRNA具有穩(wěn)定性與保守性,circRNA可調(diào)控結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲等生物學(xué)行為

    .circRNA與miRNA競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合而調(diào)控基因表達(dá)從而參與結(jié)直腸癌發(fā)生及發(fā)展過(guò)程,并可能作為結(jié)直腸癌靶向治療的潛在靶點(diǎn)

    .

    本研究結(jié)果顯示,結(jié)直腸癌組織中circ_0000527的表達(dá)量上升.circ_0000527在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá),過(guò)表達(dá)circ_0000527可促進(jìn)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,抑制細(xì)胞凋亡

    .circ_0000527在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞中表達(dá)上調(diào),并可通過(guò)充當(dāng)miR-646的海綿分子而促進(jìn)BCL-2表達(dá)從而促進(jìn)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖、遷移及侵襲

    .本研究結(jié)果顯示,干擾circ_0000527表達(dá)可降低結(jié)直腸癌細(xì)胞活力,細(xì)胞克隆形成數(shù)減少,提示干擾circ_0000527可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖及克隆形成.間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物N-cadherin與上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-cadherin是上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的主要標(biāo)志物,EMT轉(zhuǎn)化可促使遷移及侵襲發(fā)生

    .本研究結(jié)果顯示,干擾circ_0000527可降低結(jié)直腸癌細(xì)胞劃痕愈合率、侵襲細(xì)胞數(shù),并可下調(diào)N-cadherin表達(dá),上調(diào)E-cadherin表達(dá),提示干擾circ_0000527表達(dá)可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移及侵襲,其作用機(jī)制與調(diào)節(jié)EMT有關(guān).

    Circular RNA Interactome預(yù)測(cè)顯示circ_0000527與miR-1253可能存在靶向調(diào)控關(guān)系,miR-1253在結(jié)直腸癌中發(fā)揮抑癌基因作用,circ_0000527/miR-1253軸是否可參與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程尚需進(jìn)一步闡明.

    由于我國(guó)行政事業(yè)單位財(cái)務(wù)缺乏管理,易造成預(yù)算編制的不科學(xué)不合理,出現(xiàn)多預(yù)算或者少預(yù)算情況,同時(shí),也容易造成資金去向不明,其對(duì)于人民而言都是不負(fù)責(zé)任的行為。

    4 結(jié)論

    綜上所述,circ_0000527可競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-1253,干擾circ_0000527表達(dá)可通過(guò)上調(diào)miR-1253表達(dá)而抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移及侵襲,circ_0000527/miR-1253分子軸在結(jié)直腸癌發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)揮重要調(diào)控作用.

    2.2 干擾circ_0000527表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌SW620細(xì)胞增殖的影響 轉(zhuǎn)染si-circ_0000527可降低細(xì)胞增殖、克隆形成能力(

    <0.05),見(jiàn)圖1、表2.

    可以看出,不同粗糙度下材料表面的BRDF在鏡反射方向出現(xiàn)峰值,且隨著表面粗糙度增大,鏡反射方向附近BRDF峰形由陡峭逐漸趨于平緩。說(shuō)明隨著粗糙度的增大,漫反射占反射能量的比重增加,鏡反射特性減弱,這是由于當(dāng)表面粗糙度較小時(shí),多數(shù)光子被直接反射到鏡反射方向及其附近區(qū)域,表現(xiàn)出較強(qiáng)的鏡反射;當(dāng)表面粗糙度較大時(shí),光子在粗糙表面會(huì)經(jīng)歷多次散射,導(dǎo)致鏡反射特征減弱,漫反射特性增強(qiáng)。

    circRNA可參與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程,可作為結(jié)直腸癌診斷、治療靶點(diǎn),并調(diào)控miRNA表達(dá)進(jìn)而調(diào)節(jié)結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為,目前circ_0000527對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響尚未可知.

    干擾同阻滯一樣,可發(fā)生在心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)的不同層面——可發(fā)生在一個(gè)層面,也可同時(shí)發(fā)生于數(shù)個(gè)層面;根據(jù)程度也可分為一度、二度、高度和三度。如果干擾僅發(fā)生于一個(gè)心搏,則稱(chēng)為干擾現(xiàn)象;如連續(xù)發(fā)生于3個(gè)心搏以上,則稱(chēng)為干擾性脫節(jié)(圖6)。干擾的心電圖表現(xiàn)有時(shí)可見(jiàn);有時(shí)也呈隱匿性,此時(shí)稱(chēng)為隱匿性傳導(dǎo);有時(shí)干擾還可引起一次新的干擾,從而使心電圖表現(xiàn)復(fù)雜化。

    本研究證實(shí)circ_0000527與miR-1253存在靶向調(diào)控作用,circ_0000527可通過(guò)吸附miR-1253而發(fā)揮作用.研究表明

    ,miR-1253在非小細(xì)胞肺癌組織中下調(diào)表達(dá),上調(diào)其表達(dá)可抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲.miR-1253在非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)水平降低,上調(diào)其表達(dá)可抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移

    .miR-1253過(guò)表達(dá)可抑制乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)

    .本研究結(jié)果顯示,結(jié)直腸癌組織中miR-1253的表達(dá)量低于癌旁組織,下調(diào)miR-1253表達(dá)可降低干擾circ_0000527表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移及侵襲的抑制作用.提示circ_0000527可通過(guò)負(fù)向調(diào)控miR-1253表達(dá)影響結(jié)直腸癌細(xì)胞結(jié)直腸癌的發(fā)展進(jìn)程.

    2.6 下調(diào)miR-1253表達(dá)逆轉(zhuǎn)了干擾circ_0000527表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌SW620細(xì)胞增殖、遷移、侵襲的作用 共轉(zhuǎn)染si-circ_0000527、anti-miR-1253可逆轉(zhuǎn)si-circ_0000527對(duì)SW620細(xì)胞生物學(xué)行為的作用(

    <0.05),見(jiàn)圖5、表7.

    circ_0000527通過(guò)靶向調(diào)控miR-1253表達(dá)影響結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲.

    綜上所述,隨著媒介融合時(shí)代的到來(lái),新聞受眾和新聞生產(chǎn)者之間的界限變得越來(lái)越模糊,這一現(xiàn)象的存在不僅僅給新聞編輯帶來(lái)了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),同時(shí)也是一種機(jī)遇。要想更好地抓住這次機(jī)遇和應(yīng)對(duì)這些挑戰(zhàn),要求新聞編輯準(zhǔn)確地做好自我定位,不斷提升自身素養(yǎng),努力成為媒體融合時(shí)代中合格且優(yōu)秀的傳媒人才。

    即把不在園林空間中的元素包含到園林空間中來(lái),使得園林意境更添一份深意。由于園林建造在城市中,園林的場(chǎng)地是很有局限性的,要通過(guò)滲透和延伸園林空間來(lái)豐富園林空間和意境。借景的方法主要有近借、遠(yuǎn)借、互借等[2]。

    qRT-PCR法檢測(cè)結(jié)直腸癌患者的癌組織及其癌旁組織標(biāo)本中circ_0000527、miR-1253的表達(dá)量;將人結(jié)直腸癌細(xì)胞SW620分為si-NC組、si-circ_0000527組、miR-NC組、miR-1253組、si-circ_0000527+anti-miR-NC組、sicirc_0000527+anti-miR-1253組;CCK-8、平板克隆形成、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)增殖、克隆形成、遷移和侵襲;雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)circ_0000527與miR-1253靶向.

    結(jié)直腸癌組織中circ_0000527上調(diào)表達(dá),miR-1253下調(diào)表達(dá),抑制circ_0000527或miR-1253過(guò)表達(dá)可減弱細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移及侵襲能力,證實(shí)circ_0000527可靶向調(diào)控miR-1253表達(dá),下調(diào)miR-1253表達(dá)可減弱抑制circ_0000527表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移及侵襲能力的抑制作用.

    circ_0000527表達(dá)可通過(guò)抑制miR-1253表達(dá)而促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移及侵襲.

    circ_0000527/miR-1253可能作為結(jié)直腸癌分子靶向治療的潛在靶點(diǎn).

    1 Xu H,Liu Y,Cheng P,Wang C,Liu Y,Zhou W,Xu Y,Ji G.CircRNA_0000392 promotes colorectal cancer progression through the miR-193a-5p/PIK3R3/AKT axis.

    2020;39:283 [PMID:33317596 DOI:10.1186/s13046-020-01799-1]

    2 Chen LY,Wang L,Ren YX,Pang Z,Liu Y,Sun XD,Tu J,Zhi Z,Qin Y,Sun LN,Li JM.The circular RNA circ-ERBIN promotes growth and metastasis of colorectal cancer by miR-125a-5p and miR-138-5p/4EBP-1 mediated cap-independent HIF-1α translation.

    2020;19:164 [PMID:33225938 DOI:10.1186/s12943-020-01272-9]

    3 Li C,Zhou H.Circular RNA hsa_circRNA_102209 promotes the growth and metastasis of colorectal cancer through miR-761-mediated Ras and Rab interactor 1 signaling.

    2020;9:6710-6725 [PMID:32706154 DOI:10.1002/cam4.3332]

    4 Wu M,Kong C,Cai M,Huang W,Chen Y,Wang B,Liu X.Hsa_circRNA_002144 promotes growth and metastasis of colorectal cancer through regulating miR-615-5p/LARP1/mTOR pathway.

    2021;42:601-610 [PMID:33347535 DOI:10.1093/carcin/bgaa140]

    5 Wu X,Yan L,Liu Y,Shang L.Circ_0000527 promotes osteosarcoma cell progression through modulating miR-646/ARL2 axis.

    2021;13:6091-6102 [PMID:33617480 DOI:10.18632/aging.202602]

    6 Yang D,Zhang D.miR-1253,a novel tumor suppressor gene in colon cancer,is associated with poor patients prognosis.

    2021;21:563-571 [PMID:33837882 DOI:10.1007/s10238-021-00706-y]

    7 Deng Q,Wang CJ,Hao R,Yang QY.Circ_0001982 accelerates the progression of colorectal cancer via sponging microRNA-144.

    2021;25:2458 [PMID:33829421 DOI:10.26355/eurrev_202103_25394]

    8 Li H,Jin X,Liu B,Zhang P,Chen W,Li Q.CircRNA CBL.11 suppresses cell proliferation by sponging miR-6778-5p in colorectal cancer.

    2019;19:826 [PMID:31438886 DOI:10.1186/s12885-019-6017-2]

    9 Li Z,Yao H,Wang S,Li G,Gu X.CircTADA2A suppresses the progression of colorectal cancer via miR-374a-3p/KLF14 axis.

    2020;39:160 [PMID:32799891 DOI:10.1186/s13046-020-01642-7]

    10 Yu B,Zhao J,Dong Y.Circ_0000527 Promotes Retinoblastoma Progression through Modulating miR-98-5p/XIAP Pathway.

    2021;46:1414-1423 [PMID:33629639 DOI:10.1080/02713683.2021.1891255]

    11 Zhang L,Wu J,Li Y,Jiang Y,Wang L,Chen Y,Lv Y,Zou Y,Ding X.Circ_0000527 promotes the progression of retinoblastoma by regulating miR-646/LRP6 axis.

    2020;20:301 [PMID:32669977 DOI:10.1186/s12935-020-01396-4]

    12 Chen NN,Chao DL,Li XG.Circular RNA has_circ_0000527 participates in proliferation,invasion and migration of retinoblastoma cells via miR-646/BCL-2 axis.

    2020;38:1036-1046 [PMID:32266733 DOI:10.1002/cbf.3535]

    13 Xing Y,Jing H,Zhang Y,Suo J,Qian M.MicroRNA-141-3p affected proliferation,chemosensitivity,migration and invasion of colorectal cancer cells by targeting EGFR.

    2020;118:105643 [PMID:31704502 DOI:10.1016/j.biocel.2019.105643]

    14 Liu M,Zhang Y,Zhang J,Cai H,Zhang C,Yang Z,Niu Y,Wang H,Wei X,Wang W,Gao P,Li H,Zhang J,Sun G.MicroRNA-1253 suppresses cell proliferation and invasion of non-small-cell lung carcinoma by targeting WNT5A.

    2018;9:189 [PMID:29415994 DOI:10.1038/s41419-017-0218-x]

    15 Li L,Wan K,Xiong L,Liang S,Tou F,Guo S.CircRNA hsa_circ_0087862 Acts as an Oncogene in Non-Small Cell Lung Cancer by Targeting miR-1253/RAB3D Axis.

    2020;13:2873-2886 [PMID:32308420 DOI:10.2147/OTT.S243533]

    16 Ding X,Zheng J,Cao M.Circ_0004771 Accelerates Cell Carcinogenic Phenotypes via Suppressing miR-1253-Mediated DDAH1 Inhibition in Breast Cancer.

    2021;13:1-11 [PMID:33442289 DOI:10.2147/CMAR.S273783]

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